CK20 mRNA在大肠癌病人外周血中的表达及其临床意义

目的 探讨大肠癌病人外周血中ＣＫ２０ ｍＲＮＡ的表达及其临床意义。方法 以ＣＫ２０ ｍＲＮＡ为靶基因,运用逆转录－聚合酶链反应方法（ＲＴ－ＰＣＲ）,检测４７例Ｄｕｋｅｓ分期结直肠癌病人及肝转移病人外周血中的大肠癌细胞ＣＫ２０ ｍＲＮＡ的表达。结果 ２０例大肠癌组织标本,均有ＣＫ２０ ｍＲＮＡ的表达;２０例正常人外周血中均无ＣＫ２０ｍＲＮＡ表达;Ｄｕｋｅｓ Ｂ,Ｃ,Ｄ期病人外周血中ＣＫ２０ｍＲＮＡ阳     

大肠癌患者门静脉血p53和k-ras基因突变的检测及临床意义

目的 研究大肠癌患者门静脉血中基因突变检测的可行性,探讨门静脉血微转移癌细胞与大肠癌肝转移的关系。方法 以聚合酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）／银染技术,检测55例大肠癌门静脉血中p53和k-ras基因的突变。结果 55例患者门静脉血中检出基因突变阳性22例（40％）,阳性检出与Dukes分期、肝转移显著相关。随访发现门静脉血基因突变阳性者,术后发生肝转移机会增加。结论 门静脉血内微转移癌细胞的基因突变检测有助于判断大肠癌恶性程度和患者预后,对早期诊断或预测大肠癌肝脏微小转移有一定的临床价值。     

大肠癌患者骨髓微转移的基因研究

目的 探讨大肠癌患者骨髓中微转移基因检测的意义。方法 应用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）／银染技术,检测５１例大肠癌患者手术前、后不同时间骨髓中ｐ５３和Ｋ－ｒａｓ基因的突变状况。结果 ５１例患者术前骨髓中基因突变阳性者１９例,阳性率３７．２５％。阳性检出与Ｄｕｋｅ’ｓ分期、淋巴转移显著相关。术后经２～３个疗程的化疗后,１９例基因突变阳性的患者中１１例转阴。结论 大肠癌患者骨     

粘附分子的表达与大肠癌转移相关性的分析

目的 检测粘附分子ＣＤ４４ｖ６、Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达与人大肠癌转移的关系。方法 应用免疫组化方法,测定３２例病理证实的大肠癌标本中ＣＤ４４ｖ６和Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ。结果 ＣＤ４４ｖ６表达与肿瘤分型、Ｄｕｋｅｓ分期及ＴＮＭ分期无明显相关性,但与淋巴结转移和远处转移明显相关。Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在大多数正常粘膜呈阳性表达,而在大肠癌标本中阳性率仅为４９．６％,在能转移的病例中阳性率为２０％。结     

ras蛋白在大肠癌组织中表达的临床意义

ｒａｓ基因突变常导致ｒａｓｍＲＮＡ转录加速，ｒａｓ蛋白合成增加。ｒａｓ蛋白过度增多，是细胞发生转化、癌变的重要原因之一。作者用免疫组织化学方法检测９２例大肠癌组织中ｒａｓ蛋白表达，用时序检验方法分析ｒａｓ蛋白表达对大肠癌生存率的影响。ｒａｓ蛋白在大肠癌组织中表达率为６８．４８％，表达率与大肠癌Ｄｕｋｅｓ分期、癌细胞分化程度相关。ｒａｓ蛋白免疫反应阳性大肠癌患者生存率低于阴性大肠癌患者。本研究表明ｒａｓ蛋白表达与大肠癌生物学行为及大肠癌预后相关。     

大肠癌术后血路播散的动态追踪监测

目的 研究大肠癌血路播散在监测大肠癌患者术后复发转移中的意义。方法 使用靶向ＣＫ２０的ＲＴ－ＰＣＲ技术,对５８例大肠癌患者外周血和骨髓微转移癌细胞在术前和术后不同时间进行了动态检测。结果 术后肿瘤无复发转移的大肠癌患者ＣＫ２０的阳性率（１６.３％）显著低于复发转移者（８８.９％）。血路播散有四种情况：①术后ＣＫ２０检测曾有一度转阴;②ＣＫ２０检测持续阳性;③ＣＫ２０在术后才转阳;④ＣＫ２０术后一直阴性。死亡的６例患者术前ＣＫ２０检测均为阳性。结论 大肠癌血路播散在术后复发转移中起重要作用,动态追踪检测大肠癌ＣＫ２０的变化有助于预测肿瘤的复发转移、术前存在血路播散者预后差。     

