蛆虫治疗糖尿病足溃疡的临床与实验研究

目的 研究蛆虫对糖尿病足部溃疡创面的清创和抗菌作用.方法 以糖尿病足溃疡创面上分离培养出的金黄色葡萄球菌为指示菌,提取丝光绿蝇幼虫血淋巴分泌物,采用平板法做抑菌实验,头孢哌酮盐水溶液做对照,记录对细菌的抑制效果.对临床上6例糖尿病足部溃疡患者行蛆虫清创治疗,观察创面情况.结果 蝇幼虫分泌物对金黄色葡萄球菌,有较强的抗菌活性.6例糖尿病足部溃疡病例平均治疗12天,创面坏死组织均清除干净,新鲜的肉芽组织生长,创面培养无细菌生长.结论 蛆虫对糖尿病足部溃疡创面,有较强的清创和抗菌作用.     

蛆分泌物对大鼠溃疡创面的愈合作用研究

目的 探讨蛆分泌物对大鼠糖尿病模型溃疡创面的愈合作用.方法 制备糖尿病大鼠模型,在大鼠背部制造创面,实验组创面涂以丝光绿蝇蛆虫的分泌物,对照组不予处理.于伤后不同时间用透明膜法测定创面面积并进行病理检查.结果 经过蛆分泌物处理后的创面在伤后4周的愈合率达到100%,同期糖尿病大鼠创面不断扩大,不愈合并伴细菌感染.病理检查蛆分泌物组表皮细胞再生,有大量的再生毛细血管及纤维母细胞.结论 蛆分泌物有明显的促进创面愈合的作用.     

蛆虫治疗糖尿病足溃疡的临床与实验研究

目的研究蛆虫对糖尿病足部溃疡创面的清创和抗菌作用.方法以糖尿病足溃疡创面上分离培养出的金黄色葡萄球菌为指示菌,提取丝光绿蝇幼虫血淋巴分泌物,采用平板法做抑菌实验,头孢哌酮盐水溶液做对照,记录对细菌的抑制效果.对临床上6例糖尿病足部溃疡患者行蛆虫清创治疗,观察创面情况.结果蝇幼虫分泌物对金黄色葡萄球菌,有较强的抗菌活性.6例糖尿病足部溃疡病例平均治疗12天,创面坏死组织均清除干净,新鲜的肉芽组织生长,创面培养无细菌生长.结论蛆虫对糖尿病足部溃疡创面,有较强的清创和抗菌作用.     

康复新液促进肛周脓肿术后创面愈合45例

目的:探讨康复新液促进肛周脓肿术后创面愈合的疗效。方法:将90例低位肛周脓肿术后患者按照数字随机表法分为治疗组和对照组,均采用肛周脓肿一次性根治术,术后第2 d起,治疗组在换药后应用康复新液纱条置于创面,对照组应用生理盐水浸透的无菌纱布敷贴于创面,比较两组创面愈合时间,并比较术后7 d、14 d、21 d创面肉芽评分、创面缩小率、创面疼痛评分,术后7 d、14 d两组肉芽组织成纤维细胞数;术后21 d比较总有效率。结果:治疗组创面愈合时间少于对照组(19.4±3.3)d vs(25.8±3.1)d,术后14 d、21 d治疗组创面肉芽评分分别为(1.8±0.5)分和(0.8±0.3)分,分别低于对照组的(2.2±0.5)和(1.1±0.3)分;术后14 d、21 d治疗组疼痛评分分别为(0.5±0.2)分和(0.2±0.2)分,分别低于对照组的(0.8±0.3)分和(0.4±0.3)分,术后14 d、21 d治疗组创面缩小率分别为(62.2±7.9)%和(87.5±9.1)%,分别高于对照组的(56.6±8.1)%和(78.4±8.6)%;术后7 d、14 d治疗组肉芽组织成纤维细胞数分别为(48.5±9.1)和(57.4±7.8),分别高于对照组的(39.6±7.7)和(51.9±8.4),术后21 d总有效率高于对照组(97.8%vs 84.45%),差异均有统计学意义(P0.05)。结论:康复新液可促进肛周脓肿术后腐物的脱落和肉芽组织的生成,减轻疼痛,加快创面愈合。     

