熊果酸通过下调环氧化酶2表达调控舌鳞癌细胞增殖与凋亡

目的 研究熊果酸(UA)对舌鳞癌细胞增殖与凋亡的作用及其可能机制.方法 人舌鳞癌细胞Tca8113分别加入UA 0、10、20、40 μmol/L,培养12-72 h,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色观察细胞凋亡的形态学变化,Western blot法检测药物作用后细胞中环氧化酶2(COX-2)、B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)及半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白表达.结果 UA呈剂量依赖性地抑制舌鳞癌细胞Tca8113增殖,诱导舌鳞癌细胞凋亡,下调Tca8113细胞中COX-2蛋白表达,上调Bax/Bcl-2比值及活化的Caspase-3蛋白表达.结论 UA可能通过下调COX-2的表达抑制舌鳞癌细胞增殖,诱导凋亡.     

蛇葡萄根提取物的含药血清对肝星状细胞凋亡及基因Bax/Bcl-2表达的影响

目的:研究中药蛇葡萄根提取物的含药血清对HSC/T6凋亡及凋亡基因Bax/Bcl-2表达的影响,从细胞学和分子生物学水平探讨中药蛇葡萄根抗纤维化的作用机制。方法:用流式细胞仪测定各体积分数(5%,10%和20%)的含药血清对HSC/T6作用后的DNA含量,计算细胞凋亡率;用SABC染色检测凋亡基因Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果:含药血清体积分数为5%,10%和20%的蛇葡萄根提取物对HSC/T6的凋亡率分别为8.50%,14.30%和22.65%,均显著大于含生理氯化钠溶液的血清对照组(P<0.01);且均上调HSC/T6的促凋亡基因Bax的蛋白表达,同时下调抗凋亡基因Bcl-2的基因表达。结论:蛇葡萄根提取物含药血清能诱导HSC/T6的凋亡,上调促凋亡基因Bax的表达,下调抗凋亡基因Bcl-2的表达。     

扶正解毒祛瘀方联合奥沙利铂对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

目的:研究扶正解毒祛瘀方(简称"扶正方")联合奥沙利铂(L-OHP)对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:将HT-29细胞分为空白对照组(不加药物)、扶正方组(1 000 mg/L)、L-OHP组(31.25 mg/L)和联合用药组(1 000 mg/L扶正方+31.25 mg/L L-OHP)。加入相应药物作用48 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)法检测细胞中促凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl-2 m RNA的表达,Western blot法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,L-OHP组和联合用药组细胞增殖均受到抑制、S期和G_2/M期细胞比例升高、G_0/G_1期细胞比例降低(P<0.05),L-OHP组、扶正方组和联合用药组细胞凋亡率升高、细胞中Bax m RNA及蛋白的表达上调、细胞中Bcl-2 m RNA的表达下调(P<0.05),且联合用组变化较两药单用组更明显(P<0.05)。结论:扶正方与L-OHP联合应用可抑制HT-29细胞的增殖、促进细胞凋亡,且作用优于两药单用;其机制可能与上调细胞中Bax基因与蛋白表达、下调细胞中Bcl-2基因表达有关。     

Effect of gambogic acid on apoptosis of gastric adenocarcinoma cell line AGS

目的 探讨藤黄酸对人胃腺癌细胞株AGS的增殖和凋亡作用.方法 用不同浓度藤黄酸处理AGS细胞后,MTT法测定AGS细胞的增殖活性,流式细胞术分析藤黄酸诱导AGS细胞凋亡,Western blot法检测B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)表达的变化.结果 藤黄酸能剂量依赖性地抑制AGS细胞增殖、诱导AGS细胞凋亡、下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达;24 h半数抑制浓度(IC50)为0.9μmol/L.结论 藤黄酸能明显抑制胃癌细胞株AGS的增殖,诱导AGS细胞凋亡.其促凋亡作用可能与Bcl-2、Bax的表达有关.     

