3－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度：ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，碘乙酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／Ｌ。最适ｐＨ在７．８～８．０，Ｋｍ为７．２×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ。批内ＣＶ：酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为５．７％和１．４％；批间ＣＶ：酶活性在１１．８９Ｕ／Ｌ和１００．０８Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为６．０％和３．３％，酶活性线性范围至少可达１８０Ｕ／Ｌ。健康人６０名，ＡＬＤ活性为４．５３±１．１７（ｘ±ｓ）Ｕ／Ｌ，男女两组均值无显著性差异。本文对ＴＥＡ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）三种缓冲液用于ＡＬＤ活性测定效果进行了评价，结果表明在ＴＥＡ缓冲液中所测ＡＬＤ活性最高；ＴＥＡ和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ两种缓冲液的浓度在２５～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内对ＡＬＤ活性无影响，Ｔｒｉｓ缓冲液在５０ｍｍｏｌ／Ｌ时测得酶活性较高，缓冲液浓度过高或过低，酶活性均有所下降     

3—磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度；ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，磷惭酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／《Ｌ。最适ＰＨ在７．８－８．０，Ｋｍ为７．２×１０＾－３ｍｍｏｌ／Ｌ批内ＣＶ；酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０９６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别     

3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

建立血清醛缩酶活性的３－磷酸甘油醛脱氢酶偶联剂测定法。用底物１，６－二磷酸果糖妄动酶促反应，连续监测ＮＡＤＨ生成速率。反应条件：温度３７℃，ｐＨ８．３，各反应物的终末浓度：三乙醇胺５０ｍｍｏｌ／Ｌ，１，６－二磷酸果糖４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，砷酸钠１０ｍｍｏｌ／Ｌ，氧化型辅酶１６ｍｍｏｌ／Ｌ，３－磷酸甘油醛脱氢酶２５００Ｕ／Ｌ，磷酸丙糖异构酶５００Ｕ／Ｌ，乳酸脱氢酶１５００Ｕ／Ｌ，血清与试剂容积比０．４     

选择性抑制法测定淀粉酶同工酶

本文报道用选择性抑制法结合酶偶联法测定淀粉酶（Ａｍ）同工酶。通过数学推导和实验，建立了结果计算公式和标准曲线。方法线性范围０－１１００Ｕ／Ｌ。批内，批间ＣＶ＜９．９％。参考范围：血清Ｐ－Ａｍ７－５５Ｕ／Ｌ，Ｓ－Ａｍ１．８－６８．３Ｕ／Ｌ；尿Ｐ－Ａｍ２．５－２２．６Ｕ／ｍｍｏｌＣｒ，Ｓ－Ａｍ２．２－３１．３Ｕ／ｍｍｏｌＣｒ。本法制备的抑制剂溶液稳定期长，保存，使用方便。     

聚乙二醇修饰酶法直接测定高密度脂蛋白胆固醇的评价

本文用德国Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ公司生产的高密度脂蛋白胆固醇试剂盒在Ｄｌｙｍｐｕｓ ＡＵ－５６０型生化仪上建立了直接法测定血清ＨＬＤ－Ｃ的程序，并对此方法作了初步评价。ＨＤＬ－Ｃ浓度在２．６ｍｍｏｌ／Ｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９；两组低，中，高浓度的标本批内ＣＶ２．１％－３．３％，批间ＣＶ２．２％－３．６％，平均回收率为９７．５％，浓度为６．２ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯，１０５．６μ     

2—（8′—羟基喹啉—5′—磺酸—7′—偶氮）—变色酸测定血清镁

目的 建立简便，灵敏，试剂稳定性好的２－（８′－羟基喹啉－５′－磺酸－７′－偶氮）－变色酸（８Ｑ５ＳＡＣ）血清镁测定法，方法 用国内合成的８Ｑ５ＳＡＣ作显色剂，ＥＧＴＡ掩蔽钙，在甘氨酸－ＮａＯＨ缓冲体系中以分光光度法测定血清镁。结果 该法线性０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，平均回收率９８．１％，变异系数１．９２％～２．９８％，与Ｃａｌｍａｇｉｔｅ法对照，ｒ＝０．９９６，Ｐ〉０．２；与ＭＴＢ法对照，ｒ＝０．９８     

