缝隙连接蛋白重构与心律失常

缝隙连接蛋白（Cx）是心肌细胞缝隙连接通道（GJC）的主要组成部分,主要介导细胞间的电化学耦联。心脏在某些病理因素影响下,出现Cx表达的变化和分布异常,以及结构和功能的重构,导致心肌细胞间耦联异常,从而导致异常冲动的传导,引发心律失常。深入研究Cx的重构与心律失常的关系,探讨作用于相关靶点的药物,对心律失常的防治具有重要意义。     

心肌细胞缝隙连接与心律失常的关系

有疾病的心肌中缝隙连接(GJ)发生重塑,连接蛋白(Cxs)含量的改变和ID内GJ斑的分布发生变化,从而使心肌细胞间电耦联传导速度减慢,各向异比率减小增加折返性心律失常,有助于阐明一些心律失常机制.     

心室肥厚时的缝隙连接蛋白Cx43及快速刺激对其的影响

探讨心室肥厚时缝隙连接在心律失常发生中的作用。部分结扎日本大耳白兔腹主动脉建立心肌肥厚模型。术后 4周和 10周分别观察对照组、结扎组及结扎 +右心耳刺激组 (2 6 0次 /分起搏 30min)缝隙连接蛋白Cx4 3的面积及密度改变。结果 :①心肌肥厚伴随有Cx4 3的分布变化 ,这种情况与肥厚的不同阶段有关 :早期Cx4 3的密度下降 ,Cx4 3弥散分布于整个细胞表面 ,而不再集中于闰盘处 ;后期Cx4 3的分布面积增加 ;②心肌肥厚不同阶段Cx4 3也发生着变化 ,随病程的增加Cx4 3的分布面积和密度均明显加大 ;③快速短时右心耳起搏刺激对肥厚心肌Cx4 3的分布有影响。结论 :压力负荷增加所致的心肌肥厚引起了缝隙连接蛋白Cx4 3的改变 ,这种改变具有阶段依赖性、频率依赖性     

压力超负荷心力衰竭大鼠心室肌电生理失稳态及缝隙连接蛋白Cx43 的变化

目的观察压力超负荷所致心力衰竭（HF）大鼠心室肌电生理失稳态和缝隙连接蛋白Cx43表达的变化。方法采用腹主动脉缩窄法建立压力超负荷大鼠HF模型,取左室舒张末压≥15mmHg的存活大鼠入HF组,另设假结扎对照组。术后32周两组大鼠以颈总动脉插管法和心脏B超测定心功能,并检测电生理指标,以免疫印迹方法检测心肌细胞Cx43蛋白表达的变化,通过透射电镜观察心室肌缝隙连接分布的变化。结果HF大鼠出现明显电生理失稳态和心功能不全,左室舒张末压明显增高而心室有效不应期明显延长,左室射血分数明显下降,同时大鼠心室肌中缝隙连接蛋白Cx43表达明显下调（0．929±0．095VS1．250±0．083,P〈0．05）并出现空间重构。结论压力超负荷所致HF大鼠心室肌存在明显缝隙连接重构,这可能是导致HF时心肌电生理重构的重要机制。     

心肌缝隙连接蛋白43与心血管疾病的关系

心脏缝隙连接（gap junction,GJ）是细胞间进行电化学偶联及信息交换的重要途径,是介导心脏维持正常的协调性和同步性功能的重要桥梁及特殊通道。GJ主要由连接蛋白组成,而在心肌细胞水平上主要包括连接蛋白（connexin,Cx）43、Cx40和Cx45,但各自在心脏部位的表达分布和功能上却有所不同。现已有研究报道分析在许多心血管疾病中,GJ在结构和功能上的改变或异常与主要心血管事件的发生有直接关联。Cx含量及分布的减少、GJ调控因素的影响及GJ的侧一侧连接导致传导异向性变化等,均可能使心脏整体功能活动不同程度地下降或受到抑制,从而引起心脏疾病的发生和发展。     

