低凋亡指数与高端粒酶活性的葡萄胎与GTT关系的研究

目的研究葡萄胎的凋亡指数及端粒酶活性与妊娠滋养细胞肿瘤的相关关系。方法对142例葡萄胎及8例妊娠滋养细胞肿瘤采用S-P法及Evision法检测PCNA、Ps,、Ki-67、FADD、端粒酶活性的表达。结果142例葡萄胎中PCNA阳性率为14．08％（20／142）、P535．63％（8／142）、Ki-67阳性率5．63％（8／142）、FADD59．15％（84／142）、端粒酶阳性率10．56％（15／142）。5例侵袭性葡萄胎中PCNA阳性率80％（4／5）、Ki-67阳性率80％（4／5）、P53阳性率100％（5／5）、FADD阳性率0％（0／5）、端粒酶阳性率100％（5／5）。3例绒毛膜癌中PCNA阳性率100％（3／3）、P53阳性率100％（3／3）、Ki一67阳性率100％（3／3）、FADD阳性率33．3％（1／3）、端粒酶阳性率66．7％（2／3）。结论低凋亡指数与高端粒酶活性的葡萄胎可能是发展为妊娠滋养细胞肿瘤的高危因素。端粒酶的激活能够促进细胞增殖和恶性进展,抑制端粒酶活性能够起到抑制细胞增殖的作用。     

端粒酶活性与恶性脑肿瘤的诊断

目的：探讨脑胶质瘤及脑脊液（CSF）中端粒酶的活性表达情况及其在恶性脑肿瘤中的诊断价值。方法：采用TRAP（telomeric repeat amplification protocol)法检测50例脑胶质瘤,取其中15例端粒酶呈阳性患者术后CSF、4例术前CSF,检测端粒酶活性表达情况。结果：（1）脑胶质瘤（KERNOHAN分级）端粒酶：阳性率为22／50（44．0％）,其中I级为3／16（18．8％）,Ⅱ级为3／12（25．0％）;Ⅲ级为9／14（64．3％）,Ⅳ级为7／8（87．5％）。22例Ⅲ级以上恶性脑肿瘤中端粒酶活性表达阳性16／22（72．7％）明显高于Ⅱ级以下脑胶质瘤中端粒酶活性表达6／28（21．4％）（P＜0．005）。（2）CSF中端粒酶：4例术前、15例术后患者的脑脊液端粒酶检出率分别为2／4（50．0％）和10／15（66．7％）。2例术前CSF呈阴性,术后1例CSF呈阳性。结论：端粒酶是胶质瘤发展的重要因素之一,检测脑脊液中端粒酶的活性可作为辅助检查,对脑胶质瘤的诊断有一定的参考价值。     

端粒酶活性与宫颈癌演进的关系

目的：研究端粒酶表达及其活性与宫颈癌发生发展的关系。方法：应用端粒复复序列扩增－酶联免疫吸附法（TRAP－ELISA）对30例宫颈癌和15例宫颈上皮内肿瘤组织的端粒酶活性进行检测，以吸光度（A）值判断端粒酶活性，同时检测20例正常宫颈上皮的端粒酶活性作为对照。结果：宫颈癌、宫颈上皮内肿瘤和正常宫颈上皮组织中端粒酶表达的阳性率分别为93．3％、26．7％和0％，组间比较，差异有显著性（P＜0．01）。宫颈癌组织的端粒酶活性明显高于宫颈上皮内肿瘤（P＜0．01）。结论：端粒酶的表达及其活性的进行性增高与宫颈癌的发生发展密切相关。     

食管癌组织中端粒酶活性及PCNA的表达和意义

目的：探讨食管癌组织中端粒酶活性和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达关系及临床意义。方法：采用一杂交技术和免疫组织化学技术检测端粒酶活性，PCNA在30例食管癌中的表达情况。结果：（1）食管癌组织中端粒酶mRNA的阳性表达率为93．3％（28／30），明显高于癌旁组织（距肿瘤3cm处），正常黏膜组织（距肿瘤8cm处），经统计学处理有显著性差异（P＜0．001）；端粒酶活性的表达强度与肿瘤的分化程度，浸润深度，临床分期及淋巴结转移显著相关（P＜0．05），与性别、年龄无相关性。（2）PCNA阳性表达率为93．3％（28／30），其表达强度与肿瘤的分化程度、浸润深度显著相关（P＜0．05），与淋巴结转移无明显相关性。（3）端粒酶活性表达与PCNA密切相关（P＜0．05）。结论：端粒酶的激活在食管癌的发生发展中有一定作用，检测端粒酶活性和PCNA的表达强度对食管癌的诊断，治疗及预后判断有重要意义。二者联合检测更有价值。     

