输注辐照血小板后血液病患者免疫参数变化的临床意义

目的：本研究主要对输注辐照血小板后血液病患者免疫参数变化情况展开分析讨论。方法：将119例恶性血液病患者分成实验组（53例）与对照组（66例）,对照组患者的血小板使用普通机采集;实验组患者的血小板使用γ辐照机采集,对两组患者的不良反应发生率、榆注有效率进行比较,并对其在输血前后C蛋白变化（CRP）、循环免疫复合体（CIC）、补体（C3、C4）、免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）的变化情况进行检测。结果：实验组患者的循环免疫复合体、补体、免疫球蛋白在输注前后的变化不明显,不具备统计学意义,P〉0．05,对照组则出现了明显的升高,P〈0．05;比较两组患者的输注有效率差异较大,具有统计学意义,P〈0．05。结论：在对血液病患者的免疫参数进行测量时,循环免疫复合体、补体、免疫球蛋白可能引起血小板的输注无效,利用γ辐照机来对患者的血小板进行采集,可以降低患者体内的体液免疫反应,提升输注的效率。     

不同路径肝素对门静脉胰岛移植术后立即经血液介导炎症反应的影响

目的:临床上肝素主要作为抗凝药物使用,也具有一定的抗炎作用。目前糖尿病患者门静脉胰岛移植术后主要通过四肢的外周静脉而不是门静脉输注肝素,达到抗凝、保护移植物的目的。本研究采用动物实验探讨经门静脉与耳缘静脉输注肝素对门静脉胰岛移植术后立即经血液介导炎症反应(instant blood mediated inflammatory reaction,IBMIR)的影响,为临床胰岛移植手术抗凝方式的选择提供决策依据。方法:选择日龄3～5 d新生猪(Xeno-1型)50只,取出胰腺后分离并提纯胰岛。选择1.5～2.0月龄非糖尿病模型长白猪10只作为受体,外科手术暴露门静脉,将新生猪胰岛(12 000 IEQ/kg)通过门静脉移植于长白猪肝脏。移植术前10 min所有受体均团注肝素50 U/kg,团注肝素后实验组通过门静脉输注肝素[10 U/(kg·h),5只]、对照组通过耳缘静脉输注肝素[10 U/(kg·h),5只]。分别于术前、术后1、3及24 h采集两组动物上腔静脉血液,实验组于术后1、3 h采集门静脉血液。检测实验组与对照组术前、术后1、3 h上腔静脉血液补体C3a、C5a、凝血酶-抗凝...     

CD59对补体激活致内皮细胞损伤的保护作用

目的 观察CD59对眼镜蛇毒因子（CVF）激活补体引起内皮细胞（EC）损伤的影响。方法用台盼蓝拒染法分别染色并计算在对照组（灭活补体的人血清加CVF组）、实验组Ⅰ（人血清加CVF组）及实验组Ⅱ（人血清加CVF再加CD59组）等环境中EC的死亡率。结果实验组Ⅱ的EC死亡率比实验组Ⅰ的EC死亡率低。结论 CD59对CVF激活补体引起的EC损伤有保护作用。     

供体脾灌注对高度致敏患者移植肾的免疫保护作用

目的探讨供体脾灌注对高度致敏患者移植肾的保护作用及机理。方法对16例高度致敏患者进行配对分组,实验组肾移植术中先予供体脾灌注。前瞻性观察脾灌注对受者群体反应性抗体（penel reactive antibody,PRA）、补体依赖细胞毒性（complement dependent cytotoxicity,CDC）试验、血清补体溶血活性（CH50）、可溶性人类白细胞抗原Ⅰ（soluble human leucocyte antigen-Ⅰ,sHLA-Ⅰ）以及术后早期移植肾排斥反应和移植肾功能的影响。结果供体脾灌注40min后,患者的PRA、CDC和CH50较灌注前显著降低,血清sHLA-Ⅰ浓度显著增加。对照组肾移植术后发生超急性排斥1例,加速性排斥反应3例,急性排斥反应3例。对照组排斥反应严重程度明显较灌注组高（u=2.54,P〈0.05）;对照组排斥反应发生时间为（3.3±2.6）d（中位数3.0d）,脾灌注组为（10.5±6.2）d（中位数8.5d）,组间比较差异具有统计学意义（t=10.46,P〈0.01）;术后近期血肌酐（serumc reatinine,Scr）值显著高于脾灌注组。结论供体脾灌注可以延缓高度致敏患者术后近期移植肾排斥反应的发生,减轻排斥反应强度,改善移植肾功能;其机制可能与供体脾脏特异性吸附受者毒性抗体,消耗血清补体和分泌s HLA-Ⅰ类抗原有关。     