几丁糖/海藻酸敷料对海水浸泡创面作用的实验研究

目的 观察几丁糖(chitosan,CTS)/海藻酸(alginate,ALG)敷料对大鼠海水浸泡创面的作用.方法 取健康SD大鼠25只,体重250～300 g,于脊柱两侧切取直径1.8 cm圆形创面,制作皮肤创面模型,左侧为实验组,右侧为对照组.将创面浸泡于预先配置的人工海水1 h后,实验组采用CTS/ALG敷料外敷创面,对照组用无菌纱布外敷.行大体观察并记录创面愈合时间;术后3、5、7、10、12 d切取包括创面在内的2 cm×2 cm皮肤标本,行HE染色和免疫组织化学Envision法染色,观察创面组织学改变及EGF受体(EGF receptor,EGFR)、bFGF表达情况.结果 实验组创面炎性反应轻,结痂收缩较快;对照组创面结痂收缩较慢.实验组创面完全愈合时间为(11.68±0.57)d,对照组为(12.51±0.54)d,比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组自术后3 d开始出现肉芽组织增生及细胞浸润,胶原组织增生,创面皱缩及上皮化,至术后10 d胶原组织已排列整齐,上皮化过程基本完成,可见皮肤附件出现,术后12 d完全愈合;对照组相应时间点细胞浸润出现晚,且出现肉芽组织伴溃疡,上皮化过程较晚.免疫组织化学观察示实验组术后3、5 dbFGF在血管内皮细胞和间质纤维母细胞内高表达,EGFR在血管内皮细胞内高表达,术后7、10、12 d呈低表达;对照组术后相应时间点bFGF及EGFR呈低表达和无表达.结论 CTS/ALG对海水浸泡创面具有促进愈合作用,但其机制仍有待进一步深入研究.     

复合缓释微球的胶原膜促创面愈合的实验研究

目的观察复合缓释微球的胶原膜对猪皮肤创面损伤的促愈合作用.方法将20μl的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)溶液滴加在2 mg的冻干微球上,复合于胶原膜内.取2.5～3月龄健康约克猪6只,随机分为3组,在每只猪背部制作6个4 cm×4 cm全层皮肤缺损创面模型.将包裹bFGF的明胶缓释微球与胶原基多孔膜复合制备,作为实验组移植创面,对照组及空白组分别给予复合bFGF的胶原膜和空白胶原膜,术后每日观察创面愈合情况,14、21、28和35 d图像分析计算创面愈合率,3、7、14、21、28和35 d行组织学染色,观察各组材料对猪皮肤全层缺损创面的影响. 结果制备的复合微球的胶原膜内明胶微球大小均一,平均粒径为12.36±3.56 μm,孔径为80～150μm.实验组、对照组及空白组创面愈合时间为27.30±1.14、29.18±1.69、31.12±1.36 d,3组组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);实验组创面愈合率在术后14、21、28和35 d均高于对照组及空白组,差异有统计学意义(P＜0.05);术后各时间点组织学观察实验组愈合创面的上皮化程度均优于对照组及空白组.结论复合bFGF缓释微球的胶原膜能有效促进猪皮肤全层缺损创面的愈合,可作为具有应用前景的覆盖材料进一步研究.     

猪内脏膜生物敷料促进兔皮肤创面愈合的实验研究

目的 观察一种用猪内脏膜制成的新型生物敷料对兔皮肤创面愈合的影响.方法 制做兔背全层创伤模型,分成实验组和对照组,创面分别外用新型生物敷料及无菌凡士林敷料.伤后3、5、7、10、14、17、21 d观察两组创面愈合情况和创面愈合率;并分别取创面组织进行病理组织学、羟脯氨酸含量测定及成纤维细胞周期分析等检查,评估创面的修复质量,进行观察比较.两组数据的比较采用t检验,两组间组织病理结构评价采用秩和检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 实验组术后7、10、14、17、21 d创面愈合率分别比对照组高,差异具有统计学意义(P＜0.05);术后第14天进行两组间组织病理等级评价,发现实验组在组织结构、表皮层、基底细胞层及真皮层评价中等级占+++的百分比分别比对照组高.两组之间对比采用秩和检验,差异具有统计学意义(P＜0.05);实验组与对照组平均愈合时间分别为(12.36±2.03)d、(16.82±2.12)d,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组在3、5、7、10、14、17及21 d时,组织羟脯氨酸的含量分别比对照组高,差异有统计学意义(P＜0.05);创面组织成纤维细胞细胞周期分析结果显示:实验组每时相S期细胞百分比均高于对照组.结论 用猪内脏膜制成的新型生物敷料可加速皮肤创面上皮化过程,使伤口愈合时间提前.可提高皮肤创面愈合质量,促进胶原生成的作用.     

