1,25二羟维生素D3对乳腺癌细胞株生长及调亡的影响

目的 研究１,２５二羟维生素Ｄ３〖１,２５（ＯＨ）２Ｄ３〗对乳腺癌细胞株ＭＣＦ－７生长及凋亡的影响。方法 采用四唑氮蓝比色（ＭＴＴ）法检测细胞增殖,光镜和电镜形态学观察,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位酶标记（ＴＵＮＥＬ）法计数凋亡细胞,免疫印迹法检测ｂｃｌ－２蛋白表达。结果 １０＾－７ｍｏｌ／Ｌ的１,２５（ＯＨ）２Ｄ３就可以抑制ＭＣＦ－７增生,改变细胞周期时相分布,     

1，25二羟维生素D3对乳腺癌细胞株生长及凋亡的影响

目的　研究１ ，２５ 二羟维生素 Ｄ３［１ ，２５（ Ｏ Ｈ）２ Ｄ３］ 对乳腺癌细胞株 Ｍ Ｃ Ｆ７ 生长及凋亡的影响。　方法　采用四唑氮蓝比色（ Ｍ Ｔ Ｔ） 法检测细胞增殖，光镜和电镜形态学观察，流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率，末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位酶标记（ Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ） 法计数凋亡细胞，免疫印迹法检测ｂｃｌ２ 蛋白表达。　结果　１０ － ７ ｍｏｌ／ Ｌ 的１ ，２５（ Ｏ Ｈ）２ Ｄ３ 就可以抑制 Ｍ Ｃ Ｆ７ 增生，改变细胞周期时相分布，致 Ｇ０／ Ｇ１ 期阻滞，加强细胞毒性化疗药阿霉素（ Ａｄｒ） 的作用，促进细胞凋亡，下调ｂｃｌ２ 蛋白表达。　结论　１ ，２５（ Ｏ Ｈ）２ Ｄ３ 可以作为细胞调亡诱导剂成为新一类乳腺癌激素治疗药。     

blc—2蛋白在肝细胞肝癌发生过程中的表达及其与肝细胞 …

为探讨肝细胞肝癌发生过程中ｂｃｌ－２蛋白的变化规律及与细胞凋亡变化的关系,运用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化方法检测石蜡保存的肝细胞肝癌组织（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＨＣＣ）肝硬变组织（ｌｉｖｅｒｃｉｒｒｈｏｓｉｓ,ＬＣ）和正常肝组织（ｎｏｒｍａｌｌｉｖｅｒ,ＮＬ）中细胞凋亡发生率和ｂｃｌ－２的表达。结果 从ＮＬ,ＬＣ到ＨＣＣ组织,细胞凋亡活性出现增强,ｂｃｌ－２蛋白的表达逐渐下降     

抗bcl-2核酶基因转染促进GRC-1肾癌细胞凋亡的研究

目的　观察抗ｂｃｌ２ 核酶促进ＧＲＣ１ 肾癌细胞凋亡的情况。　方法　体外构建抗ｂｃｌ２核酶基因逆转录病毒真核表达载体ｐＤＯＲＲＺ,用脂质体介导的ＤＮＡ 转染法导入ＧＲＣ１ 细胞,用ＤＮＡ 和ＲＮＡ 打点杂交、流式细胞仪（ＦＣＭ） 、电镜及光镜观察。　结果　核酶（ ＲＺ） 基因成功导入ＧＲＣ１ 细胞并在其内表达,转基因后ＧＲＣ１ 细胞的ｂｃｌ２ 蛋白量明显减少,ＦＣＭ 检测转基因后ＧＲＣ１ 细胞周期Ｇ１ 期前出现了典型的亚２ 倍体凋亡峰,电镜下观察ＧＲＣ１ 细胞出现典型的凋亡现象。　结论　人工合成的抗ｂｃｌ２ 核酶基因能够成功地导入ＧＲＣ１ 肾癌细胞并抑制ｂｃｌ２ 蛋白的合成,促进ＧＲＣ１ 细胞的凋亡。     

bcl-2和Fas/FasL系统在肝癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨ｂｃｌ－２和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统在肝癌细胞凋亡过程中的作用。方法 应用免疫组织化学方法检测３６例肝癌和４９例肝硬化组织中ｂｃｌ－２、Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达,用ＴＵＮＥＬ法检测肝中的细胞凋亡。结果 肝癌组织与肝硬化组织比较, 细胞明显减少;肝癌和肝硬化组织中ｂｃｌ－２的表达率分别为１６．６６％和６７．３４％;Ｆａｓ的表达率分别为５２．７７％和７３．４７％;ＦａｓＬ的表达率分别为７２．２２％     

