吸入脂多糖诱导小鼠急性肺炎模型的建立

目的：用吸入脂多糖(lipopolysaccharide, LPS）的方法建立简便、经济、稳定的小鼠急性肺炎模型。方法：将正常BALB/c小鼠麻醉后仰位固定,行LPS（50 μL, 1 g/L）吸入,于不同时间点获取支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF)后取肺组织制备匀浆,对支气管肺泡灌洗液进行细胞染色分类计数,用ELISA的方法检测肺组织匀浆和支气管肺泡灌洗液白介素-1β(（interleukin-1β,IL-1β）的含量。再取肺组织固定、切片,用HE染色鉴定炎症程度。结果：LPS吸入2~4 h后,支气管肺泡灌洗液和肺组织匀浆中IL-1β水平即明显增加。2 h时肺内就开始出现炎性细胞浸润,12~24 h炎症加剧甚至形成脓肿。支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞增多最早出现,从2 h即开始增加,巨噬细胞和淋巴细胞则在1 d后开始明显增加,一直持续3 d。结论：用LPS吸入的方法可以建立快速、稳定、典型的小鼠急性肺炎模型。     

脂多糖联合MPTP诱导的小鼠慢性帕金森病模型的评价

目的 建立脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)联合1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP)诱导的慢性小鼠帕金森病模型,探讨其行为学和黒质多巴胺能神经元细胞的变化情况。方法 将20只C57BL/6小鼠随机分为模型组和对照组,模型组每日腹腔注射LPS(0.25 mg/kg) 一次,连续3 d,最后一次注射LPS 4 h后,每日腹腔注射MPTP(25 mg/kg)一次,连续2 d,对照组腹腔注射相同量的生理盐水。8周后用步态分析和转棒实验评价小鼠的行为学能力,免疫组化法观察黑质酪氨酸羟化酶(TH) 阳性细胞变化情况。结果 模型组小鼠行为学变化较对照组差异有显著性(P<0.05),模型组小鼠中脑黒质区显示出严重的神经元细胞损伤。结论 LPS联合MPTP腹腔注射可成功诱导出慢性小鼠帕金森病模型,提示该模型可用于帕金森病的发病机制及药物治疗效果等相关研究。     

猪急性重症胰腺炎模型的建立

目的 :建立急性重症胰腺炎 ( ASP)模型。　 方法 :猪 6头 ,体重 17～ 2 2 kg。在无菌条件下 ,向胰总管内注入 1ml/ kg 5%牛磺胆酸钠 (内含 80 0 0～ 10 0 0 0 BAEE单位胰蛋白酶 / ml,p H7.6)诱导 ASP。　 结果 :ASP组胰腺表现为广泛出血、坏死、大量炎性细胞浸润 ,并伴有较严重的血流动力学紊乱、生化异常 ,及其它器官功能损害 ,符合 ASP。　 结论 :为进一步探讨和研究 ASP后胰腺及胰腺外损伤病理生理机理及防治对策提供了一种更接近于人生理的实验动物模型     

姜黄素衍生物对脂多糖诱导急性肺损伤的防护作用研究

对姜黄素衍生物是否可治疗脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）进行研究,为研究姜黄素衍生物的作用机制及临床应用提供参考。方法小鼠腹腔注射LPS复制ALI模型,昆明小鼠90只,随机分为6组,分别为正常组、模型组、姜黄素组,以及姜黄素衍生物低、中、高剂量组（50、100 和200 mg/kg）。预先7 d 给予小鼠灌胃治疗,第7 天小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS。分别于6 h、1 d和3 d 取材,检测血中中性粒细胞和单核细胞的比例变化。酶联免疫吸附试验检测小鼠肺组织中炎症因子白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量;丙二醛、髓过氧化物酶及谷胱甘肽试剂盒检测小鼠肺组织中氧化物质的含量。肺组织苏木精- 伊红染色法（HE）染色观察肺组织病理改变。结果姜黄素衍生物可减少小鼠血中炎症细胞数,降低小鼠肺组织中炎症因子。肺组织HE染色结果显示,模型组肺组织切片炎症细胞增多,肺泡壁增厚,肺泡结构破坏,而姜黄素衍生物各剂量组与模型组比较,差异有统计学意义（p <0.05）。结论姜黄素衍生物对内毒素诱导的ALI有一定的保护作用。     

