沉默CD44表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖与侵袭的影响

目的:探索乳腺癌细胞MDA-MB-231及MCF-7中CD44分子的表达水平差异及沉默CD44对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭和迁移的影响。方法:利用qRT-PCR及Western blot技术检测细胞中CD44基因表达水平;设计并合成CD44的siRNA片段(CD44-siRNA)转染乳腺癌细胞,利用qRT-PCR、Western blot技术检测细胞中CD44基因表达水平的变化;MTT检测MDA-MB-231细胞增殖;Transwell侵袭实验检测MDA-MB-231细胞的迁移与侵袭能力变化。结果:CD44在侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达高于非侵袭性乳腺癌细胞MCF-7,CD44-siRNA下调了 MDA-MB-231细胞中CD44 mRNA与蛋白水平的表达,并抑制了细胞的增殖和侵袭转移能力。结论:CD44-siRNA能够下调CD44的表达,并有效抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖及其侵袭迁移力。     

CD44基因变异体对人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭作用

目的 探讨一种新的CD44基因变异体(CD44v17)对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响及其机制.方法 以人乳腺癌耐阿霉素细胞株(MCF-7/ADR)cDNA为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,将其T-A克隆后,进行测序;构建CD44v17质粒真核表达载体(pcDNA3.1-CD44v17);应用脂质体转染法将pcDNA3.1-CD44v17转染入MCF-7细胞中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及明胶酶谱法测定转染细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell法检测CD44v17对MCF-7细胞的侵袭力;Western blot检测胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及磷酸化蛋白激酶(p-ERK)变化.结果 限制性内切酶消化证实,重组载体已正确克隆;DNA序列分析显示,CD44v17包含CD44基因1～4号外显子、16～17号外显子、18号外显子1～205位碱基(GeneBank NO.FJ216964).MCF-7细胞转染peDNA3.1-CD44v17后,CD44 mRNA表达量和蛋白表达率分别为0.92±0.22和(70.0±2.5)%;透明质酸(HA)处理后,MMP-2 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.72±0.22和1.14.4-0.12,MMP-9 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.85±0.19和1.23±0.25,细胞侵袭能力明显增加,侵袭细胞数目为352±33个/视野,而CD44单抗可以阻断这种作用;CD44单抗和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路抑制剂预处理转染细胞后,显著阻断了P-ERK的表达.结论 在MCF-7/ADR细胞中发现CD44v17,并成功克隆和建立pcDNA3.1-CDd4v17;HA与CD44v17受体结合,通过CD44→ras→MAPK信号传导通路调节MMP-2和MMP-9的表达,从而增加MCF-7细胞的侵袭力.     

HA-CD44st-TGF-β信号通路对乳腺癌MCF-7细胞HER2表达及侵袭能力的影响

目的探讨HA-CD44st-TGF-β信号通路对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞HER2表达及侵袭能力的影响。方法应用脂质体转染法将真核表达载体pcDNA3.1-CD44st转染入MCF-7细胞中,以该转染细胞株(MCF-7/CD44st)为基础,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术及Western blot检测mRNA及相关蛋白的表达,电泳迁移率变动分析(EMSA)检测激活蛋白-1(AP-1)的活性,Transwell法检测HA-CD44st→TGF-β信号通路对MCF-7细胞侵袭能力的影响。结果 MCF-7细胞转染pcDNA3.1-CD44st后,CD44 mRNA和CD44蛋白的表达水平升高;透明质酸(HA)处理后,MCF-7/CD44st细胞中人表皮生长因子受体2(HER2)、转化生长因子-β(TGF-β)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)表达水平明显升高,转录因子AP-1活性增强,侵袭细胞数量增多。结论 HA与CD44st受体结合后,可以通过HA-CD44st→TGF-β信号转导通路调节HER2基因表达并增强MCF-7细胞的侵袭能力。     

CD44在乳腺癌中的表达及意义

目的研究CD44在乳腺癌中的表达。方法应用免疫组化S-P法检测乳腺癌中CD44的表达。结果CD44蛋白表达与乳腺癌组织学类型、淋巴结转移呈正相关，与预后呈负相关，与组织学分级无明显相关性。结论CD44表达与乳腺浸润癌、转移及预后显著相关，检测乳腺癌中CD44表达水平，可用于乳腺癌恶性程度、复发转移潜能及预后的判断指标。     