生肌长皮膏促进下肢慢性溃疡愈合的病例对照研究

目的:探讨中药生肌长皮膏促进下肢慢性溃疡愈合的临床疗效。方法:2010年3月至2011年9月外科门诊和中医科收治的64例患有下肢慢性溃疡病人随机分为实验组和对照组,每组32例。实验组溃疡创面应用中药生肌长皮膏,对照组采用普通换药治疗,均为每天1次。两组病人于治疗后第3、7、14和21 d观察并计算创面愈合率,并分别取创面肉芽组织标本行HE染色、Masson染色和免疫组织化学检测CD34,观察组织结构变化、总胶原的分布和微血管密度(MVD)。结果:与对照组相比,实验组在第14、21 d创面愈合率明显较高;胶原着色深、面积广[(68.7±7.7)比(48.9±9.3),P<0.05)。结论:中药生肌长皮膏可促进创面肉芽组织生长、胶原合成和血管新生,从而促进溃疡愈合,有益于治疗下肢慢性溃疡。     

下肢静脉性溃疡大鼠模型建立与评价

目的:建立下肢静脉性溃疡大鼠模型并进行评价。方法:在大鼠建立下肢深静脉血栓模型基础上,采用局部皮肤缺损的方法建立溃疡模型。将20只大鼠随机分为对照组、模型组,观察模型大鼠的外部体征和行为学表现,创面组织病理变化,以及血清中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达。结果:对照组7 d溃疡面积为(0.83±0.04)cm~2、14 d为(0.49±0.03)cm~2,7 d溃疡愈合率为(13.1±1.8)%、14 d为(47.7±5.5)%。模型组7 d溃疡面积为(1.48±0.09)cm~2、14 d为(1.23±0.07)cm~2,7 d溃疡愈合率为(16.02±5.55)%、14 d为(30.43±4.06)%。模型组在溃疡面积上明显大于对照组;模型组在创面愈合率上明显低于对照组(P0.05)。组织病理学提示,模型组有大量炎细胞增生,纤维结缔组织增生明显。对照组可见少量炎性细胞浸润及坏死中性粒细胞。大鼠在成模后,一般状态良好,活动自如,体质量减轻,创面溃疡部分有愈合,面积较之前缩小。模型组成功率为80%,对照组成功率为100%。在大鼠7 d、14 d血流变及血浆D-二聚体的化学检测对比中得出结果,模型组各项数值均高于对照组;在模型组大鼠7 d、14 d血清IL-1β、IL-6和TNF-α浓度均高于对照组。结论:下肢静脉性溃疡大鼠模型建立成功。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠烫伤创面中基质金属蛋白酶及其抑制剂的影响

目的　观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶 (MMP) 2、MMP 7与金属蛋白酶组织抑制因子 2 (TIMP 2 )的变化以及创面外用碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对其的影响。　方法　制作 30 %TBSA深Ⅱ度烫伤大鼠模型 ,分为单纯烫伤组和bFGF治疗组。于伤后 3、6h和 1、3、7、14d取创面皮肤标本 ,检测再上皮化率及胶原含量 ,并采用免疫组织化学染色法检测创面组织真皮内成纤维细胞MMP 2、MMP 7和TIMP 2的表达变化。另取 6只正常大鼠作为假烫组 ,分别检测上述各项指标。　结果　 (1)伤后 3～ 14d ,bFGF治疗组再上皮化率高于单纯烫伤组。 (2 )伤后 3h～ 3d ,bFGF治疗组和单纯烫伤组胶原含量持续下降 ,7～ 14d开始回升 ,但仍低于假烫组 (P<0 .0 5 )。 (3)伤后 1d ,单纯烫伤组MMP 2、MMP 7和TIMP 2表达增多 ,7d时达到高峰 ,持续到 14d。(4 )伤后 3～ 6h,bFGF治疗组MMP 2、MMP 7的表达与单纯烫伤组相似 ;伤后 1～ 14d ,3者的阳性表达强于单纯烫伤组。　结论　烫伤大鼠创面中细胞外基质的活动会影响皮肤的胶原沉积 ;MMP 2、MMP 7、TIMP 2的表达变化是组织修复的重要步骤 ,与bFGF加速创面愈合的过程密切相关。     