大肠癌组织端粒酶活性的检测及意义

目的：探讨端粒酶活化在大肠癌发生发展中的作用。方法：采用ＰＣＲ技术对３２例手术切除大肠癌及其癌旁组织及４例大肠腺瘤的端粒酶活性进行检测。结果：３２例大肠癌组织有２５例检出端粒酶活性，阳性率为７８．１％。２例绒毛状腺瘤检出端粒酶活性，２例管状腺瘤为阴性。端粒酶活化与肿瘤部位、大小、组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及Ｄｕｋｅｓ分期无显著相关。结论：检测大肠癌组织端粒酶活性对阐明大肠癌的发病机理、癌变危     

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大肠癌早期诊断水平有了明显的提高 ,获得治愈性切除的病例逐渐增加。 5年生存率达 40 %～ 5 0 % ,但复发率仍高达 30 %～ 5 0 %。如何预防和治疗大肠癌术后复发与转移是 2 1世纪亟待研究解决的课题。1　大肠癌复发和转移的类型　　切缘阳性或癌细胞在吻合口种植可导致吻合口复发。淋巴结清扫不彻底可导致局部复发。癌细胞污染腹腔、腹壁切口、造口或引流口可造成局部种植。大肠癌转移包括腹膜广泛种植转移、肝脏转移和肺转移等。2　预防策略2 1　早期诊断　　大肠癌术后复发率与Ｄｕｋｅｓ分期关系密切 ,ＤｕｋｅｓＡ期大肠癌根治性切除术…     

P53蛋白在大肠癌组织中表达的预后价值

用Ｐ５３单克隆抗体ＰＡｂ１８０１对９２例大肠癌组织中Ｐ５３蛋白表达进行检测，同时序检验方法分析Ｐ５３蛋白表达与大肠癌的预后关系，５７．６１％大肠癌有Ｐ５３蛋白表达，Ｐ５３蛋白表达与大肠癌Ｄｕｋｅｓ分期相一致。生存资料分析显示Ｐ５３蛋白阳性大肠癌生存率低于Ｐ５３蛋白阳性大肠癌生存率，结果表明Ｐ５３蛋白在大肠癌组织中表达与大肠癌预后相关，是预后不良的标志。     

大肠癌患者腹腔微量游离癌细胞的研究

目的 研究大肠癌患者腹腔渗液中微量癌细胞的敏感检测方法及临床意义。方法 用CEA mRNA RT-PCR和免疫组化方法对72例大肠癌患者腹腔渗液进行了癌细胞检测。结果 72例大肠癌患者腹腔渗液中CEA mRNA RT-PCR和免疫组化法检出的阳性率分别为33．3％和18．1％（P＜0．05）。大肠癌患者腹腔渗液中CEA mRNA RT-PCR阳性检出与肉眼腹膜播散、浆膜受侵、淋巴结转移、肝转移和癌侵犯肠管周径显著相关（P＜0．05）,而免疫组化的阳性检出仅与肉眼腹膜播散和肝转移2项病理特征显著相关（P＜0．05）。结论 CEA mRNA RT-PCR检测大肠癌患者腹腔渗液中微量癌细胞敏感性高、特异性强,优于免疫组化法,大大提高了大肠癌隐匿性腹膜播散的检出率,帮助建立癌转移的早期诊断。     

大肠癌术中门静脉血CK20 mRNA检测临床意义的探讨

目的检测大肠癌患者门静脉和外周血中细胞角蛋白(CK20)mRNA,探讨它作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志的临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测63例大肠癌患者术中抽取的门静脉和外周血中CK20 mRNA和癌胚抗原(CEA)表达的阳性率,并对所测结果进行分析和比较。结果Ducks A,B期和Ducks C,D期患者门静脉血CK20 mRNA阳性表达均明显高于外周血,差异有统计学意义。随着病情进展,门静脉和外周血中CK20 mRNA表达均显著提高(65% vs 96%;33% vs 54%),但仅门静脉结果差异有统计学意义(P<0.005,χ2=8.65)。比较不同时期不同部位CK20 mRNA与CEA表达差异时,除Ducks A,B期患者门静脉血中CK20 mRNA阳性率较CEA阳性率为高且具有统计学意义外,Ducks C,D期门静脉组和各期外周血组中CK20 mRNA阳性率和CEA阳性率差异无统计学意义。结论大肠癌患者门静脉中CK20 mRNA含量高于外周血,门静脉和外周血中CK20 mRNA的阳性表达可随病情进展而增加,因此可作为大肠癌肿瘤细胞血行播散标志,应用于手术后预后判断。     