粘附分子CD44在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨粘附分子CD44在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法对30例乳腺癌及10例乳腺良性肿瘤组织中的CD44基因的表达进行检测。结果：（1）CD44V6在乳腺癌中的表达显著性高于乳腺良性肿瘤；（2）乳腺癌组织中CD44V6表达率明显高于CD44S及CD44V3；（3）Ⅲ，Ⅳ期乳腺癌CD44V6表达显著高于I，II期乳腺癌；（4）有淋巴结转移的乳腺癌CD44V6的表达明显高于无淋巴结转移者。结论：CD44V6在乳腺癌中的表达与乳腺癌的发生发展，浸润转移和预后密切相关，可作为临床判断浸润转移和估计预后的一个有人价值的指标。     

VEGF和CD44表达与乳腺癌分期的相关性研究

目的：研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和CD44在不同分期乳腺癌中的表达及其相互关系。方法：共收集79例手术标本和12例正常乳腺组织,用免疫组织化学法（S-P法）检测,用免疫组化图象分析系统进行结果处理。结果：乳腺癌中VEGF和CD44的表达水平与正常乳腺组织相比差异具有显著性（P〈0.05）;Ⅰ期与Ⅱ期及Ⅲ期之间相比,VEGF和CD44的表达水平差异同样具有显著性,并且随分期越晚表达越强（P〈0.05）;不同细胞类型之间的差异无显著性（P〉0.05）,而与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、远处器官转移以及肿瘤的TNM分期密切相关（P〈0.05）。结论：VEGF与CD44的表达水平与乳癌分期成正相关,在排除创伤和炎症的前提下,可能提示肿瘤的活跃生长以及潜在转移。     

CD44在乳腺癌中的表达与预后的关系

目的 研究糖蛋白ＣＤ４４在乳腺癌中的表达及其表达程度与预后的关系。方法 采用免疫组织化学方法,对１４０例有随访结果的乳腺癌和３７例乳腺良性病就的石蜡切片作ＣＤ４４染色并进行分析。结果 ＣＤ４４在良、恶性乳腺病中的表达有显著差异。ＣＤ４４在乳腺癌中的表达随着组织学级别的升高百升高。ＣＤ４４在肿瘤中的表达与预后差相关。当ＣＤ４４与ＭＴ在肿瘤中的表达其五年生存率明显降低。ＣＤ４４在肿瘤中的表达与抹时腋下     

侵袭性垂体腺瘤中CD44与Ki-67表达的相关性

目的探讨细胞粘附分子CD44、细胞增值核抗原Ki-67在侵袭性垂体腺瘤中的表达及意义并探讨二者之间的关系。方法用免疫组化法检测CD44s、CD44v5、Ki-67在20例侵袭性垂体腺瘤和18例非侵袭性垂体腺瘤中的表达。结果CD44s和Ki-67在侵袭性垂体腺瘤组中表达高于非侵袭性垂体腺瘤组(P<0.01),且二者在垂体腺瘤中的表达呈正相关。CD44v5在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中表达无明显差异(P>0.05)。结论CD44s和Ki-67与垂体腺瘤的侵袭性生长行为有关,二者协同作用,在侵袭性垂体腺瘤的发生、发展中起重要作用,可作为侵袭性垂体腺瘤诊断和判断预后的重要生物学指标。     

粘附因子CD44S、CD44V3、CD44V6在乳腺癌中的表达及临床意义

目的：研究粘附因子CD44s、CD44v3、CD44v6蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：收集60例经根治性切除的乳腺癌标本,应用免疫组化S-P法检测CD44s、CD44v3、CD44v6。蛋白的表达,并分析与临床病理因素之间的相关性。结果：CD44s、CD44v3、CD44v6在乳腺癌中的阳性率分别为78．3％、75．0％、78．3％。CD44s、CD44v6的表达程度与淋巴结转移、临床分期、肿块的大小密切相关（P〈0．05）。CD44v3与乳腺癌的转移、临床分期无明显相关性。三者与患者的年龄均无明显相关性。结论：CD44s和CD44v6蛋白表达与乳腺癌转移、侵袭明显相关,而CD44v3则与之无明显相关性。     