2-(8′-羟基喹啉-5′-磺酸-7′-偶氮)-变色酸测定血清镁

目的建立简便、灵敏、试剂稳定性好的２－（８′－羟基喹啉－５′－磺酸－７′－偶氮）－变色酸（８Ｑ５ＳＡＣ）血清镁测定法。方法用国内合成的８Ｑ５ＳＡＣ作显色剂，ＥＧＴＡ掩蔽钙，在甘氨酸－ＮａＯＨ缓冲体系中以分光光度法测定血清镁。结果该法线性０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，平均回收率９８．１％，变异系数１．９２％～２．９８％。与Ｃａｌｍａｇｉｔｅ法对照，ｒ＝０．９９６，Ｐ＞０．２；与ＭＴＢ法对照，ｒ＝０．９８３，Ｐ＞０．２；测试灵敏度分别是上述方法的２．５倍和４．３倍。结论该法简便、灵敏、试剂稳定性明显优于ＭＴＢ法和Ｃａｌ－ｍａｇｉｔｅ法，适于血清镁的常规手工分析和自动分析。     

连续监测法测定血清山梨醇脱氢酶

以ＮＡＤ＋、山梨醇为底物，３７℃ｐＨ１０的甘氨酸／氢氧化钠为缓冲体系，建立血清山梨醇脱氢酶（ＳＤＨ）的连续监测法。ＮＡＤ＋、山梨醇和Ｚｎ２＋的最终浓度分别为０．４７、１９和１．９ｍｍｏｌ／Ｌ，ＫＮＡＤ＋、Ｋ山梨醇分别为０．０９和１．２ｍｍｏｌ／Ｌ。在此条件下，确定ＳＤＨ线性范围为０～１８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ为３．９％，批间ＣＶ为５．２％，６０例健康成人血清ＳＤＨ正常参考值为０～３．１Ｕ／Ｌ。初步临床观察表明，急性肝损伤时该酶明显升高，肝外梗阻、心肌梗塞等非肝病患者血清ＳＤＨ一般不增高。     

健康老人血液纤溶能力测定值报告

为了解我国老年人血液纤溶能力状态，对９２位健康老人（７２．０±８．６岁）血浆组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）及其快速抑制剂（ＰＡＩ～１）和血浆纤溶酶原（ＰＬＧ）进行了测定并据此确定了参考值范围。ｔＰＡ：６８０±１６０ＩＵ／Ｌ（４２０～９４０ＩＵ／Ｌ）；ＰＡＩ－１：１１．９６±１．５６ｆＵ／Ｌ（８．９１～１５．０１ＦＵ／Ｌ）；ＰＬＧ：１０７．２％±１６．９％（７４．１％～１４０．３％）。上述结果与年轻组相比ｔＰＡ与ＰＬＧ活性降低而ＰＡＩ－１活性增高（Ｐ＜０．００１），说明老年人纤溶系统功能有明显减退。     

尿液丙氨酸氨基肽酶连续监测法

建立了用丙氨酸对硝基苯胺（Ａｌａ－ｐＮＡ）为底物测定尿液丙氨酸氢基肽酶（ＡＡＰ）的连续监测法。此酶的最适ｐＨ８．０～８．３（２５℃），Ｋｍ值０．６０ｍｍｏｌ／Ｌ，Ａｌａ－ｐＮＡ的最终浓度６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，批内，批间ＣＶ分别为４．２％，线性范围高达４００Ｕ／Ｌ。健康成人（ｎ＝７４）尿ＡＡＰ活性内１．９１～１４．４Ｕ／ｇ．ｃｒ。同时还对其重复性、尿中共存物质的干扰、尿ＡＡＰ的稳定性进行了初步观察。此     

血清1，5脱水葡萄糖醇全酶的测定

目的　建立一种测定血中１ ,５脱水葡萄糖醇（１ ,５ＡＧ） 的方法,辅助诊断糖尿病。方法　采用葡萄糖激酶去除血清样品内源葡萄糖干扰,以吡喃糖氧化酶（ＰＲＯＤ） 氧化血清１ ,５ＡＧ,生成１ ,５脱水果糖和Ｈ２Ｏ２ ,后者用Ｔｒｉｎｄｅｒ 反应进行比色测定。结果　该方法ＰＲＯＤ 用量为８０ ｋＵ／Ｌ,反应（ 终点） 时间１０ 分钟,最低检测限为１－９８ μｍｏｌ／Ｌ,１ ,５ＡＧ 在６３３－３ μｍｏｌ／Ｌ 以内线性良好。高（３７８－６６ μｍｏｌ／Ｌ） 、中（２１６－４６ μｍｏｌ／Ｌ） 、低（１９－４２ μｍｏｌ／Ｌ） 浓度批内变异系数（ ＣＶ） 分别为０－６２ ％ 、１－４１ ％ 和１－６ ％ ,批间ＣＶ为１－０４ ％ 、１－８３ ％ 和３－５１ ％ ,平均回收率为９９－８ ％ 。测定了４８ 例糖尿病患者血清１ ,５ＡＧ 含量（珋ｘ±ｓ） 为（３０－７ ±１６－４） μｍｏｌ／Ｌ,显著低于健康对照组［（１７０－６ ±４８－２） μｍｏｌ／Ｌ］ ,Ｐ＜ ０－００１ 。结论　该法简便快速、灵敏、准确和稳定、特异,可用于糖尿病的及时诊断与监控,适合于各类实验室常规应用。     