参麦注射液减轻大鼠重症急性胰腺炎相关性肺损伤

目的 观察参麦注射液能否减轻大鼠重症急性胰腺炎(SAP)相关性肺损伤,并初步探讨其相关机制。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、SAP模型组和参麦注射液干预组,每组10只。采用经胰胆管注射5%牛黄胆酸钠诱发SAP大鼠肺损伤模型,参麦注射液干预组在建模前10 min经尾静脉注射8 mL/kg参麦注射液。模型制作24 h后经心脏取血1 mL测定血淀粉酶,取胰腺组织及左肺组织用于病理学与免疫组织化学检测;取右肺组织匀浆后检测匀浆液中髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)与白介素1β(IL-1β)含量。结果 假手术组大鼠各项指标未见明显异常。SAP模型组大鼠经胰胆管注射5%牛黄胆酸钠24 h后,血浆淀粉酶明显升高,胰腺组织小叶结构严重破坏;肺泡结构破坏,肺泡内大量炎性细胞浸润;肺组织氧化应激指标MPO活性与MDA含量明显升高,炎性指标TNF-α、IL-1β含量亦升高,与假手术组相比差异有统计学意义(P<0.01);肺组织ICAM-1与caspase-3呈强阳性表达。参麦注射液干预组大鼠各项指标均较SAP模型组减轻。结论 参麦注射液能减轻SAP相关性肺损伤的原发病及肺损伤,其对肺的保护作用与抗氧化损伤、抗炎症反应及抗凋亡等有关。     

重症急性胰腺炎对肠黏膜屏障功能损伤的研究进展

在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)中常见肠屏障功能障碍(intestinal barrier functional disturbance, IBFD)的发生。肠屏障功能障碍可引发细菌及内毒素移位,导致肠源性感染的发生,诱发多器官功能障碍。本文就SAP时肠黏膜屏障的损伤研究作一综述。     

内毒素复合油酸二次打击致大鼠急性肺损伤模型的建立

目的研究腹腔注射内毒素（LPS）和（或）静脉注射油酸（OA）的方法致大鼠急性肺损伤（ALI）模型的不同特点及其可能机制。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组6只。对照组（C组）：腹腔注射生理盐水10ml/kg;内毒素组（LPS组）：腹腔注射1%LPS10mg/kg;油酸组（OA组）：静脉注射OA0.15ml/kg;内毒素＋油酸组（LPS＋OA组）：腹腔注射1%LPS10mg/kg,30min后静脉注射OA0.15ml/kg。观察120min内各组大鼠平均动脉压和心率变化率的改变。120min后处死动物采集标本。分别检测肺组织核转录因子κB（NF-κB）P65、血清IL-6、肺组织髓过氧化物酶（MPO）含量、动脉血气指标和肺组织湿-干重比（W/D）,HE染色观察肺组织病理学改变。结果与C组比较,LPS组肺组织NF-κBp65水平、MPO含量及血清IL-6含量显著增加,肺组织W/D比值及血气分析结果无显著性差异,病理组织学改变轻微;OA组肺组织NF-κBp65水平和MPO含量及血清IL-6含量无显著改变,肺组织W/D比值升高,pH值和PaO2降低,PaCO2升高,肺脏出现严重的肺泡上皮细胞损伤和肺泡结构破坏。LPS＋OA组肺组织NF-κBp65水平、MPO含量和W/D比值及血清IL-6含量显著增加,pH值和PaO2降低,PaCO2升高,肺泡破坏严重,大量组织液渗出。结论内毒素复合油酸可以产生协同作用,产生大量致炎细胞因子,并造成大鼠严重的肺脏病理生理改变,临床ALI/ARDS发病过程更为接近,是一种研究ALI发病机制及早期干预的较理想的动物模型。     

DMTU对大鼠SAP致肺损伤的保护作用

目的研究二甲基硫脲（dimethylthiourea,DMTU）对大鼠急性重症胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）肺损伤是否具有保护作用,为临床治疗SAP所致肺损伤提供新思路。方法将18只雄性Wistar大鼠随机分为治疗a组（注射DMTU a组）、对照a组（注射生理盐水a组）和假手术a组,每组6只。在存活实验中,将60只Wistar大鼠随机分为3组（治疗b组、对照b组和假手术b组）每组包括20只大鼠。应用逆行胰胆管穿刺注射牛黄胆酸钠制备SAP大鼠模型,造模成功后对治疗组大鼠腹腔注射DMTU（500 mg/kg体质量、150 mg/kg体质量,2次/d）。其余各组大鼠均腹腔注射生理盐水（1 ml/100 g体质量）。术后观察72 h后通过心脏放血处死大鼠,取走肺及胰腺组织。观察大鼠肺脏组织的髓过氧化酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）水平和组织学变化及DMTU对其的影响。在存活实验中,观察各组大鼠的存活情况。结果对照a组的MPO活性增强,MDA水平提高;DMTU可以明显降低肺组织的MPO活性和MDA水平,同时DMTU可以减轻大鼠肺组织的病理损害而没有改善胰腺组织的病理损害;术后72h内各时间点治疗b组的大鼠生存率均比对照b组高。结论各种炎症介质、细胞因子及氧自由基参与了SAP的病理生理过程。DMTU可直接降低SAP大鼠肺组织MPO活性和MDA水平而减轻组织脂质过氧化和肺组织病理损害,最终可以降低死亡率。     