CD44表达与乳腺癌侵袭转移相关性的研究

目的：研究乳腺癌组织中粘附分子CD44的表达及其对肿瘤发生,发展和转移的影响。方法：应用免疫组织化学方法,检测30例乳腺癌和10例乳腺良性肿瘤组织中CD445、CD44V3及CD44V6表达情况。结果：CD445、CD44V3表达在乳腺癌和良性乳腺肿瘤组织中无显著差异,CD44V6表达在乳腺癌组织明显高于良性组织;CD44V6表达与临床分期相关,与病理类型无关,有淋巴结转移的乳腺癌组织中,CD44V6表达明显高于无淋巴结转移者。结论：CD44（尤其是CD44V6）的异常表达与乳腺癌的发生发展,浸润转移密切相关;对评价乳腺癌恶性程度,预测淋巴结转移和判断预后有一定的参考价值。     

CD44v6在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨 CD4 4v6 在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法 :应用免疫组织化学 S- P法分别检测 CD4 4v6 在 5例正常乳腺组织和 6 4例乳腺癌组织中的表达 ,分析它的表达与乳腺癌临床病理因素的关系。结果 :CD4 4v6 在正常乳腺导管上皮细胞和腺泡上皮细胞呈阴性表达 ,而在肌上皮细胞呈强阳性表达 ;CD4 4v6 表达和淋巴结有无转移、ER、PR有关 (P<0 .0 0 1和 P<0 .0 5 ) ,CD4 4v6 表达阴性患者 5年生存率高于阳性者 ,差异有显著性意义 (P<0 .0 5 ) ,而与患者年龄、月经状态、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型、组织学分级无关。结论 :CD4 4v6 在乳腺癌浸润和转移中可能起重要作用 ,可作为一个预后指标     

粘附分子CD44v6在乳腺癌组织表达的研究

目的：探讨ＣＤ４４ｖ６基因在不同乳腺组织的表达及其与乳腺癌淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化Ｓ－Ｐ法对１１３例不同乳腺组织进行ＣＤ４４ｖ６表达的研究。结果：ＣＤ４４ｖ６阳性表达率在乳腺癌组织（９６．７％）明显高于乳腺良性肿瘤（５０．０％）和正常乳腺组织（１３．３％）（Ｐ〈０．０５）,但淋巴结转移灶（２２．２％）明显低于原发癌灶（１００％）（Ｐ〈０．０５）。结论：ＣＤ４４ｖ６基因高表达可作为判断乳     

肿瘤坏死因子-α对乳腺癌细胞CD44表达调控及其影响细胞迁徙机制的探讨

目的:检测肿瘤坏死因子(TNF-α)对乳腺癌细胞株MDA-MB-231中CD44s、CD44V3和CD44V6表达的调控及其对细胞迁徒力的影响,并探讨TNF-α调节CD44可能存在的信号途径.方法:用RT-PCR和蛋白质印迹法检测TNF-α(0、2、20和200 ng/mL)作用乳腺癌细胞后其CD44 mRNA和蛋白的表达情况,Transwell方法检测TNF-α作用后细胞迁徒能力的改变;以浓度为20 ng/mL的TNF-α处理MCF-7和MDA-MB-231后,用蛋白质印迹法检测MAPK(JNK、p38和ERK)信号通路中蛋白磷酸化水平变化,对磷酸化水平增加的蛋白用特异性抑制剂预处理后检测CD44的表达及细胞迁徙能力的改变.结果:TNF-α作用后MDA-MB-231细胞CD44s、CD44V3、CD44V6mRNA和蛋白表达水平均上调;迁徙力增加了22%～90%;TNF-α作用MDA-MB-231细胞后p38磷酸化水平升高;用p38的特异性抑制剂预处理后可以逆转CD44表达和细胞迁徒力的改变.结论:TNF-α通过p38途径对MDA-MB-231细胞CD44表达进行调控,CD44的表达可以增强肿瘤细胞的迁徙力.     