胃蛋白酶原I,Ⅱ的分离纯化及初步临床应用

用ＤＥＡＥ－５２阴离子交换层析,凝胶过滤高压液相层析（ＨＰＬＣ）,Ｑ－２阴离子交换中压层析从人胃粘膜中提取了胃蛋白酶原Ｉ,Ⅱ,比活分别为１２．５Ｕ／ｍｇ和１９．１Ｕ／ｍｇ得率分别为３１．３５和１０．０％,提取的胃蛋白酶原Ｉ,Ⅱ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分别呈单一区带,分子量分别为２４ｋＤ和３７ｋＤ。潜在的蛋白水解活性的最适ｐＨ都为１．８ＰＧＩ经碱性缓冲液处理后,其水解活性明显变化。而ＰＧⅡ对碱性缓冲液不短     

连续监测法测定血清中异柠檬酸脱氢酶

采用连续监测法测定以ＮＡＤＰ为辅酶的异柠檬酸脱氢酶（ＩＣＤ），并对酶促反应条件进行了研究。以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ为缓冲体系，酶促反应最适ｐＨ为７．５，Ｍｎ＾２＋为２ｍｍｏｌ／Ｌ，在最佳条件下测定ＩＣＤ的线性范围为０￣８５Ｕ／Ｌ，批内变异系数２．０６％￣５．８５％，批间变异系数为３．７１％￣８．７２％，１００例健康人血清参考范围为２．０￣１１．２Ｕ／Ｌ，初步临床应用表明各类肝炎及肝癌均显著升高，ＩＣＤ／     

3，5－二氯邻羟基苯磺酸钠的合成及其临床应用

目的制备３，５－二氯邻羟基苯磺酸钠（ＤＣＨＢＳ）以取代Ｔｒｉｎｄｅｒ′ｓ反应中所用的苯酚及四氯酚。方法２，４－二氯苯酚和浓硫酸在１００℃进行磺化反应，制得ＤＣＨＢＳ；将其和过氧化物酶、尿酸酶、４－氨基氨替比林等组成尿酸检测试液，进行灵敏度、精确度、回收率、干扰试验、稳定性考查，并与苯酚和四氯酚法及与进口试剂进行对比，作相关试验。结果ＤＣＨＢＳ使用浓度为６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，检测波长为５１０ｎｍ，尿酸浓度在２４０ｍｇ／Ｌ范围内线性关系良好，检测极限５ｍｇ／Ｌ，高、中、低浓度的质控血清，其批内变异系数分别为１．１０％，１．６８％和２．３０％；批间变异系数分别为３．２０％，１．２０％和２．０７％。回收率为９９．８％～１００．７％，检测范围５～２４０ｍｇ／Ｌ，当血清中胆红素含量小于６１．８ｍｇ／Ｌ，维生素Ｃ小于１５ｍｇ／Ｌ时，用该试剂测定尿酸含量误差小于５％；该试剂与进口试剂相关试验γ＝０．９９４５。结论合成的ＤＣＨＢＳ试剂，完全可以替代苯酚和四氯酚，用于尿酸、胆固醇、甘油三酯等多种临床生化项目检测中     

化学抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶LD1和LD2

本文应用１，６－已二醇为ＬＤ分子中Ｍ亚基的专一抑制剂，用自动生化分析仪直接测定血清中ＬＤ１和活性，加入１，６－已二醇的最终浓度分别为０．７５ｍｏｌ／Ｌ和０．５５ｍｏｌ／Ｌ。ＬＤ同工酶电泳图谱表明，此时血清中ＬＤ２－ＬＤ５和ＬＤ３－ＬＤ５的活性全部被抑制。用本法同常规电沪法平行检测７５例血清ＬＤ１和ＬＤ１＋ＬＤ２的平均回收率分别为９８．０％和９７．５％；线性范围至少可分别达到８４Ｕ／Ｌ和２０５Ｕ／Ｌ     

蛋白酶解法测定门冬氨基酸基转移酶同工酶

作者用α－糜蛋白酶分解血清胞浆门冬氨基酸基转移酶比色法测定线粒体门冬氨基酸基转移酶。α－糜蛋白酶浓度在１－１．５ｇ／Ｌ（８００ｋＵ／ｇ）已能使ｃＡＳＴＲＷ ＩＴＤ ，ＤＭＪ ｍＡＳＴ不受影响。２９份标双份平行测定，Ｐ＞０．５，电泳法与要比较，ｎ＝２１，ｒ＝０．９８４４，Ｙ＝０．９３６１＋１．０３５６ｘ，健康人１０７例（男３７，女７０）中位数１．１４卡门单位，２．５％－９７．％范围为０．０６－４．２     

