三氧化二砷联合Gal-PEI-ASODN对Bel-7402细胞增殖的影响

目的 探讨以半乳糖受体为靶向的投递系统对肝癌化疗药物敏感性的影响。方法 用半乳糖(Gal)-聚乙烯亚胺(PEI)交联物与c-myc反义核酸(ASODN)形成Gal-PEI-c-myc ASODN复合物,与三氧化二砷(As2O3)联合应用,观察其对人肝癌Bel-7402细胞增殖的作用。结果 AsO3联合Gal-PEI-c-myc ASODN复合物对Bel-7402细胞增殖的IC50比单用As2O3或As2O3联合单纯c-myc ASODN的IC50明显下降。结论 半乳糖受体为靶向的投递系统可提高肝癌对化疗药物的敏感性。     

半乳糖受体介导的c-myc反义核酸联合三氧化二砷对人肝癌细胞的增殖抑制作用

目的　探讨Gal-PEI-c -mycASODN与三氧化二砷 (As2 O3 )联合应用对人肝癌Bel- 74 0 2细胞增殖的影响。方法　As2 O3 分别或联合Gal-PEI-c -mycASODN与人肝癌Bel- 74 0 2细胞共孵育 4 8h ,台盼蓝染色法检测细胞增殖的变化 ,流式细胞仪分析细胞亚二倍体百分率。结果　 0 5 μmol/LAs2 O3 和Gal-PEI-ASODN(含A SODN 0 12 5 μmol/L)均不能抑制Bel- 74 0 2细胞增殖 ,0 5 μmol/L的As2 O3 联合Gal-PEI-ASODN(含ASODN 0 12 5μmol/L)对Bel- 74 0 2细胞增殖有明显抑制作用 (P <0 0 5 ) ,与 4 μmol/LAs2 O3 产生的抑制作用相当 ;1 0 μmol/LAs2 O3 不引起Bel- 74 0 2细胞凋亡 ,但联合Gal-PEI-ASODN(含ASODN 0 2 5 μmol/L)即导致Bel - 74 0 2细胞凋亡。结论　Gal-PEI-ASODN联合As2 O3 能明显提高肝Bel- 74 0 2细胞对As2 O3 的敏感性 ,抑制Bel- 74 0 2细胞增殖 ,促进细胞凋亡。     

半乳糖受体介导的PCNA反义核酸提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性

目的　研究半乳糖(galactose ,Gal) -聚乙烯亚胺(polyethyleneimine ,PEI)介导的增殖细胞核抗原(pro liferatingcellnuclearantigen ,PCNA)反义核酸(antisenseoligdeoxynucleotides ,ASODN)分别与3种常用化疗药物5 -氟尿嘧啶(5 -fluorouracil,5 -FU) ,顺铂(cis-Diamminedichloroplatinum ,DDP) ,羟喜树碱(hydroxyicamptothecine ,HCPT)联合作用于人肝癌Bel- 74 0 2细胞,观察它们对细胞增殖的抑制作用。方法　将Gal-PEI与反义核酸形成交联复合物Gal-PEI-ASODN ,用CCK - 8细胞计数试剂盒检测单纯使用化疗药物以及联合0 0 3μmol/LASODN或0 0 3μmol/LGal-PEI-ASODN对Bel- 74 0 2细胞增殖的抑制作用,并分别计算抑制率和IC50 。结果　单纯使用5 -FU ,DDP ,HCPT作用于Bel- 74 0 2细胞4 8h ,其IC50 分别为16 15 ,1 88,0 31μg/ml;ASODN与上述药物联合使用其IC50 分别为12 5 9,1 71,0 2 7μg/ml,将Bel- 74 0 2细胞对化疗药物的敏感性分别提高到单用化疗药物的1 2 8,1 10 ,1 15倍;Gal-PEI-ASODN与上述药物联合使用其IC50 分别为0 5 1,0 90 ,0 10 μg/ml,将Bel- 74 0 2细胞对化疗药物的敏感性分别提高到单用化疗药物的31 6 7,2 0 9,3 10倍。金正均Q值法分析表明:5 -FU与Gal-PEI-ASODN联合使用,表现为协     