CD44V6在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌中CD44v6蛋白的表达及临床意义.方法用免疫组织化学方法对乳腺癌CD44v6蛋白送行检测,并与患者临床病理指标进行分析.结果乳腺癌CD44v6蛋白阳性反应率为58.4%(28/48),与肿瘤大小、腋淋巴结转移成正相关.结论CD44v5参与了乳腺癌的发生、发展过程,可能是评估乳癌生物学行为的不良指标.     

CD44v6在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其对卵巢癌细胞株侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨CD44v6(CD44 variant domain 6,CD44v6)在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3侵袭和迁移能力的影响.方法:收集东莞市人民医院妇产科2002年至2010年间手术切除的卵巢上皮性肿瘤标本185例,采用RT-PCR和EnVision-免疫组化染色技术检测卵巢上皮性肿瘤组织中CD44v6的表达.构建CD44v6表达质粒转染SKOV3细胞,分别加入不同浓度anti-CD44v6中和抗体,应用Transwell小室实验检测各组SKOV3细胞侵袭和迁移能力的变化.结果:CD44v6 mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达高于卵巢良性上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织(P＜0.05).CD44v6的表达与卵巢上皮性癌的病理组织学分级、预后相关(P＜0.05).体外实验显示,上调CD44v6的表达可以促进SKOV3细胞的迁移能力,而加入anti-CD44v6中和抗体后,可消除CD44v6对SKOV3细胞迁移的促进作用.结论:CD44v6表达上调参与卵巢上皮性肿瘤的发生、发展.     

CD44V6表达与乳腺癌侵袭转移的关系

目的研究乳腺癌中CD44V6的表达及其与乳腺癌侵袭转移的关系。方法应用免疫组织化学和RT-PCR方法,检测30例乳腺癌和10例乳腺良性肿瘤组织中CD44V6表达。结果CD44V6在乳腺癌组织中的表达明显高于良性组织;CD44V6在Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌中表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期,有淋巴结转移乳腺癌组织中CD44V6表达显著高于无淋巴结转移者;CD44V6的表达与乳腺癌的病理类型无关。结论CD44V6的表达,有助于预测乳腺癌进展程度和对淋巴结转移的判断。     

HIF-2α对乳腺癌MCF-7细胞生物学功能的影响

目的 探讨HIF-2α对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭及成瘤能力的影响。方法 利用HIF-2αORF/shRNA慢病毒颗粒分别感染乳腺癌MCF-7细胞,筛选构建MCF-7 HIF-2α上调或下调的稳定细胞株;利用Real-time PCR和Western blot方法分别检测HIF-2α mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8方法检测细胞增殖活力;Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力变化;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。结果 HIF-2α shRNA质粒转染MCF-7细胞后HIF-2α的表达水平均显著下降;HIF-2α ORF质粒转染MCF-7细胞后HIF-2α的表达水平显著升高。CCK-8检测结果显示：HIF-2α上调后MCF-7细胞增殖活力增强;Transwell小室实验结果显示：HIF-2α上调后MCF-7细胞侵袭能力增强;平板克隆形成实验结果显示：HIF-2α上调后MCF-7细胞克隆形成能力增强。而HIF-2α下调MCF-7细胞具有相反趋势。结论 HIF-2α过表达能够增强MCF-7细胞增殖活力、促进肿瘤细胞侵袭和克隆形成。     

CD44V6基因蛋白在乳腺癌中的表达及其意义

目的 探讨ＣＤ４４Ｖ６在乳腺癌中的表达及其意义。方法 应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测５４例乳腺癌组织中ＣＤ４４Ｖ６基因蛋白表达变化。结果 乳腺癌ＣＤ４４Ｖ６阳性率为５９．３％（３２／５４）,良性肿瘤的阳性率为２７．３％（３／１１）,Ｐ〈０．０５。有淋巴结转移者ＣＤ４４Ｖ６高表达者的阳性率为６９．２％（１８／２６）。在无淋巴结转移者中,浸润性癌高表达生率为５４．５％（１２／２２）,低表达阳性率为１３．