藤黄酸对胃腺癌细胞株AGS凋亡的影响

目的探讨藤黄酸对人胃腺癌细胞株AGS的增殖和凋亡作用。方法用不同浓度藤黄酸处理AGS细胞后,MTT法测定AGS细胞的增殖活性,流式细胞术分析藤黄酸诱导AGS细胞凋亡,Western blot法检测B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)表达的变化。结果藤黄酸能剂量依赖性地抑制AGS细胞增殖、诱导AGS细胞凋亡、下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达;24h半数抑制浓度(IC50)为0.9μmol/L。结论藤黄酸能明显抑制胃癌细胞株AGS的增殖,诱导AGS细胞凋亡。其促凋亡作用可能与Bcl-2、Bax的表达有关。     

羟基红花黄素A拮抗IL-1β诱导软骨终板细胞凋亡的作用机制

目的探讨羟基红花黄素A(hydroxy safflower yellowA,HSYA)对IL-1β诱导小鼠软骨终板细胞凋亡的拮抗作用。方法用10μg.L-1的IL-1β诱导正常软骨终板细胞退变,分别制备不同浓度的HSYA培养基作为干预措施,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因的表达水平。采用Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白表达量,细胞免疫荧光分析各组Bax、Bcl-2细胞内定位。结果不同浓度的HSYA培养基均能拮抗IL-1β诱导的软骨细胞凋亡。流式细胞分析结果显示各浓度HSYA可以降低IL-1β诱导的小鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例;RT-PCR结果显示各浓度HSYA可拮抗IL-1β诱导细胞上调Bax基因表达,下调Bcl-2基因表达作用;细胞免疫荧光结果显示HSYA 10-5 mol.L-1给药组可下调Bax表达,上调Bcl-2表达;Western blot结果显示HSYA 10-5 mol.L-1和HSYA10-6 mol.L-1均可以拮抗IL-1β诱导细胞上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达作用。结论羟基红花黄素A具有拮抗IL-1β诱导小鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的作用。     

吡唑啉酮衍生物镉(Ⅱ)配合物诱导食管癌细胞凋亡与Bax和Bcl-2的关系

目的 研究吡唑啉酮衍生物镉(Ⅱ)配合物(Ls-17)对人食管癌细胞(Eca-109)的凋亡诱导作用及对细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.方法 MTT法检测Ls-17对Eca-109细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡、周期分布变化及线粒体膜电位的改变,caspase活性法检测caspase-3和9的变化,Western blot法分析Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果 Ls-17对Eca-109细胞增殖抑制的IC50值为25.12 mg·L-1,使细胞周期阻滞在G2/M期而导致细胞凋亡;能降低线粒体膜电位水平并激活caspase-3和9,使Bax/Bcl-2的比值增大.结论 Ls-17能够抑制Eca-109细胞增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2的表达,使Bax/Bcl-2的比值升高有关.     

白介素-15对过氧化氢诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响

目的观察白介素-15(IL-15)对H2O2诱导的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响及探讨其机制。方法体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(RLE-6TN),分为:(A)正常对照组;(B)IL-15预处理组;(C)H2O2损伤组;(D)IL-15预处理后H2O2损伤组。采用DAPI荧光染色及Annexin V-FITC/PI检测各组细胞凋亡,JC-1染色观察各组线粒体膜电位;RT-PCR检测各组细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达。结果与正常对照组比较,H2O2损伤能明显诱导RLE-6TN凋亡,IL-15预处理可明显降低H2O2诱导的细胞凋亡率,使细胞线粒体膜电位下降,Bcl-2 mRNA表达增加,Bax、Caspase-3mRNA表达降低(P<0.05)。结论 IL-15能抑制H2O2诱导的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡,其作用机制可能为稳定细胞线粒体膜电位,增强抗凋亡基因Bcl-2,同时,抑制促凋亡基因Bax表达,下调Caspase-3表达。     

半枝莲含药血清对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的影响

目的:探讨半枝莲含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的影响。方法:传代培养大鼠肝星状细胞系HSC-T6与不同剂量半枝莲(高、中、低剂量组)共同孵育48 h后,应用Annexin-V-碘化丙锭染色检测半枝莲对大鼠HSC-T6凋亡的影响;免疫组化检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2表达。结果:半枝莲能使大鼠HSC-T6凋亡明显增多,同时可使凋亡抑制分子Bcl-2表达下调,使凋亡分子Bax表达增强(P<0.01)。结论:半枝莲可下调Bcl-2/Bax比率,促进HSC-T6凋亡。     