Bcr/abl同靶点小干扰RNA与反义寡核苷酸对K562细胞的作用比较

目的比较靶向Bcr／abl基因b3a2融合位点的小干扰RNA（small interferon RNA,SiRNA）及作用靶点完全相同的反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）对人白血病K562细胞的增殖抑制作用,并联用三氧化二砷（As2O3）,比较二者对K562细胞化疗增敏作用。方法体外转录方法合Bcr／abl b3a2融合住点SiRNA,lipofectamine^TM2000转染,改良MTT法检测药物对K562细胞增殖的抑制作用。结果SiRNA和相同作用靶点的ASODN均显示出明显的细胞增殖抑制效应,SiRNA抑制K562细胞的IC50为97．47nmol／L,ASODN抑制K562细胞的IC50为10．71μmol／L;50nmol／L SiRNA与As2O3联用后,明显提高K562细胞对As2O3的敏感性,相同浓度的ASODN对细胞无明显化疗增敏作用。结论本实验结果提示针对Bcr／abl基因融合位点设计的极低浓度的SiRNA即能显著抑制K562细胞增殖,提高细胞对化疗药物的敏感性,其效果明显强于同靶位点的ASODN,显示了RNAi技术应用于慢性髓系白血病的良好前景。     

三氧化二砷联合抗坏血酸对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究三氧化二砷(As2O3)联合抗坏血酸(AA)对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其细胞内谷胱甘肽(GSH)水平.方法:As2O3和AA不同组合孵育细胞HepG2,采用台盼蓝染色实验检测药物对细胞生长的影响,流式细胞仪检测亚二倍体凋亡峰,Annexin V染色检测细胞凋亡率,GSH实验检测细胞内GSH水平.结果:100 μmol/L的AA单独作用与对照组相比在细胞增殖和凋亡都无显著性差异;低剂量(2 μmol/L)和高剂量(5 μmol/L)的As2O3都能抑制细胞增殖活性和诱导细胞凋亡,联合AA作用后,比相应浓度的单独As2O3作用更为显著;AA和As2O3分别处理都能明显消减细胞GSH含量,两种药物联合作用后与相应单独As2O3作用相比GSH水平显著性降低.结论:GSH在As2O3对肝癌细胞抑制增殖和诱导凋亡作用机制中起到重要的作用,高低剂量的As2O3联合AA通过降低GSH水平均可以增强As2O3对肝癌细胞抑制生长及其诱导凋亡作用的敏感性.     

不同序贯的西妥昔单抗与化疗药物联合对HepG2和 Bel-7402细胞的增殖抑制作用

 【目的】 观察不同序贯的西妥昔单抗(cetuximab)与化疗药物联合对人肝癌细胞系HepG2和Bel-7402的增殖抑制作用,并分析其意义? 【方法】 浓度递增的cetuximab和表柔比星?奥沙利铂?泰素?伊立替康四种化疗药物分别按照不同给药序贯联合作用于HepG2和Bel-7402细胞,使用细胞计数试剂盒CCK-8检测不同给药序贯的药物对HepG2和Bel-7402细胞的增殖抑制作用,利用生物学软件Calcusyn计算不同给药序贯时cetuximab和化疗药物的半数抑制浓度(IC50)的变化,计算其作用的协同系数(CI)? 【结果】 Cetuximab和化疗药物联用对HepG2和Bel-7402细胞的增殖抑制作用受给药序贯影响:cetuximab先于化疗药物给药,两者的IC50较单用时降低,但是CI值均大于1,两者之间为拮抗效应;cetuximab后于化疗药物给药,两者的IC50较单用时降低更为明显,且CI值均小于1,两者之间具有较明显的协同效应? 【结论】 Cetuximab与化疗药物联用对肝癌细胞的增殖具有协同抑制作用,较佳的给药序贯是化疗药物先于cetuximab给药,能获得明显的协同效应,这有助于临床用药时降低药物剂量,减少毒副作用?     

奥曲肽逆转肝癌细胞多药耐药机制的初步研究

目的：探讨生长抑素类似物奥曲肽(octreotide)逆转肝癌细胞多药耐药，增加肝癌细胞对化疗药物敏感性的机制。方法：应用MTT法分析肝癌细胞对化疗药物的敏感性；用RT—PCR、流式细胞术检测肝癌细胞多药耐药基因MDR1、MRP2 mRNA蛋白质的表达。结果：奥曲肽联合化疗药物可以显著降低各化疗药物的IC50。肝癌原代培养细胞有SSTR2、SSTR3、MDR1、MRP2的表达，奥曲肽可以显著降低肝癌细胞表面MDR1、MRP2的表达。结论：奥曲肽可以与肝癌细胞表面的SSTR结合，降低肝癌细胞表面MDR1、MRP2的表达，从而使细胞内细胞毒药物浓度增加，逆转肝癌细胞多药耐药。     