碱性成纤维细胞生长因子在肛周创面愈合中的疗效观察

目的　观察碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对肛周疾病术后创面愈合的影响。方法　 1996年 4月～2 0 0 0年 12月 ,因肛周外伤、痔疮及肛瘘手术后 10 9例 ,其中 6 8例局部应用 b FGF,4 1例常规换药法治疗的肛周术后创面的愈合、全身及局部反应情况进行观察。结果　应用 b FGF治疗组肛周术后创面的愈合时间为 (17.0 0± 1.5 4 )天 ,局部疼痛轻 ,3周内愈合率 97.1% ;常规治疗组肛周术后创面的愈合时间为 (2 0 .0 0± 1.16 )天 ,换药时局部剧痛 ,3周内愈合率87.8% ,两组的愈合时间与愈合率比较均有统计学意义 (P<0 .0 1) ,两组均未见肝、肾功能异常及过敏反应。结论　局部外用 b FGF可加速创面的愈合过程 ,患者痛苦少 ,应用安全     

胎儿和成人皮肤及其创面愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子的表达及意义

目的　探讨胎儿和成人皮肤及其创面愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)的表达及其意义。方法　将孕龄 2 0～ 2 4周胎儿皮肤移植至 BAL B/ C裸鼠背部皮下 ,皮片成活后制造创面 ,建立胎儿无瘢痕愈合动物模型 ,定期获取相应标本。对临床所取正常成人皮肤及创面愈合皮肤标本 ,采用免疫组织化学染色方法 ,观察 b FGF的表达情况。　结果　正常胎儿皮肤及创伤后胎儿皮肤中均未见明显的 b FGF阳性表达。正常成人皮肤中血管周围可见阳性表达 ;创伤后成人皮肤也可见阳性表达 ,尤其成纤维细胞和血管内皮细胞创伤后表达明显增强。高倍镜视野随机观察计数b FGF阳性表达细胞数 ,正常胎儿皮肤为 2 .1± 0 .1,创伤后 12小时 ,1、3天和 1周胎儿皮肤分别为 2 .2± 0 .1、2 .1± 0 .3、2 .1± 0 .3和 2 .0± 0 .1;正常成人皮肤为 2 3.2± 4 .2 ,创伤后成人皮肤为 4 0 .5± 3.6 ,胎儿正常皮肤和创伤皮肤 b FGF表达与正常成人皮肤和创伤后皮肤 b FGF表达比较 ,差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。　结论　 b FGF的阴性表达可能是胎儿皮肤无瘢痕愈合的重要原因之一。     

肝素对大鼠Ⅱ度烧伤创面愈合的影响

目的　研究肝素对大鼠 度烧伤创面愈合的影响。方法　 2 0只 SD大鼠随机分为两组 ,制成2 0 %面积深 度烧伤 ,实验组采用肝素 10 0 U /kg加生理盐水至 1ml皮下注射 ;对照组采用生理盐水 1ml皮下注射 ,每天一次直至创面完全愈合。从大体观察创面愈合天数及全身有无出血现象 ,光镜观察肉芽组织及胶原纤维生长情况 ,电镜观察成纤维细胞生长情况。结果　大鼠全部成活。实验组创面愈合时间为 (2 2 .8± 1.87)天 ,对照组为(2 6 .2± 2 .82 )天 ,实验组创面愈合所需时间明显少于对照组 (P<0 .0 0 5 )。光镜观察发现实验组肉芽组织及胶原纤维生长明显优于对照组。电镜观察发现实验组成纤维细胞生长优于对照组。结论　肝素皮下注射能加速创面愈合。     