C—myc,Bcl—2基因对细胞凋亡的调控及其在肾脏病中的意义

Ｃ－ｍｙｃ基因是ｍｙｃ原癌基因家族中的一员，能诱导细胞凋亡，ｂｃｌ－２基因是原癌基因ｂｃｌ－２家族中最受关注的基因之一，具有抑制细胞凋亡的作用。Ｃ－ｍｙｃ及ｂｃｌ－２基因表达及其对细胞凋亡的调控参与原发性与继发性肾小球肾炎、肾囊性疾病、肾脏肿瘤及移植肾排斥反应的发生、发展。对Ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２基因的进一步探讨在肾脏病领域中的具有重要意义。     

脂质体介导c-myc基因反义寡核苷酸对人肝癌细胞的生物学影响

目的 探讨应用脂质体（ＬＲ）介导ｃ－ｍｙｃ基因反义寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ）对人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１（７７２１细胞）的生物学影响。方法 利用１ｍｇ／Ｌ ＬＲ包裹２μｍｏｌ／Ｌ ｃ－ｍｙｃ ＡＳＯＤＮ转染于培养的人肝癌细胞,观察其对瘤细胞的作用。结果 四唑盐比色实验（ＭＴＴ）法测定ＬＲ－ＡＳＯＤＮ组作用４８ｈ对瘤细胞生长抑制率（５５％）较无ＬＲ的ＡＳＯＤＮ组的生长抑制率（１５％）显著提高（Ｐ〈０．     

C-myc、Bcl-2基因对细胞凋亡的调控及其在肾脏病中的意义

Ｃ－ｍｙｃ基因是ｍｙｃ原癌基因家族中的一员,能诱导细胞凋亡,ｂｃｌ－２基因是原癌基因ｂｃｌ－２家族中最受关注的基因之一,具有抑制细胞凋亡的作用。Ｃ－ｍｙｃ及ｂｃｌ－２基因表达及其对细胞凋亡的调控参与原发性与继发性肾小球肾炎、肾囊性疾病、肾脏肿瘤及移植肾排斥反应的发生、发展。对Ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２基因的进一步探讨在肾脏病领域中具有重要意义     

bcl-w、bcl-x基因表达与肝细胞癌临床病理特征的关系

肿瘤的生物学特性与癌细胞的过度增殖有关,更与癌细胞的凋亡减少有关。ｂｃｌ－ｗ和ｂｃｌ－２家族的重要成员,前者编码产物具有抗细胞凋亡功能＾〔１〕。迄今有关ｂｃｌ－ｗ基因对肿瘤细胞凋亡调控的研究文献报道甚少;后者存在两种片段,ｂｃｌ－ｘＬ有抗凋亡作用,ｂｃｌ－ｘＳ具促凋亡活性＾〔２〕。本研究采用免疫组织化学方法检测ｂｃｌ－ｗ和ｂｃｌ－ｘ在肝细胞癌（ＨＣＣ）的表达及意义。     

凋亡相关基因bcl—2和bax胆管癌组织中表达的意义

目的 探讨细胞凋亡抑制基因ｂｃｌ－２和凋亡促进基因ｂａｘ在胆管癌组织中的表达。方法 应用且化方法对２０例胆管癌（ＣＨＣ）和７例先天性胆总管囊肿（ＣＣＣ）组织中ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白进行检测。结果 ２０例ＣＨＣ中有１例ｂｃｌ－２蛋白表达阳性（５％）,７例ＣＣＣ中ｂｃｌ－２均表达阴性。２０例ＣＨＣ中有１１例ｂａｘ蛋白表达生（５５％）,７例ＣＣＣ中仅１例表达阳性（１４．２９％）。两是差异有显著意义（Ｐ〉     

胆囊收缩素对胆管癌细胞凋亡的调节作用及机制

目的 探讨胆囊收缩素（CCK）对胆管癌细胞凋亡的调节作用及机制。方法 采用TUNEL染色、定量RT-PCR和反义寡核苷酸技术分别研究CCK-8S对QBC939人胆管癌细胞系诱发性凋亡指数（AI）和bcl-2/bax mRNA表达的影响、以及bcl-2在CCK抑制凋亡中的作用。结果CCK-8S组 AI显著降低、bcl-2mRNA表达显著增强,同时加入CCK受体拮抗剂L364.718或L365.206可拮抗;反义bcl-2寡核苷酸转染能逆转CCK-8S对凋亡的抑制作用。结论CCK能提高凋亡阈值、抑制胆管癌细胞凋亡,其机制与上调bcl-2基因表达有关。     

