乙型肝炎病毒感染者病毒基因型和亚型分布及其临床意义

目的研究不同类型乙型肝炎病毒（HBV）感染者中HBV基因型和亚型分布情况及其临床意义。方法应用基因型和亚型特异性引物聚合酶链反应法（PCR），对北京、长春、汉川，深圳，清远和南京等6个城市445份HBV感染者血清进行基因型及亚型分型，其中急性肝炎7例，无症状携带者36例，慢性乙型肝炎352例，肝硬化28例，肝细胞癌22例。通过对PCR产物测序确定其基因型，以验证该法的准确性。结果445份血清中，239例（53．7％）为C型，其中13例（5．4％）为C1亚型，135例（56．5％）为C2亚型，91例（38．1％）为非C1／C2亚型；145例（32．6％）B型，其中100例（69．0％）为Ba亚型，25例（17．2％）为Bj亚型，20例（13．8％）为非Ba／Bj亚型；61例（13．7％）为B型与C型混合感染，其中6例（9．8％）为Ba与C1亚型混合感染，3例（4．9％）为Bj与C1亚型混合感染，15例（24．6％）为Ba与C2亚型混合感染，8例（13．1％）为Bj与C2型混合感染，11例（18．0％）为Ba与非C1／C2亚型混合感染，7例（11．5％）为Bj与非C1／C2亚型混合感染，2例（3．3％）为非Ba／Bj亚型与C1亚型混合感染，3例（4．9％）为非Ba／Bj亚型与C2亚型混合感染，6例（9．8％）为非Ba／BJ亚型与非C1／C2亚型混合感染。未检测到其他基因型及亚型。在不同类型乙型肝炎病毒感染者中，B型，C型、B与C型混合感染及亚型分布差异有统计学意义，在肝硬化和肝细胞癌患者中C型所占比例较高（分别为78．6％和86．4％），无症状携带者中B型所占比例较高（72．2％）。但不同性别患者中，HBV基因型和亚型分布无差异。在HBeAg阳性和阴性感染者中，HBV基因型和亚型分布差异也有统计学意义。结论该6个城市HBV感染者中，以B2和C2亚型占优势，C基因型可能与肝硬化和肝细胞癌的发生有关。     

核酸杂交检测HBV DNA及基因分型

检测血清中HBVDNA并进行基因分型。采用聚合酶链反应（PCR）扩增HBV DNA后，采用不同的探针，利用微板杂交法将其分为六个亚型。50例广东地区HBVDNA阳性病人中C型占68％（34例），B型占10％（5例），D型占6％（3例），F型占2％（1例），另有8％为混合型（3例BC，1例BCD），没有发现A型和E型，3例分型结果阴性，为未定型。广东地区HBV基因亚型以C型为主，B型次之，其它较少。可能存在其他亚型。     

浙江温州地区1020例乙型肝炎患者HBV基因分型研究

目的:了解浙江温州地区乙肝病毒基因型分布,初步评价微流芯片分析仪在乙肝病毒基因分型中的应用特点.方法:用HBV基因型特异引物经聚合酶链反应扩增温州地区1 020例慢性乙型肝炎患者血清HBV,其扩增产物应用微流芯片检测.结果:该地区1 020例患者中966例有基因分型结果,其中B型20.49%(198/966)、C型66.46%(642/966),B、C混合型4.87%(47/966),C、B混合型6.21%(60/966),D型1.97%(19/966).结论:浙江温州地区乙型肝炎病毒基因型分布具有北方流行特点,微流芯片在同类检测方法中具有灵敏、准确、快速优势.     