T细胞疫苗诱导异种胰岛移植免疫耐受的实验研究

目的体外制备供体特异性T细胞疫苗（T cell vaccine）,探讨T细胞疫苗免疫（T cell vaccination）诱导异种胰岛细胞移植免疫耐受的作用。方法腹腔注射链脲佐菌素诱导建立Balb／c小鼠Ⅰ型糖尿病模型,用酶消化法和密度梯度离心法无菌分离纯化Wistar大鼠胰岛细胞。制备Balb／c小鼠针对Wistar大鼠的T细胞疫苗：实验随机分为三组,G1：糖尿病小鼠对照组;G2：胰岛细胞移植组,糖尿病小鼠＋胰岛细胞移植＋1640培养液（对照组）;G3：胰岛细胞移植加T细胞疫苗免疫组,糖尿病小鼠＋胰岛细胞＋T细胞疫苗（实验组）,于d1,d7,d14,d21实验组Balb／c小鼠接种TCV（1×107／mL）,对照组用1640替代。接种前和每次接种后第5d分别进行混合淋巴细胞反应。胰岛细胞移植：将Wistar大鼠的胰岛按1200。1500IEQ／kg经肝门静脉导入小鼠体内,移植后观测血糖和体重变化。结果异种胰岛细胞移植可以诱导I型糖尿病小鼠血糖降至正常水平且维持一段时间,对照组小鼠移植后（5．12±1．36）d即发生排斥,实验组移植物存活时间达（20．25±3．45）d。结论TCV能够有效延长异种胰岛移植物的存活时间,是一种潜在诱导异种胰岛移植免疫耐受的方法。     

补体激活对内皮细胞分泌组织型纤溶酶原激活物的影响

目的探讨眼镜蛇毒因子（CVF）激活补体对内皮细胞（Ec）分泌组织型纤溶酶原激活物（t-PA）的影响。方法EC用CVF加入新鲜血清分别处理0小时（对照组）、2小时（实验组Ⅰ）、4小时（实验组Ⅱ）和6小时（实验组Ⅲ）后，再继续培养，用发色底物$2390检测法测定培养液中t—PA的活性。结果CVF加入新鲜血清处理时间越长，培养液中t—PA的活性越低。结论CVF激活补体可引起ECt—PA的分泌减少。     

眼镜蛇毒因子对兔出血性脑水肿影响的实验研究

目的 研究眼镜蛇毒因子（CVF）激活补体系统,对兔脑出血后脑水肿及肿瘤坏死因子（TNF-α）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）的影响.方法 56只日本大耳兔随机分为4组,实验组兔按0.5mg/kg腹腔内注射含CVF的0.9%氯化钠溶液约5ml,对照组兔腹腔注射5m10.9%氯化钠溶液.再设空白组、标准组.4组不同时间点检测血浆补体C3、TNF-α、NSE浓度,以脑（湿-干）/湿检测脑水的含量.结果 兔血浆中补体C3、NSE、TNF浓度,在4组间、组内各时点间比较差异有统计学意义（P〈0.05）.左大脑（湿-干）/湿比重：实验组（80.19±0.54）%,对照组（79.57±0.44）%,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 CVF能有效激活并耗竭补体,补体系统过度激活加重脑水肿的发生.脑出血急性期TNF-α、NSE升高的峰值与脑损伤、脑水肿严重程度可能存在某种联系,TNF-α、NSE水平可在一定程度上可反应脑损伤和脑水肿情况.     

