血小板源生长因子-α受体结构域切除对肺血管平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨从血小板源生长因子－α（PDGF－α）受体水平阻断对肺血管平滑肌增殖的影响。方法：将组织贴块法培养的肺动脉平滑肌细胞（VSMC）分别施加小、中、大剂量的受体结构域切除的PDGF－α受体腺病毒重组体Ad5CMV-PaRtr(ACP),通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察细胞不同时相的增殖曲线；采用流式细胞学技术观察不同干预条件下VSMC细胞周期的变化。结果：中、大浓度ACP对细胞增殖有明显抑制作用。中、大剂量ACP干预后，VSMC生长明显受抑，波峰减弱或消失，第7－9天生长曲线才呈现上升趋势。在中浓度的ACP作用下，加入PDGF－BB不能促进VSMC的增殖。ACP干预前后，VSMC增殖周期中各期细胞构成发生显著的变化，以G0＋G1期细胞增多，S＋G2＋M期细胞减少为特征。与对照组相比，各组的G0＋G1期细胞均有显著升高（P＜0．05）。小剂量与中剂量、中剂量与大剂量间G0＋G1期细胞有显著性差异（P＜0．05）。结论：ACP作为细胞增殖抑制剂，能在中、大剂量下明显抑制VSMC的增殖，可使G0／G1期细胞数明显增多，且与ACP有剂量依赖关系。     

川芎嗪对PDGF-BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和骨桥蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨川芎嗪对血小板源生长因子(PDGF BB)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及骨桥蛋白mRNA表达的影响。方法:大鼠胸主动脉平滑肌细胞体外培养,PDGF BB刺激VSMC ,采用MTT法和流式细胞仪测定川芎嗪对VSMC增殖的影响,逆转录聚合酶联反应(RT PCR)测定VSMC骨桥蛋白mRNA的表达水平。结果:川芎嗪可显著地抑制VSMC增殖(P <0 .0 1) ,使细胞生长停滞于G0 /G1期;PDGF BB诱导骨桥蛋白mRNA呈高表达,川芎嗪下调了这种表达。结论:川芎嗪能抑制体外的VSMC增殖,提示川芎嗪可能作为防治血管成形术后再狭窄的一种药物。     

TNF-α和IL-10基因多态性预测肾移植效果的临床研究

目的：探讨TNF－α和IL－10基因多态性预测移植肾急性排斥反应的临床意义，方法：用序列特异引物聚合酶链反应（PCR－SSP）方法，对126例肾移植患者进行TNF－α和IL－10基因型检测。结果：肾移植后急性排斥反应发生率，TNF－α为高分泌基因型的患者显著高于低分泌基因型者（P＜0．01），IL－10为高分泌基因型的患者显著高于低分泌基因型者（P＜0．05），TNF－α与IL－10均为高分泌基因型的患者比所有其他基因型组合者高（P＜0．01），TNF－α与IL－10均为低分泌基因型患者比所有其他基因型组合者低（P＜0．05），结论：常规检测TNF－α和IL－10基因多态性对于预测移植效果具有重要意义。     

PDGF-BB促进人卵巢癌微血管内皮细胞增殖及PCNA、VEGF表达的实验研究

目的研究血小板源性生长因子BB（PDGF—BB）对人卵巢癌微血管内皮细胞（OdMEC）增殖、增殖细胞核抗原（PCNA）和血管内皮生长因子（VEGF）表达影响。方法体外分离培养OdMEC,施加不同浓度的PDGF—BB（0,5,10,20,50ng／ml）,采用四甲基偶氯唑（MTT）法测定细胞生长曲线;免疫细胞化学及RT—PCR方法检测PCNA和VEGF表达的变化。结果PDGFBB能促进OdMEC的增殖,呈剂量依赖性,以20ng／ml最为明显（P〈0．05）。在20ng／ml PDGF-BB刺激下,PCNA和VEGF的表达均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PDGF—BB促进OdMEC的增殖、PCNA和VEGF的表达。     

