MTT法和LDH法检测T—AK细胞活性的研究

采用ＭＴＴ比色分析法和ＬＤＨ释放法检测了ＣＤ３单克隆抗体和白细胞介素－２共同激活的Ｔ－ＡＫ细胞的杀伤活生，并对检测方法进行了改良。     

改良MTT比色法检测NK细胞活性

目的 :探求更简便、实用的改良四甲基偶氮唑盐 ( MTT)比色法检测 NK细胞活性。方法 :1 2只 Wistar大鼠 ,取脾淋巴细胞 ,用 MTT比色法测定 NK细胞活性 ,效、靶细胞分别先孵育0 h和 4h,再与 MTT共同孵育 4h两种方法 ,对不同孵育时间的实验结果进行 t检验和相关性分析。结果 :两种方法差异有统计学意义 ,呈高度正相关。结论 :可以用效靶细胞不进行预先孵育的方法检测 NK细胞活性     

IL—2／LAK与放,化疗联合治疗晚期恶性肿瘤

目的：探讨ＩＬ－／ＬＡＫ细胞与放疗和／或化疗联合治疗晚期恶性肿瘤的价值。方法：本组共３０例,其中单纯ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗５例（包括２例ＴＩＬ细胞胸腹腔灌注）,ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞联合放疗１８例（包括１例动脉灌注）,ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞联合化疗４例）包括１例动态灌注）,ＩＫ－２／ＬＡＫ细胞联合放疗和化疗３例。结果：完全缓解率２０．０％（６／３０）,总有效率５０．０％（１５／３９）,其中单纯ＩＬ－     

植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞体外抗肿瘤作用的MTT比色法分析

目的　检测植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞（ＰＨＡ－ＬＡＫ）的体外广谱抗肿瘤作用。方法 用ＭＴＴ比色法测定 ＰＨＡ－ＬＡＫ对体外培养的Ｋ５６２、ＭＧｃ８０－３、１４３ＴＫ－、ＨｅＬａ、ＬｏＶｏ等５种肿瘤细胞的杀伤活性。结果ＰＨＡ－ＬＡＫ对５种不 同组织器官来源的肿瘤细胞均有明显杀伤活性,在效靶比为７．５：１．０时,ＰＨＡ－ＬＡＫ对１４３ＴＫ－细胞的杀伤率可高达 ５７．３％,杀伤效应随效靶比增加而升高;但在效靶比为１５：１时,杀伤效应不随效靶比增加而增高数。结论　（１）来自健康献血 员的ＰＨＡ－ＬＡＫ对肿瘤细胞具非特异性杀伤活性,能较好解决传统过继免疫治疗中免疫效应细胞的数量和活性问题; （２）在一定的条件下,ＭＴＴ法用于检测免疫效应细胞的杀瘤作用时才具灵敏、可靠的优点。     

Expressions of IL-10 on leukemic cells in acute leukemic patients and its significance

Objective: To explore the expressions of IL-10 on leukemic cells in acute leukemia patients and its significance.Methods :The expressions of IL-10 on leukemic cells in thirty patients was measured by indirect immunofluorescence technique. Results:Observed yellow-green bright fluorescence on leukemic cells membrane, the positive rote of cells was 10-80%, there were 18 patients expressing IL-10 (18/30, 60% ) positively, among them 11 with ANLL (11/19, 58% ) and 7 with ALL (7/11, 64% ) respectively while that of peripheral mononucleate cells in control group was 13%. Compared with that in the control group, there was a significant increase of positive rote in ANLL and ALL but with no significant difference between ANLL and ALL. Conclusion: IL-10 secreted by leukemic cells, contributed to the immunosuppressive state at the tumor site. This is probably one of the important mechanisms of acute leukemic escape.     

Experimental Studyon Anti－tumor Effect of SplenocytesInduced by Anti－CD3McAb，PHA and IL－2

（沈张悦）（邵静芳）（王晓林）（朱慧芬）ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙｏｎＡｎｔｉ－ｔｕｍｏｒＥｆｆｅｃｔｏｆＳｐｌｅｎｏｃｙｔｅｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＡｎｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ，ＰＨＡａｎｄＩＬ－２￥ＳＨＥＮＧｕａｎ－ｘｉｎ，ＷＡＮＧＸｉａｏ－ｌｉ...     