白细胞介素-2、超氧化物歧化酶和丙二醛在维持性血液透析中的变化及其意义

目的：探讨白细胞介素２（ＩＬ２）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和丙二醛（ＭＤＡ）对体内代谢产物排泄的影响及其意义。方法：选１６例维持性血液透析患者，于透析前２小时，透析１小时、４小时及透析后４小时测定ＩＬ２、ＳＯＤ、ＭＤＡ，并于非透析日与非透析慢性肾功能衰竭患者及正常人对照。结果：ＩＬ２于透析前２小时最高（８８４．１５±１０．５１ｋＵ／Ｌ），透析后４小时最低（４１７．３６±７．３５ｋＵ／Ｌ），Ｐ＜０．０１。ＳＯＤ于透析前２小时最低（１４４．０９±９．４１Ｕ／Ｌ），透析后４小时最高（２１５．３０±８．３５Ｕ／Ｌ），Ｐ＜０．０１。ＭＤＡ于非透析日最高（８５．９９±１６．７１Ｕ／Ｌ），透析后４小时最低（２４．１９±７．１１Ｕ／Ｌ），Ｐ＜０．０１。非透析日ＩＬ２在维持性透析者最高（６０９．４１±７．４２ｋＵ／Ｌ），非透析肾功能衰竭次之（２０１．３３±１１．５１ｋＵ／Ｌ），健康对照组最低（１２５．１３±１２．４６ｋＵ／Ｌ），Ｐ＜０．０１。结论：ＩＬ２的变化规律与体内代谢产物清除状况相符，ＩＬ２可能作为是否充分透析的指标之一。     

组胺 H_2 受体阻滞剂阻断再生障碍性贫血患者 CD_8~ 细胞抑制正常 CFU-GM 生长的作用

目的：探讨再生障碍性贫血（再障）患者ＣＤ８＋细胞的组胺Ｈ２受体在造血抑制中的作用。方法：在１７例正常人粒－巨噬细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）培养体系中分别加入１７例再障患者外周血ＣＤ８＋细胞，再障患者外周血ＣＤ８＋细胞＋甲氰咪胍和单加甲氰咪胍。结果：再障患者外周血ＣＤ８＋细胞在体外能抑制正常人骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ的生长，０．５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ和１．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ的甲氰咪胍均能解除这种抑制作用。１．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ甲氰咪胍本身可使正常人骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ的产率有所下降，但０．５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ甲氰咪胍对正常人骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ的生长无抑制作用。结论：组胺Ｈ２受体阻滞剂甲氰咪胍在体外能解除再障患者ＣＤ８＋细胞对正常ＣＦＵ－ＧＭ生长的抑制作用。     

血清1,5脱水葡萄糖醇全酶的测定

目的 建立一种测定血中１，５－脱水葡萄糖醇（１，５－ＡＧ）的方法，辅助诊断糖尿病。方法 采用葡萄糖激酶去除血清样品内源葡萄糖干扰，以吡喃糖氧化酶（ＰＲＯＤ）氧化血清１，５－ＡＧ，生成１，５－脱水果糖和Ｈ２０２，后者用Ｔｒｉｎｄｅｒ反应进行比色测定。结果 该方法ＰＲＯＤ用量为８０ＫＵ／Ｌ，反应（终点）时间１０分钟，最低检测限为１．９８μｍｏｌ／Ｌ，１，５－ＡＧ在６３３．３μｍｌｏ／Ｌ以内线性良好。高     

酶偶联法测定红细胞谷胱甘肽过氧化物酶

根据酶偶联催化反应机理，通过二次作图法测定了过氧化物酶（Ｓ＿１）和Ｈ＿２Ｏ＿２（Ｓ＿２））的米氏常数（Ｋｍ），分别为０．０６９ｍｍｏｌ／Ｌ和０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ。通过理论计算和实验分析确定Ｓ＿１的最适底物浓度为１．５ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｓ－２最适底物浓度为２．２５ｍｍｏｌ／Ｌ。实验证明指示酶（Ｇ·Ｒ）用量应＞０．２５Ｕ／ｍｌ反应液，本法采用０．３９Ｕ／ｍｌ反应液并就ｐＨ、温度、Ｈｂ干扰等因素对实验影响进行了系统研究，优选了最佳条件。本法批内变异系数为３．８％，批间变异系数为５．２％。