BQ123对左向右分流肺动脉高压大鼠肺组织Ⅰ、型胶原合成的影响

目的：研究内皮素-1(ET-1)受体拮抗剂BQ123对左向右分流肺动脉高压大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响，并探讨左向右分流肺动脉高压的发生机理。方法：选择Wistar大鼠34只，随机分为实验Ⅰ组(n=15)．实验Ⅱ组(n=9)，对照组(n=10)。实验组大鼠采用套管连接法建立颈部左向右分流肺动脉高压模型，实验Ⅱ组大鼠术后4周开始给予BQ123，每次50μg／kg，每周3次，连用12周，术后16周测取大鼠肺动脉收缩压。放射免疫法测定大鼠肺组织ET-1含量变化。RT-PCR检测BQ123对大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响。免疫组化法检测BQ123对大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达及相对含量的影响。结果：左向右分流大鼠肺动脉收缩压及肺组织ET-1含量升高，肺组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达增强，胶原蛋白相对含量增加；应用BQ123后大鼠肺动脉压力及肺组织ET-1含量降低，Ⅰ、Ⅲ型前胶原mR-NA的表达及胶原相对含量降低。结论：BQ123可降低肺组织ET-1含量，抑制胶原合成，ET-1和胶原合成增加均参与了肺动脉高压的形成过程。     

BQ123对左向右分流肺动脉高压大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的:研究内皮素-1(ET-1)受体拮抗剂BQ123对左向右分流肺动脉高压大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响,并探讨左向右分流肺动脉高压的发生机理.方法:选择Wistar大鼠34只,随机分为实验Ⅰ组(n=15),实验Ⅱ组(n=9),对照组(n=10).实验组大鼠采用套管连接法建立颈部左向右分流肺动脉高压模型,实验Ⅱ组大鼠术后4周开始给予BQ123,每次50μg/kg,每周3次,连用12周,术后16周测取大鼠肺动脉收缩压.放射免疫法测定大鼠肺组织ET-1含量变化.RT-PCR检测BQ123对大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响.免疫组化法检测BQ123对大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达及相对含量的影响.结果:左向右分流大鼠肺动脉收缩压及肺组织ET-1含量升高,肺组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达增强,胶原蛋白相对含量增加;应用BQ123后大鼠肺动脉压力及肺组织ET-1含量降低,Ⅰ、Ⅲ型前胶原mR-NA的表达及胶原相对含量降低.结论:BQ123可降低肺组织ET-1含量,抑制胶原合成,ET-1和胶原合成增加均参与了肺动脉高压的形成过程.     

转化生长因子β1对L929细胞增殖转分化及细胞外基质代谢的影响

目的 探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对L929细胞增殖的影响,为体外研究预防食管内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)术后狭窄提供理论基础.方法 实验分为两组,①空白对照组:L929细胞不做处理;②TGF-β1组,用10 ng/mL TGF-β1 持续刺激L929细胞,依据刺激时间不同又分为24、48、72、96、120 h 5个亚组.观察各组对细胞增殖的影响.用CCK-8法检测细胞增殖,qPCR检测α-SMA及Ⅰ型前胶原、Ⅲ型前胶原、MMP1、TIMP1 mRNA 表达,Western blot检测α-SMA、MMP1、TIMP1蛋白水平,ELISA检测Ⅰ型前胶原、Ⅲ型前胶原合成.结果 与空白对照组比较,TGF-β1组细胞增殖能力显著增高(P＜0.05),TGF-β1组α-SMA、Ⅰ型前胶原、Ⅲ型前胶原、MMP1、TIMP1 mRNA表达均显著升高(P＜0.05);TGF-β1刺激24 h组Ⅰ型前胶原合成增加(P＜0.05),TGF-β1组Ⅲ型前胶原合成增加(P＜0.05);TGF-β1组MMP1、TIMP1蛋白表达增加(P＜0.05).结论 TGF-β1能促进L929细胞增殖,并诱导L929细胞向肌成纤维细胞转分化,同时促进Ⅰ型前胶原、Ⅲ型前胶原以及MMP1、TIMP1合成.     

灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1表达的干预作用

目的研究灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1(MMP1)和金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)表达的影响。方法以人胚肺成纤维细胞系MRC-5为研究对象,Western blot法检测常氧、低氧、丝/苏氨酸激酶抑制剂星型孢菌素(straurosporine,SP)、灯盏细辛作用下MRC-5缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)、Ⅰ型胶原前α1链(pro-col1α1)、p-smad2蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白的含量。结果体外培养的MRC-5,常氧环境下细胞内表达一定的pro-col1α1、p-smad2蛋白,几乎不表达HIF-1α,细胞外基质有较低水平的Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白表达;低氧环境下细胞内pro-col1α1、p-smad2蛋白、HIF-1α和细胞外基质Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1均较常氧组表达增加(P<0.05);SP(5nmol/L)预处理细胞30min与单纯低氧组比较,其胞内的p-smad2蛋白、pro-col1α1和基质中的Ⅰ型胶原、TIMP1降低(P<0.05),而基质中的MMP1表达增加(P<0.05);灯盏细辛组(12.5μg/mL、50μg/mL)与单纯低氧组比较其胞外的Ⅰ型胶原、MMP1、TIMP1蛋白和胞内的HIF-1α、pro-col1α1和p-smad2蛋白表达均有降低(P<0.05)。结论灯盏细辛可降低低氧环境下HIF-1α蛋白的表达,并部分通过p-smad2信号通路抑制Ⅰ型胶原、TIMP1蛋白生成。     

高糖状态下心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化的观察

目的探讨高糖对大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取心肌成纤维细胞,采用正常糖(5.5mmol/L,对照组)和高糖(25mmol/L,高糖组)干预。用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白水平的变化。结果与对照组比较,高糖刺激12h可使心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达增加,Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA表达在12h升高,在24h达高峰,Ⅰ型前胶原mRNA升高幅度高于Ⅲ型前胶原mRNA;高糖刺激48h可使Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,Ⅰ型胶原蛋白升高幅度高于Ⅲ型胶原。结论高糖可促进大鼠心肌成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

老龄大鼠肺内基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1、2、3表达变化

目的:对比观察老龄大鼠和成年大鼠肺胶原蛋白的改变、转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)水平的变化、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPS)MMP2,MMP9以及基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPS)表达调控的变化,寻找肺间质纤维化发病率随年龄增加的可能原因.方法:通过羟脯氨酸定量测定肺组织胶原含量,ELISA方法测定TGF-β1蛋白水平,荧光定量PCR(realtime PCR)技术测定MMP2,MMP9,TIMP1,TIMP2,TIMP3 mRNA表达量的变化.结果:与成年大鼠组相比,老龄大鼠肺细胞外胶原成分增加,TGF-β1蛋白水平升高[(756±160)pg/g vs(1 000±246)pg/g,P＜0.05],MMP2 mRNA(3.15±1.76 vs 0.17±0.13,P＜0.01)表达水平降低,MMP9 mRNA(1.66±0.67 vs 1.74±0.87,P＞0.05)表达水平没有明显变化.老龄大鼠组TIMP1 mRNA(2.00±1.74 vs 0.11±0.06,P＜0.01),TIMP2 mRNA(7.60±2.51 vs 2.69±1.76,P＜0.01),TIMP3 mRNA(1.32±0.46 vs 0.29±0.16,P＜0.01)表达水平均低于成年大鼠组.结论:肺老化后细胞外胶原比例增加,TGF-β1蛋白水平升高,MMP2和MMP9转录水平改变,TIMPS mRNA转录水平降低等多重因素共同构成肺间质纤维化发病率随年龄增加的基础.     