外源性瘦素对重症急性胰腺炎肝损伤的机制研究

目的：探讨外源性瘦素对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肝损伤的作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAP组、瘦素干预组。采用逆行胰胆管注射3．5％牛黄胆酸钠制作SAP大鼠模型。瘦素干预组大鼠腹腔内注入瘦素20μg／kg。在术后12 h处死各组大鼠,取胰腺、肝脏组织进行HE染色、检测肝脏组织核因子‐κB（NF‐κB）,采用细胞凋亡原位缺口末端标记法（TUNEL）测定肝脏组织的细胞凋亡指数,检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬酸氨基转移酶（AST）及淀粉酶（AMY）水平。结果与假手术组比较,SAP组和瘦素干预组大鼠肝脏组织病理评分均明显增加（P＜0．05）;与SAP组比较,瘦素干预组大鼠肝脏组织病理评分降低（P＜0．05）;肝脏组织NF‐κB表达在SAP组和瘦素干预组较假手术组明显增加（P＜0．01）,与SAP组比较,瘦素干预组大鼠NF‐κB表达下降（P＜0．05）。肝细胞凋亡指数SAP组、瘦素干预组大鼠均较假手术组明显增高（P＜0．05）,而瘦素干预组较SAP组降低（P＜0．05）。SAP组和瘦素干预组大鼠 ALT、AST、AMY水平较假手术组显著增高（P＜0．05）,而瘦素干预组较SAP组降低（P＜0．05）。结论外源性瘦素可能通过降低肝脏组织 NF‐κB的表达而降低肝细胞的凋亡指数起到保护SAP并发的肝损害作用。     

犬重症急性胰腺炎模型的制备

目的:探讨建立稳定、可靠的犬重症急性胰腺炎(SAP)模型的方法,以利于重症急性胰腺炎的研究.方法:健康杂种犬15只(实验组10只,对照组5只),在无菌条件下行胃、胆囊、空肠、膀胱造瘘,十二指肠、主胰管、副胰管插管.实验组于手术第4天,向主胰管内注入5%牛磺胆酸钠溶液1 ml/kg诱导重症急性胰腺炎.所有动物均单纯营养支持,观察自然病程.结果:成功建立犬重症急性胰腺炎模型.犬10 d存活率实验组为80%,对照组为100%;实验组中外周血淀粉酶及血钙、肝肾功能均有明显改变,胰液中淀粉酶明显升高;实验组胰腺组织病理改变和腹部CT符合出血坏死性胰腺炎表现;对照组无明显生化和病理改变.结论:本模型较传统造模方法,将犬10 d存活率由30%～40%提高到80%,利于较长时间(1～2周)连续动态观察,适合各种治疗方法比较研究.     

大肠杆菌致小鼠急性腹膜炎模型的建立

目的建立一种简便、稳定、符合临床特征的小鼠感染大肠杆菌致细菌性腹膜炎的模型。方法小鼠腹腔分别注射9种浓度的2株大肠杆菌菌液,分别于4、6、8、16、24h记录小鼠外周血白细胞总数的变化;记录实验组小鼠死亡时间,并解剖死亡小鼠,观察其腹腔情况以及肝、脾组织的病理变化。结果各实验组小鼠均表现出细菌性腹膜炎临床征象,高于2×10^8cfu/ml浓度的实验组小鼠细菌性腹膜炎尤为典型;小鼠外周血白细胞总数随着注射菌液后时间的延长呈现先升高后降低的趋势;病理检查显示实验组小鼠肝、门管、脾窦内有不同程度的中性粒细胞浸润。标准菌株的MLD为3×10^8cfu/ml。结论小鼠大肠杆菌细菌性腹膜炎模型建立成功;小鼠死亡率因不同菌株、不同浓度而有所差异。     

