P33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨抑癌基因p33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其与突变型P53蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶复合物（SP）方法,检测64例膀胱移行细胞癌组织标本中P33^ING1b、突变型P53蛋白的表达,并与15例正常膀胱黏膜组织进行对照研究。结果64例膀胱移行细胞癌组织中,P33^ING1b蛋白的阳性表达率为64.06%,而正常膀胱黏膜组织中P33^ING1b蛋白阳性表达率为93.33%。P33^ING1b蛋白的表达与膀胱移行细胞癌的WHO肿瘤分级有相关性。根据Spearman相关分析表明P33^ING1b蛋白表达与P53蛋白表达正相关（P〈0.05）。结论P33^ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达下降,可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,p33ING1b与p53基因具有协同作用,同时检测P33^ING1b与P53的表达水平,将有助于膀胱移行细胞癌的诊断与治疗。     

膀胱癌组织中Wnt拮抗因子分泌型卷曲相关蛋白1甲基化和异常表达的意义

目的 探讨Wnt拮抗因子分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)甲基化和表达在膀胱癌发病机制中的作用. 方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应检测人膀胱癌细胞株T24、5637和SCaBER及45例膀胱癌组织和对应癌旁正常组织的SFRP1基因甲基化状态,蛋白质印迹方法检测SFRP1蛋白表达. 结果 SFRP1在膀胱癌细胞株T24和5637中呈现甲基化状态,而SCaBER细胞未检出SFRP1甲基化.将去甲基化试剂5’-氮杂-脱氧胞苷酸(1μg/ml)加入发生甲基化的膀胱癌细胞株T24和5637后,细胞SFRP1 mRNA和蛋白出现表达.45例膀胱癌组织中SFRP1甲基化表型28例(62.2％),癌旁正常组织6例(13.3％),组间频率差异有统计学意义(P＜0.01). 结论 SFRP1甲基化及表达下调可能参与了膀胱癌的发病过程.     

胃癌中p53蛋白K370位点甲基化在新辅助化疗的作用和临床意义

目的研究胃癌患者外周核细胞p53蛋白K370位点甲基化在新辅助化疗的判断的作用和临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法分别检测胃癌组织及外周血有核细胞p53蛋白K370位点甲基化和化疗疗效以及病理分期的相关性,并通过Pearson统计学方法分析其相关性。结果 110例胃癌患者中,K370的甲基化在胃癌组织及全血中的表达具有正相关性,K370的甲基化率随着病理分期增高而增高,胃癌外周血中p53蛋白K370甲基化表达情况与病理分期密切相关;胃癌患者经过新辅助化疗治疗后,甲基化平均敏感性阴性组为60.6%,阳性组为25.3%,甲基化阴性组的敏感性高于阳性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌全血标本中p53蛋白K370位点甲基化状态有望作为胃癌新辅助化疗方案敏感性的依据。     

前列腺癌和癌前病灶中p53和bcl-2蛋白表达在移行区和非移行区的差异

目的比较研究p53和bcl-2蛋白在前列腺移行区和非移行区(即中央区和外周区)内前列腺癌(PCa)和高分级前列腺上皮内瘤(PIN)细胞中的表达,探讨移行区和非移行区内PCa发病率和生物学行为差别的分子机制.方法采用免疫组织化学分析,以30例前列腺癌患者根治术切除标本作为检测对象,检测前列腺癌和高分级PIN细胞中p53和bcl-2蛋白的表达.结果共发现高分级PIN灶97处和PCa灶58处.在癌灶中p53蛋白表达非移行区内(35.3%)明显高于移行区内(8.3%,χ2=4.209,P＜0.05),差异有显著意义;在高分级PIN灶中,p53蛋白表达非移行区内(8.7%)虽高于移行区内(0%),但差异无显著意义(χ2=1.313,P＞0.05);bcl-2蛋白表达在癌灶的非移行区内(23.5%)也高于移行区内(16.7%),但差异无显著意义(χ2=0.016,P＞0.05);高分级PIN灶中bcl-2蛋白表达在非移行区内(85.5%)高于移行区内(75%,χ2=0.440,P＞0.05),差异亦无显著意义.结论癌灶和高分级PIN灶在移行区和非移行区内p53和bcl-2蛋白表达的差异可能和两区间癌发病率和生物学行为的不同相关.     

