视网膜母细胞瘤p53基因存在状态的研究

目的 探讨Ｐ５３基因突变与视网膜母细胞瘤的发病或病主煌关系。方法 应用单链构象多态性分析和ＤＮＡ序列测定技术,检测５２例Ｒｂ肿瘤患者ＤＮＡＰ５３基因的整个编码区、ｍＲＮＡ剪接位点及其附近的内含子含序是否存在变异,并与正常对照的ＤＮＡ序列比较,确定其变异的性质。结果 ５２例Ｒｂ肿瘤中除可见多态性、同义突变及内含子序列的变异外,未检出Ｐ５３基因有真正的点突变。结论Ｐ５３基因不是通过其结构的突变参与Ｒｂ     

视网膜母细胞瘤中p16,pRb表达的研究

用免疫组化方法对２７例视网膜母细胞瘤中ｐ１６及ｐＲｂ的表达进行研究，结果发现４１％的病例不表达ｐ１６蛋白，５９％的病例不表达ｐＲｂ蛋白，两者均呈低表达的趋势，在一些病例中ｐ１６与ｐＲｂ有互换性缺失，提示ｐ１６及ｐＲｂ的视网膜母细胞瘤的发生中起重要作用。     

双眼视网膜母细胞瘤Rb基因缺失研究

利用Ｒｂ基因ＣＡＤ探针，采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法，检测５例双眼视网膜母细胞瘤患者及家系中相关人员共１９例外周血白细胞ＤＮＡ。２例患者体细胞出现Ｒｂ基因半合缺失，其中１例Ｒｂ基因半合缺失来自亲代生殖细胞，另１例Ｒｂ基因半合缺失可能发生于配子形成期。这一结果为以分子水平为基因的“二次突变论”提供了依据，并表明此方法在临床上有推广应用价值。文中还讨论了第二恶性肿瘤问题。     

视网膜母细胞瘤p53、c-myc及增殖细胞核抗原表达的研究

目的 探讨Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及增殖细胞核抗原在视网膜母细胞瘤中的表达及其与Ｒｂ分化和蔼和视神经浸润的关系。方法 应用抗人Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ的单克隆抗体,采用锭霉卵白素－生物素免疫组化法,对３１例Ｒｂ常规石蜡标本行ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ表达的测定。结果 ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ在Ｒｂ中的表达阳性率分别为５１．６％、４５４．２％及６７．７％,且均与Ｒｂ的分化程度有关。ＰＣＮＡ的表达     

PTEN和p53在视网膜母细胞瘤中的表达及临床意义

目的检测视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)组织中PTEN基因和p53基因的蛋白表达水平并探讨二者在RB发生发展中的作用以及相关性。方法采用PV-9000免疫组织化学二步法,检测40例RB组织和16例正常视网膜组织中PTEN和p53蛋白的表达,统计分析不同临床和病理阶段RB表达PTEN和p53的差异及其相关性。结果(1)PTEN在正常视网膜组织中的阳性表达率为100%,显著高于RB55%(P<0.01);PTEN蛋白的阳性表达率与临床分期、病理分型以及是否伴有视神经浸润有关(P<0·05);与性别差异无关(P>0.05)。(2)p53在正常视网膜组织中不表达,在RB组织中阳性表达率为57.5%,差异有统计学意义(P<0·05);p53蛋白的阳性表达率与临床分期、病理分型以及是否伴有视神经浸润有关(P<0.05);与性别差异无关(P>0·05)。(3)PTEN和p53在RB中的蛋白表达呈负相关(r=-0.3710,P<0.05)。结论PTEN和p53可作为判断RB恶性程度和预后的指标。PTEN可作为RB早期诊断的分子标记物之一。     

视网膜母细胞瘤抑制基因分子生物学研究进展

视网膜母细胞瘤（ＲＢ）由于仅发生在婴幼儿，又有遗传与非遗传二种形式，一直被认为是研究肿瘤遗传学及肿瘤发病机理的理想模式。有关肿瘤发生的“二次突变论”、“隐形调节基因假说”及“抗癌基因理论”都是在研究ＲＢ的基础上建立并完善的。目前Ｒｂ基因研究是当今国际上肿瘤学、细胞生物学及分子生物学的前沿课题，因为Ｒｂ基因除参与ＲＢ肿瘤的形成外，在正常细胞周期的调控及多种不同组织学来源的恶性肿瘤发生发展中也起重要作     