用IL－2／LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响

为了探讨ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响,用３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＤＮＡ法测定了１７例中晚期癌症病人在ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后外周血加ＰＨＡ或不加ＰＨＡ淋巴细胞体外增殖试验,结果显示无论空白对照（１１／１６）还是ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖试验（１２／１６）,ｃｐｍ值较治疗前均有明显的提高（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）;在Ｔ细胞亚群的测定中,ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗前后比较,ＣＤ３＋和Ｃ８＋细胞都未发现明显的差异,只有Ｃ４＋细胞较治疗前（１３／１７）有了显著提高（Ｐ＜０．０１）;ＮＫ细胞虽未达到正常水平,但也显示较治疗前有显著增高的倾向;结果表明,ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞疗法既对肿瘤细胞有直接杀伤作用,也对细胞免疫起了明显的促进作用。     

多发性硬化患者血清白细胞介素2和抗白细胞介素2抗体检测及意义

目的 探讨白细胞介素2（IL－2）和抗IL－2抗体测定在多发性硬化（MS）患者病理免疫机制及病程演变中的作用和意义。方法 采用ELISA对48例MS患者（其中发作期31例，缓解期17例）和30名健康人血清IL－2和抗IL－2抗体进行测定，并进行各组间比较分析。结果 MS发作期患者血清IL－2水平和抗IL－2抗体水平升高，至缓解期血清IL－2水平降低至正常水平，而抗IL－2抗体水平依然处于高水平。发作期患者IL－2与抗IL-2抗体水平呈正相关。结论 IL－2和抗IL－2抗体的产生可能与MS的免疫病理过程有关，血清IL－2水平可作为评价MS活动性的辅助指标之一。     

同种异体LAK细胞联合IL－2治疗慢性乙型肝炎的临床研究

５５例慢性活动性乙型肝炎患者随机分为３组．分别为异体ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２治疗组，单纯ＩＬ－２治疗组；一般药物对照组。在治疗前后检测周围血Ｔ细胞亚群、ＮＫ细胞活性、乙型肝炎病毒ＤＮＡ，两对半血清ＨＢＶ标志物、肝功等项目。结果表明，单纯ＩＬ－２治疗组较对照组疗效明显，免疫功能得到一定的改善（Ｐ＜０．０５），而与异体ＬＡＫ细胞联合治疗组，效果更佳，免疫功能改善有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。     

IL-2基因修饰对巨噬细胞杀瘤活性的影响

目的;观察ＩＬ－２基因修饰对小鼠腹腔巨噬细胞免疫效应功能的影响。方法：通过重组腺病毒介导,在体外将ＩＬ－２基因转染至小鼠腹腔巨噬细胞,检测ＩＬ－２基因修饰的巨噬细胞ＴＮＦ,ＩＬ－１和ＮＯ分泌水平及其杀伤活性。结果：ＩＬ－２基因修饰的巨噬细胞ＴＮＦ,ＩＬ－１和ＮＯ分泌水平显著提高,对巨噬细胞敏感株Ｌ１２１０细胞以及Ｒｅｎｃａ细胞的杀伤活性增强。结论：ＩＬ－２基因居噬细胞的细胞毒效应。本研究为ＩＬ－２     

喉癌患者白细胞介素2及可溶性白细胞介素2受体的检测

目的：观察喉癌患者的白细胞介素2（IL—2）与可溶性白细胞介素2受体（sIL—2R）水平的变化．方法：IL—2测定采用IL—2诱生及活性测定法,sIL—2R采用双抗体夹心法。结果：喉癌患者IL—2水平明显低于对照组，经统计学处理差异显著（P＜0．01），而sIL—2R水平则显著增高（P<0．01），并且与喉癌的分型及分期有明显的相关性；结论：sI-2R水平测定配合IL—2测定可作为喉癌临床监测的重要指标。     

L1210细胞表面IL—2受体的表达和以IL—2为导向的免疫？…

目的 证明Ｌ１２１０细胞表面表达ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）,并以此为基础建立检测以ＩＬ－２为导向的免疫毒素的杀伤细胞活性的体内、体外实验模型。方法 采用免疫荧光染色及流式细胞测定技术,测定Ｌ１２１０细胞表面ＩＬ－２Ｒ。用ＭＴＴ法测定ＩＬ－２与两种由突变改型的绿脓杆菌毒素片段构建的两种融合蛋白（ＩＬ－２－ＰＥＺＮＭ和ＩＬ－２－Ｋ－ＰＥＺＮＭ）的体外杀伤细胞活性;以腹腔注射Ｌ１２１０细胞诱发小鼠腹水瘤     

MTT体外药敏指导下消化道肿瘤化疗的临床应用

目的　筛选化疗药物,提高肿瘤化学治疗的预见性。方法采用ＭＴＴ法检测３５例手术切除的消化道恶性肿瘤组织对几种常用化疗药物的敏感性,根据其结果选择化疗药物,指导临床化疗,并与经验化疗组进行比较。结果　ＭＴＴ指导组总有效率为７７．１％,经验化疗组总有效率４２．２％,两组比较。差异有非常显著意义（ Ｐ＜０． ０１）。结论 ＭＴＴ体外药敏试验指导恶性肿瘤化疗方法可行,疗效满意。     