山西省HBV基因型及亚型分布调查

目的了解山西省乙型肝炎病毒(HBV)的基因型及亚型分布情况。方法对136例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性者血清采用PCR-PFLP结合基因型特异性引物-PCR法进行HBV基因型及亚型检测。结果 136例HBV感染者的血清标本经PCR-PFLP分析,B基因型18例,均为Ba亚型,占13.2%;C基因型113例,占83.1%,除4例未分型外均为Ce亚型;D基因型5例,占3.7%。经型特异性引物-PCR分析,18例HBV B基因型中有4例为B/C基因型混合感染;5例经PCR-PFLP确定的D基因型病毒经型特异性引物法分析有2例扩增出E基因型条带。C、B基因型病毒感染者的平均年龄分别为(39.5±13.1)岁和(30.5±14.1)岁,差异有统计学意义(P<0.05);与B基因型相比,C基因型病毒感染者的HBeAg阴转率减慢。结论山西省HBV基因型主要为C(Ce),有少量的B(Ba)和D基因型,且存在B/C混合基因型,且可能存在D和E基因型病毒的重组体;与B基因型比较,感染C基因型病毒更难被机体清除,疾病更易慢性化。     

乙型肝炎病毒聚合酶链反应基因分型法的建立及应用

目前应用基因序列测定法分析乙型肝炎病毒(HBV)基因型虽然结果可靠,但操作较复杂,且费用较高,不适用于大规模的临床和流行病学调查。旨在建立一种简便的HBV基因分型法,即基因型特异引物PCR法,并用此法对2001年北京地坛医院110例慢性乙型肝炎患者的HBV基因型进行了分析。     

十堰地区乙肝病毒基因型分布及其临床意义

目的:了解十堰地区乙肝病毒基因型分布情况以及基因型与临床特征的关系,探讨其临床意义。方法:采用型特异性引物巢式PCR方法对本地区244例乙型肝炎患者进行基因型检测,同时对部分PCR产物进行测序,确定其基因型。结果:在244例乙型肝炎患者中,B型165例(67.62%)、BC混合型74例(30.33%)、C型5例(2.05%),未发现A、D、E、F型;AsC中,B型36例,占76.60%;HF、AHB、HCC中B基因型占绝对优势,分别为95.96%、100%、81.82%,显著高于LC的57.69%和CHB的60.00%,其中HF与LC、CHB之间差异显著(P<0.05,P<0.01);CHB中BC混合型51例(37.38%),与AsC中10例(21.28%)比较有统计学意义(P<0.05);B基因型患者血清ALT(323.57±596.83IU/L)、AST(254.88±460.94IU/L)、TBil(100.67±137.09μmol/L)均高于BC混合型(160.70±235.62IU/L、137.57±201.95IU/L、50.97±78.93μmol/L),差异有显著性意义(P<0.05);基因型分布在年龄、性别及HBeAg阳性率上均无差异;B基因型HBV DNA水平处于高度复制状态(>108copies/ml)的比例占49.12%(56/114),比BC混合型32.14%(18/56)高,BC混合型中中度复制(105~108copies/ml)和低度复制(<105copies/ml)占67.86%(38/56),比B型50.88%(58/114)高(P<0.05)。结论:本地区基因型以B型为主,BC混合型次之,C型少见;B型在AsC、HF、AHB、HCC中占优势,与疾病的活动度及预后密切相关;BC混合型在CHB和LC中多见,与乙型肝炎慢性化相关。     

急性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒基因分型及意义

实验采用巢式聚合酶链反应（PCR）对73例急性乙型病毒性肝炎（AHB）患者血清中HBV DNA 进行检测并做基因型别分析，现将结果报道如下：     

兰州地区HBV基因型的分布及临床意义

目的观察兰州地区HBV基因型的分布及其与病情严重性的相关性。方法采用荧光PCR法对163例乙肝患者血清进行基因分型。结果兰州地区乙肝患者HBV基因分型以C型为主,占92.02%,B型占4.33%,B＋C型占3.64%。基因C型患者中,肝硬化患者明显多于慢乙肝患者,（49.33% vs34.00%）,但差异无统计学意义。进一步分析年龄、HBVDNA对病情的影响,肝硬化与肝癌患者在年龄方面明显大于慢乙肝患者,在HBVDNA水平方面低于慢乙肝患者,差异有统计学意义。结论兰州地区以C型为主,符合北方以C型为主的研究结果 ;除外基因型对病情及预后的影响外,还需要结合患者的年龄、病程的长短、HBVDNA水平等多种因素来分析病情。     

中国广东地区乙型肝炎病毒基因亚型的分布

目的调查中国广东地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型,主要是基因亚型的分布情况.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法以及序列测定法,对广东地区417例慢性HBV感染者血清进行研究.结果广东地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为Ba亚型,未发现Bj亚型的存在.C亚型有C1和C2两个亚型,其中C1占63%,C2占37%.结论广东地区流行的HBV基因型以Ba和C1亚型为主,C2亚型较少,Bj亚型极为罕见.     