Rb1基因在双眼视网膜母细胞瘤病人体细胞中杂合性突变的检测

目的对５０例眼视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）病人进行外周血体细胞Ｒｂ１基因杂合性突变的检测工作。方法ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（单链构像多态分析）直接测序技术。结果改进的方法可以检测出Ｒｂ１基因１～１０个碱基的多种类型的微小突变。结论可将此快速、敏感、有效的方法用于阐明Ｒｂ１基因突变机制并可以对此类病人及家系在分子水平上进行ＲＢ的产前诊断、产后早期诊断及遗传咨询。     

视网膜母细胞瘤自杀基因疗法的研究进展

视网膜母细胞瘤（Rb)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤,其发病率有逐渐升高的趋势。Rb的恶性程度高,发病早,可侵及单眼和双眼,对视功能的损害极大,甚至威胁生命,自杀基因疗法是目前肿瘤基因治疗中一种具有很大临床应用前景的治疗策略。但其用于视网膜母细胞瘤治疗的研究近年才刚刚起步,本综述从作用机制,旁观效应,设计策略及基础实验的疗效评估等方面介绍近年来视网膜母细胞瘤自杀基因疗法的研究进展。     

视网膜母细胞瘤中p53蛋白表达的研究

视网膜母细胞瘤中ｐ５３蛋白表达的研究郭浩轶宋绣雯刘政国张成关键词视网膜母细胞瘤蛋白质ｐ５３／分析免疫细胞化学视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）的发生与位于染色体１３ｑ１４的Ｒｂ抗癌基因的失活有关。以往对ＲＢ的研究多集中于对Ｒｂ基因的...     

Expression of p63 and p73 in retinoblastoma: a clinicopathological correlation study

The aim of the study was to explore the expression profile of p63, p73 and their delta isoforms in the retinoblastoma tumor samples and to correlate with clinicopathological parameters. Immunohistochemistry was performed for p63, delta p63, p73 and delta p73 on the archival paraffin sections of retinoblastoma and correlated with clinicopathological features. Western blotting was performed to confirm immunoreactivity results. p63 immunoreactivity was observed in 59% (29/49) of the RB specimens. p63 was expressed in 60% (20/33) low risk tumors and in 56% (9/16) of high risk tumors. p73 was expressed in 77% (38/49) RB specimens. Among the 33 low risk tumors, p73 was expressed in 69% (23/33) tumors and among the 26 high risk tumors, p73 was expressed in 93% (15/16) tumors. High risk tumors showed significantly increased expression of p73 compared to tumors with low risk (P < 0.05). This is the first correlation between p63/p73 expression and histopathology in human RB tumors. Our study showed increased expression of p73 in high risk tumors (P < 0.05) compared to low risk tumors. Further functional studies are required to explore the role of p63, p73 and their respective isoforms in retinoblastoma.     

基因治疗视网膜母细胞瘤的研究进展

基因治疗视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)是近年来新型的治疗方法。我们从自杀基因、抑癌基因、抗血管生成基因这三方面对RB的基因治疗现状、相关进展及存在问题作一综述。     

Rb基因诱导视网膜母细胞瘤移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的观察外源性Ｒｂ基因对视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞凋亡的影响。方法建立裸鼠眼玻璃体腔ＲＢ移植瘤模型及构建Ｒｂ基因的逆转录病毒表达载体Ｐｂａｂｅ－Ｒｂ，用脂质体Ｄｏｓｐｅｒ介导法将Ｒｂ基因导入裸鼠ＲＢ移植瘤，采用流式细胞术（ＦＣＭ），光镜、电镜及ＴＵＮＥＬ细胞凋亡原位末端标记法进行ＲＢ细胞凋亡的检测。结果Ｒｂ基因在ＲＢ移植瘤内表达至少持续７天。ＦＣＭ检测发现在Ｒｂ基因转染后第４天，各实验组治疗眼ＲＢ中均可检测到凋亡细胞峰，凋亡细胞百分率高于对照眼；第２０天，各实验组治疗眼细胞凋亡百分率与对照眼比无差异（Ｐ＞０．０５）。透射电镜下可见到典型的早期凋亡细胞及晚期凋亡小体形成。ＴＵＮＥＬ方法可在荧光显微镜下见到发黄绿色荧光的凋亡细胞，光镜下可见到紫红色的被标记的凋亡细胞。结论Ｒｂ基因可诱导ＲＢ移植瘤细胞凋亡，这可能是Ｒｂ基因体内抗癌的又一作用机制。     