雌二醇及他莫昔芬对LAK细胞杀伤卵巢癌细胞作用的影响

目的：探讨雌二醇（Ｅ２）和他莫昔芬（ＴＡＭ）对淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）杀伤卵巢癌细胞３ＡＯ作用的影响。方法：分别用Ｅ２,ＴＡＭ,Ｅ２＋ＴＡＭ预处理ＬＡＫ细胞及３ＡＯ细胞１２ｈ,然后以５：１效靶比将效、靶细胞混合作用４ｈ,用流式细胞术检测ＬＡＫ细胞杀伤活性,比较用药前后杀伤活性的变化。结果：Ｅ２预处理ＬＡＫ细胞及３ＡＯ细胞后,其杀伤活性提高了５６．６％～１９９．２％;ＴＡＭ处理后提高了４     

MTT法检测AU14-1介导LAK细胞的细胞毒效应

目的 应用MTT比色法研究抗小鼠宫颈癌单克隆抗体(McAb)AU14-1介导淋巴因子激活的杀伤细胞Gym-phokine activated killercells，LAK)对靶肿瘤细胞的体外细胞毒作用。方法 通过检测不同数量小鼠宫颈癌U14细胞与加入四甲基偶氮唑盐{[3-(4，5-dimethylthiazof-2-y1)-2，5-diphenyl terazolium bromide]，MTT}后形成甲质颗粒所产生的不同吸光度(A)值，建立测定的线性关系。进而应用MTT比色法研究McAb AU14-1介导LAK细胞的体外细胞毒作用。结果 当U14细胞在10～10^5个／孔以内时，活细胞数与A值呈直线相关；LAK细胞对于经AU14-1处理的肿瘤细胞的杀伤率显著高于未经AU14-1处理的肿瘤细胞(P＜0．01)。结论 McAb AU14-1可加强LAK细胞对靶细胞的溶解作用。提示特异性宫颈癌单克隆抗体AU14-1介导的细胞毒在治疗宫颈癌中可能是一种有潜在价值的方法。     

重组白细胞介素-2对急性白血病及MDS患者NK活性异常的逆转作用

用标准的~(51)Cr 释放法观察了12例急性白血病及白血病前期(MDS)患者的外周单个核细胞(PBMNCs)经重组白细胞介素-2(rIL-2)诱导3～4周后 NK活性及 LAK 活性的变化。结果诱导前 NK 活性(5.3±4.5%)较健康人(56.2±9.9%)明显减低(P<0.01)。rIL-2(1000u//ml)诱导3～4周后 NK 活性(46.9±8.6%)较培养前显著提高(P<0.01)。LAK 活性由0.80±0.83%升高到49.4±9.6%。同时在培养过程中也观察到淋巴细胞逐渐增多,而白血病幼稚细胞逐渐减少。这提示 rIL-2在体外能够逆转急性白血病及 MDS 患者 NK 杀伤功能缺陷,其 LAK 活性的诱导过程也是对白血病细胞的清除过程。     

原发性与转移性肝癌病人LAK活性,IL—2水平及sIL—2R表达

作者对26例原发性肝癌(PHC)、28例转移性肝癌(MLC)病人外周血单个核细胞(PBMC)的LAK活性、IL-2水平及sIL-2R表达进行了研究。结果发现,PHC及MLC病人PBMC的LAK活性、IL-2水平下降而sIL-2R表达上升。提示肿瘤病人处于免疫异常状态,检测sIL-2R/IL-2比值,对判断肿瘤病人及转移性肿瘤病人的生物学意义具有重要价值。     

Augmentation of cytotoxicity of lymphokine－activated killer cells by monoclonal antibody against gastric cancer

Ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｂｙｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒＢｉＦｅｎｇ（毕锋），ＺｈａｎｇＸｕｅｙｏｎｇ（张学...     

MTT比色法的改良及其在LAK细胞活性检测中的应用

目的：改良四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法,并用来检测淋巴因子激化的杀伤细胞（LAK细胞）活性。方法：在MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度测定及效靶细胞不同孵育时间的比较等方面进行研究。结果：MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度为510nm,效靶细胞最佳孵育时间为4h。结论：改良的MTT比色法优于常规的MTT比色法。     

脐血IgE、白细胞介素2及5的测定及其临床意义

目的探讨新生儿脐血免疫球蛋白E（IgE）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素5（IL-5）水平及其对预测婴幼儿哮喘发生的意艾。方法使用美国IMX型化学发光检测仪,采用免疫荧光法测定37例新生儿脐血IgE含量;用酶标仪、双抗体夹心ELISA法测定172例脐血IL-2、IL-5含量。结果①新生儿脐血IgE水平男性高于女性（P〈0．05）;②脐血IL-2、IL-5水平性别间差异无统计学意义（P〉0．05）。③有家族过敏史的13例中IL2、IL5水平低于无过敏家族史者,但差异无统计学意义（P〉0．0S）。结论脐血中IgE、IL-2、IL-5含量极低;性别对IgE有影响,对IL-2、IL-5无明显影响;家族过敏史可能对脐血IgE、IL-2、IL-5水平有影响,尚待继续观察。