抗心律失常肽对兔长QT综合征模型室性心律失常的影响

目的:观察缝隙连接激动剂抗心律失常肽(AAP10)对兔长QT综合征(LQTS)模型室性心律失常的影响并探讨其作用机制.方法:应用心肌细胞钠通道开放剂海葵毒素(ATX-Ⅱ,20 nmol/L)在兔左室楔型心肌块建立LQTS模型,随机分为正常组、LQTS组、AAP-100组和AAP-500组,采用浮置玻璃微电极法同步记录心内膜、心外膜心肌细胞跨膜动作电位及跨室壁心电图.通过免疫印迹法(Western blot)反映心肌细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)去磷酸化水平的变化.结果:LQTS组QT间期和跨室壁复极离散度(TDR)与正常组相比较显著增大,早期后除极(EAD),R-on-T期前收缩和尖端扭转性室性心动过速(TdP)发生率也显著高于正常组,并伴有Cx43去磷酸化水平增高(均P＜0.01).在LQTS模拟状态下,AAP-500组QT间期和TDR显著缩短(均P＜0.01),EAD、R-on-T和TdP发生率显著小于LQTS组(P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05),并伴随Cx43去磷酸化水平降低(P＜0.01).结论:缝隙连接激动剂AAP10能通过防止Cx43去磷酸化来减少兔LQTS模型TDR和室性心律失常发生率,说明缝隙连接可能参与了兔LQTS模型TDR的形成.     

心室内折返性心律失常的心电图表现

心室内折返激动是引起室性早搏、室性快速心律失常的主要机制 ,多数室性早搏的配对间期、ＱＲＳ形态是一致的 ,少数因折返径路内出现文氏 (Ｗｅｎｃｈｅｂａｃｈ)现象、多径路传导 ,致配对间期不等或ＱＲＳ形态多变。兹对心室内折返性心律失常的心电图表现作一探讨。　　心室内折返性心律失常的心电图表现有 8种类型 :　　 1 配对间期、ＱＲＳ形态均一致的室性早搏 ,常呈显性或隐性二、三联律。　　 2 心室内双径路、多径路折返　　①传入双径路 ,可伴蝉联现象 (图 1) ;　　②传出双径路、多径路等速传导 (图 2、3) ;　　③传出双径路、多…     

缝隙连接、连接蛋白43及其与心律失常的关系

缝隙连接(GJ)通道是介导心肌细胞间电化学信息交流,保证心脏整体活动的协调性和同步性的特殊通道。在致心律失常发生上,GJ通道介导的细胞间电耦联障碍甚至比膜离子通道功能紊乱起了更重要的作用。连接蛋白43(Cx43)是心室GJ通道的主要构成成份,其表达和分布的异常将导致心室肌细胞的整体性异常,从而传导速度和传导各向异性发生改变,产生折返和传导阻滞。以GJ通道为作用靶点的新一代抗心律失常药的出现将为心律失常的治疗带来新的希望。     

增加缝隙连接耦联对兔长QT综合征心律失常的影响

目的:观察增加缝隙连接耦联对兔长QT综合征(LQTS)模型室性心律失常的影响。方法:应用心肌细胞快速延迟整流钾通道(IKr)阻滞剂E-4031(0.5μmol/L)在兔左室楔型心肌块建立LQT2模型,随机分为正常组、LQT2组、100 nmol/L缝隙连接激动剂(AAP-10)干预组(AAP-100组)、500 nmol/L AAP-10干预组(AAP-500组),每组10只。采用浮置玻璃微电极法同步记录心内膜、心外膜心肌细胞跨膜动作电位及跨室壁心电图。结果:LQT2组QT间期,跨室壁复极离散度(TDR)、早期后除极(EAD)、R-on-T期前收缩和尖端扭转性室性心动过速(TdP)发生率均显著高于正常组(P<0.05)。在LQT2模拟状态下,500 nmol/L AAP显著缩短了QT间期和TDR(P<0.05),降低了EAD、R-on-T期前收缩和TdP的发生率(P<0.05)。结论:增加缝隙连接耦联能减少兔LQT2模型TDR和室性心律失常发生率。     

