肝母细胞瘤细胞凋亡和增殖状况及其相关基因表达的研究

目的探讨肝母细胞瘤细胞凋亡和增殖状况及其相关调控基因p53和Bcl-2在各肿瘤中表达的意义。方法应用原位末端标记及免疫组化技术检测了38例肝母细胞瘤中细胞凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA),p53和Bcl-2蛋白表达。结果肝母细胞中的凋亡细胞数120.6±24.52及增殖细胞数257.64±29.64均显著高于对照组(19.57±1.32,18.28±1.25,均P<0.001),p53和Bcl-2的表达率(分别为57.8%、36.8%)其表达强度也显著高于对照组(分别为0,17%,P<0.05),代表细胞增殖活性的PCNA在各型肝母细胞瘤中差异明显(P<0.01),而凋亡细胞数的差异无意义,细胞凋亡密度高的肿瘤预后较好。结论肝母细胞凋亡与增殖平衡调控异常在肝母瘤的发生、发展中可能起重要作用,突变型p53及Bcl-2蛋白均具有抑制细胞凋亡,促进细胞增殖的作用。     

肺癌刷落细胞、活检组织及痰液细胞端粒酶的活性研究

目的探讨支气管镜下肺刷落细胞、活检细胞及痰液细胞的端粒酶活性检测对诊断肺癌的价值。方法采用TPAP结合银染色定性法 ,对 46例肺部疾病患者支气管镜下肺刷落细胞、活检组织及其新鲜痰液细胞的端粒酶活性进行分析。结果32例肺癌患者 ,其活检组织、肺刷落细胞及痰液细胞端粒酶阳性率分别为 90 .6 %、87.5 %、5 3 .1% ,显著高于肺炎性、良性增生组 ;与病理学检查结果相比 ,肺刷落细胞及痰液细胞的端粒酶阳性率明显高于其细胞涂片中的癌细胞检出阳性率。结论痰液细胞及支气管镜下肺刷落细胞、活检组织的端粒酶活性检测 ,可作为肺癌诊断的有效而灵敏的指标 ,能提高肺癌的检出率。     

甲壳低聚糖对非肥胖性糖尿病小鼠胰岛细胞生长及胰岛素分泌量的影响

目的探讨甲壳低聚糖对非肥胖性糖尿病 (NOD)小鼠胰岛 β 细胞生长增殖和释放胰岛素的影响。方法通过胰导管逆行灌注胶原酶静止消化NOD小鼠胰腺及不连续密度梯度Ficoll液纯化胰岛细胞 ,并用转板以及碘乙酸处理的方法除去其中的成纤维细胞 ,得到比较纯的胰岛细胞。以此为材料 ,将细胞分为干预组及对照组 ,干预组在细胞培养液中加入 3%甲壳低聚糖 ,对照组在细胞培养液中加入生理盐水。分别检测细胞增殖情况和急性胰岛细胞释放胰岛素实验。结果干预组细胞增殖优于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而急性胰岛素释放则两组相比较差异无显著性。结论甲壳低聚糖能够促进胰岛 β 细胞的增殖     

新辅助化疗诱导结肠癌细胞凋亡及IκBα mRNA的表达

目的探讨羟基喜树碱 (HCPT)联合 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)和甲酰四氢叶酸钙 (CF)新辅助化疗诱导结肠癌细胞凋亡及其可能的分子机制。方法2 0例结肠癌患者术前静脉滴入HCPT 10mg/d ,5 Fu5 0 0mg/d,CF 2 0 0mg/d ,共 5天即一周期。术中取结肠癌组织标本 ,应用DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的生化改变 ,比色法检测Caspase 3的活性 ,RT PCR半定量技术检测IκBαmRNA的表达 ,并与同期术中取得的 2 0例术前未化疗患者的结肠癌组织及癌旁正常肠组织作比较。结果①新辅助化疗组结肠癌细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现明显的特征性梯状条带 ,术前未化疗组结肠癌细胞无明显的DNA梯状条带 ;②结肠癌细胞Caspase 3活性新辅助化疗组较术前未化疗组结肠癌细胞及癌旁正常结肠细胞明显增高 (P <0 .0 5 ) ;③新辅助化疗诱导后 ,结肠癌细胞IκBαmRNA的表达明显上调 (P <0 .0 5 )。结论HFCF方案新辅助化疗可能通过上调IκBαmRNA表达、激活Caspase 3活性诱导人体内结肠癌细胞凋亡而起作用。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义