灯盏花素对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响

目的　探讨灯盏花素对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响。方法　将 2级SD大鼠分为对照组 (A组 )、低氧组 (B组 )和低氧 灯盏花素组 (C组 ) ,低氧时间为 4周。采用透射电镜、免疫组织化学和原位杂交等方法研究灯盏花素对慢性低氧大鼠肺动脉平均压 (mPAP)、平均颈总动脉压 (mCAP)、肺细小动脉超微结构、肺动脉管壁Ⅰ、Ⅲ型胶原和Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因的影响。结果　 1.B组mPAP显著高于A组 (P <0 .0 1) ,C组mPAP显著低于B组 (P <0 .0 1) ;三组间mCAP差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 2 .电镜显示B组肺动脉胶原纤维较A组明显多 ;C组较B组明显少。 3.免疫组织化学显示B组肺细小动脉 (直径 10 0～ 2 0 0 μm)Ⅰ型胶原含量(测平均吸光度值 )较A组明显高 (P <0 .0 1) ,C组较B组低 (P <0 .0 1) ;Ⅲ型胶原平均吸光度值各组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。原位杂交显示B组肺细小动脉 (直径 10 0～ 2 0 0 μm)Ⅰ型前胶原mRNA平均吸光度值较A组明显高 (P <0 .0 1) ,C组较B组明显低 (P <0 .0 1) ;Ⅲ型前胶原mRNA平均吸光度值各组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　灯盏花素可预防慢性低氧肺动脉高压的形成及肺动脉管壁胶原的生成和沉积     

缺氧诱导因子在高肺血流性肺动脉高压大鼠肺组织中的动态变化及意义

目的 观察缺氧诱导因子(hypoxia inducible factors,HIFs)在高肺血流性肺动脉高压大鼠肺组织的动态表达,探讨HIF-1 α、HIF-2α在高肺血流性肺动脉高压形成过程中的作用.方法 64只6周龄雄性健康SD大鼠采用随机数字法均分为假手术组与肺动脉高压组,肺动脉高压组大鼠通过腹主动脉-下腔静脉分流法建立高肺血流性肺动脉高压模型,在两组大鼠术后第4、8、12、16周测量平均肺动脉压力(mean pulmonary artery pressure,mPAP)、右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI)及肺血管形态学观察,Western blot检测肺组织HIF-1α、HIF-2α蛋白表达,RT-PCR检测HIF-1αmRNA、HIF-2αmRNA的表达.结果 肺动脉高压组大鼠术后mPAP及RVHI随时间延长持续增高,肺动脉形态学变化与mPAP变化一致;肺动脉高压组大鼠肺组织HIF-1α、HIF-2α蛋白表达在术后随着时间的延长,均呈现先升高后下降的趋势,于术后8、12周明显高于同时间点对照组(P＜0.05);HIF-1 αmRNA、HIF-2αmRNA的表达亦呈现先升高后下降的趋势,于术后8、12周明显高于同时间点对照组(P＜0.05).结论 HIF-1α和HIF-2α可能在大鼠高肺血流性肺动脉高压形成过程中的肺血管病变可逆阶段发挥了一过性的血管保护作用,但仍无法遏制肺动脉高压的形成.     

L-精氨酸对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响

目的探讨L 精氨酸对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响。方法 2 4只Wistar大鼠随机分为对照组 (C)、低氧组 (H1)和低氧 +L 精氨酸组 (H2 ) ,常压低氧时间 4周 ,采用免疫组化法和图像分析检测肺动脉管壁I、Ⅲ型胶原光密度的变化 ,并测定大鼠平均肺动脉压 (mPAP)。结果H1组mPAP显著高于C组和H2 组 (P <0 .0 1 ) ;H1组肺小动脉I型胶原平均光密度值较C组和H2 组高 (P <0 .0 1 ) ,Ⅲ型胶原平均吸光度值各组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,结论L 精氨酸可预防慢性低氧性肺动脉高压的形成及肺动脉管壁胶原的生成和沉积     

NOX4在高肺血流肺动脉高压大鼠中表达的意义

目的 观察NADPH氧化酶4(NOX4)在高肺血流肺动脉高压大鼠肺组织中表达的变化,探讨NOX4在高肺血流性肺动脉高压发病机制中的意义.方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组、分流4周组、分流8周组、分流11周组,通过腹主动脉-下腔静脉分流法建立高肺血流肺动脉高压大鼠模型,检测模型大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥厚指数(RVI),RT-PCR检测大鼠肺组织中NOX4 mRNA的表达情况.结果 随着分流时间的延长,各分流组大鼠逐步出现了右室肥厚、平均肺动脉压升高等肺高压的表现,肺组织中NOX4 mRNA表达亦逐步增强.结论 高肺血流肺动脉高压大鼠肺组织中存在着NOX4的显著表达,NOX4参与了高肺血流大鼠肺动脉高压的形成.     

