NM23-H1基因调控肺癌侵袭转移相关基因的研究

目的 研究与NM23-H1基因有关的肺癌侵袭转移相关基因.方法 在抑制消减cDNA文库的基础上制备基因表达谱芯片.经芯片杂交、克隆测序及同源性分析得到人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1各差异表达基因的信息,再以实时荧光定量PCR技术对筛选出的差异基因作进一步的验证.结果 成功制备了人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1差异表达基因的基因表达谱芯片.经测序及同源性分析发现19个差异表达基因.经荧光定量PCR验证发现转染NM23-H1后,L9981细胞中PSMA7、SBDS,ODC1,YARS、CSDA、PTP4A1、SHPRH和TDMM78个基因的mRNA表达上调,PKM2和GMNN基因的mRNA表达下调.结论 NM23-H1基因可能为转移相关的上游调节基因,它可通过对下游一系列基因进行调节而实现对肺癌转移潜能的抑制作用.     

Expression of the novel gene NM23-H1B in ovarian cancer

Objective：To study the expression of the human novel gene NM23-H1B in ovarian cancer.Methods: Totally 24 samples from patients with epithelial ovarian tumor at different clinical stages and 4 from normal ovaries were examined for NM23-H1B mRNA expression by RT-PCR and Northern blot. Results: All samples expressed NM23-H1B mRNA through RT-PCR, while the level of expression in ovarian tumor was higher than that of normal ovary. The results of Northern blot showed that NM23-H1B was overexpressed in ovarian cancer while lowexpressed in normal ovary or low malignant potential (LMP).The level of expression at early stage cancer (stage Ⅰ and Ⅱ ) was higher than those in advanced cancer(stage Ⅲ and Ⅳ ). In early stage carcinoma, the expression level was involved in the differentiation of tumor cell, and well-differentiated cancer expressed NM23-H1B mRNA in comparatively higher level. Conclusion: The novel gene NM23 N1B is closely correlated with the ovarian cancer.     

NM23-H1基因产物在膀胱移行细胞癌的表达及临床意义

目的　探讨NM2 3-H1在膀胱移行细胞癌的表达与其生物学行为的关系及临床意义。方法　免疫组化SABC法检测 4 0例膀胱移行细胞癌中NM2 3-H1的表达情况。结果　NM2 3-H1总阳性率为 75 % ,复发癌阳性表达率为 4 6 % ,初发癌 89%。NM 2 3-H1表达水平随膀胱移行细胞癌细胞分化程度增高而增高 (P <0 .0 5 )。Ta -T1期表达水平高于T2 -T4期 (P <0 .0 5 )。初发癌表达水平高于复发癌 (P <0 .0 5 )。结论　NM2 3-H1表达水平与膀胱移行细胞癌组织学分级、临床分期及复发密切相关 ;NM 2 3-H1的检测能为判断膀胱移行细胞癌的恶性程度和复发提供依据。     

nm23-H1基因在人贲门癌中的表达

目的 :检测转移抑制基因 nm2 3- H1在贲门癌中的表达 ,探讨其与贲门癌生物学特性和其他病理学指标的关系。方法 :应用免疫组化染色技术对 2 8例贲门癌组织中的 nm2 3- H1进行检测并与正常组织对照。结果 :贲门癌及其相应的正常组织中 nm2 3- H1蛋白表达率分别为 67.9%和71 .4% ,两者间无显著性差异 ( P<0 .0 5)。 nm2 3- H1蛋白在贲门癌中的表达 ,随肿瘤浸润程度的增加而表达下降 ( P>0 .0 5) ;在淋巴结转移阳性组贲门癌中 ,表达阳性率为 46.2 % ,而淋巴结转移阴性组为 92 .8% ,两者差异显著 ( P<0 .0 5)。结论 :nm2 3- H1蛋白表达在肿瘤分化程度高组与低组之间 ,无显著性差异。     