前列腺癌组织RASSF2基因甲基化及蛋白表达的检测及意义

目的:通过检测Ras相关序列家族2(RASSF2)基因在前列腺癌及前列腺增生组织中的甲基化及其蛋白表达情况,探讨该基因的表观失活在前列腺癌发生发展中的作用及意义。方法:获取前列腺癌石蜡包埋组织标本30例(实验组),前列腺增生石蜡包埋组织标本30例(对照组),石蜡组织标本切片后获取相应组织基因组DNA,通过甲基化特异性PCR技术(MSP)检测两组组织中RASSF2基因甲基化情况,通过免疫组织化学技术检测两组组织中RASSF2蛋白表达情况。结果:实验组中,RASSF2基因甲基化发生率为66.7%(20/30),RASSF2蛋白表达缺失发生率为70.0%(21/30);对照组中RASSF2基因甲基化发生率为6.7%(2/30),RASSF2蛋白表达缺失发生率为3.3%(1/30)。实验组RASSF2基因甲基化发生率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组RASSF2蛋白表达缺失发生率显著高于对照组,差异亦有统计学意义(P<0.05)。RASSF2基因异常甲基化与其蛋白表达缺失具有显著相关性(P<0.05)。结论:RASSF2基因的表观失活与前列腺癌的发生具有相关性,RASSF2基因的表观失活有望成为前列腺癌的分子诊断及治疗靶点。     

早期直肠癌中p53和hMLH1的表达

目的探讨p53基因和hMLH1基因的突变是否是直肠癌发生的早期事件之一。方法用PV-9000二步法免疫组化检测技术对我院2003年2月至2009年7月期间的32例早期直肠癌、32例直肠腺瘤及30例正常直肠黏膜组织石蜡切片进行p53和hMLH1基因蛋白表达的检测。结果①正常直肠黏膜组织、直肠腺瘤组织及早期直肠癌组织中p53蛋白表达阳性率分别为0(0/30)、59.38%(19/32)及68.75%(22/32),其在直肠腺瘤组织和早期直肠癌组织中的p53蛋白表达阳性率差异无统计学意义(P0.05),但二者均明显高于其在正常直肠黏膜组织中的表达(P0.01);hMLH1蛋白在前述三种组织中的表达阴性率分别为0(30/30)、12.50%(4/32)和50.00%(16/32),其在早期直肠癌组织中的表达阴性率明显高于在直肠腺瘤组织和正常直肠黏膜组织中的表达(P0.01)。②在直肠腺瘤组织和早期直肠癌组织中p53阳性表达同时合并hMLH1阴性表达者分别占9.38%(3/32)及37.50%(12/32),二者间差异有统计学意义(P=0.008)。③p53阳性表达和hMLH1阴性表达均与早期直肠癌的分化程度有关(P0.05),而均与患者的性别、年龄、肿瘤最大径、浸润深度及大便潜血均无关(P0.05)。④p53阳性表达与腺瘤的增生程度有关(P=0.009),hMLH1阴性表达与腺瘤的增生程度无关(P0.05)。结论 p53基因和hMLH1基因的同时突变致癌作用明显,可能是直肠癌发生的早期事件之一。     