All-trans retinoic acid in pulmonary vascular structural remodeling in rats with pulmonary hypertension induced by monocrotaline

Objective To determine whether all-trans retinoic acid (atRA) exerts an inhibitory effect on rats with pulmonary hypertension induced by monocrotaline.Methods All rats were given a single subcutaneous injection of either monocrotaline (60 mg/kg) or saline.Monocrotaline-injected rats received either atRA (30 mg· kg(-1)·day(-1)) or saline through oral-gastro intubation.On Days 7 , 14, 21, and 28 respectively after monocrotaline injection, cardiovascular cath eters were inserted to examine the mean pulmonary artery pressure of rats in eac h group.Meanwhile, the matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) mRNA expression an d hydroxyproline content in the main pulmonary artery were determined by RT-PCR and chromometry, respectively.Results The mean pulmonary artery pressure of rats in the model group increased signific antly on day 21 and reached a peak on Day 28 compared with the control group (25 .7±4.3 mm Hg vs 15.1±1.5 mm Hg and 38.5±6.4 mm Hg vs 16.4±2.0 mm Hg, P&lt;0.01).MMP-1 mRNA overexpression was present on Day 14 (0.72 ±0.15 vs 0.39±0.08, P&lt;0.01) and was rapidly down-regulated on Day 21 and 28 compared with Day 14, but was still higher than that in the control.The hydroxyoroline content of the main pulmonary artery dropped significantly on Da y 14 (4.01±1.13 μg/mg vs 5.10±0.91 μg/mg, P&lt;0.05) and increased s ignificantly on Days 21 and 28 compared with the control.atRA inhibited the MM P-1 mRNA overexpression from Day 14 to Day 28 and reduced the hydroxyproline co ntent (5.59±0.70 μg/mg vs 7.96±1.13 μg/mg and 7.77±0.96 μg/mg vs 9.93±1.27 μg/mg, P&lt;0.01) and the mean pulmonary artery pressure compa red with the model group (19.6±3.2 mm Hg vs 25.7±4.3 mm Hg and 26.3± 4.6 mm Hg vs 38.5±6.4 mm Hg, P&lt;0.01).Conclusion atRA inhibits MMP-1 overexpression and the accumulation of collagen, which migh t elicit favorable geometric remodeling in rat pulmonary hypertension induced by monocrotaline.     

脂氧素受体激动剂BML-111对左向右分流大鼠肺动脉压力影响及其机制的研究

目的:观察脂氧素受体激动剂BML-111对左向右分流大鼠肺动脉压力的影响及与基质金属蛋白酶(MMP-2、9)及组织途径抑制物(TIMP-1)的关系。方法:将SD大鼠30只分为C组、P组、B组,P组和B组大鼠行建立左颈总动脉-颈外静脉吻合,吻合饲养6周后,B组每天腹腔注射1mg/kgBML-111连续4周,P组每天腹腔注射等量生理盐水。实验测量指标:各组大鼠体重增长速度、平均肺动脉压力、右心室收缩压、右室(RV)/(左室LV+室间隔S)、肺小动脉中膜厚度百分比、肺血管纤维化程度比、肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1的水平。结果:P组、B组与C组相比平均肺动脉压力、右心室收缩压、RV/(LV+S)、肺小动脉中膜厚度百分比、肺血管纤维化程度比、肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1的水平均高于P组,体重增长速度低于C组(P<0.05);B组与P组相比,平均肺动脉压力、右心室收缩压、肺小动脉中膜厚度百分比、肺血管纤维化程度比、肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1低于P组,体重高于P组(P<0.05)。结论:脂氧素受体激动剂BML-111减轻肺动脉高压的作用机制可能与降低MMP-2、9和TIMP-1的表达有关。     