癌组织nm23-H1基因表达对胃肠道癌浸润与转移的影响及意义

目的通过检测、分析癌组织中nm23-H1基因表达,探讨nm23-H1对胃肠道癌浸润、转移的影响及临床意义。方法应用免疫组化技术检测62例胃肠道癌术后标本nm23-H1基因的蛋白表达,采用χ2检验进行统计学分析。结果nm23-H1在胃肠道癌组织中的阳性表达率为62.9%(39/62),Ⅰ Ⅱ与Ⅲ Ⅳ患者之间nm23-H1的阳性表达有显著性差异(P<0.05)。nm23-H1的表达与局部淋巴结转移呈负相关(P<0.01)。在高分化组nm23-H1的表达明显降低(P<0.05),与癌栓的形成无关(P>0.05)。结论癌组织中nm23-H1基因的蛋白表达增强或减弱可能与胃肠道肿瘤转移有内在联系;可通过调控癌细胞的转移潜能,影响胃肠道癌浸润和淋巴结转移;可作为胃肠道肿瘤判断预后的指标,指导临床正确综合治疗。     

转移抑制基因nm23-H1在胆管细胞癌中的表达

目的探讨转移抑制基因nm23-H1的表达与胆管细胞癌临床病理及预后的关系.方法25例胆管细胞癌标本,制成石蜡切片,采用免疫组织化学ABC法染色.结果11例(40%)为阳性表达,14例(56%)为阴性表达.nm23-H1的表达与肿瘤大小、肿瘤部位、侵及浆膜、肝外转移、肿瘤破裂、淋巴结转移、侵及门静脉、分化程度和生存率无关.术后2年内的复发率nm23-H1阴性表达例(71.4%)高于阳性表达例(45.5%),但这一区别没有显著性差异(P>0.05).结论nm23-H1在胆管细胞癌中所起的作用不同. nm23-H1的表达对胆管细胞癌不具有预后指示作用.     

肿瘤转移抑制基因Nm23-H1融合蛋白的表达纯化及其功能的初步研究

目的 利用人Nm23-H1基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化融合蛋白,并对蛋白其活性进行初步分析.方法 将重组质粒pET28a-Nm23-H1转化入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达并鉴定.用金属螯合层析技术进行蛋白纯化,得到Nm23-H1融合蛋白,用SDS-PAGE及Western blot鉴定纯化蛋白,并用RP-HPLC法、电泳迁移率变动分析实验检测Nm23-H1融合蛋白的核苷二磷酸激酶(NDPK)活性及核酸内切酶(AP)修复活性.结果 转化溶原菌后能够表达目的 蛋白,蛋白表达量高,为可溶性蛋白.Ni2+柱纯化后得到Nm23-H1融合蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定正确.RP-HPLC法就及电泳迁移率变动分析实验证明所纯化的Nm23-H1融合蛋白具有NDPK活性,不具有AP修复活性,但可以增加APE1蛋白的AP修复活性.结论 利用原核表达载体pET28a-Nm23-H1在E.coli BL21(DE3)中高效表达和纯化得到具有NDPK活性,但无AP修复活性的Nm23-H1融合蛋白,此蛋白可以增强APE1蛋白的AP修复活性,共同参与细胞的DNA损伤修复.     

Molecular mechanism for effects of NM23-H1 on primary hepatocellular carcinoma with intrahepatic metastasis

Themostlife--threateningaspectsoftheoncogenicprocessareinvasionandmetastasis.Eventhoughtheclinicalsignificanceofsuchexpressionofthemalignantphenotypehasbeenwellappreciated,advancesinunderstandingthemolecularmechanisminvolvedinmetastasishavelaggedbehind.Therecurrenceofprimaryhepatocellularcarcinoma(HCC)isusuallycausedbytheintrahepaticmetastasisthroughtheportalvein[1.2J.TheNM23--HIgene,aputativemetastasissuppresser,wasoriginallyrevealedinmurinemelanomacelllines.Subsequently,theNM23-HImRNAw…     

子宫内膜异位症与nm23-H1基因之间关系的研究

目的　研究nm2 3 H1基因在子宫内膜异位症发生中的作用。方法　采用免疫组化方法研究 2 5例子宫内膜异位症患者的病理组织和 2 2例正常子宫内膜组织中的nm2 3 H1蛋白的表达情况 ;用RT PCR方法研究 2 5例子宫内膜异位症患者的病理组织中nm2 3 H1基因的mRNA的表达情况。结果　子宫内膜异位症组中的nm2 3 H1蛋白表达水平明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,子宫内膜异位症组中 ,nm2 3 H1蛋白表达与mRNA表达的结果无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　nm2 3 H1基因在子宫内膜异位症的发生发展中起一定的作用。     