缝隙连接在大鼠缺血预适应心肌保护中的作用

目的探讨心肌缝隙连接在缺血预适应中的调控机制以及在预适应信号传导通路中的地位和作用。方法Sprague—Dawley大鼠进行30min的冠状动脉缺血和4h再灌注,根据是否使用缺血预适应、二氮嗪、18β-甘草次酸和5-羟基奎酸分为7组,即对照组（单纯缺血再灌注）、缺血预适应组、缺血预适应和5-羟基奎酸合用组、二氮嗪组、二氮嗪和5-羟基奎酸合用组、甘草次酸组、甘草次酸和5-羟基奎酸合用组。测量各组的血流动力学指标、心肌梗死面积以及缝隙连接蛋白43的磷酸化和内化。结果与对照组相比,缺血预适应、二氮嗪、18β-甘草次酸能降低心肌梗死面积（P〈0．001）,5-羟基奎酸可以阻断缺血预适应和二氮嗪的心肌保护作用（P〉0．05）,但是对缝隙连接失耦联剂甘草次酸没有影响（P〈0．001）。缺血预适应和线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂二氮嗪能促进缝隙连接蛋白43磷酸化,抑制去磷酸化和内化（P〈0．001,P〈0．001）,线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道阻断剂5-羟基奎酸能阻断该作用（P〉0．05,P〉0．0051）。结论缺血预适应通过开放线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道来调节缝隙连接蛋白43的磷酸化和内化,进而调控缝隙连接的化学转运,减少心肌梗死面积。     

脂联素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤时心律失常的影响

目的：观察脂联素对大鼠心肌缺血再灌注损伤时心律失常的影响并探讨其可能机制。方法：32只8周龄雄性大鼠被随机分为假手术组、缺血一再灌注（IR）组、地尔硫卓组和脂联素（APN）组,每组8只。①假手术组：只穿线,旷置90min;②IR组：先阻断血流30min,再灌注60min;③地尔硫卓组和APN组：先阻断血流30min,于再灌注开始时,从鼠尾静脉分别注射地尔硫卓（3．5μg／g·min）、APN（60ng／g·min）．再灌注60min。以Medlab生物信号采集处理系统连续监测各组心电图的变化。各模型组于再灌注60min后处死大鼠。测定血清、心肌组织一氧化氮（NO）的含量。结果：（1）与假手术组比较,IR组再灌注60min时段里．8只大鼠均出现再灌注心律失常．再灌注过程中ST段抬高的幅度显著增高（P〈0．001）,心肌组织、血清中NO含量均明显降低（P〈0．001）;（2）与IR组比较．APN组再灌注60min时段里,没有出现再灌注心律失常,再灌注过程中ST段抬高幅度显著下降（P〈0．001）,心肌组织、血清中NO含量均明显升高（P〈0．001）,且优于地尔硫卓组（P〈0．001）。结论：脂联素对缺血一再灌注损伤造成的心律失常有一定的保护作用．其机制可能与脂联素增加心肌组织、血清中NO含量有关。     