wortmannin对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂wortmannin对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用并探讨其机制.方法:将健康成年SD大鼠54只随机分为对照组、SAP组和SAP wortmannin组,每组18只,逆行胆胰管注射50 g/L牛磺胆酸钠制备SAP模型.检测血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量;观察肺组织及胰腺组织的病理变化.结果:SAP组较对照组血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、BALF蛋白含量及肺组织MPO活性均显著升高(P《0.01),胰腺、肺组织病理损伤随病情进展而逐渐加重;SAP wortmannin组较对照组各项指标均升高,但较SAP组均明显降低(P《0.01), 胰腺、肺组织病理损伤较SAP组减轻.结论:wortmannin对SAP大鼠肺损伤有一定的保护作用, 其机制可能与其抑制了中性粒细胞内PI3K信号转导通路的活化, 使多种炎症细胞的活化和TNF-α等炎症因子的释放受到抑制有关.     

大鼠重症急性胰腺炎模型制备方法的建立与探讨

目的 建立一种操作简单,诱导成功率高且病变典型的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型.方法 36只健康雄性SD大鼠随机分为模型组(n=18)和对照组(n=18).模型组用微量输液泵经胰胆管逆行注入3.5%牛磺胆酸钠诱导SAP大鼠模型;对照组仅翻动胰腺和十二指肠.观察两组大鼠术后3h、6h、12h腹水及血清淀粉酶、脂肪酶的变化,观察胰腺组织大体形态以及病理改变,并进行评分.结果 模型组胰腺组织结构破坏明显,其大体及病理评分均显著高于对照组(P<0.01),腹水量、血清淀粉酶、脂肪酶也均较对照组显著增加(P<0.01).结论 逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠能成功诱导大鼠SAP,具有创伤小、操作简便、可重复性好及诱导成功率高的特点,是一种较为理想的SAP动物模型制备方法.     

布雷菲德菌素A在脂多糖诱导急性肺损伤中的作用

目的 探讨布雷菲德菌素A(Brefeldin A)在脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤中的作用。 方法 小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)和上皮细胞(MLE-12)分别给予浓度为1、10、100 μM的Brefeldin A后,立即用LPS 500 ng/ml处理,收集3、6、9、24 h的细胞上清并测定MH-S中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和MLE-12中的趋化因子KC值;ICR小鼠随机分为生理盐水组(Normal组)、模型组(LPS组)、地塞米松组(Dex组,5 mg/kg)、Brefeldin A组(BFA组,10 mg/kg),每组12只,气道内2 mg/kg滴入LPS制备急性肺损伤模型,生理盐水组给予等体积生理盐水。6 h后观察肺组织病理改变,测定肺泡灌洗液(BALF)中白细胞、白蛋白含量和TNF-α、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)等炎症因子含量,检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、cAMP含量和MAPK信号通路中ERK、p38和JNK等蛋白激酶分子磷酸化水平的变化。 结果 100 μM的Brefeldin A能显著减少MH-S中TNF-α的释放和MLE-12细胞中KC的产生(P<0.001)。Brefeldin A显著改善肺组织病理变化,降低BALF中白细胞(P<0.001)和TNF-α(P<0.05)含量,对BALF中白蛋白、IL-1β和IL-6无显著影响,显著降低小鼠肺组织中MPO活性(P<0.05),升高cAMP的水平(P<0.001),同时能显著抑制ERK的磷酸化(P<0.05)。 结论 Brefeldin A对急性肺损伤可产生保护作用,其机制与抑制相关炎症因子释放、升高细胞内cAMP的含量、抑制ERK磷酸化等途径有关。      

脂氧素A4对重症急性胰腺炎肺损伤小鼠的保护作用

目的 观察脂氧素A4(LXA4)对小鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤的作用.方法 将30只ICR小鼠随机分为对照组即假手术组、SAP组及LXA4治疗组,每组10只小鼠.SAP组及LXA4组小鼠采用逆行胰胆管注射法建立重症急性胰腺炎模型,术后1h,LXA4小鼠尾静脉给予LXA4 0.1 mg/kg,建模后24 h处死小鼠,检测肺湿干重比,ELISA法检测血清TNF-α、IL-10,观察小鼠肺组织病理变化并评分,比色法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO),TBA法检测肺组织丙二醛(MDA)含量及Western Blot检测肺组织核转录因子-κB p65、IκBα的表达情况.结果 与SAP组相比,LXA4治疗组血清TNF-α,肺组织病理评分、肺湿干重比、MPO活性、MDA含量及NF-κB p65表达均有所降低,血清IL-10及肺组织IκBα表达上升,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 LXA4对小鼠重症胰腺炎相关肺损伤有保护作用,其机制可能是通过下调NF-κB的表达实现的.     