表皮干细胞在糖尿病创面愈合过程中的动态变化

目的 观察糖尿病（diabetes mellitus，DM）大鼠创伤后不同时期表皮厚度、表皮干细胞（epidermalste mcells，ESCs）数量变化和分布特征及创面愈合率等动态变化，探讨ESCs与DM皮肤创面难愈之间的关系。方法 48只Wistar大鼠，雄性，体重180～200g。随机分为DM组和正常对照组，各24只。DM组大鼠制备DM大鼠慢性创面愈合模型。两组大鼠同时用特制打孔器在大鼠背部脊柱两侧约1．5cm制作直径1．8cm、面积2．54cm。的全层皮肤缺损（共计96个创面），分别在致伤后第3、7、14和21天拍摄创面，计算创面愈合率；取创缘及肉芽组织，行HE染色及角蛋白19（keratin19，K19）和β1整合素抗体免疫组织化学染色，显微图像分析系统测量表皮厚度、阳性部分面积及灰度值。结果 致伤后第3、7、14和21天，正常对照组大鼠创面愈合率分别为24．48％±3．37％、50．46％±1．26％、92．82％±2．12％和99．41％±0．66％，而DM组分别为2．43％±1．02％、40．59％±1．65％、80．77％±3．57％和85．40％±0．94％，两组同时期比较差异有统计学意义（P〈0．01）。致伤后第3、7、14和21天，正常对照组表皮厚度分别为26．43±3．21、33．29±3．52、31．53±3．35和26．01±3．19p．m，DM组表皮厚度分别为23．58±2．33、31．02±3．38、33．72±5．49和21．80±4．02p．m，致伤后第3、21天，二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。致伤后第3、7、14和21天，正常对照组K19染色的平均阳性单位（positiveunit，PU）值分别为91．68％、93．14％、72．27％和70．31％，而DM组分别为40．29％、40．79％、29．94％和10．37％；正常对照组β1整合素染色的平均PU值分别为49．60％、91．16％、77．13％和57．17％，DM组分别为38．94％、24．16％、61．36％和38．83％，与正常对照组同时期比较，DM组K19和β1整合素染色的平均PU值都降低，且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 ESCs数量少和活性低可能是DM创面难愈的重要机制之一。     

丹银海绵对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响

目的:探讨丹银海绵对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为8组。除空白对照组外,其余7组大鼠,通过手术在其背部形成一10mm×10mm相同大小,深达肌层的溃疡,分别给予抗生素、生长因子凝胶、纳米银、丹黄散,以及不同浓度的丹银海绵处理溃疡面。给药28d后处死大鼠,取溃疡部位新生肉芽组织,HE染色观察组织形态的变化;WesternBlot检测大鼠创面组织中AGEs、hs-CRP、IL-1、IL-6、bFGF、PDGF、VEGF表达水平。结果:病理切片观察显示适宜浓度的丹银海绵可以促进血管新生并伴扩张,同时生成大量新生成纤维细胞。WesternBlot检测显示高浓度的丹银海绵可以显著上调创面组织中生长因子表达(P<0.05),降低AGEs水平及炎症因子表达(P<0.05)。结论:适宜浓度的丹银海绵对于糖尿病大鼠皮肤溃疡的愈合有明显的促进作用,提高治疗效果。     

偎脓长肉法对大鼠慢性溃疡组织病理学及肉芽组织 VEGF、Notch1、TGF-β1表达的影响

目的:观察偎脓长肉法对大鼠皮肤慢性溃疡愈合过程中肉芽组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)及Notch1表达的影响。方法:将24只大鼠随机分为正常组、模型组、对照组、治疗组共4组,每组6只。正常组无创面,其他3组大鼠采用“激素干预-皮肤缺损-细菌感染”复合因素叠加法制备慢性皮肤溃疡模型,模型组给予生理盐水换药,对照组给予凡士林纱条外敷,治疗组给予生肌象皮膏外敷,每日换药1次,共14 d。于治疗3、7、14 d,分别取各组大鼠溃疡创面肉芽组织,行HE染色观察组织病理学改变,并采用免疫组化方法检测VEGF、TGF-β1、Notch1等的表达情况。结果:治疗组应用偎脓长肉法治疗14 d后创面为(0.012±0.004)cm2,基本愈合,与模型组、对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在创面修复早、中期(3~7 d),与模型组、对照组比较,治疗组创面组织TGF-β1、VEGF表达水平升高,Notch1表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);疮面修复晚期(14 d),各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:偎脓长肉法可能通过调节肉芽组织VEGF、Notch1、TGF-β1的表达,起到促进肉芽组织生长、促进疮面修复的作用。