As2O3对肾癌786-0细胞5-氟尿嘧啶药物敏感性的研究

目的 探讨As2O3与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对肾癌细胞786-0细胞株细胞增殖、细胞凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响.方法 取对数生长期786-0细胞,MTT比色法检测As2O3和/或不同浓度5-FU对细胞生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR法及蛋白质印迹法检测XIAP mRNA表达及XIAP蛋白质表达的变化.结果 不同浓度的5-FU分别作用786-0细胞后,细胞生长受到抑制,但无明显的时间、浓度相关性;2μmol/L As2O3与不同浓度5-FU联合应用对786-0细胞的增殖抑制率随作用时间、药物浓度的增加逐渐升高,与单药相比较(P＜0.01),两药相互作用系数显示为协同作用.48h检测2μmol/L As2O3与不同浓度5-FU联合用药处理的786-0细胞的凋亡率明显增加,与单药相比(P＜0.01);XIAP mRNA表达明显减少,与单药相比(P ＜0.01);2μmol/L As2O3与400 μg/ml 5-FU联合应用48h XIAP蛋白表达亦明显减少,与单药相比(P＜0.01).结论 As2O3联合5-FU可以明显提高肾透明细胞癌的化疗敏感性,抑制786-0细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,这一作用与抑制786-0细胞XIAP基因的表达有关.     

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌细胞的增殖抑制作用 .方法　应用台盼蓝拒染法、MTT比色法及细胞克隆形成试验 ,研究 As2 O3对肝癌 Hep G2细胞的增殖抑制和细胞毒作用 .结果　 As2 O3 能显著抑制肝癌细胞的生长 ,5μmol· L- 1 As2 O3 抑制程度明显强于 1μmol· L- 1 . 5和 1μmol· L- 1 As2 O3 作用后细胞克隆形成率分别为 (1.5±1.2 ) %和 (12 .3± 2 .2 ) % ,明显低于对照组的 (30 .0± 4.2 ) %(P<0 .0 1) .As2 O3对肝癌细胞有较强的细胞毒作用 ,且呈明显剂量和时间依赖性 ,其对肝癌细胞的杀伤率高于 5 -氟脲嘧啶 (5 - FU )和丝裂霉素 (MMC) ,但无显著性差异 ,As2 O3与 5 -FU及 MMC存在协同效应 ,联合应用杀伤率明显升高 .结论　 As2 O3具有明显的抑制肝癌细胞增殖作用 ,有必要进一步探讨其对肝癌的治疗价值     

三氧化二砷聚乙二醇-聚乳酸偶联人源抗血管内皮细胞生长因子受体2隐形纳米粒的抗肝癌机制探讨

目的 探讨以聚乙二醇-聚乳酸（PEG-PLA）为载体材料包载的三氧化二砷（As2O3）,同时偶联人源抗血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR-2）的隐形纳米粒的抗肝癌机制。方法 以PEG-PLA为载体材料,W/O/W型超声乳化制备As2O3纳米粒,同时偶联具有肝癌靶向作用的VEGFR-2,得到人源抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA纳米粒,同时以相同方法制作香豆素6（C6）-PEG-PLA及抗VEGFR-2/C6-PEG-PLA纳米粒。测定纳米粒粒径分布、Zata电位;MTT法计算As2O3、As2O3-PEG-PLA及抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA对Bel 7402肝癌细胞IC50值;采用流式细胞实验和激光共聚焦显微镜实验检测人肝癌Bel 7402细胞摄取C6-PEG-PLA及抗VEGFR-2/C6-PEG-PLA纳米粒的速度和强度;将18只肝癌裸鼠采用随机数字表法分为3组,每组分别经尾静脉注射As2O3、As2O3-PEG-PLA、抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA溶液,给药后12 h处死小鼠,取肿瘤、脾、心、肺、肝、肾等组织,测试其中As2O3浓度;再将另24只肝癌裸鼠采用随机数字表法分为4组,每组分别经尾静脉注射As2O3、As2O3-PEG-PLA、抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA及0.9%氯化钠溶液,给药后第17 d,处死小鼠,计算肿瘤抑制率。结果 抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA平均粒径为（141.9±13.2）nm（PDI=0.23）,呈正态分布,Zata电位为（10.2±1.1）mV。As2O3、As2O3-PEG-PLA、抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA的IC50值分别为（1.53±0.22）μmol/L,（2.30±0.18）μmol/L和（1.80±0.22）μmol/L。不同剂型IC50值比较,差异有统计学意义（F=4.503,P=0.018）。不同时间点人肝癌Bel 7402细胞摄取抗VEGFR-2/C6-PEG-PLA的速度均高于C6-PEG-PLA,差异有统计学意义（t=2.012,P=0.045;t=2.231,P=0.035;t=2.311,P=0.022）。As2O3组不同组织As2O3含量比较,差异有统计学意义（F=5.568,P=0.018）;As2O3-PEG-PLA组不同组织As2O3含量比较,差异有统计学意义（F=4.659,P=0.034）;抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA组不同组织As2O3含量比较,差异有统计学意义（F=5.001,P=0.022）。对照组、As2O3组、As2O3-PEG-PLA组和抗VEGFR-2/As2O3-PEG-PLA组肿瘤抑制率分别为32.6%、45.9%、66.2%和87.9%。4组肿瘤抑制率比较,差异有统计学意义（χ2=4.189,P=0.018）。结论 以PEG-PLA为载体材料制备得到As2O3纳米制剂,且偶联具有肝癌靶向作用的VEGFR-2,用于肝癌的治疗,可显著提高As2O3的生物利用度,为构建As2O3肝癌靶向纳米递送系统提供了理论依据。     