45例重症急性胰腺炎的临床治疗分析

目的探讨重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）的＂个体治疗方案＂。方法回顾性分析45例SAP患者的临床诊治资料,评价其诊治的临床效果。结果在45例SAP患者中,28例非胆源性SAP的治愈率为82.14%,17例胆源性SAP的治愈率为100%;仅行非手术治疗的25例SAP患者治愈率为63.63%,非手术治疗后行手术治疗的8例SAP患者治愈率为87.50%,12例早期行急诊手术的SAP患者治愈率为100%。结论对于SAP的治疗,在遵循治疗原则、严格掌握手术指针的同时,应综合判断患者病情、采取个体化治疗方案,可提高SAP的救治率。     

重症急性胰腺炎69例临床治疗分析

目的探讨重症急性胰腺炎的治疗方法。方法回顾性总结重症急性胰腺炎69例的治疗情况。结果其中保守治疗40例,手术治疗29例。保守治疗重症Ⅰ级37例,死亡1例;重症Ⅱ级3例,死亡1例。手术治疗重症Ⅰ级6例,均治愈;重症Ⅱ级23例,死亡4例。结论重症急性胰腺炎有胰腺感染和并发症者应行手术治疗;对年龄大于65岁者,因更易出现多器官功能衰竭,可适当放宽手术指征;其余的患者则行积极的保守治疗。     

重症急性胰腺炎69例临床治疗分析

目的：探讨重症急性胰腺炎的治疗方法。方法：回顾性总结重症急性胰腺炎69例的治疗情况。结果：其中保守治疗40例，手术治疗29例。保守治疗重症Ⅰ级37例，死亡1例；重症Ⅱ级3例，死亡1例。手术治疗重症Ⅰ级6例，均治愈；重症Ⅱ级23例，死亡4例。结论：重症急性胰腺炎有胰腺感染和并发症者应行手术治疗；对年龄大于65岁者，因更易出现多器官功能衰竭，可适当放宽手术指征；其余的患者则行积极的保守治疗。     

冬凌草甲素对雨蛙素诱导的重症急性胰腺炎大鼠免疫紊乱和组织损伤的影响

[目的]探讨冬凌草甲素（Ori）在重症急性胰腺炎（SAP）大鼠免疫紊乱和组织损伤中的调节作用。[方法]将50只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组（SAP组）、SAP+Ori 5 mg/kg组、SAP+Ori 10 mg/kg组、SAP+Ori 20 mg/kg组,每组10只。采用化学诱导法建立SAP大鼠模型,皮下注射雨蛙素（25μg/kg）诱导SAP;计算胰腺质量指数,酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清脂肪酶、淀粉酶水平,苏木精-伊红（HE）染色观察胰腺组织病理形态学变化;免疫组化观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达;蛋白免疫印记（Western Blot）法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白（Bax）/Bcl-2蛋白表达;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、白细胞介素-10(IL-10)表达水平;实时定量荧光聚合酶链反应（RT-PCR）法检测胰腺组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)mRNA表达水平。[结果]与对照组比较,SAP组大鼠胰腺组织功能明显下降（P<0.05）,...     

大鼠急性重症胰腺炎模型制备的技术改进

目的 探讨大鼠重症急性胰腺炎模型制备技术的改进。方法60只健康SD大鼠随机分为改进组（A组,n=30）和对照组（B组,n=30）。A组采用一次性BD胰岛素注射器以5～10°角（针头与肠胰平面夹角）、B组采用一次性1ml注射器以10～150角,分别经十二指肠乳头逆行胰胆管穿刺注射5％牛磺胆酸钠诱导大鼠重症急性胰腺炎模型。各组大鼠分别于术后24h处死,观察胰腺大体及光镜下病理改变,计算诱导成功率、24h存活率及肠坏死率,并进行统计学比较。结果两组大鼠胰腺均呈出血坏死性改变,光镜下均可见炎性细胞浸润。与对照组相比,改进组肠坏死率降低（P＜0．05）。结论应用此方法对逆行胰胆管穿刺注射法制作大鼠急性重症胰腺炎模型加以改进,具有创伤小,操作简单,模型肠坏死率低等优点,是一种较理想的制模方法。