缺氧性肺动脉高压大鼠泡内肺动脉与右心室胶原表达及黄芪的干 …

目的 观察缺氧性肺动脉高压大鼠胞内肺动脉与右心室胶原表达及黄芪的干预作用,初步探讨其作用机制。方法 将雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为３组：（１）缺氧组：在常压缺氧舱内缺氧,每日１２小时,连续３周;（２）黄芪组：缺氧条件同缺氧组;自缺氧第一天起给大鼠每天腹腔注０．２ｍｌ黄芪注射液;（３）正常组对照组：室内空气正常饲养,用心导管和Ｆｉｃｋ’ｓ法测定肺动脉压和右心排血量,苦味酸天狼猩红染色切片观察泡内肺动     

Alleviation of hypoxic pulmonary vascular structural remodeling by L-arginine

目的探讨L-精氨酸(L-Arg)对低氧性肺血管结构重建的干预作用及其可能机制.方法将18只Wistar大鼠配伍后随机分为对照组、低氧组和低氧+L-Arg组(共6个配伍组).以右心导管法测定肺动脉压力,并对大鼠肺组织标本进行显微结构观测和超微结构观察,同时以分光光度法测定血浆一氧化氮(NO)含量,并对肺组织以内皮素-1(ET-1) cRNA探针进行原位杂交,研究肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA的表达.结果低氧组大鼠肺动脉平均压明显高于对照组(20.33±2.18?mm?Hg vs 15.38±1.05?mm?Hg, P<0.05).低氧后大鼠肺血管显微及超微结构发生明显改变,肺血管结构重建形成.同时低氧组大鼠血浆NO间接含量明显低于对照组 (P<0.05 ).低氧后肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA表达明显增强.然而,低氧+L-Arg组大鼠PAMP较低氧组明显降低(16.73±1.35?mm?Hg vs 20.33±2.18?mm?Hg, P<0.05).L-Arg缓解了低氧性肺血管结构重建的形成.同时低氧+L-Arg组大鼠血浆NO间接含量明显高于低氧组(P<0.05).L-Arg使低氧大鼠肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA表达明显受抑制.结论 L-Arg对低氧性肺血管结构重建以及低氧性肺动脉高压的形成有重要的调节作用,其机制可能与通过促进低氧大鼠体内NO生成,从而抑制肺动脉内皮细胞ET-1 mRNA表达有一定的关系.     

All-trans retinoic acid diminishes collagen production in a hepatic stellate cell line via suppression of active protein-1 and c-Jun N-terminal kinase signal

Following acute and chronic liver injury,hepatic stellate cells (HSCs) become activated to undergo a phenotypic transformation into myofibroblast-like cells and lose their retinol content,but the mechanisms of retinoid loss and its potential roles in HSCs activation and liver fibrosis are not understood.The influence of retinoids on HSCs and hepatic fibrosis remains controversial.The purpose of this study was to evaluate the effects of all-trans retinoid acid (ATRA) on cell proliferation,mRNA expression of collagen genes [procollagen α1 (Ⅰ),procollagen α1 (Ⅲ)],profibrogenic genes (TGF-β 1,CTGF,MMP-2,TIMP-1,TIMP-2,PAI-1),fibrolytic genes (MMP-3,MMP-13) and the upstream element (JNK and AP-1) in the rat hepatic stellate cell line (CFSC-2G).Cell proliferation was evaluated by measuring BrdU incorporation.The mRNA expression levels of collagen genes [procollagen α1 (Ⅰ),procollagen α1 (Ⅲ)],profibrogenic genes (TGF-β 1,CTGF,MMP-2,TIMP-1,TIMP-2,PAI-1),and fibrolytic genes (MMP-3,MMP-13) were quantitatively detected by using real-time PCR.The mRNA expression of JNK and AP-1 was quantified by RT-PCR.The results showed that ATRA inhibited HSCs proliferation and diminished the mRNA expression of collagen genes [procollagen α1 (Ⅰ),procollagen α1 (Ⅲ)] and profibrogenic genes (TGF-β 1,CTGF,MMP-2,TIMP-1,TIMP-2,PAI-1),and significantly stimulated the mRNA expression of MMP-3 and MMP-13 in HSCs by suppressing the mRNA expression of JNK and AP-1.These findings suggested that ATRA could inhibit proliferation and collagen production of HSCs via the suppression of active protein-1 and c-Jun N-terminal kinase signal,then decrease the mRNAs expression of profibrogenic genes (TGF-β 1,CTGF,MMP-2,TIMP-1,TIMP-2,PAI-1),and significantly induce the mRNA expression of MMP-3 and MMP-13.     