三氧化二砷与顺铂联用对肝癌HepG2细胞的作用

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)与顺铂(CDDP)联合对肝癌细胞HepG2的作用.方法 应用MTT法和细胞免疫组化酶法检测人肝癌HepG2细胞Bax,Bcl-2,Fas蛋白的表达情况.结果 As2O3与CDDP联合应用在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡,增强Bax,Fas的表达,下调Bcl-2的表达方面均较各自单用的作用明显增强.结论 As2O3与CDDP联合应用具有明显的协同抗肝癌作用,其主要机制可能为As2O3联合化疗能诱导肝癌细胞凋亡,与增强Bax,Fas的表达,下调Bcl-2的表达有关.     

RNA干扰HBx基因对肝癌细胞化疗效果的影响

目的：探讨RNA干扰技术和传统的化疗方法联合应用对肝癌细胞生长抑制作用的影响,并选择高效的治疗组合,研究其凋亡机制。方法：鉴定3组肝癌细胞——MHCC97-H(原肝癌细胞株),HK3细胞（转染空质粒的MHCC97-H细胞）和21543细胞（转染含HBx-shRNA质粒的MHCC97-H细胞）;RT-PCR检测RNA干扰对HBx mRNA沉寂作用,CCK8和TUNEL分别检测RNA干扰HBx后化疗药物对MHCC97-H肿瘤细胞生长的抑制及诱导细胞凋亡情况。结果：RT-PCR结果显示,与MHCC97-H细胞组比较,21543细胞的HBx mRNA水平下降约91%,HK3细胞HBx mRNA水平下降不明显;RNA靶向干扰HBx基因后的肝癌细胞（21543细胞）较原肝癌细胞（MHCC97-H细胞）和HK3细胞增殖明显减慢,而后两种细胞差别无统计学意义;3种不同细胞加用3种不同浓度的氟尿嘧啶(0~120 mg/L)、顺铂(0~32 mg/L)后细胞生长明显减慢并呈浓度依赖性,以RNA靶向干扰HBx基因后的21543细胞生长抑制最明显;相同浓度的氟尿嘧啶对3组不同肝癌细胞均可引起细胞凋亡,以21543细胞凋亡最明显。结论：RNA干扰HBx可明显抑制肝癌细胞的增殖,并增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性;RNA干扰HBx基因和化疗药物联合应用使肝癌细胞凋亡更明显,细胞增殖速度明显减慢。     

三氧化二砷对兔晶体上皮细胞增殖的影响

目的:体外试验研究三氧化二砷(As2O3)对兔晶体上皮细胞(RLECs)增殖的影响。方法:取第3代RLECs,分为正常组和加入不同浓度三氧化二砷的实验组,分别于作用24小时、72小时和5天后观察各组LECs的形态学改变,用MTT比色法测定As2O3对LECs的影响。结果:As2O3作用于LECs24小时的IC50为3.101μmol/L,72小时的IC50为1.743μmol/L,5天的IC50为1.094μmol/L。结论:As2O3为剂量依赖性和时间依赖性药物,对体外培养的LECs增殖有明显抑制作用。     