阿司匹林下调lncRNA CCAT1增加肺癌细胞顺铂敏感性的研究

目的研究阿司匹林通过调控长链非编码RNA(lnc RNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对人非小细胞肺癌耐顺铂细胞A549(A549/DDP)的顺铂敏感性的影响。方法阿司匹林以不同浓度(1、3、6和9 mmol/L)作用于A549/DDP细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;用流式细胞术和蛋白质印迹法(Western blot)检测阿司匹林处理A549/DDP细胞的凋亡率和凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测多种肺癌细胞中CCAT1的表达差异,并分析阿司匹林作用A549/DDP细胞后CCAT1的表达情况;运用双酶切法构建pcDNA3.1-CCAT1表达载体;流式细胞仪和Western blot分别检测阿司匹林作用于CCAT1过表达的A549/DDP细胞后,细胞的凋亡率和凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果阿司匹林可明显抑制A549/DDP细胞增殖(P0.05),具有剂量依耐性;且可通过调节Bax等相关蛋白表达增强A549/DDP细胞凋亡效应(P0.05);A459/DDP细胞中CCAT1较非耐药细胞株明显高表达(P0.05);阿司匹林作用后,CCAT1表达明显下调(P0.05);成功构建了pcDNA3.1-CCAT1表达载体并成功转染;证实CCAT1过表达逆转阿司匹林对A549/DDP细胞敏感性的影响。结论阿司匹林通过下调lncRNA CCAT1的表达,提高A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。     

MiR-497对人胃癌细胞株顺铂耐药性的影响和机制

目的:通过建立人胃癌细胞SGC-7901的顺铂耐药细胞株SGC-7901/DDP,探讨miR-497对SGC-7901/DDP耐药性的影响及其机制。方法:体外研究采用顺铂体外逐步加量诱导法建立人胃癌细胞SGC-7901耐药株,并通过检测药物半抑制浓度和耐药基因MDR1、BCRP、MRP1的表达以鉴定耐药细胞株;检测在亲本及耐药细胞中miR-497、MDR1、MRP1、BCRP和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达水平;miR-497模拟物分别转染SGC-7901/DDP细胞株,利用SRB法和流式细胞术检测转染miR-497模拟物后细胞对顺铂醇的敏感程度和细胞的周期、凋亡的变化,并检测耐药基因和凋亡相关基因的表达。结果:成功建立人胃癌SGC-7901/DDP耐药细胞株,耐药细胞株中耐药基因MDR1、BCRP、MRP1表达均升高,抗凋亡基因Bcl-2升高,凋亡基因Bax下降,miR-497表达下降(P<0.05);miR-497模拟物提高耐药细胞株对顺铂的药物敏感性,凋亡水平增加,细胞周期G₀/G₁期细胞增多(P<0.05),并可抑制耐药细胞中耐药基因的表达,降低Bcl-2/Bax比值(P<0.05)。结论:人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP的miR-497表达下调;上调miR-497的表达可逆转人胃癌SGC-7901/DDP细胞株对化疗药物顺铂的耐药性。     

顺铂诱导人宫颈鳞癌细胞Caski细胞凋亡的分子机制

目的研究顺铂对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究顺铂诱导宫颈鳞癌细胞凋亡的分子机制。方法运用体外细胞培养,顺铂以不同浓度（20、10、5、2、1μg/ml）作用于人宫颈癌Caski细胞。采用噻唑蓝（MTT）法测定顺铂对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNALadder现象;Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果顺铂对人宫颈癌Caski细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使Caski细胞G2/M期比例明显下降（P〈0.01）,S期比例升高（P〈0.01）;诱导细胞凋亡发生;顺铂作用Caski细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论顺铂在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡分子机制与Bcl-2家族表达调控,线粒体膜跨膜电位下降的线粒体参与凋亡途径相关。     