强力霉素对大鼠急性心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶及其组织型抑制剂表达的影响

目的 评价基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂强力霉素(Dox)对急性心肌梗死(AMI)大鼠左室非MI区心肌MMP-8和13、MMP组织型抑制剂(TIMP)-1和2的表达及胶原重构的影响。方法 将雌性SD大鼠于AMI术后24 h随机分为:AMI对照组和Dox(30 mg·kg-1·d-1)治疗组,并开始给药治疗。另设假手术组。上述各组再均随机分为1周、2周和4周3个疗程亚组。满疗程后处死大鼠,测定左室MI面积;以RT-PCR和Western印迹法测定非MI区两种MMP和TIMP的mRNA和蛋白表达;免疫组化染色测定非MI区Ⅰ/Ⅲ型胶原含量(CVF)。结果 MI面积在AMI对照和治疗组各时间点亚组间差异均无显著意义(42％-48％,均P>0.05)。与假手术组相比,AMI对照组的MMP-8和13蛋白表达在各时间亚组均显著增高(均P<0.05),mRNA表达则在1周和4周亚组均显著增高(均P<0.05);而TIMP-1 mRNA和蛋白表达仅在1周亚组时均显著增高(均P<0.05);TIMP-2 mRNA表达在各时间点亚组均显著增高(均P<0.05),而蛋白表达仅在2和4周亚组时均显著增高(均P<0.05);最后非MI区Ⅰ/Ⅲ型CVF在各时间亚组均显著升高(P<0.05-0.001)。与AMI对照组相比,Dox对大鼠AMI后MMP-8、13和TIMP-1、2 mRNA和蛋白表达的增强均有显著抑制作用(均P<0.05);使Ⅰ型CVF减少(P<0.01-0.001),但对Ⅲ型CVF于各时间点亚组均无显著影响。结论 MM     