不同序贯的西妥昔单抗与化疗药物联合对HepG2和Bel-7402细胞的增殖抑制作用

【目的】观察不同序贯的西妥昔单抗（cetuximab）与化疗药物联合对人肝癌细胞系HepG2和Bel-7402的增殖抑制作用,并分析其意义。【方法】浓度递增的cetuximab和表柔比星、奥沙利铂、泰素、伊立替康四种化疗药物分别按照不同给药序贯联合作用于HepG2和Bel-7402细胞,使用细胞计数试剂盒CCK-8检测不同给药序贯的药物对HepG2和Bel-7402细胞的增殖抑制作用,利用生物学软件Calcusyn计算不同给药序贯时cetuximab和化疗药物的半数抑制浓度（IC50）的变化,计算其作用的协同系数（CI）。【结果】Cetuximab和化疗药物联用对HepG2和Bel-7402细胞的增殖抑制作用受给药序贯影响：cetuximab先于化疗药物给药,两者的IC50较单用时降低,但是CI值均大于1,两者之间为拮抗效应;cetuximab后于化疗药物给药,两者的IC50较单用时降低更为明显,且CI值均小于1,两者之间具有较明显的协同效应。【结论】Cetuximab与化疗药物联用对肝癌细胞的增殖具有协同抑制作用,较佳的给药序贯是化疗药物先于cetuximab给药,能获得明显的协同效应,这有助于临床用药时降低药物剂量,减少毒副作用。     

Effect of 5-fluorouracil (5-FU) Joint Arsenic Trioxide (As2O3) on Growth Inhibition of Liver Cancer Cell BEL-7402 During Hypoxia in Vitro

目的 探讨缺氧条件下,不同浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)联合0.5 μmol/L浓度三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞株BEL-7402生长抑制的影响.方法 用二氯化钴(CoCl2)诱导细胞培养的化学性缺氧条件,及四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定缺氧条件下不同浓度5-FU及5-FU联合As2O3对肝癌细胞BEL-7402的生长抑制作用.结果 在化学性缺氧条件下,不同浓度5-FU联合As2O3对肝癌细胞株BEL-7402生长抑制作用比单用5-FU有统计学差别(P﹤0.05),呈剂量-效应依赖关系.结论 在CoCl2诱导的化学缺氧条件下,非细胞毒剂量As2O3具有改善缺氧状态下5-FU对人肝癌细胞BEL-7402化疗敏感性下降的作用.     

PTEN基因逆转白血病多因素多药耐药机制探讨

目的 研究分析野生型PTEN基因对多柔比星(阿霉素,ADM)耐药人红白血病细胞系K562/ADM多药耐药(MDR)逆转的作用机制.方法 将携带野生型PTEN基因的腺病毒载体(Ad-PTEN-GFP)或空载体(Ad-GFP)感染ADM耐药的K562/ADM细胞,流式细胞术检测感染效率,在感染3d内联合应用不同浓度的ADM、阿糖胞苷(Ara-C)或三氧化二砷(As2O3),通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,根据IC50计算药物逆转倍数,观察PTEN基因对上述化疗药物MDR逆转作用.同时采用荧光定量PCR检测PTEN、NF-kB、MDR1、MDR相关蛋白(MRP)及凋亡相关基因Bcl-2、BcbxL及Bax水平变化,蛋白质印迹检测PTEN、Akt、p-Akt、P65水平变化.结果 以感染复数为200感染第3天后,Ad-PTEN-GFP感染与化疗药物联合作用组K562/ADM细胞增殖抑制率、凋亡率均高于Ad-GFP与化疗药物联合作用组(P＜0.05),PTEN感染能增加K562/ADM对ADM、Ara-C、As2O3的敏感性,逆转倍数分别为3.80、2.65、2.64.与Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP感染K562/ADM细胞3d后p-Akt与P65蛋白表达下调,NF-kB、MDR1、Bcl-2、Bcl-xL mRNA表达下调,Bax mRNA表达上调.结论 野生型PTEN基因可能通过抑制Akt信号转导通路进一步调控下游信号分子,通过下调NF-kB、MDR1、Bcl-2及上调Bax等多种信号分子逆转K562/ADM细胞的多药耐药.     