川芎嗪对顺铂肾损伤大鼠肾细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨川芎嗪(TMP)对顺铂(DDP)大鼠肾毒性有无保护作用。方法DDP8mg·kg-1ip诱导大鼠肾损伤,于给予DDP2d前大鼠分别ip50,100mg·kg-1·d-1TMP,连续5d,于给药d5收集各组大鼠尿液,测24h尿蛋白含量,并于末次给药后4h处死大鼠,测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)含量,采用原位缺口末端标记法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化SP法检测肾脏Bax和Bcl2蛋白表达水平。结果50,100mg·kg-1TMP组可降低DDP所致大鼠24h尿蛋白及血清BUN和Cr含量的升高(P<0.01);TMP两剂量组也可明显减少肾脏细胞凋亡率(P<0.01),显著增强肾脏凋亡相关蛋白Bcl2的表达,减少Bax表达,并明显降低Bax/Bcl2比值(P<0.01)。结论TMP可能通过降低凋亡相关蛋白Bax和增强Bcl2的表达,并降低Bax/Bcl2比值而抑制DDP引起的肾细胞凋亡,使肾脏免受损伤的作用。     

高强度聚焦超声通过TRIF介导的ERK通路增强乳腺癌的顺铂化疗敏感性

目的　探究高强度聚焦超声（HIFU）通过β干扰素TIR结构域衔接蛋白（TRIF）介导的细胞外调节蛋白激酶（ERK）通路增强乳腺癌顺铂（DDP）化疗敏感性的作用机制。方法　依次增加DDP浓度间歇作用的方法诱导乳腺癌细胞（MDA-MB-231、MCF-7）/DDP耐药细胞;将MDA-MB-231/DDP、MCF-7/DDP细胞分为control组、HIFU组、HIFU+二甲基亚砜（DMSO）组、HIFU+漆黄素（fisetin）组。CCK-8检测细胞活力;集落形成实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况;Western blot检测细胞TRIF蛋白、耐药相关蛋白及ERK通路蛋白表达;体内成瘤实验检测肿瘤生长情况;免疫组化染色法检测肿瘤组织Ki-67的表达。结果　与亲本MDA-MB-231及MCF-7细胞相比,在相同浓度DDP处理下MDA-MB-231/DDP及MCF-7/DDP细胞活力更高,且半数抑制浓度（IC50）显著增加（P＜0.05）,成功建立了稳定的DPP耐药细胞系;与control组相比,HIFU组MDA-MB-231/DDP及MCF-7/DDP细胞IC50、OD450值、克隆细胞数、S期细胞百分比、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、TRIF、p-糖蛋白（p-gp）、多药耐药基因1（MDR1）、p-ERK1/2/ERK1/2表达水平显著降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、Bcl-2关联X蛋白（Bax）表达水平显著增加（P＜0.05）;与HIFU组相比,HIFU+fisetin组细胞IC50、OD450值、克隆细胞数、S期细胞百分比、Bcl-2、TRIF、p-gp、MDR1、p-ERK1/2/ERK1/2表达水平显著增加,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、Bax表达水平显著降低（P＜0.05）。与control组相比,HIFU组肿瘤体积、肿瘤质量、TRIF及p-ERK1/2/ERK1/2表达水平、Ki-67阳性表达显著降低（P＜0.05）;与HIFU组相比,HIFU+fisetin组肿瘤体积、肿瘤质量、TRIF及p-ERK1/2/ERK1/2表达水平、Ki-67阳性表达显著增加（P＜0.05）。结论　HIFU通过抑制TRIF表达来抑制其介导的ERK通路,从而增强乳腺癌DDP化疗敏感性。     

尾加压素Ⅱ对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及相关机制研究

目的：探讨尾加压素Ⅱ（U-Ⅱ）对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及相关机制。方法：将体外培养A549细胞分为正常对照组、顺铂组（25μg/mL）及U-Ⅱ＋顺铂组（10-7mol/L U-Ⅱ＋25μg/mL顺铂）,TUNEL法测定A549细胞凋亡,免疫细胞化学方法检测A549细胞中Bcl-2和Bax的表达。结果：与正常对照组相比,顺铂组肺腺癌A549细胞的凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax表达明显升高（P〈0.01）;与顺铂组相比,U-Ⅱ则能够抑制A549细胞的凋亡,上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达（P〈0.01）。结论：U-Ⅱ可通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达从而抑制肺腺癌A549细胞凋亡。     

Dysregulation of apoptosis in scorpion envenomed children: its reflection on their outcome.