急性胰腺炎急性期血清TNF-α、IL-6和IL-10变化的实验研究

目的 研究急性胰腺炎急性期血清TNF－α、IL－6和IL－10的变化。方法 分别以1％和5％牛磺胆酸钠（0．1ml/100g)胰胆管注射建立急性水肿性胰腺炎（AEP）和急性坏死性胰腺炎（ANP）模型。雄性SD大鼠48只随机平均分为Sham(假手术）组，AEP组，ANP组3组。分别于造模后3h,6h处死8只动物，分别观察血清TNF－α、IL－6和IL－10的变化。结果 ANP组和AEP组血清TNF－α、IL－6和IL－10显著升高（均P＜0．001）。造模后6h的血清TNF－α，3h和6h的血清IL－6，IL－10在ANP组均较AEP组为高（分别P＜0．05，P＜0．001，P＜0．05）。ANP组血清TNF－α、IL－6水平在造模后6h比3h为高（均P＜0．05）。结论 在急性胰腺炎病程中细胞因子（TNF－α、IL－6，IL－10）起了重要的作用。IL－6有助于早期判断胰腺坏死。     

整合素β1介导血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞与单核细胞间黏附作用

目的探讨血小板源生长因子（PDGF）对血管平滑肌细胞（VSMC）与人单核细胞系（THP-1）间黏附作用的影响以及可能的分子机制。方法培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞分别用2．5、5、10和20ng／mlPDGF刺激不同时间后,在无或含有整合素β1单克隆抗体培养液中,加入经PKI-126标记的THP-1细胞与VSMC共培养,测定黏附的THP-1细胞数量。采用Western免疫印迹法检测PDGF对VSMC表达整合素13。的影响。结果PDGF刺激SMC促进THP-1与VSMC的黏附的作用随着浓度的增加而增强,THP-1与血管平滑肌细胞黏附的数量是对照组的1．1、2．1、3．1和4．4倍;在10ng／mlPDGF刺激下,黏附的THP-1细胞数量是对照组的3．1倍（135±47个细胞／视野伽43±14个细胞／视野,P〈0．001）;整合素β1单克隆抗体能显著抑制PDGF刺激的THP．1细胞与VSMC的黏附作用,黏附的细胞数量（54±13个细胞／视野,P〈0．01）;PDGF促进THP-1与VSMC黏附的作用在PDGF刺激后8h达到高峰。免疫印迹显示PDGF能诱导VSMC表达整合素β1,在8h左右达高峰。结论血小板源生长因子能够呈剂量和时间依赖性地促进单核细胞与血管平滑肌细胞的黏附,该作用部分是通过整合素β1介导的,这一效应在动脉粥样硬化发病过程中可能具有重要意义。     

重组人白介素10对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察重组人白介素１０（ｒｈＩＬ－１０）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 离体培养大鼠胸主动脉 ＶＳＭＣ并分别接受不同浓度ｒｈＩＬ－１０、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）的刺激,采用ＭＴＳ／ＰＥＳ 法确定ＶＳＭＣ的增殖状态并与对照组比较。结果　与对照组相比,ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ均对ＶＳＭＣ增殖具有明显的刺 激作用（Ｐ＜０．０５）。单独应用ｒｈＩＬ－１０对血管平滑肌细胞生长没有影响。在ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ分别刺激下,ｒｈＩＬ－１０均可 抑制ＶＳＭＣ的生长（Ｐ<０．０５）。结论　ｒｈＩＬ－１０可抑制细胞因子和生长因子诱导的ＶＳＭＣ增殖。     

血脂康对培养的家兔主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨调脂中经血脂康对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法：在培养的家兔主动脉VSMC中加入不同浓度的血脂康共同孵育24h,分别采用细胞计数及^3H－胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)掺入实验观察血脂康对VSMC增殖及MDA合成的影响。结果：血脂康明显抑制VSMC增殖（P＜0．05）和DNA合成（P＜0．01）。结论：血脂康既具有降低血脂作用,又可能通过抑制VSMC增殖而防止动脉粥样硬病变恶化及血管成形术后血管再狭窄等作用。     