目的　探讨肝细胞癌 (HCC)和癌旁肝组织中PTEN蛋白表达及其临床意义。方法利用SP免疫组织化学技术检测PTEN蛋白在HCC及其癌旁肝组织的表达。结果PTEN蛋白在HCC中的阳性率和阳性强度均低于癌旁肝组织(P <0 .0 1) ;HCC中PTEN蛋白的表达强度与患者的性别和肿瘤的大小无关 (P >0 .0 5 ) ,但与肿瘤细胞的分化程度明显相关 (P <0 .0 1)。分化愈差 ,表达愈弱。结论提示检测PTEN蛋白可能对判断HCC的预后具有一定意义。     

急性间质性肾炎肾间质中淋巴细胞亚型分析

分析急性间质肾炎 (AIN)肾间质中浸润的淋巴细胞亚型的意义。方法19例AIN患者根据肾活检前的血清肌酐值 (SCr)分为SCr >5 0 0 μmol/L组 (A组 )及SCr <5 0 0 μmol/L(B组 ) ;根据病人入院 30d时的血清肌酐分为SCr恢复正常组 (Ⅰ组 )及SCr未恢复正常组 (Ⅱ组 )。所有病人行肾穿刺活检 ,肾间质淋巴细胞亚型的检测采用SABC法。结果病理改变均表现为不同程度的间质炎性细胞浸润 ,以淋巴细胞为主 ,淋巴细胞亚型以CD 4 和CD 8细胞居多 ,CD 2 0 细胞较少 ;A组肾间质中的淋巴细胞明显多于B组 (P<0 .0 5 ) ;Ⅱ组间质中CD 4 及CD 8细胞明显多于Ⅰ组 (P <0 .0 1)。结论间质浸润淋巴细胞越多 ,肾功能越差 ,AIN的预后也越差 ;细胞免疫在AIN发病机制中起着重要作用。     

p27基因在宫颈癌中表达的临床病理意义

目的探讨 p2 7基因在宫颈癌中表达的临床病理意义。方法用链霉菌亲生物素 -过氧化酶法检测宫颈癌中 p2 7蛋白表达。结果p2 7蛋白高表达率在宫颈癌中为 19% (9/48) ,而正常宫颈组织中均为高表达。细胞分化程度中 ,Ⅰ级的 p2 7蛋白高表达率明显高于Ⅱ级及Ⅲ级 (P <0 .0 5 ) ;不伴淋巴结转移的 p2 7蛋白高表达率 3 2 %(8/2 5 ) ,明显高于伴有淋巴结转移的p2 7蛋白表达率 4% (1/2 3 ) (P <0 .0 5 )。结论p2 7与宫颈癌的发生、分化程度及淋巴结转移有关 ,对p2 7蛋白进行检测可为诊断宫颈癌及临床综合治疗提供参考     

MMP-9、PCNA在骨肉瘤中的表达及其临床意义

【目的】研究骨肉瘤组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及两者的相关性及临床意义。【方法】对54例骨肉瘤组织和20例正常骨组织进行MMP-9和PCNA免疫组化染色。【结果】两者在骨肉瘤组织中的阳性表达明显高于正常组骨组织,且呈正相关（P〈0．05）;MMP-9在骨肉瘤组织中的表达与其临床分期无明显相关性;而与骨肉瘤侵袭软组织及预后有显著相关性。PCNA在骨肉瘤组织中的表达与其临床分期和预后有相关性。【结论】MMP-9和PCNA在骨肉瘤组织的表达明显上调;MMP-9与骨肉瘤的侵袭、转移有关,可作为预测转移潜能的指标。PCNA可作为骨肉瘤增殖的一个指标。     

两种HBV DNA检测法对干扰素治疗慢性乙肝的疗效评估

目的以斑点杂交法及PCR定量检测法评价干扰素抗HBV的疗效。方法90例慢性乙肝患者干扰素治疗前后均同时用两种方法检测血清HBVDNA。结果HBVDNA定量在总体上呈下降趋势。治疗后 2个月末与 4个月末其病毒拷贝数分别为 5 .83± 1.0 5 ,5 .75± 1.2 1,与治疗前 6 .74± 1.6 8相比差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。HBVDNA定量PCR较斑点杂交更能反映干扰素治疗过程中患者外围血内病毒拷贝数的增长。结论两种方法均能灵敏地反映干扰素抗HBV的疗效 ,但在实际中定量PCR更灵敏。     