In the present study, 46 children in Upper Egypt (less than 13 years old) were admitted to the Pediatric Intensive Care Unit for scorpion envenomation. They were compared with 20 apparently healthy children of matching age and sex as controls. Out of the studied victims, 25 children (54%) showed signs of severe envenomation and multiple organ dysfunction (MOD), while 21 victims (46%) showed signs of mild envenomation. The serum levels of apoptotic markers, soluble Fas (sFas), soluble Fas ligand (sFasL) and Bcl-2, were determined for both victims and controls. In addition, the serum levels of nitric oxide (NO) and lipid peroxides (LPO) were also measured. Scoring of MOD was evaluated using Logistic Organ Dysfunction System Score (LODS) for the severely envenomed victims. All victims (both severe and mild cases) showed significantly higher mean levels of sFas, LPO and NO and significantly lower serum levels of Bcl-2 in comparison to the controls. The level of sFasL was not detectable in the sera of the healthy control group. The case fatality rate was 15%. The severely envenomed children with MOD as well as the non-survivors showed significantly higher serum levels of sFas, sFasL, LPO and NO and significantly lower serum levels of Bcl-2 in comparison to the mild envenomed victims and the surviving victims of severe cases, respectively. The LODS score of the severely envenomed victims showed significant positive correlations with sFas and LPO and significant negative correlation with Bcl-2. In all victims, a significant positive correlation was detected between sFas and NO. On the other hand, Bcl-2 was significantly negatively correlated with both sFas and LPO. In conclusion, our study revealed that scorpion envenomation can increase apoptosis as shown by up-regulation of sFas/sFasL system and down-regulation of Bcl-2 that was associated by elevation of LPO and NO. This dysregulation of apoptosis was increased with the severity of scorpion envenomation and its extent increased as MOD score and outcome increased. Therefore, sFas and Bcl-2 may be of value in predicting the outcome of these cases. The increase of the extent of apoptosis detected in this study seems to play a role in the outcome of scorpion envenomation, and hence, should be taken into consideration for strategies of therapeutic regimen.     

蛇床子素对肺癌H1299细胞增殖和凋亡的作用

摘要:目的 探讨蛇床子素对人肺癌H1299细胞增殖、凋亡的作用及可能的机制,为临床治疗提供理论依据。方法 以不同浓度蛇床子素（0、20、40、60、80、100、120、140和160 μmol/L）处理H1299细胞48 h后,采用MTT法检测细 胞增殖活性,以确定后续实验浓度。经不同浓度蛇床子素（0、40、80、120和160 μmol/L）处理体外培养的肺癌H1299 细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、 核因子κB（NF-κB）和磷酸化NF-κB（pNF-κB）的表达。结果 与溶剂对照组（0 μmol/L）比较,40、80、120、160 μmol/ L浓度的蛇床子素均可明显抑制人肺癌H1299细胞增殖（P＜0.05）。80、120和160 μmol/L蛇床子素处理H1299细胞 48 h后可以明显地诱导细胞凋亡,降低BCL-2和pNF-κB的表达,升高Bax蛋白的表达（P＜0.05）,但对NF-κB的表达 无显著影响（P＞0.05）。结论 蛇床子素可抑制人肺癌H1299细胞增殖并促进细胞凋亡,其机制可能与促进激活促 凋亡因子Bax的表达、抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达以及下调pNF-κB的表达有关     