血小板源生长因子α受体结构域切除对肺血管平滑肌细胞增殖和c-sis基因表达的影响

目的 探讨从血小板源生长因子α（PDGF—α）受体水平阻断对肺血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 在肺动脉平滑肌细胞（VSMC）培养液中分别给予不同剂量的受体结构域切除的PDGF—α受体腺病毒重组体Ad5CMV—PaRtr（ACP）,对细胞不同时相的增殖曲线和c—sis原癌基因表达进行测定。结果 5ml／L、10ml／L剂量ACP对细胞增殖有明显抑制作用。在5ml／LACP作用下,加入PDGF-BB不能促进VSMC的增殖。不同剂量的ACP可使c—sismRNA的表达上调。5ml／LACP作用下,加入PDGF—BB可下调c—sis mRNA的表达。结论 5ml／L、10ml／LACP能明显抑制肺VSMC的增殖,使c—sismRNA的表达上调。     

酸味中药复方对糖尿病大鼠动态硬化的作用

目的：研究酸味中药复方对糖尿病大鼠动脉硬化的作用。方法：采用免疫组织化学法、图像分析观察了该方对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠血糖和腹主动脉终末糖化产物（AGEs）、腹主动脉α－SM-肌动蛋白、血小板源生长因子－A（PDGF－A）及血管平滑肌细胞（VSMC）的影响。结果：酸味中药复方有降低血糖、减少AGEs含量、降低PDGF－A水平、提高α－SM－肌动蛋白水平以及抑制VSMC增生的作用。结论：酸味中药复方对糖尿病大鼠的动脉硬化有一定的防治作用。     

内毒素促进肝纤维化与肝硬化形成机制的探讨

目的：探讨肠源性内毒素（intestinal endotoxin,IET)促进肝纤维化发与肝硬化形成机制。方法：采用复合因素复制大鼠肝硬化模型，分别于4周及8周末测定其血浆ET、NO、TNF－α和IL－10水平。结果：实验组血浆ET、NO和TNF－α水平均明显高于正常对照组，血浆内毒素水平与TNF－α和NO均呈正相关（r=0.651，P＜0．025；r=0.912,P＜0．001）。实验组IL－10水平无明显高于正常对照组，但肝硬化8周组IL－10水平明显低于4周组（P＜0．05）。结论：ET诱导的NO、TNF－α和IL－10的释放在肝硬化发生发展中起一定作用。     

肺癌患者血清与癌肿块中细胞因子的变化及其意义

目的：探讨肺癌患血清与癌肿块中白介素－8（IL－8），白介素－18（IL－18），肿瘤坏死因子（TNFα），血管细胞粘附因子－1（sVAM-1)的变化情况，方法：采用Elisa方法检测12例正常对照，17例肺癌患手术前后IL－8，IL－18，TNFα，sVCAM-1在血清和癌旁肺组织，癌组织中的含量。结果：肺癌患手术前后血清中的IL－8，IL－18，TNFα，sVCAM-1含量均比正常对照组增高有显差异（P值均＜0．01），术后与术前两组比较术后TNFα含量有明显下降（P＜0．05），其余3项指标有一定下降但无显差异，癌肿块中IL－8，IL－18，TNFα，sVCAM-1含量比癌旁组织中的含量4项指标均显增高（P＜0．01，P＜0．05），结论：测定血清中的IL－8，IL－18，TNFα，sVCAM-1对肺癌的诊断及判断预后，鉴别良，恶性肿瘤有重要临床意义。     

胃癌患者血清中NO、T—SOD及TNF—α的水平变化及临床意义

目的：探讨胃癌患者血清中一氧化氮（NO）、总超氧化物歧化酶（T－SOD）及肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的含量变化。方法：用生物化学方法测定胃癌患者血清NO、T－SOD含量;用ELISA法测定胃癌患者血清TNF－α含量,并进行统计学分析。结果：胃癌患者血清NO及T－SOD含量均显著低于正常对照组（P值均＜0．05）,而血清TNF－α含量显著高于正常对照组（P＜0．05）。本实验还对胃癌患者中的10例进行了肿瘤根治术前及肿瘤根治术后10天左右标本的对比检测。结果表明,肿瘤根治术后该病患者血清NO及T－SOD含量较术前明显升高（P值均＜0．05）,但仍低于正常对照组（P值均＜0．05）,而血清TNF－α含量较术前明显降低（P＜0．05）,但仍高于正常对照组（P＜0．05）。结论：胃癌患者血清NO及T－SOD含量降低：TNF－α含量增高,多项指标的联合检测对其发病机理探讨,疗效观察和预后判断均有一定临床意义。     