抗心律失常肽在兔肥厚心肌心律失常中的作用

目的:研究缝隙连接开放剂抗心律失常肽(AAP10)抗肥厚心肌室性心律失常的作用并探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)与心律失常的关系.方法:30只日本大耳白兔随机分为假手术组(Sham组)、左室肥厚组(LVH组)、AAP10组.LVH组和AAP10组行腹主动脉缩窄术,Sham组开腹但不行腹主动脉缩窄术.术后喂养8周.制备左室楔形心肌块灌注模型.Sham组和LVH组灌注正常台式液,AAP10组灌注含100 nmol/L的AAP10台式液.利用浮置玻璃微电极法同步记录楔型心肌块跨壁心电图和内外膜心肌细胞跨膜动作电位,程序电刺激起搏,记录早期后除极及室性心律失常的发生率.采取Western blot检测3组Cx43表达;采取免疫荧光方法显示3组Cx43的分布.结果:Sham组、LVH组、AAP10组室性心律失常的发生率分别为0、40%、10%.与Sham组相比,LVH组Cx43表达下降(50.7±6.1)%(P＜0.05),AAP10组与LVH组相比,Cx43表达上升(20.9±4.7)%,P＜0.05.免疫荧光显示肥厚心肌Cx43分布紊乱,由正常的端端分布成为细胞表面随机分布,加入AAP10后可改善其分布.结论:肥厚心肌有较高的心律失常发生率,肥厚心肌细胞Cx43表达下降并且排列紊乱,AAP10可提高Cx43的表达及改善其分布,降低室性心律失常的发生率.     

高血压病患者心脏结构改变与心律失常的关系

目的：探讨原发性高血压病患者心脏结构改变与心律失常的关系。方法：采用２４ｈ动态心电图、超声心动图对１２５例原发性高血压病患者进行检查和回顾性分析。结果高血压病患者房性心律失常发生率显著高于室性心律失常,左心房扩大发生率显著高于左心室肥厚。结论心扩大和室性心律失常的发生与左心室肥厚密切相关。     

有机磷农药中毒致心律失常分析

目的：观察有机磷农药中毒对患的心电图的影响及其在心律失常的发生,发展中所起的作用。方法：对32例重度有机磷农药中毒患及28例轻,中度患进行临床心电观察比较。结果：重度有机磷中毒患出现心律失常,与轻,中度中毒患比较,在统计学上有非常显性差异（P＜0．01）,心律失常形式呈多样化,既有室性心律失常,也有室上性：既有快速型心律失常,也有缓慢型。结论：对重度有机磷农药中毒引起的多种类型心律失常,应密切观察,及时发现,及时处理,绝大部分病人经治疗,心律失常可纠正。     

紧密连接蛋白occludin在急性坏死性胰腺炎大鼠脑微血管内皮细胞的表达

目的 研究ANP大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白occludin表达的变化及与胰腺病变程度的关系.方法 80只大鼠按完全随机法分为假手术(SO)组和ANP 3、6、12、24 h组.以5%胆酸钠逆行性胰胆管注射诱导ANP大鼠动物模型,行胰腺组织病理学评价,应用免疫组织化学法、RT-PCR法及Western blotting法检测大鼠脑微血管内皮细胞间紧密连接蛋白occludin及其mRNA表达.结果 occludin蛋白沿脑血管线性表达.ANP 3 h组蛋白表达量从S0组的0.49±0.08下降到0.35±0.09;occludin mRNA表达从1.50±0.30减少到1.01±0.18(P<0.05).ANP 6 h组达最低值,分别为0.26±0.07和0.93±0.19.ANP 12、24 h组occludin蛋白和mRNA表达量又较ANP 6 h组增加(P<0.05),但仍低于SO组(P<0.05).occludin蛋白及mRNA表达与胰腺组织损害程度呈明显负相关(Pearson相关系数分别为-0.48和-0.536,P<0.05).结论 在ANP进程中,脑微血管内皮细胞间紧密连接蛋白occludin及其mRNA均呈下调趋势,且与胰腺病变程度呈负相关.     

索他洛尔联合胺碘酮对心律失常的疗效观察

目的探讨索他洛尔联合胺碘酮治疗心律失常的临床效果。 方法选取2016年1—12月荣成市人民医院收治的100例心律失常患者,按随机数表法将所有患者分为对照组和研究组,各50例。对照组患者接受胺碘酮治疗,研究组在对照组的基础上联合索他洛尔治疗。 结果对照组治疗12个月后转复率为42.0%(21/50),观察组治疗12个月后转复率为54.0%(27/50),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者心率、舒张压和收缩压均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05),观察组患者心率、舒张压和收缩压优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者均未出现严重不良反应。 结论索他洛尔联合胺碘酮治疗心律失常效果显著,值得临床推广应用。