神经胶质瘤中细胞增殖核抗原Ki-67的表达及研究

目的探讨神经胶质瘤组织中Ki-67抗原表达及其与肿瘤发生和恶性程度的关系。方法应用免疫组化Envision法对39例颅内神经胶质细胞瘤标本中Ki-67抗原的表达进行检测,观察Ki-67与神经肿瘤恶性程度间的关系。结果不同恶性程度胶质细胞瘤间Ki-67表达强度有明显差异（F=36．375,P〈0．05）,与肿瘤的恶性程度呈正相关（r=0．939,R〈0．05）。结论细胞增殖核抗原Ki-67的表达与胶质瘤的发生及其恶性程度有一定关系,临床检测Ki-67指数有助于患者预后评估。     

端粒酶与Ki-67及p53在大肠癌和大肠腺瘤病变中的关系

目的：探讨端粒酶与Ki-67、p53在大肠癌和腺瘤的表达及发生、发展机理。方法：用组织芯片原位杂交的方法在分子学水平对细胞的端粒酶进行检测,同时用免疫组织化学法对Ki-67,p53进行检测。结果：72例大肠癌端粒酶表达的阳性率为77．78％,Ki-67阳性率88．89％,p53阳性率63．89％;36例大肠腺瘤端粒酶表达阳性率8．3％,p53阳性率22．22％,Ki-67阳性率13．89％。端粒酶和Ki－67、p53的阳性表达在大肠癌和大肠腺瘤之间的差异有显著性（P〈0．05）。结论：端粒酶和K-i67、P53在大肠细胞癌变过程中有一定的协同作用。     

甲状腺良恶性病变组织中端粒酶活性分析

目的研究端粒酶在各种甲状腺肿瘤中的活性状态。方法用改良端粒重复序列扩增聚合酶链反应法（TRAP-PCR）在定性及定量水平上检验100例良恶性甲状腺组织标本及15例甲状腺癌细针穿刺标本的端粒酶活性。结果甲状腺癌组织的端粒酶阳性率（83．8％，31／37例），明显高于良性甲状腺病变（21．2％，7／33例）及病变旁正常甲状腺组织（10．0％，3／30例）；15例甲状腺癌的细针穿刺标本也均呈阳性表达，与相应的组织标本相符。定量结果显示甲状腺癌组端粒酶活性明显高于良性病变及正常组织，髓样癌及间变癌的活性高于乳头状癌。结论端粒酶活性是恶性甲状腺肿瘤的一个敏感标志物。TRAP-PCR定量分析对甲状腺肿瘤的鉴别诊断具有重要意义。     

钙粘素与Ki-67和p16在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨钙粘素(E-cadherin,E-cd)、p16和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测53例胶质瘤和12例正常脑组织中的E-cd、p16蛋白和Ki-67的表达。结果E-cd和p16在正常脑组织中的阳性表达率均为100％;E-cd在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为53．6％、20．0％,各级肿瘤组织之间以及与对照组之间均有显著性差异(P<0．05);p16在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为57．1％、24．0％,肿瘤组织学分级之间有显著性差异(P<0．05),与对照组之间也有显著性差异(P<0．01);而且E-cd和p16二者在胶质瘤中的表达呈正相关(P<0．05);Ki67在不同级别的肿瘤组织中的阳性细胞为1％-30％,各级肿瘤之间以及与对照组之间的阳性表达率有非常显著性差异(P<0．01)。结论E-ed、p16和Ki-67在胶质瘤的发生发展过程中起重要作用,并且对于评估胶质瘤的恶性程度及预后有重要意义。     

端粒酶活性及凋亡相关基因在胶质瘤临床分级和预后整体评价中的应用

目的探讨端粒酶.bc1-2,P16与P53及增殖细胞核抗原(PCNA)在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法分别采用%loreeraser PCRELISA试剂盒和免疫组化S-P法检测55例脑胶质瘤标本和if-常对照组10例标本的端粒酶活性表达及ki-67蛋白的表达的结果35例胶质标本q-,端粒酶和ki-67蛋白表达阳性率分别为74.2%(26/35)和80.0%(28/35):显著高于I~II级(16.7%)的表达强度(P<0.01)。结论p16和P53、PCNA蛋白表达异常可用以判断人脑胶质瘤的生物学行为。端粒酶活性可以作为脑胶质瘤的恶性标记之.测定胶质瘤端粒酶活性对其诊断及预后判断具有重要价值。     