乙型肝炎病毒D基因型与原发性肝癌的关系

根据HBV全基因序列的同源性差异≥8％，现已将HBV分为A～G8个基因型。HBV DNA的基因型别呈一定的地域性分布，不同的基因型与HBV感染途经、致病性亦有一定的相关性。在我国约有90％原发性肝癌(HCC)合并HBV感染，HBV感染与HCC的发生密切相关。然而，迄今为止对HBV感染后的确切致癌机制还不甚清楚，有关HBV基因型与HCC关系的研究甚少。应用PCR微板核酸杂交-酶联免疫吸附试验(ELISA)对73例HBV DNA阳性HCC患者进行了基因分型，旨在探讨HBV基因型与HCC的关系。     

长春市702例HBV感染者的病毒基因分型及临床意义

目的了解长春市HBV基因型的分布情况,分析不同基因型与病毒复制水平、血清标志物及肝损伤的关系及临床意义。方法收集2013年8月-2016年5月于吉林大学第一医院就诊的HBV感染者702例,采用real-time PCR法检测HBV基因型,并检测HBV DNA载量、血清标志物及肝功能,分析基因型与临床检测项目的相关性。计量资料组间比较采用独立样本t检验;计数资料组间比较采用χ2检验。HBV基因型在不同疾病中的分布选用Mann-Whitney U检验。结果 702例HBV感染者中成功分型664例,其中C基因型484例(72.9%),B基因型168例(25.3%),B+C基因型12例(1.8%)。HBV基因型分布无性别、年龄差异。C基因型感染者HBV DNA载量为(6.68±1.20)log10拷贝/ml,显著高于B基因型(5.15±1.37)log10拷贝/ml,差异有统计学意义(t=13.714,P0.001);C基因型HBsAg(+)+HBeAg(+)+抗-HBc(+)高于B基因型,差异有统计学意义(χ2=21.687,P0.001);但HBsAg(+)+抗-HBe(+)+抗-HBc(+)两者间差异无统计学意义(χ2=2.124,P=0.145);B基因型HBsAg和抗-HBc双阳性率显著高于C基因型(χ2=28.780,P0.001)。C基因型感染者ALT、AST水平显著高于B基因型[(307.6±113.4)U/L vs(285.8±96.2)U/L,(211.1±96.4)U/L vs(192.7±89.2)U/L],差异有统计学意义(t值分别为2.229、2.172,P值分别为0.026、0.030)。C基因型感染者Alb水平(37.6±9.1)g/L低于B基因型(39.9±10.6)g/L,差异有统计学意义(t=2.701,P=0.007)。C基因型感染者发展为慢性肝炎264例,肝硬化202例,肝癌18例,B基因型感染者发展为慢性肝炎142例,肝硬化20例,肝癌6例,前者对肝脏的损伤程度强于后者,差异有统计学意义(U=28 894.000,P0.001)。结论长春市HBV感染者以C基因型为主,B基因型次之。HBV基因型与性别、年龄差异无关。C基因型感染者的HBV DNA复制较为活跃,与肝损伤严重程度的相关性高于B基因型。     