两种HBV DNA检测法对干扰素治疗慢性乙肝的疗效评估

目的以斑点杂交法及PCR定量检测法评价干扰素抗HBV的疗效.方法90例慢性乙肝患者干扰素治疗前后均同时用两种方法检测血清HBV DNA.结果HBV DNA定量在总体上呈下降趋势.治疗后2个月末与4个月末其病毒拷贝数分别为5.83±1.05,5.75±1.21,与治疗前6.74±1.68相比差异均有显著性(P<0.05).HBV DNA定量PCR较斑点杂交更能反映干扰素治疗过程中患者外围血内病毒拷贝数的增长.结论两种方法均能灵敏地反映干扰素抗HBV的疗效,但在实际中定量PCR更灵敏.     

骨良恶性肿瘤Bcl-2和p53蛋白表达及意义

【目的】探讨Ｂｃｌ－２、ｐ５３在良恶性骨肿瘤组织中的蛋白表达情况及其生物学意义。【方法】应用ＡＢＣ免疫组化方法对３３例恶性骨肿瘤,包括１９例骨肉瘤,１４例软骨肉瘤和２２例良性骨肿瘤（骨软骨瘤）组织中Ｂｃｌ－２,ｐ５３的蛋白表达进行研究。【结果】恶性骨肿瘤组织中Ｂｃｌ－２,ｐ５３蛋白的阳性表达率分别为５１．５％和５４．５％,其中骨肉瘤组织为６３．２％和４７．４％,软骨肉瘤组织为３５．７％和６４．３％;良性骨肿瘤组织阳性表达率为１８．２％和２２．７％。恶性骨肿瘤组织Ｂｃｌ－２,ｐ５３蛋白阳性表达率明显高于良性骨肿瘤（Ｐ＜０．０５）,骨肉瘤组织Ｂｃｌ－２蛋白阳性表达率明显高于骨软骨瘤（Ｐ＜０．０１）,软骨肉瘤组织ｐ５３蛋白阳性率明显高于骨软骨瘤（Ｐ＜００５）。ＡＫＰ值增高组的恶性骨肿瘤组织ｐ５３蛋白阳性表达率（７５％）明显高于ＡＫＰ值正常值组（２０％,Ｐ＜０．０５）。【结论】Ｂｃｌ－２癌基因介导的凋亡紊乱和ｐ５３肿瘤抑制基因突变失活与恶性肿瘤的发生有关,Ｂｃｌ－２蛋白表达活性可能与骨肿瘤的恶性程度有关,ｐ５３肿瘤抑制基因突变失活是恶性肿瘤细胞成骨活性增强的因素之一。标记羊抗鼠ＩｇＧ和ＡＢＣ试剂,购自Ｓｉｇｍａ公     

卵巢肿瘤组织谷胱甘肽S转移酶－π的表达及其临床意义

目的研究卵巢肿瘤组织中谷胱甘肽S转移酶 -π(GST -π)的表达及其临床意义。方法用免疫组化链霉菌素亲生物素过氧化酶法 (S -P法 )测定 10例良性卵巢肿瘤、40例恶性肿瘤组织中GST -π的表达 ,及其与组织学类型、病理分级、临床分期及术前化疗的关系。结果10例良性肿瘤GST -π无阳性表达 ,40例恶性肿瘤阳性表达 2 6例 (6 5 % ) ;GST -π的表达与组织学类型和术前化疗无关系 (P >0 .0 5 )。GST -π阳性表达在低分化癌中占 85 .71% ,高于高、中分化癌 (33.33% ,P <0 .0 1) ;在上皮性肿瘤Ⅰ～Ⅱ期中占 2 0 % ,Ⅲ～Ⅳ期占 71.4% ,有随着分期升高而升高的趋势。GST-π阳性者缓解期短 ,易近期内复发。结论免疫组化测定GST -π在卵巢恶性肿瘤中的表达对判定化疗疗效 ,克服耐药、估计预后具有一定的临床价值。GST -π阳性者属非P -糖蛋白耐药 ,化疗疗效及预后差。     