地塞米松诱导骨髓来源抑制细胞对同种异系小鼠皮肤移植排斥反应的作用

目的 探讨地塞米松诱导骨髓来源抑制细胞（MDSCs）在同种异系小鼠皮肤移植模型中的表达及免疫负调节作用。方法 以雌性BALB/c小鼠皮肤为供体,雄性C57BL/6小鼠为受体,建立同种异系小鼠尾—背皮肤移植模型（n=40）。受体小鼠随机分为实验组和对照组（n=20）,实验组每日地塞米松磷酸盐溶液5 mg/kg腹腔注射,对照组等体积生理盐水腹腔注射,观察小鼠移植皮肤排斥反应情况,确定移植皮肤排斥时间;术后第7日切取小鼠移植皮肤行病理学检查;术后第9日处死部分小鼠,获取脾脏及移植皮肤引流淋巴结,行流式细胞术检测。结果 实验组小鼠移植皮肤的中位生存期为（24±3.062）d,显著长于对照组小鼠的（9±0.816）d （P〈0.05）。石蜡切片苏木精-伊红（HE）染色可见,与对照组比较,实验组移植皮肤的排斥反应显著减轻。流式细胞术检测结果显示：在脾脏组织,与对照组比较,实验组CD11b＋GR1＋ 细胞比例明显增高（P〈0.05）,肿瘤坏死因子-α （TNF-α）表达下调（P〈0.05）、白介素-10 （IL-10）表达上调（P〈0.05）,并伴有趋化因子受体CXCR2和黏附分子CD44、CD62L表达增加（P〈0.05）;在引流淋巴结,与对照组比较,实验组CD11b＋GR1＋ 细胞比例显著增高（P〈0.05）,而CD4＋ T细胞比例及γ干扰素（IFN-γ）表达显著减少（P〈0.05）。结论 地塞米松可能通过诱导产生MDSCs,使其向移植物局部迁移并作用于CD4＋ T细胞,抑制其功能,从而达到减轻移植物排斥反应及延长移植物生存的效应。     

阻断ICOS对小鼠移植胰岛功能影响的实验研究

目的：在小鼠胰岛移植模型基础上，通过阻断可诱导共刺激分子（ICOS）。探讨ICOS单克隆抗体（ICOSmAb）对移植胰岛功能的影响。方法：供体为近交系昆明小鼠，受体为C57小鼠。受体小鼠随机分成5组，每组10只。假手术组：受体小鼠仅行开腹手术，不行胰岛移植；对照组：单纯胰岛移植，不给ICOS mAb；实验1、2、3组：分别于胰岛移植后1、3、5d腹腔内注射ICOSmAb50、100、200μg/kg。观察小鼠胰岛移植后移植物存活时间和移植胰岛病理改变，流式细胞仪检测ICOS在T淋巴细胞上的表达。结果：实验2组小鼠移植胰岛存活时间和实验3组相同，统计学分析无显著性差异，而较对照组及实验1组明显延长（P〈0．05）。ICOS在移植术后7d受体小鼠T淋巴细胞上表达明显上调。结论：ICOS分子在小鼠同种异体胰岛移植排斥反应中表达上调。参与了排斥反应的发生。ICOSmAb通过阻断ICOS共刺激信号途径，诱导小鼠同种异体胰岛移植免疫耐受，减轻排斥反应，延长移植胰岛有功能存活时间。ICOS mAb的最佳给药剂量为100μg/kg。     

草麻黄中补体抑制成分抑制大鼠异种心脏移植超急性排斥反应的实验研究

目的初步探讨草麻黄中补体抑制成分(complement inhibiting component,CIC)对异种心脏移植超急性排斥反应的作用.方法按是否给予CIC灌胃处理,将动物模型分为对照组和实验组,观察对照组和实验组术后供心存活时间,在术后早期及供心失活时取两组心脏组织行光镜、电镜病理检查,并在术后固定时间分别抽鼠血行血清学检查,用微量法测定CHs0、APHs0,用透射比浊法测定C3.结果实验组移植心脏存活时间为(51.00±3.46)min,与对照组(30.30±3.46)min比较差异极显著(P＜0.01).结论豚鼠至大鼠异种心脏移植后,补体的经典途径和替代途径均被激活.CIC能明显抑制补体活性,延缓超急性排斥反应的发生,从而使移植心脏的存活时间延长.