Chemosensitization of breast carcinoma cells with the use of bcl-2 antisense oligodeoxynucleotide

This study was designed to observe whether the rates of apoptosis induced in the breast cancer cell line MCF-7 by 5-fluorouracil (5-FU) could be enhanced by transfecting bcl-2 antisense oligonucleotide (ASODN). In our experiment, bcl-2 ASODNs and control ODNs including untreated control, sense ODN and scrambled ODN, were transfected into MCF-7 cells. Changes in expression of the bcl-2 gene were examined by Western blot; cell growths were detected by MTT assay, and apoptosis rates were detected by flow cytometry (FCM). Expression of bcl-2 protein after transfection of bcl-2 ASODN was significantly lower than control ODNs. Moreover, incubation of MCF-7 with bcl-2 ASODN prior to 5-FU treatment caused remarkable loss of viable cells compared with all other control ODNs (P < 0.01). FCM showed the apoptosis rates for ASODN, untreated control, sense ODN and scrambled ODN (29.8 +/- 7.4)%, (8.0 +/- 2.3)%, (15.0 +/- 5.1)% and (16.5 +/- 7.1)%, respectively. Compared with control ODNs, ASODN achieved the strongest effect in terms of enhancing apoptosis (P < 0.01). These results suggest that combining bcl-2 ASODN with 5-FU led to synergistic cytotoxicity.     

三氧化二砷抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长及其作用机制的探讨

摘要：目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人乳腺癌细胞系MCF 7细胞裸鼠背部皮下移植瘤生长的抑制作用及其作用机制。方法 建立BALB/C nu/nu裸鼠MCF 7人乳腺癌皮下移植瘤模型，以不同浓度的As2O3行腹腔内注射，与5 氟脲尿嘧啶（5 FU）治疗进行对比，观察移植瘤的瘤重及瘤重抑制率。通过流式细胞仪检测移植瘤的凋亡情况，免疫组织化学法检测bcl 2，Fas基因表达水平的变化，并进行血常规及骨髓涂片检查。结果 5 FU（8mg/kg）组，As2O3 （4mg/kg）组，As2O3（8mg/kg）组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长，抑瘤率分别为38.33%，51.42%和62.43%；As2O3对移植瘤的生长抑制作用明显强于5 FU，差异有显著性 (P<0.01)。两种浓度As2O3组MCF 7细胞凋亡率明显高于5 FU组。各实验组乳腺癌细胞存在G2/M期阻滞，在G1峰前出现明显的凋亡峰。移植瘤组织中bcl 2蛋白阳性细胞数明显减少，Fas蛋白阳性细胞数明显增加。血常规及骨髓涂片计数显示As2O3实验组未见造血系统功能受抑，与5 FU组相比较，差异有显著性(P<0.05)。结论 As2O3可明显抑制乳腺癌移植瘤的生长，诱导移植瘤MCF 7细胞凋亡；其作用的机制可能是下调bcl 2基因表达，上调Fas基因表达。     

自稳定反义IGF1R基因片段对膀胱癌细胞的影响

目的　探讨针对胰岛素样生长因子 1受体 (IGF1R )基因的自稳定反义脱氧寡核苷酸(ODN)对膀胱癌细胞的影响。　方法　采用RT -PCR、Westernblot、MTT试验、流式细胞仪对经反义ODN作用后的T2 4膀胱癌细胞进行动态分析。　结果　自稳定反义ODN在血清培养基中 2 4h内均保持稳定状态 ,而硫代反义ODN 4h后基本降解。自稳定反义ODN可有效降低T2 4膀胱癌细胞IGF1R基因及蛋白表达 ,增强膀胱癌细胞对丝裂霉素的敏感性及凋亡易感性。　结论　IGF1R基因的自稳定反义ODN可能是一种治疗膀胱肿瘤的新途径     