Hepatitis C virus infection and genotypes in Japanese hemophiliacs

Abstract: Liver function and antibodies to hepatitis C virus and to human immunodeficiency virus-1 were examined in 195 Japanese patients with hemophilia. One hundred and seventy-three were positive for antibody to HCV and 61 for antibody to human immunodeficiency virus-1. In 63 patients, we examined HCV genotypes according to the double polymerase chain reaction method. Forty cases (63%) were infected with hepatitis C virus with a single genotype, including type 1a in five, type 1b in 21, type 2a in seven and type 2b in seven; 16 (25%) were infected with double genotypes, including types 1a+1b in 14, types 1b+2a in one and types 1b+2b in one; and four (6%) were infected with triple genotypes, including types 1a+1b+2a in two and types 1a+1b+2b in two. Genotype could not be determined in three patients by this method. In the 191 non-hemophiliac patients with chronic hepatitis C, HCV genotyping was as follows: type 1a in 0, type 1b in 121, type 2a in 40 and type 2b in 10 of 171 cases (89.5%) with single infection and types 1b+2a in five and types 2a+2b in one of six (5.5%) with double infection. In the remaining 14 patients, genotype could not be determined. Frequent transfusion of domestic and/or imported coagulation factor concentrates probably caused the high incidence of HCV infection with rare or mixed genotypes in Japanese hemophiliacs.     

HBV基因型与HBeAg的表达关系及其临床意义

目的观察慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者HBV基因型与HBeAg表达和病情轻重的关系。方法利用型特异性引物多重PCR方法检测HBV基因型,时间分辨荧光法检测HBV DNA。结果在120例慢性乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型C型84例（70%）、B型31例（25.8%）,BC混合型5例（4.2%）,未发现A、D、E、F基因型;C型在慢性重型肝炎组最高（P〈0.05）;在C基因型中HBeAg（＋）患者较HBeAg（-）患者多见（P〈0.05）,在B基因型中,HBeAg（＋）和HBeAg（-）患者分布无明显差别。结论徐州地区HBV基因型以C型和B型多见,e抗原的表达率在C型中较高;基因型B型与C型相比,C型引起肝脏损伤重。     

乙型肝炎患者血清中HBcAg与HBV复制指标的关系

目的探讨乙型肝炎患者血清ＨＢｃＡｇ与ＨＢＶ复制指标的关系及临床意义．方法对３１１例乙型肝炎患者进行了ＨＢｃＡｇ检测，并同时进行酶联法乙肝五项、地高辛法ＨＢＶＤＮＡ检测，其中２３７例进行乙肝ＤＮＡ聚合酶（ＤＮＡＰ）检测．结果ＨＢｃＡｇ阳性组的ＨＢＶＤＮＡ检出率（７７６％），明显高于ＨＢｃＡｇ阴性组（３５５％，Ｐ＜００１）；在ＨＢｃＡｇ阴性组中，抗ＨＢｅ阳性者仍能检出２９９％（４４／１４７）ＨＢＶＤＮＡ者阳性；ＨＢｅＡｇ，ＨＢｃＡｇ均阳性者其ＨＢＶＤＮＡ和ＤＮＡＰ的检出率高达８５９％；其他依次为ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃＡｇ均阳性者７１４％，抗ＨＢｅ，ＨＢｃＡｇ阳性者６９２％，ＨＢｅＡｇ阳性，ＨＢｃＡｇ阴性者６８４％，抗ＨＢｅ阳性，ＨＢｃＡｇ阴性者２７６％．结论血清ＨＢＶＤＮＡ，ＤＮＡＰ，ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ均是反映乙肝病毒复制的敏感指标，抗ＨＢｅ的出现并不表示病毒复制停止，应参考其他病毒复制指标情况．各种指标的不同组合可以清楚地反映出患者体内病毒复制状况．     

High rate of mixed genotypes of hepatitis C virus in patients of an epidemic area in Japan