DDPH对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用氚－胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）参入、电镜、原位杂交及Northern blot杂交方法，观察了 1－ （2，6－二甲基苯氧基）－2－（3，4－二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（DDPH）对自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：DDPH在降低SHR血压 的同时，能减少VSMC的线粒体、粗面内质网及3H－TdR参入量（P＜0．01），并能逆转c－fos、c－myc、c－sis 原癌基因mRNA表达增强（P＜0．05或＜0．01）以及P53抑癌基因mRNA表达减弱（P＜0．05）。表明： DDPH能抑制SHR的VSMC增殖，与癌基因调控的分子生物学机制有关。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠血清IL-1、TNFα、IL-4及IL-10的影响

目的：观察新风胶囊对佐剂性关节炎的治疗作用及对细胞因子系列（IL－1、IL－4、IL－10及TNFα）的影响。方法：将50只大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,新风胶囊组,雷公藤多苷片（TPT）组和甲氨喋呤TX）治疗组,每组10只,制备完全佐剂并分别向除正常组以外的其余动物右后足跖皮内注射0．05ml致炎,观察各组血清中各细胞因子含量的变化,结果：与治疗前比较,新风胶囊治疗组,TPT治疗组及MTX治疗组治疗后大鼠的关节炎指数（AI）显降低（P＜0．05或P＜0．01）,新风胶囊治疗组给药后体质量增加值与正常对照组比较差异无显性（P＞0．05）;TPT治疗组及MTX治疗组给药前后体质量增加值显低于正常对照组和新风胶囊治疗组（P＜0．01）,与模型对照组相比,新风胶囊治疗组的IL－1,TNFα显降低,IL－4,IL－10显升高（P＜0．01）,并与其余两治疗组无显性差异（P＞0．05）,结论：新风胶囊与MTX,TPT一样能降低佐剂性关节炎模型大鼠的AI,而在增加大鼠体质量方面优于TPT和MTX,新风胶囊可能通过下调致炎因子（IL－1,TNFα）,上调抗炎因子（IL－4,IL－10）,抑制致炎效应,增强抗炎效应,从而达到降低AI,消除肿胀的治疗目的。     

大鼠肾脏缺血再灌注后IL -6和TNF-α变化与时间的关系

目的：通过观察大鼠肾脏缺血再灌注（I－R）的不同时间IL－6和TNF－α的变化，探索细胞因子在肾脏I－R损伤中的作用。方法：采用大鼠肾脏I－R损伤模型，分别在缺血和再灌注1、4和24h时取血和肾组织，用双抗体夹心ELISA法测定IL－6和TNF－α的含量。结果：缺血组及再灌注4h(R4h)和24h(R24h)组IL－6含量均低于对照组（P＜0．05）；而再灌注1h组与对照组相当，但显著高于缺血组（P＜0．01）。IL－6含量的动态变化在肾组织和血液中呈直线正相关（P＜0．05）。肾组织中TNF－α含量在缺血和再灌注1h组均高于对照组（P＜0．05），血液中TNF－α与对照组无显著性差异。结论：大鼠肾脏I－R时肾组织和血液中IL－6含量随时间的推迟而降低，而肾组织中TNF－α含量在早期增加。     

CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用机制的研究

目的：探讨CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用的机制。方法：将卵巢癌细胞株（A2780)分成两组,实验组采用CD3AK＋A2780,对照组采用LAK＋A2780,分别共育24h并于作用前和作用后每4h收集一次上清液以检测TNF－α和IFN－γ分泌水平。结果：实验组和对照组共育前,后上清液中均有TNF－α和IFN－γ分泌,但共育后TNF－α和IFN－γ分泌水平显著高于共育前（P＜0．01）,且同一效靶比的实验组TNF－α和IFN－γ分泌水平明显高于对照组（P＜0．05）。结论：CD3AK细胞可通过分泌细胞因子TNF－α和IFN－γ杀伤肿瘤细胞。     