门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测对早期诊断结直肠癌肝转移的意义

目的动态检测结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况，探讨其对早期诊断结直肠癌肝转移的临床意义。方法40例结直肠癌患者随机分为两组（各20例），实验组术中留置门静脉埋植式给药装置（implantable drug delivery system，IDDS），术后常规随访加用荧光定量RT—PCR方法动态检测门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况；对照组常规术后随访。结果两组病例术后发生肝转移的时间和比例无显著性差异，发生肝转移的病例中，在影像学检查检出病灶的同时，几乎均有外周血CEA的增高，3例未发生肝转移的病例也可见外周血CEA的增高，实验组发生肝转移的病例则在影像学检查检出病灶之前3-9月即有门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达阳性。结论门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测比外周血CAE检测和影像学检查更敏感、特异性更高，是早期诊断结直肠癌肝转移的有效方法。     

联合检测大肠癌组织中血管内皮生长因子与门静脉血细胞角蛋白20mRNA的临床意义

目的探讨大肠癌病人肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）蛋白和门静脉血细胞角蛋白20（cytokeratin,CK20）mRNA作为血行播散标志物的临床意义。方法RT-PCR技术检测63例大肠癌病人门静脉血CK20mRNA表达阳性率,免疫组织化学方法检测肿瘤标本VEGF蛋白的表达。结果随着病情由Dukes A、B期向Dukes C、D期进展,门静脉血CK20 mRNA表达的阳性率由64．9％升高到96．2％（P〈0．01）。高、中分化肿瘤组织VEGF蛋白阳性率为50．0％,低、未分化时升高到92．3％（P〈0．01）。CK20 mRNA与VEGF作为单项指标测定时,阳性率分别为77．8％和58．7％,联合检测时阳性率显著升高（92．1％）。结论大肠癌病人门静脉血中CK20 mRNA和肿瘤组织VEGF作为衡量大肠癌浸润能力的指标,二者表达分别与Dukes分期和肿瘤恶性程度的关系密切。联合检测二者时,敏感性显著提高,可弥补单项指标检测的不足,值得在临床上推广。     

CK19/20检测对结直肠癌微转移的诊断意义

目的 探讨 CK19/20mRNART-PCR检测对结直肠癌微转移的诊断意义。方法 采用RT-PCR逆转录多聚酶链反应）方法检测42例结、直肠癌患者及对照组6例非恶性病变腹部手术患者骨髓血、门静脉血和外周血CK19mHNA及 CK20 mRNA的表达。结果 对照组6例患者无 CK19及 CK20阳性表达,CK19及CK20在42例结、直肠癌患者骨髓血、门静脉血及外周血中阳性表达分别为24/42、21/42、11/42及27/42、18/42、11/42,两间无显著差异（P>0.05）,骨髓和门静脉中表达比外周血高（P<0.01）,Dukes　C 期患者表达高于Dukes A、B期（P<0.05）。结论 CK19、CK20的RT-PCR检测是较敏感和特异的结、直肠癌微小转移指标,阳性表达患者有较高发生远处转移的危险。     

大肠癌患者外周血中癌细胞检测的临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血微转移的检测及临床意义。方法以CK20非同位素RT．PCR方法,检测54例大肠癌患者术前和术后不同时间外周血中结肠癌细胞。结果54例病人外周血中查出CK20阳性表达32例,阳性率59．63％,CK20阳性检出与Duke’s分期、淋巴转移存在差别有显著性。术后3天内外周血CK20阳性检出较术前多出3例,术后早期短程化疗结束后16例转阴。结论大肠癌在早期就可能已累及全身,外周血中CK20的检测可帮助综合判断疾病恶性程度及患者预后,为指导辅助化疗提供了理论依据。术后早期短程化疗对控制大肠癌微转移具有一定的作用。     