The subjects of this study were 151 patients (69 males and 82 females) who underwent examination and liver biopsy owing to liver dysfunction in an epidemic area with hepatitis C. Second generation hepatitis C virus antibody (HCV Ab) was positive in 116 (76.8%) of 151 cases. HCV-RNA was detected in 120 (79.5%) by polymerase chain reaction (PCR). In 7 (4.6%) cases, HCV Ab could not be found, but HCV-RNA was detected. Three (2.0%) cases were positive for HCV Ab but negative for HCV-RNA. On the basis of variation in nucleotide sequence within a restricted region in the putative core gene of HCV, HCV genotypes were classed into four types of I, II, III and IV by PCR. The genotypes were identified in 120 cases. Ninety-eight (81.7%) cases carried one of the four types. Type II was found in 76 (63.3%) cases and type III in 22 (18.3%). The other 22 (18.3%) carried simultaneously two different genotypes (mixed type): 21 (17.5%) cases with type II + III and one (0.8%) case with type II + IV. In comparison with the incidence of HCV mixed types in cases with hepatitits C in a non-epidemic area, carriers of mixed types were found at a significantly higher rate in the epidemic area. Liver biopsy of 120 cases with identified HCV genotypes in the epidemic area showed 93 cases of chronic active hepatitis, nine of chronic lobular hepatitis, 10 of chronic persistent hepatitis and eight of liver cirrhosis. No significant correlation could be detected between liver histology and HCV genotypes. Of the 120 cases, 63 (52.5%), 54 (45.0%) and 12 (10.0%) cases had past histories of folk remedies accompanying bleeding, operation and transfusion, respectively. The repetition of these medications may have caused a high ratio of carriers of the mixed genotypes of HCV.     

乙型肝炎病毒基因型的分布及与临床相关性

目的了解镇江地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布及与临床的相关性。方法选择镇江地区HBV感染者257例,其中慢性HBV携带者49例,慢性乙型肝炎轻度52例、中度38例、重度32例,重型肝炎22例,肝硬化41例,原发性肝癌23例。应用聚合酶链反应(PCR)微板核酸杂交-酶联免疫吸附(ELISA)技术检测HBV的基因型。结果257例HBV感染者中B基因型112例(43.6%),C基因型140例(54.5%),B C基因型5例(1.95%),未发现A、D、E、F、G和H基因型。C基因型在慢性乙型肝炎重度、重型肝炎、肝硬化、肝细胞癌中占绝对优势,分别占65.6%、72.7%、68.3%、78.3%,显著高于慢性HBV携带者的38.8%,P<0.05。C基因型HBV感染者的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平(262.3±319.7u/L)、总胆红素(TBIL)水平(69.9±35.8μmol/l)、HBeAg阳性率(67.1%)、HBV DNA定量中位数绝对值(6.02±1.34)显著高于B基因型(141.5±206.1u/L)、(38.3±22.4μmol/l)、46.4%和4.18±1.10,P<0.05。B基因型HBV感染者的血清白蛋白(ALB)水平(39.6±9.6g/)显著高于C基因型(30.1±7.3g/l),P<0.05。结论PCR微板核酸杂交—ELISA技术可用于HBV基因型的临床检测。镇江地区HBV感染者基因型以单一的B型或C型为主,含少量B C型。C基因型为本地区优势基因型,并在严重肝病和原发性肝癌中比例较高,其引起的ALT、TBIL、病毒血症水平均较高,HBeAg血症持续时间长,故预后较差。     

肝癌患者血清中乙型肝炎病毒基因分型及临床意义

目的:探讨血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型及HBV DNA水平与肝细胞癌的关系。方法:应用巢式聚合酶链反应扩增乙型肝炎病毒与基因,用末端标记方法对PCR产物标记并直接测序,测序结果和GenBank中登录的标准基因型序列相比较,应用荧光定量PCR法检测HBV DNA水平。对61例肝癌、65例慢性乙型肝炎、10例乙型肝炎病毒携带者进行了检测。结果:136例中B基因型59例(43.4%)、C基因型77例(56.6%),随着病情加重,C基因型比例逐渐增高;不同基因型HBV感染的肝癌患者间HBV DNA水平差异有显著意义,P<0.05;在慢性乙型肝炎患者中,HBV DNA水平差异无显著性意义。结论:本地区乙型肝炎病毒以B、C基因型为主,乙型肝炎病毒C基因型及高水平的HBV DNA感染与肝癌的发生相关。