紫龙金对前列腺癌细胞系DU-145的体外作用

目的　探讨中药紫龙金 (ZLJ)对雄激素非依赖型人前列腺癌细胞系DU 14 5的体外作用及其机制。方法　应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法、软琼脂集落生长试验和流式细胞术测定ZLJ对DU 14 5的增殖抑制、集落生长抑制、周期阻滞和诱导凋亡作用 ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和Westernblot方法检测对凋亡相关基因 /蛋白bcl 2和bax ,抑癌基因 /蛋白p16表达的影响。结果　ZLJ具有时间和剂量依赖性增殖抑制、G0 /G1期阻滞和诱导凋亡作用 ,作用 72hIC50 为 0 .42g/L ,ZLJ 0 .1g/L作用 14d对DU 14 5细胞集落生长抑制率为 87.9% ,ZLJ 0 .5 g/L作用 2dG0 /G1期细胞比例从 41.3 0 %增高至 76.70 %。ZLJ可以下调bcl 2基因 /蛋白 ,上调bax和p16基因 /蛋白的表达。 结论　ZLJ可能通过抑制DU 14 5细胞的集落生长、增殖抑制、G0 /G1期阻滞、诱导凋亡、下调bcl 2基因 /蛋白 ,上调bax和 p16基因 /蛋白表达等作用机制发挥抗肿瘤作用。     

Bcl-2反义寡核苷酸诱导增生性瘢痕细胞凋亡的研究

目的：探讨反义寡核苷酸(ASODN)对bcl-2基因的表达调控及诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用。方法：采用RT-PCR法和流式细胞术检测ASODN对bcl-2蛋白和mRNA表达量的调控；通过MTT法比较两条人工合成ASODN直接作用及脂质体D0’FAt，转染对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制效果；用相差显微镜、电子显微镜观察bcl-2ASODN诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡效果。结果：ASODN降低bcl-2蛋白和mRNA表达；两条ASODN抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用呈浓度和时间依赖性，且靶位点于mRNA蛋白编码区(ASODN2)和以DOTAP为载体的ASODN对成纤维细胞的增殖抑制效果最佳。Bcl-2ASODN作用于成纤维细胞后，成纤维细胞缩小、凋亡小体和染色质浓缩等特征性改变出现。结论：bcl-2ASODN能抑制bcl-2mRNA和蛋白表达，诱导成纤维细胞凋亡。     

反义K-ras基因对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨反义K-ras癌基因对胰腺癌细胞增殖和凋亡及Fas/FasL、Bcl-2、Bax表达的影响.方法 将重组逆转录病毒载体pLXSN转染包装细胞PT-67,获得重组逆转录病毒.在细胞和动物水平将该重组逆转录病毒分别感染PC-3和BxPC-3胰腺癌细胞,经G418筛选获得稳定细胞系,应用MTT、流式细胞仪和免疫组化法分别研究其增殖、凋亡及其相关基因表达情况.结果 成功制备含反义K-ras基因的重组逆转录病毒.感染含反义K-ras基因重组病毒后,胰腺癌PC-3细胞和移植瘤(有K-ras基因第12密码子点突变GGT→GTT)增殖受到抑制,G<,0/1>期细胞增加而S期细胞明显减少,细胞凋亡增加.免疫组化显示含反义K-ras癌基因逆转录病毒感染后PC-3细胞Bax/Bcl-2比值升高,Fas表达上调.结论 反义K-ras基因可使胰腺癌细胞及移植瘤增殖受到抑制,并可通过上调Bax/Bcl一2比值和(或)促进Fas表达诱导细胞凋亡.     

基因靶向抑制反义生存素对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨反义生存素（Survivin）脂质体复合物对脑胶质瘤细胞增殖和凋亡效应的影响及机制，为脑胶质瘤Survivin基因靶向治疗提供理论依据。方法用脂质体介导Survivin反义寡核苷酸转染脑胶质瘤细胞系U251细胞；Western印迹试验检测Survivin表达水平变化；噻唑蓝（MTT）法测量细胞生长情况；流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位变化；电镜倒置显微镜观察细胞形态学变化；应用激光共聚焦显微镜免疫荧光分析法评价脂质体反义复合物对Survivin蛋白的影响。结果反义Survivin脂质体复合物能有效下调Survivin表达水平。肿瘤细胞凋亡率随转染时间延长而逐渐递增。并出现凋亡形态学变化。免疫荧光分析中标记有绿色荧光染色的Survivin蛋白分子在未转染的细胞浆中清晰可见。并呈斑点状分布；而在转染细胞中几乎没有发现。结论靶向抑制Survivin基因在脑胶质瘤未来治疗中有良好的应用前景。