结直肠癌早期肝转移的预测

目的研究CK20 mRNA、CD44v6、血管内皮生长因子（VEGF）与结直肠癌肝转移的关系,探讨临床预测结直肠癌早期肝转移的有效的客观指标。方法应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测50例结直肠癌患者回流门静脉血中CK20 mRNA,并同时应用免疫组织化学方法测定结直肠癌癌组织中CD44v6、VEGF的表达;并与良性病变对照组10例和正常组织对照组10例比较。结果结直肠癌患者门静脉血CK20 mRNA;癌组织中CD44v6、VEGF表达阳性率明显高于良性病变对照组（P〈0．01）和正常对照组（P〈0．01）;结直肠癌组织中CIM4v6及VEGF的表达与门静脉血中CK20 mRNA的表达有显著相关性（r．=0．933,r2=0．906,P〈0．05）;同时肝转移组CK20 mRNA、CD44v6、VEGF阳性表达率均高于非肝转移组（P〈0．05）。结论联合检测CD44v6、VEGF及CK20 mRNA预测结直肠癌肝转移,可提高预测的灵敏度及特异性,对于结直肠癌早期肝转移监测具有较高的临床价值。     

胃癌阻断新技术降低癌细胞血行转移的临床研究

目的　评价胃癌阻断技术降低胃癌门静脉血内癌细胞播散的效果。方法　 2 3例胃癌患者 ,8例术中未采用胃癌阻断技术者为常规手术组 ,15例采用胃癌阻断技术者为阻断组 ,术前、术中抽门静脉血及阻断区域胃网膜静脉弓内静脉血 ,应用RT -PCR技术测定静脉血内CK19mRNA表达情况。结果　切除胃癌病灶之前 ,门静脉血内CK19mRNA的总阳性率为 34 7% ( 8/ 2 3) ,常规组和阻断组的阳性率分别为 37 5 % ( 3/ 8)和 33 3% ( 5 / 15 ) ;术中牵拉胃癌病灶时 ,常规组门静脉血CK19mRNA的阳性率为 87 5 % ( 7/ 8) ,而阻断组的阳性率为 6 7% ( 1/ 15 ) ,两组差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;阻断组 15例患者癌灶阻断区域网膜血管弓内静脉血CK19mRNA均阳性。结论　术中采用胃癌阻断技术能有效的阻断胃癌细胞播散 ,防止手术操作引致的癌细胞远处转移     

检测细胞角蛋白19和20对结直肠癌微转移的诊断意义

目的探讨检测细胞角蛋白19（CK19）和CK20的表达对结直肠癌微转移的诊断意义。方法采用RT-PCR方法检测44例结直肠癌患者（结直肠癌组）及18例非恶性病变腹部手术患者（良性病变组）门静脉血和外周血CK19和CK20的表达。结果良性病变组患者门静脉血和外周血均无CK19或CK20阳性表达。结直肠癌组患者外周血和门静脉血中CK19和（或）CK20均阳性表达者34例（77．3％）。与良性病变组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌组外周血CK19和CK20的阳性表达率分别为36．4％和52．3％．门静脉血则分别为59．1％和72．7％,高于外周血的阳性表达率（P〈0．05）：Ⅲ期结直肠癌患者CK19和（或）CK20的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P〈0．05）。外周血CK19和（或）CK20阳性表达者术后转移或复发率61．5％,明显高于仅在门静脉血中CK19和（或）CK20阳性者的25．0％（P〈0．05）。结论外周血和门静脉血中CK19和CK20的RT—PCR检测是判断结直肠癌患者有无血行微转移的敏感和特异性诊断方法之一。     

大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达及其意义

目的　探讨大肠癌患者外周血CK2 0mRNA的表达及其意义。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 4 2例大肠癌患者术前、术后外周血及 2 0例大肠癌患者新鲜癌组织标本中CK2 0mRNA的表达 ,另以 2 0例健康成年自愿者作对照。结果　 4 2例大肠癌患者外周血CK2 0mRNA呈阳性表达者术前为 19例(45 .2 4 % ) ,术后为 14例 (33.33% ) ;2 0例大肠癌患者新鲜癌组织中CK2 0mRNA表达均为阳性。而正常对照组2 0例外周血CK2 0mRNA表达均为阴性。且大肠癌外周血CK2 0mRNA阳性表达与组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ,但与有无淋巴结转移、肝转移及Dukes分期有关 (P<0 .0 5 )。结论　检测外周血中CK2 0mRNA表达将有助于大肠癌的早期诊断、预后的判断及治疗方案的制定。     

腹腔渗液CK20 mRNA检测对指导结直肠癌腹腔化疗的意义

目的　研究腹腔渗液CK2 0mRNA的表达对指导结直肠癌腹腔转移化疗意义。方法　采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,对 5 0例结直肠癌进行腹腔渗液CK2 0mRNA测定。结果腹腔渗液CK2 0mRNA阳性表达与腹腔转移之间存在着显著相关性。结论　检测腹腔渗液中的CK2 0mRNA对于预测结直肠癌腹腔转移和指导术后治疗具有重要参考价值