Apoptin基因诱导视网膜母细胞瘤凋亡的研究

目的观察Apoptin基因对人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44的促凋亡作用,并探讨其可能的机制。方法用脂质体将Apoptin基因导入HXO-RB44细胞,通过RT-PCR法检测ApoptinmRNA的表达,同时用SABC免疫组织化学法分析Apoptin和p53的表达。采用细胞计数法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果转入Apoptin基因后,HXO-RB44细胞的生长明显受抑制（P〈0.05）。细胞周期分析可见凋亡峰,凋亡率为38.5%。细胞中可见Apoptin阳性表达（P〈0.05）,p53表达差异无统计学意义（P〉0.05）。凋亡细胞在荧光显微镜下形成凋亡小体。结论转入Apoptin基因可显著促进HXO-RB44细胞的凋亡,Apoptin诱导的凋亡不依赖功能性p53的生成。     

The genomic landscape of retinoblastoma: a review

Retinoblastoma is a paediatric ocular tumour that continues to reveal much about the genetic basis of cancer development. Study of genomic aberrations in retinoblastoma tumours has exposed important mechanisms of cancer development and identified oncogenes and tumour suppressors that offer potential points of therapeutic intervention. The recent development of next‐generation genomic technologies has allowed further refinement of the genomic landscape of retinoblastoma at high resolution. In a relatively short period of time, a wealth of genetic and epigenetic data has emerged on a small number of tumour samples. These data highlight the inherent molecular complexity of this cancer despite the fact that most retinoblastomas are initiated by the inactivation of a single tumour suppressor gene. This review outlines the current understanding of the genomic, genetic and epigenetic changes in retinoblastoma, highlighting recent genome‐wide analyses that have identified exciting candidate genes worthy of further validation as potential prognostic and therapeutic targets.     

视网膜母细胞瘤组织survivin、p16和Bcl-2表达意义

目的：研究视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,RB）组织survivin、p16和Bcl-2表达.方法：RB标本采用免疫组织化学方法观察survivin、p16和Bcl-2表达水平.结果：RB标本中survivin、p16和Bcl-2阳性检出率分别是：36例RB组织中19例survivin蛋白呈阳性表达,阳性率为53%（19/36）,对照组6例组织未见survivin蛋白阳性表达,两组比较差异有显著性的意义,分化型为50%（10/20）,未分化型为56%（9/16）,两型之间差异无显著性（P＞0.05）.36例RB组织P16蛋白阳性表达率为47%（17/36）,分化型为55%（11/20）,未分化型为38%（6/16）,两型比较差异有显著性（P＜0.05）.36例RB组织中BCL-2蛋白表达阳性率为50%（18/36）,分化型中为35%（7/20）,未分化型为69%（11/16）,两型比较差异有显著性（P＜0.05）.结论：Survivin、p16和Bcl-2在RB的发生和发展过程中起重要作用.     

Rb1基因第16内含子内21个碱基缺失1例

目地研究双眼视网膜母细胞瘤患者Rb1基因杂合性突变的分子生物学特性。方法应用PCR—SSCP直接测序技术检测双眼视网膜母细胞瘤患者白细胞DNA中Rb1基因杂合性突变。结果50例证实有Rb1基因杂合性突变的病例中有1例发生于第16内含子中可以用3种定位方法解释、具有相同序列的21个碱基缺失。结论这种极为少见的Rb1基因突变方式可能是由于破坏了正常拼接位点的结构而激活了“隐蔽拼接位点”，导致异常的Rb1基因mRNA产生或由此影响整个拼接过程。     

国人视网膜母细胞瘤患者RB1基因突变的特性

目的:检测国人RB患者体细胞中RB1基因突变,分析我国RB1基因突变的特性,探讨RB1基因突变的分子生物学机制。方法:应用PCR—SSCP技术筛查28例RB患者及亲属的白细胞基因组DNA,测序分析确定突变。结果:共确定7例RB1基因生殖细胞性突变。结论:本组RB1基因生殖细胞性突变的方式为点突变和小缺失,这些突变改变了RB1基因的遗传信息,致使异常的RB1基因蛋白产生,导致视网膜母细胞瘤的发生。中国RB1基因突变方式主要是以微小突变为主,但复杂突变的比例相对较高。     

人眼视网膜母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的 观察人视网膜母细胞（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ,ＲＢ）标本中细胞凋亡,探讨细胞凋亡在ＲＢ发生发展及消退中的作用。方法 用ＴＵＮＥＬ方法光镜和电镜观察人ＲＢ摘除眼球标本中是否存在细胞凋亡。结果 １５例人ＲＢ分化型和未分化型标本中有９例发现少量凋亡细胞,自发退化型ＲＢ中未发现凋亡细胞。每例中均见成片出现的坏死细胞。结论 视网膜母细胞瘤细胞死亡通过坏死与凋亡２种途径。细胞凋亡是ＲＢ自发退化的机制