急性白血病多药耐药相关蛋白的检测及临床意义

目的探讨多药耐药相关蛋白 (MRP)的表达与临床耐药的关系。方法以免疫组化ABC法检测了 5 3例急性白血病 (AL)患者和 15例对照组骨髓单个核细胞MRP的表达情况 ,并同时检测了P -170的表达。结果① 40例化疗后患者 ,MRP阳性表达 2 3例 ,其中疗效差 18例 ,疗效佳 5例 ;MRP阴性表达 17例 ,其中疗效差 7例 ,疗效佳 10例。MRP阳性组疗效显著差于阴性组(P <0 .0 5 )。② 40例化疗后患者 ,P -170阳性组疗效显著差于阴性组 (P <0 .0 1)。③化疗后患者MRP与P -170表达具有一定的一致性(Kappa系数 =0 .36 7,P <0 .0 1) ,且两者与临床疗效有关。结论①MRP的过高表达是多药耐药 (MDR)产生机制中又一因素 ;②MRP与P -170表达有一定的一致性 ,且与临床疗效有一定关系 ;③MDR采用多项指标检测有助于AL疗效判断及预后预测。     

儿童活动水平评定量表的中国城市常模

目的制定儿童活动水平评定量表 (WWPARS)中国城市常模 ,进行信度和效度检验。方法在全国城市中小学采集172 8例 (男 863例 ,女 865例 ) ,年龄 6～ 17岁 ,由家长填写WWPARS量表。结果年幼儿童较年长儿童得分高 ,男孩较女孩得分高。信度 :重测信度、分半信度、Cronbach的α系数及项目与总分的一致性良好。效度 :多动症组大多数项目分及总分均高于常模组 ;与PSQ的品行问题、多动指数和总分及家庭场合问卷有较好的平行效度。因子分析提取 6个因子与原量表一致 ;以ICD -10多动性障碍诊断标准作效标 ,WWPARS对多动症组的诊断灵敏度为 72 % ,诊断一致性为 0 .69。结论WWPARS常模具有代表性 ,信度和效度符合统计学要求 ,对活动过度行为有一定的辅助诊断价值     

颈前路减压BAK植入椎体融合治疗颈椎椎间盘突出症

目的探讨颈前路减压BAK植入椎体间融合治疗颈椎椎间盘突出症的效果。方法应用颈前路减压BAK植入融合治疗颈椎间盘突出症 16例 ,随访观察其早期固定及后期融合效果。结果16例患者都能早期恢复活动 ,术后 3～ 4个月均获得骨性愈合 ,手术无并发症 ,无BAK移位。结论BAK植入椎体间融合在颈椎椎间盘突出症前路减压术中有良好的早期固定、后期融合作用。     

抑肽酶用于宫颈癌广泛切除术中止血的临床研究

目的了解抑肽酶对宫颈癌广泛切除手术患者失血量、异体红细胞需求量、血红蛋白 (Hb)、血小板 (PLT)计数及凝血功能的影响。方法80例宫颈癌ⅠB～ⅡA 期患者随机分为抑肽酶组和止血敏组 ,观察两组患者术中失血量、术后 2 4h盆腔引流量、手术时间、术中术后异体红细胞输注量以及手术开始前、术毕、术后 2 4h、72hHb、红细胞压积 (HcT)、PLT、凝血酶原时间 (PT)、活化部分凝血活酶时间 (APTT)、血浆纤维蛋白原含量 (FIB)变化。结果A组平均失血量、术后 2 4h引流量 ,较B组明显减少 (P <0 .0 1) ;A组手术时间明显缩短、对异体红细胞需求明显减少 (P <0 .0 5 ) ;两组患者术后Hb均明显低于术前水平 ,但术后 2 4h、72hB组较A组更低 (P <0 .0 1) ;PLT在A组无明显变化 ,B组术后各时点均低于术前水平 ;两组PT、APTT、FIB各时点比较无明显差别。结论抑肽酶能明显减少宫颈癌广泛切除术失血量、异体红细胞输注量 ,且不影响血小板计数及凝血功能     

湖南土家族、苗族人群Gst M1基因多态性研究

目的探讨湖南土家族和苗族的谷胱甘肽S转移酶M1(GstM1)基因多态性分布情况。方法应用双重PCR方法检测152例土家族及106例苗族人群的(GstM1)基因型。结果土家族GstM1(－)基因型频率为43.4%(66/152),苗族则为39.6%(42/106),两组之间差异无显著性(P>0.05),且同民族不同性别之间,不同民族同性别之间差异亦无显著性(均P>0.05)。结论湖南土家族和苗族的GstM1基因多态性分布与我国汉族及日本人相似,而与美国黑人及白人显著不同。