nm23-H1基因遗传不稳定性和宫颈癌的相关性研究

目的 分析宫颈癌及癌前病变中nm23-H1基因遗传不稳定性及其与宫颈癌临床病理特征的相关性,探讨nm23-H1基因在宫颈癌发生、发展中的作用.方法 收集手术及活检宫颈新鲜组织标本146例,包括宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）Ⅱ～Ⅲ 级48例,宫颈鳞癌（squamous cell carcinoma,SCC）48例,慢性宫颈炎50 例.采用免疫组化技术检测nm23-H1蛋白,同时用PCR-SSCP法检测nm23-H1基因遗传不稳定性.结果 （1） nm23-H1蛋白表达率随着宫颈肿瘤的进展逐渐减弱.（2） nm23-H1 基因D17S396位点的杂合性缺失（loss of heterozysity,LOH）发生率在宫颈癌晚期较多见,而微卫星不稳定（microsatellite instability,MSI）在癌前病变及早期癌中较多见.（3） LOH的增加与nm23-H1蛋白的低表达有关,MSI对nm23-H1蛋白表达的影响不大.结论 nm23-H1基因可能参与了宫颈癌的进展及浸润转移,nm23-H1基因的MSI和 LOH可能通过不同的机制影响肿瘤进展.     

上皮性卵巢肿瘤中Nm23基因表达的研究

目的 研究转移抑制基因-Nm23-H1在上皮性卵巢肿瘤中的表达意义。方法 应用免疫组化S-P法，对116例正常卵巢组织及卵巢上皮性肿瘤患者Nm23-H1基因产物表达进行测定。结果 （1）正常卵巢，良性、交界性、恶性上皮性卵巢肿瘤中Nm23-H1基因产物表达率分别为：13.3%,33.3%,44.4%,69.3%，组间差异显著；（2）Nm23-H1/NDPK在上皮性卵巢癌Ⅰ、Ⅱ期间明显高于Ⅲ、Ⅳ期，差异有统计学意义；（3）Nm23-H1/NDPK在分化较差，期别较晚的卵巢癌患者中表达明显下降；（4）有淋巴结转移的病例中Nm23-H1产物明显低表达；（5）Nm23-H1与p21、p53分别存在独立的联合作用。结论 Nm23-H1基因产物表达与卵巢上皮性肿瘤分化，淋巴结转移相关，Nm23-H1与p21,p53联合检测对卵巢肿瘤的诊断，判断预后及治疗具有重要价值。     

Nm23-H1基因对膀胱癌化疗敏感性的体外实验研究

目的: 探讨外源性人抑癌基因nm23 H1 对膀胱癌细胞系T -24 细胞化疗敏感性的影响。方法: 将nm23 -H1真核表达质粒通过脂质体转染技术导入人膀胱癌细胞株T -24,利用免疫组化及Western blot法鉴定质粒的表达。利用MTT法、流式细胞仪分析技术检测T -24细胞转染前后化疗药物对细胞增殖、细胞凋亡的变化。结果: 顺铂组(CDDP)细胞生长明显受到抑制,细胞凋亡增加;顺铂转染前后细胞凋亡指数分别为(26.51±0.98)%、(63.21±0.58)%,两者间差异有统计学意义。结论: Nm23- H1 基因能增强顺铂的化疗敏感性,为基因联合化疗药物治疗膀胱癌提供了参考依据。     

nm23-H1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨nm23-H1基因与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测50例膀胱移行细胞癌组织nm23-H1基因表达。结果nm23蛋白弥散于胞浆及胞膜，nm23-H1的表达与膀胱癌的分级、分期有密切关系，有转移性癌组织nm23-H1基因表达明显高于无转移癌组织（P＜0.01）。结论：nm23-H1基因表达是一个判断膀胱移行细胞癌恶性程度有价值的指标。     

食管癌中P53与nm23-H1基因表达的临床意义

目的探讨P53与nm23-H1基因表达产物与食管癌临床病理及预后的关系。方法应用免疫组化S-P法测定39例食管癌标本P53与nm23-H1基因的表达产物,并对全部病例术后随访3年。结果食管癌中P53的高表达和nm23-H1的低表达与食管癌的浸润深度、临床TNM分期及预后相关(P<0.05),nm23-H1的低表达与食管癌的淋巴结转移相关(P<0.05)。P53与nm23-H1低表达者预后不良(P<0.05)。结论P53与nm23-H1在食管癌中的不同表达与食管癌的浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及预后相关,可为临床评估预后提供重要的参考指标。