食管鳞癌RASSF1A基因启动子区甲基化研究

目的 研究肿瘤抑制基因RASSF1A启动子区甲基化所致该基因表达抑制在我国食管鳞癌发生中的作用及可能机制. 方法 用甲基化特异PCR技术(MSP)检测43例原发性食管鳞癌标本及6例对照食管上皮组织标本、食管鳞癌细胞系TE11和TE12中RASSF1A启动子甲基化状态;逆转录(RT)-PCR法检测5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后食管鳞癌细胞系中RASSF1A mRNA表达水平;Western blot方法检测食管鳞癌细胞系中细胞微管蛋白的表达. 结果 20.9%(9/43)原发性食管鳞癌标本有RASSF1A启动子超甲基化,正常食管上皮组织未发现该基因超甲基化改变.RASSF1A基因甲基化与食管癌患者的性别和TNM分期无关(P＞0.05),但在不同年龄组间的差异有统计学意义(P＜0.05).TE12细胞RASSF1A启动子发生甲基化,RT-PCR检测不到RASSF1A mRNA.TE11细胞系启动子未发生甲基化,RT-PCR检测其有RASSF1A mRNA表达.5-Aza-CdR处理可使TE12重新表达RASSF1A mRNA.TE12细胞的β-微管蛋白水平比TE11细胞低87.8%. 结论 原发性食管鳞癌存在RASSF1A启动子超甲基化,该基因甲基化与年龄相关.RASSF1A在食管鳞癌细胞系表达抑制与其甲基化状态有关.RASSF1A表达缺失可能导致β-微管蛋白减少.     

前列腺癌中p53和PTEN的表达对于临床分级及预后判断的作用分析

目的 探讨前列腺癌中p53和PTEN的表达对于临床分级及预后判断的作用.方法 采用免疫组织化学检测80例前列腺癌组织和癌旁组织以及40例正常组织中PTEN和p53蛋白表达水平,比较其表达水平和前列腺癌分级、预后等病理参数关系.结果 前列腺癌组织中p53表达率显著升高(P＜0.05),PTEN表达率显著降低(P＜0.05).不同分化程度、分期、转移和预后的癌组织中PTEN表达水平差异有统计学意义(P＜0.05).不同分化程度和预后的癌组织中p53表达水平差异有统计学意义(P＜0.05).p53和PTEN表达水平无相关性(P＞0.05).结论 凋亡相关基因p53和PTEN参与到了前列腺癌的分级并因此影响了患者的预后,但两者间无相关性.     

胰腺癌细胞Flt-1受体表达与p53、ras基因突变的关系

目的探讨胰腺癌细胞Flt-1受体表达与p53、ras基因突变之间的关系,了解Flt-1受体表达与p53、ras基因突变在胰腺肿瘤血管形成中的作用.方法采用免疫组织化学EnVisionTM方法检测40例原发性胰腺癌组织Flt-1受体和p53、ras基因的表达;采用χ2检验分析Flt-1受体表达与p53、ras突变基因的相关性.结果 Flt-1受体和p53、ras基因的阳性表达率分别为77.5%(31/40)和50%(20/40)、60%(24/40).经连续切片对比分析表明,在Flt-1受体表达较高的区域,p53、ras基因的表达亦较强,Flt-1受体表达与p53基因突变呈显著相关性(χ2=4.35, P<0.05),但与ras基因表达之间无显著相关性(χ2=2.12, P>0.05).结论胰腺癌细胞Flt-1受体表达与p53基因突变之间有显著相关性,与ras基因突变之间无显著相关性,提示野生型p53基因发生突变可能会失去抑制Flt-1受体表达的功能,从而导致胰腺肿瘤血管的新生,促进肿瘤细胞生长;ras突变基因可能通过其他的途径参与胰腺肿瘤新生血管的形成.     

EphA2在前列腺癌中的表达及其意义

目的 探讨EphA2蛋白在前列腺癌中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学方法检测EphA2蛋白在43例前列腺癌及20例良性前列腺增生组织中的表达.结果 EphA2在前列腺癌的免疫反应阳性为36例,阳性表达率为83.72%,显著高于良性前列腺增生组织(只有2例表达,P<0.05).EphA2表达与前列腺癌的临床分期、病理分级、血清前列腺特异性抗原(PSA)水平以及淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与肿瘤大小及患者的发病年龄无明显相关.结论 过表达的EphA2蛋白与前列腺癌的发生、肿瘤细胞的侵袭和转移能力相关.