人食管鳞癌端粒酶活性的临床研究

目的：探讨端粒酶活性与食管癌临床生物学行为关系及临床应用价值。方法：采用端粒重复扩增－酶免疫吸附法检测人食管鳞癌组织、癌旁组织及正常食粘膜上皮组织中端粒酶活性表达。结果：35例食管组织中端粒酶阳性者占86．6％（31／35），癌旁组织中阳性率为17．1％（6／35），正常食管组织端粒酶活性均为阴性。当癌侵及肌层及外侵后，其阳性表达率高于局限于粘膜及粘膜下层者（P＜0．01）。伴淋巴结转移标本中其阳性率高于无淋巴结转移者（P＜0．05）。端粒酶活性与肿瘤组织类型，分化程度等无明显相关（P＞0．05）。结论：端粒酶活性在人食鳞癌的发生、发展进程中发挥重要作用，端粒酶有可能成为食管癌诊断和判断预后的生要生物标志物和治疗新靶点。     

p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用S-P免疫组织化学法检测10例正常脑组织及208例人脑胶质瘤组织中p53和Ki67的表达。结果p53和Ki67在正常脑组织中均无表达。p53在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为52．8％和74．1％,Ki67在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为17．8％和67．1％。p53在Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=22．004,P=0．000;x^2=9．610,P=0．002）。p53在Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织中的表达（x^2=10．336,P=0．001）。Ki67在Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=16．765,P=0．000;x^2=51．596,P=0．000）。而Ki67在正常脑组织中及Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤组织中的表达差异无统计学意义（x^2=2．143,P=0．143）。结论p53和Ki67在脑胶质瘤的发生中可能起重要作用,二者与胶质瘤的恶性程度相关。     

细胞周期对人脑胶质瘤端粒酶活性的影响

目的：研究人脑胶质瘤中端酶活性在不同细胞周期中的表达情况，以探讨恶性肿瘤细胞周期变化对端粒酶活性的影响。方法：采用端粒重复序列扩增方案（TRAP）－银染法检测了82例脑胶组织标本，并应用流式细胞术（FCM）测定它们的S期细胞比例（SPF），结果：82例脑胶质瘤标本中，有端粒酶活性表达共33例，阳性率为40．2％，星形细胞瘤和间变性星形细胞瘤中，端粒酶活性的表达与SPF无明显相关性，多形性胶质母细胞瘤端粒酶活性检测阳性标本的SPF值明显高于阴性标本，统计学分析再者结果差异有显著性。结论：在细胞周期中端粒酶活性的改变受到多种生物学因素的调节，其中恶性肿瘤本身的增殖活性可能起着关键性的作用。     

人脑肿瘤端粒酶活性表达及其临床意义

目的研究人类脑肿瘤中端粒酶的表达情况,探讨端粒酶活性与恶性脑肿瘤发生和发展的关系。方法采用TRAP—银染法检测37例脑肿瘤组织和4例正常脑组织中的端粒酶活性。结果37例脑肿瘤组织标本中,16例有端粒酶活性的表达,阳性率为43.2%;4例正常脑组织中均未检测到端粒酶活性。结论端粒酶活性的表达与脑肿瘤的恶性程度密切相关,有可能成为恶性脑肿瘤的一个重要标志物。     

端粒酶在乳腺组织中的表达

目的：检测端粒酶在乳腺组织中的表达，探讨其在诊断和预后中的意义。方法：采用TRAP－ELISA方法，对109例乳腺癌、30例正常乳腺组织及囊性增生病、30例乳腺腺纤维瘤和10例乳腺癌前病变进行端粒酶活性检测。结果：正常乳腺组织及囊性增生病无端粒酶活性，乳腺腺纤维瘤有23．33％端粒酶呈弱表达，乳腺癌前病变有4例端粒酶表达。乳腺癌中88．07％可以检测到端粒酶活性，随着临床分期的增加，端粒酶阳性率不断上升。其中端粒酶阳性率在临床I期为64．29％，Ⅱ期及以上为91．58％（P＜0．05）。端粒酶阳性率在腋淋巴结转移阴性组中为75．56％，而转移阳性组中为96．88％（P＜0．01）。端粒酶表达在ER（－）组与ER（＋）组间无明显差别。端粒酶表达在PgR(-)为95．08％，在PgR( )组为79．17％（P＜0．01）。结论：正常乳腺组织中无端粒酶表达。从乳腺癌癌前病变至各期乳腺癌中，端粒酶表达逐渐上升，端粒酶激活可能是乳腺癌形成和发展中的关键步骤，可以为乳腺癌诊断提供重要依据，在其预后判断中有着重要作用。     

On the significance of telomerase activity in human malignant glioma cells

Telomerase is critical for tumor cell immortalization and is a novel target for cancer chemotherapy. Here, we examined whether telomerase is expressed in glioma cell lines, whether telomerase activity is regulated by bcl-2 or p53, and whether telomerase activity predicts response to chemotherapy. Further, we characterized the effects of a candidate telomerase inhibitor, penclomedine, in glioma cells. All 12 human malignant glioma cell lines examined were telomerase positive. Telomerase activity was not modulated during cell cycle progression, did not correlate with p53 status or bcl-2 family protein expression, and did not predict drug sensitivity, except for an association with resistance to carmustine. Ectopic bcl-2 expression did not enhance telomerase activity. Wild-type p53 reduced telomerase activity in cell lines retaining p53 activity but not in p53-mutant cell lines. Penclomedine killed glioma cells via an apoptotic, but death receptor-, bcl-2- and caspase-independent pathway, but did not inhibit telomerase and did not act synergistically with cytotoxic drugs. We conclude that telomerase activity does not account for the differential chemosensitivity of human glioma cells and that penclomedine kills glioma cells via a telomerase-independent pathway.     