c-Myc反义寡核苷酸对人肝癌Bel-7402细胞增殖的双向调节作用

目的观察c-Myc反义寡核苷酸(c-Myc ASODN)对人肝癌Bel-7402细胞增殖的双重调节作用,探讨c-Myc基因的生物学功能.方法台盼兰拒染细胞计数,CCK-8细胞检测试剂盒检测各组细胞增殖抑制率,计算单纯黄连素组及合用c-Myc ASODN后IC50.结果单纯黄连素及c-Myc ASODN均能明显抑制细胞的增殖(P＜0.05),将黄连素合用c-Myc ASODN后,细胞增殖抑制率低于单用黄连素组,但仍高于c-Myc ASODN组.黄连素作用Bel-7402细胞的IC50值在合用c-Myc ASODN后增加1.42倍.结论c-Myc基因在Bel-7402细胞细胞生长环境良好时可促进细胞的生长,在细胞生长环境不利的情况下则诱导细胞的的凋亡,抑制细胞的生长.依据环境不同,对Bel-7402细胞增殖具有不同的调节作用,c-Myc ASODN通过下调c-Myc基因的表达,在不同的环境下亦表现出不同的生物学效应.c-Myc ASODN与黄连素合用能明显降低Bel-7402细胞对黄连素的敏感性.     

凋亡抑制因子反义寡核苷酸对肝癌细胞生物学作用

目的: 探讨survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞凋亡、增殖、化疗药物敏感性的影响. 方法: 设计合成特异性survivin的反义寡核苷酸(ASODN). 以高表达survivin基因的人肝癌细胞系(SMMC-7721)为靶细胞、ASODN为阻断剂,Western blot法检测细胞survivin表达情况, 通过MTT试验观察ASODN对该细胞系的生长抑制作用, 倒置显微镜观察细胞形态变化, 流式细胞仪分析细胞增殖周期, MTT法检测survivin表达抑制前后细胞对紫杉醇敏感性影响. 结果: ASODN明显抑制了SMMC-7721肝癌细胞的生长, 细胞分裂阻滞在分裂期的中期,并诱导细胞发生凋亡, 而各对照组细胞生长良好; 各ASODN药物组细胞凋亡指数明显高于各对照组(P<0.05)且细胞增殖指数明显低于各对照组(P<0.05); 紫杉醇药物组细胞IC50低于对照组(16.2±2.2) μg/L vs (35.5±4.3) μg/L, P<0.01. 结论: survivin ASODN能下调其蛋白表达, 诱导人肝癌细胞凋亡, 抑制细胞增殖,增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性.     

三氧化二砷抑制U266细胞增殖、诱导凋亡及与血管内皮生长因子表达的关系

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡的影响及与血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系.方法 四唑盐比色法(MTT)观察As2O3对U266细胞增殖的影响;缺口末端标记法(TUNEL)分析As2O3对U266细胞凋亡的影响;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测2 μmol/L AS2O3不同处理时间后U266细胞VEGF mRNA表达的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测As2O3不同浓度不同处理时间对U266细胞VEGF蛋白表达的变化. 结果 (1)As2 Q3明显抑制U266细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)为2 μmol/L;(2)As2O3能诱导U266细胞凋亡,呈剂量依赖性;(3)As2O3(2,5,10μmol/L)分别处理72 h后细胞培养上清中VEGF量呈剂量依赖性减少;(4)考虑细胞增殖对VEGF分泌的影响,2 μmol/L As2O3处理组的上清VEGF量与对照组的差别无统计学意义,RT-PCR显示2μmol/L As2O3处理的U266细胞个体VEGF mRNA的表达无变化.结论 As2O3可以诱导骨髓瘤细胞凋亡,抑制其增殖.As2O3可以通过抑制细胞增殖、诱导凋亡,减少肿瘤负荷,减少VEGF总量,但是不改变细胞个体VEGF的表达.     

缺氧时三氧化二砷对5-氟尿嘧啶抗肝癌细胞株BEL-7402敏感性的影响

目的探讨缺氧条件下,不同浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)联合0.5μmol/L浓度三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞株BEL-7402生长抑制的影响。方法用二氯化钴(CoCl2)诱导细胞培养的化学性缺氧条件,及四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定缺氧条件下不同浓度5-FU及5-FU联合As2O3对肝癌细胞BEL-7402的生长抑制作用。结果在化学性缺氧条件下,不同浓度5-FU联合As2O3对肝癌细胞株BEL-7402生长抑制作用比单用5-FU有统计学差别(P﹤0.05),呈剂量-效应依赖关系。结论在CoCl2诱导的化学缺氧条件下,非细胞毒剂量As2O3具有改善缺氧状态下5-FU对人肝癌细胞BEL-7402化疗敏感性下降的作用。