强力霉素、氯沙坦及其合用对大鼠急性心肌梗塞后非梗塞区心肌金属蛋白酶和金属蛋白酶组织抑制因子表达及胶原重构的影响

目的对比基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂强力霉素、血管紧张素Ⅱ受体-1阻断剂氯沙坦及其合用对急性心肌梗塞(AMI)大鼠左室非梗塞区心肌MMP-8和13、MMP组织抑制因子(TIMP)-1和2的表达及胶原重构影响.方法对431只雌性SD大鼠行冠状动脉前降支结扎致AMI,然后将术后24h存活的254只随机分人下列各组:(1)AMI对照组(n=64);(2)强力霉素组(30mg·kg-1·d-1,n=63);(3)氯沙坦组(10mg·kg-1·d-1,n=62);(4)强力霉索(30 mg·kg-1·d-1)和氯沙坦(10 mg·kg-1·d-1)合用组(n=65),并开始给药治疗;同时另设假手术组(n=30).依疗程不同,将上述各组再均分为1、2和4周3个亚组.以RT-PCR和Western blot法测定非梗塞区两种MMP和TIMP的mRNA和蛋白表达;免疫组织化学染色测定非梗塞区Ⅰ/Ⅲ型胶原含量(CVF).结果AMI对照及3治疗组各亚组问梗塞面积差异均无显著性(P均＞0.05).与假手术组相比,AMI对照组的MMP-8和13蛋白表达在各时间亚组均显著增高(P均＜0.05),mRNA表达则在1和4周亚组显著增高(P均＜0.05);TIMP-l mRNA和蛋白表达仅在1周亚组显著增高(P均＜0.05);TIMP-2 mRNA表达在各时间点亚组均显著增高(P均＜0.05),而蛋白表达仅在2和4周亚组均显著增高(P均＜0.05);同时非梗塞区Ⅰ/Ⅲ型CVF在各时间亚组也均显著升高(P＜0.05～0.001).与AMI对照组相比,3治疗组对大鼠AMI后MMP-8、13和TIMP-l、2 mRNA和蛋白表达的增强均有显著抑制作用(P均＜0.05);使Ⅰ型CVF在其2和4周亚组显著减少(P＜0.05～0.001);Ⅲ型CVF仅在氯沙坦和合用组的2和4周亚组显著减少(P＜0.05～0.01),在强力霉素组则于各时间点亚组均无显著变化(P均＞0.05).上述指标在3治疗组间对比,仅在部分时间点亚组间差异有显著性(P均＜0.05).结论强力霉素和氯沙坦一样,能够有效抑制大鼠AMI后非梗塞区心肌MMP-8、13和TIMP-1、2 mRNA和蛋白表达的增强及Ⅰ型胶原的沉积,但对Ⅲ型胶原则无此作用.     

MDI301调节MMP-1、MMP-2、TIMP-1和前胶原蛋白的表达

目的:检测MDI301对正常细胞和高糖细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和I、III型前胶原蛋白表达的影响。探讨MDI301对糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗潜力。方法:采用Real time PCR检测人成纤维细胞中MMP-1、MMP-2和TIMP-1 mRNA的表达水平;ELISA方法检测细胞培养基中TIMP-1蛋白表达量;Western blot检测I型和III型前胶原蛋白表达水平。结果:MDI301能降低高糖细胞中MMP-1和MMP-2 mRNA的表达(P<0.05),增加TIMP-1 mRNA和细胞培养上清中TIMP-1蛋白的表达(P<0.05);同时还能增加高糖细胞中I和III型前胶原蛋白的表达量(P<0.05)。结论:MDI301可能会对糖尿病患者体内MMP-1、MMP-2、TIMP-1和I、III型前胶原蛋白的表达有相似的作用,使其有望用于糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗。     

人参皂苷Rg1、Rb1及Re对人皮肤胶原代谢作用的研究

目的以人成纤维细胞为载体对三种皂苷Rg1、Rb1、Re进行研究。方法MTT法测定三种药物在不同浓度下对人成纤维细胞增殖的影响,消化法检测羟脯氨酸含量。ELISA法测定细胞分泌I型前胶原、基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）、基质金属蛋白酶抑制酶-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）的蛋白表达情况,RT—PCR法观察上述三种蛋白的mRNA表达水平。结果与空白组比较,三种单体均能显著提高细胞增殖水平,羟辅氨酸含量、I型前胶原的蛋白质及mRNA表达量,显著降低MMP—1蛋白质及mRNA表达量。结论人参皂苷Rg1、Re、Rb1通过影响成纤维细胞的基因及蛋白质的表达,均显著促进胶原合成、抑制胶原降解,从而提高胶原蛋白总量,改善胶原代谢。     

L-精氨酸干预低氧性肺血管结构重构机制的研究

探讨Ｌ－精氨酸干预低氧性肺血管结构重构的机制。方法将１８只Ｗｉｓｔａｒ大鼠采用区组随机法分为对照组、低氧组和低氧＋Ｌ－Ａｒｇ组。以右心导管法测定肺动脉压力,并对大示本进行显微结构观测和超微结构观察,同时分光光度法间接测定血浆一氧化氮（ＮＯ）含量,并对肺组织以内皮素－１（ＥＴ－１）ｃＲＮＡ探针进行原位杂交,研究肺动脉内皮细胞ＥＴ－１ｍＲＮＡ的表达。结果低氧组大鼠肺动脉平均压（ｍＰＡＰ）为２．７１ＫＰ