芹菜素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的增强作用

目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的改变。结果 AP、DDP单用及合用均明显抑制CNE-2Z细胞的生长,且呈剂量依赖性关系,两药合用时在中、高浓度呈协同效应;流式细胞术和荧光双染法结果表明低浓度AP联合DDP更能明显促进肿瘤细胞的凋亡;与单独用药组比较,RT-PCR结果显示联合用药组bcl-2 mRNA表达明显降低,而bax mRNA表达明显增高。结论芹菜素可增强顺铂对CNE-2Z细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与上调bax和下调bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降有关。     

吉西他滨联合卡铂诱导NK/T细胞淋巴瘤细胞株凋亡的研究

目的:研究吉西他滨联合卡铂对NK/T细胞淋巴瘤细胞株(SNK 6)细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用细胞增殖-毒性检测法(CCK-8)检测吉西他滨、卡铂、顺铂对SNK 6细胞增殖的影响,算出各自半数抑制浓度(IC 50)值;再用吉西他滨与卡铂或顺铂做联合实验,用金氏公式计算Q值,评价联合用药效应。应用流式细胞仪检测不同药物组对细胞凋亡的影响。蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测各药物组Cleaved-caspase-3、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等凋亡蛋白的表达水平。结果:吉西他滨、卡铂、顺铂对SNK 6细胞均有较好的抑制作用;联合用药中,吉西他滨+卡铂组与吉西他滨+顺铂组对SNK 6细胞抑制作用相当,两药联合为相加作用。吉西他滨+卡铂组凋亡率稍低于吉西他滨+顺铂组,但差异无统计学意义(P>0.05)。吉西他滨可上调Cleaved-caspase-3蛋白、Bax蛋白的表达水平,下调Bcl-2蛋白的表达水平(P<0.05),吉西他滨与卡铂或顺铂联合时效果更加显著。结论:在体外环境下,吉西他滨联合卡铂可抑制SNK 6细胞增殖并诱导其凋亡,且一定浓度的吉西他滨联合卡铂对SNK 6细胞株的凋亡率与吉西他滨联合顺铂相似。     

氯喹联合顺铂对结肠癌HCT116细胞的增殖和凋亡的影响

目的探讨氯喹(CQ)联合顺铂(DDP)对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法将HCT116细胞分组为16组:空白对照组(不加药物)、5个浓度(5,10,20,40,80μmol·L^-1)氯喹-1组至氯喹-5组,5个浓度(2,4,8,16,32μmol·L^-1)顺铂-1组至顺铂-5组和5个浓度(20μmol·L^-1氯喹+2,4,8,16,32μmol·L^-1顺铂)联合-1组至联合-5组,各组均培养24 h。用噻唑蓝法检测细胞的存活率,用PI单染流式细胞术检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等凋亡相关蛋白的表达水平(灰度值)。结果空白对照组、氯喹-1组至氯喹-5组、顺铂-1组至顺铂-5组和联合-1组至联合-5组于24 h的细胞存活率分别为(100.00±1.05)%,(99.65±1.98)%,(97.43±0.72)%,(83.88±0.51)%,(69.65±3.33)%,(51.87±0.49)%,(98.55±1.50)%,(92.33±0.50)%,(81.66±4.29)%,(70.41±0.50)%,(48.34±1.50)%,(78.61±4.37)%,(59.01±3.52)%,(37.23±0.57)%,(32.88±3.96)%和(21.09±2.57)%。空白对照组、氯喹-3组、顺铂-3组和联合-3组的细胞凋亡率分别为(1.63%±0.50%),(15.97%±1.40%),(24.83%±2.12%)和(47.23±4.29)%;这4组的Bcl-2相对表达量分别为1.11±0.01,0.92±0.03和0.73±0.08,0.46±0.07;这4组的Bax蛋白相对表达量分别为0.18±0.01,0.27±0.03,0.46±0.09和0.58±0.04。氯喹联合顺铂能显著减少抗凋亡Bcl-2蛋白的表达,并上调促凋亡Bax蛋白的表达。联合组与单用组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05);各给药组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论氯喹可以增强顺铂对HCT116细胞的增殖抑制作用,同时可以增强顺铂诱导结肠癌细胞的凋亡,其机制可能与下调Bcl-2和上调Bax有关联。