急性白血病患者血清IL-6、TNF-α检测临床意义的探讨

目的：探讨白细胞介素6（IL－6）肿瘤坏死因子α（TNF－α）水平与急性白血病（AL）发病的关系。方法：采用ELISA双抗体夹心法测定急性淋巴细胞白血病（ALL）和急性髓细胞白血病（AML）患血清IL－6、TNF－α水平。结果：AL患IL－6含量显高于正常对照组（P＜0．01），且ALL又明显高于AML（P＜0．05）；TNF－α也显高于对照组（P＜0．01），但ALL与AML两组间TNF－α水平无明显差异（P＞0．05）。结论：IL－6、TNF－α水平与AL发病，发展有密切相关；IL－6水平与白血病类型有关；而TNF－α水平与白血病类型无关。     

丹酚酸B对PDGF及MDA诱导的人鼠原代肝星状细胞增殖的影响

目的：探讨丹酚酸B（SAB）对血小板生长因子（PDGF）和丙二醛（MDA）刺激的大鼠原代肝星状细胞（HSC）增殖的影响。方法：采用原位灌注法消化大鼠肝脏，108g／L Nycodenz密度梯度离心，分离HSC，以MTT法观察细胞的增殖能力。免疫组化法检测血小板生长因子受体（PDGFR）含量。结果：MDA组与正常组相比可明显增加MTT吸光度（P〈0．05），PDGF组亦较正常组明显增加MTT吸光度（P〈0．01）；1μmol／LSAB和10μmol／L SAB不仅可显著抑制MDA刺激的HSC吸光度增加（P均〈0．01），也可抑制PDGF—BB刺激的HSC吸光度增加（P均〈0．01）。PDGF及MDA作用后细胞PDGFR的表达均明显增加，而10μmol／L SAB则可抑制PDGFR的表达。结论：SAB可通过抑制PDGFR的表达而抑制体外培养HSC的增殖．这种抑制作用与SAB的抗氧化作用有一定的关系。     

重组人白介素-10对TNF-α诱导的血管外膜成纤维细胞syndecan-4蛋白表达的影响

目的观察重组人白介素-10（IL-10）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激的血管外膜成纤维细胞（NIH／3T3细胞）增殖和syndecan-4蛋白表达的影响。方法采用体外培养的NIH／3T3细胞,分别应用终质量浓度为20ng／mL TNF-α、100ng／mL IL-10、200ng／mL IL-10、100ng／mL IL-10联用20ng／mL TNF-α、200ng／mL IL-10联用20ng／mL TNF-α作用24h,并设对照组进行比较,采用MTS／PMS法确定NIH／3T3细胞的增殖状态,利用Western blot蛋白免疫印迹法测定NIH／3T3细胞中syndecan-4蛋白的表达。结果（1）MTS／PMS法测定各组细胞增殖率统计分析显示：与对照组比较,TNF-α组能显著刺激NIH／3T3细胞的增殖（P〈0．001）,而IL-10不同剂量组单独应用对NIH／3T3细胞的增殖均无明显作用（P〉0．05）。IL-10联合TNF-α共同作用组与TNF—α组比较,NIH／3T3细胞增殖均显著减少（P〈0．01）。（2）Western blot蛋白免疫印迹法测定显示：与对照组比较,TNF—α组能显著刺激NIH／3T3细胞中的syndecan-4蛋白表达（P〈0．05）,而IL-10不同剂量组单独应用对NIH／3T3细胞的syndecan-4蛋白表达均无明显影响（P〉0．05）。IL-10联合TNF-α共同作用组与TNF-α组比较,NIH／3T3细胞的syndecan-4蛋白表达显著降低（P〈0．001）。结论IL—10可明显抑制TNF-α诱导的NIH／3T3细胞增殖及细胞syndecan-4蛋白的表达。