膀胱癌组织中端粒酶活性检测的意义

目的探讨膀胱癌组织端粒酶活性与膀胱癌病理参数的关系及其临床意义。方法应用改良的TRAP法对40例膀胱癌组织、20例膀胱癌癌旁2cm膀胱组织和10例正常膀胱组织进行端粒酶活性的检测,用Yecan酶免分析仪连续测定其450～630nm的OD值。结果40例膀胱癌组织端粒酶活性强度OD值为0.567±0.251。正常膀胱组织无端粒酶活性存在。癌组织端粒酶活性强度OD值高于癌旁组织OD值(P<0.01)。端粒酶活性强度OD值Ⅲ级>Ⅱ级>Ⅰ级(P<0.05),OD 值在膀胱癌中随分级的增加呈上升趋势。浸润性膀胱癌端粒酶活性OD值明显高于浅表性膀胱癌端粒酶活性OD值(P<0.01)。淋巴结转移的膀胱癌端粒酶活性OD值明显高于无淋巴结转移的膀胱癌端粒酶活性OD值(P<0.05)。复发膀胱癌端粒酶活性OD值明显高于原发膀胱癌端粒酶活性OD 值(P<0.05)。结论膀胱癌组织中端粒酶阳性率及端粒酶活性强度OD值显著高于正常膀胱组织。端粒酶阳性率与膀胱癌病理分级、临床分期、淋巴结是否转移以及是否复发无关。但端粒醇活性强度OD值与膀胱癌的分级、分期、淋巴结转移以及复发有关。膀胱癌各病理参数中端粒酶阳性率经统计学比较差异无显著性,用端粒酶活性强度OD值作为比较可能更能显示其真正的临床意义。     

PTEN在脑胶质瘤表达的定性研究

目的 探讨抑癌基因PTEN在脑胶质瘤的表达情况及其临床意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法,检测45例胶质瘤组织与23例正常脑组织PTEN基因外显子1-9、1-8、5-9、5-8 mRNA失表达情况。结果 在45例肿瘤组织中,PTENmRNA平均失表达率为55.6％（25／45）。正常脑组织无1例失表达。胶质瘤组织和正常脑组织中PTENmRNA失表达水平存在明显差别（P〈0.05）。胶质瘤中PTENmRNA失表达水平与患者年龄、性别无关,但随着恶性程度分级增高其失表达水平明显升高（P＜0.05）。结论 PTENmRNA表达水平的异常在胶质瘤的发生和发展过程中起着重要作用。     

端粒酶在前列腺癌组织中的活性表达及意义

目的探讨端粒酶在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测41例前列腺癌组织、18例前列腺增生组织和11例正常前列腺组织中端粒酶活性的表达,并与肿瘤的临床分期、分级及淋巴结或骨转移情况进行比较分析。结果41例前列腺癌组织中湍粒酶的阳性表达率为82.9%,明显高于良性前列腺增生(5.6%)及正常前列腺组织,而且表达率随肿瘤的临床分期、分级升高而增加,有淋巴结或骨转移者表达率高。结论端粒酶活性在前列腺癌组织中表达率高,在浸润转移过程中起重要作用,可作为前列腺癌早期诊断及估计预后的指标之一。     

CD133在不同病理级别脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的检测CD133在脑胶质瘤中的表达,探讨其对脑胶质瘤诊断及预后的作用。方法应用辣根过氧化物酶化学法检测38例脑胶质瘤（脑胶质瘤组）和5例正常脑组织（正常对照组）中CD133的表达。结果 CD133在脑胶质瘤组中的阳性表达率为71.1%（27/38）,在正常对照组中的表达为0.0（0/5）,二者比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;CD133阳性细胞例数在不同病理级别的脑胶质瘤组织中的表达存在相关性,即胶质瘤级别越高,CD133阳性细胞例数越多,差异有统计学意义（r=0.012,P〈0.01）;不同病理级别的脑胶质瘤中CD133阳性细胞率与患者的复发率存在相关性,即不同病理级别的脑胶质瘤中,CD133阳性细胞率越高,患者复发率越高,差异有统计学意义（r=0.358,P〈0.05）。结论在脑胶质瘤中CD133的表达情况可以用于指导肿瘤的临床诊断和预后评估。