探讨梅毒血清学检测方法的应用

梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋体（treponemap—allidum,TP）感染引起的性传播疾病,通过人类粘膜或有破损的皮肤直接接触病人感染性病灶而传播,不但引起人类全身性疾病,同时还传播给下一代,因此加强对孕产妇梅毒的早期诊断和及时治疗已成为当前重要问题。     

梅毒螺旋体血清学检测方法的比较

梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)是性传播疾病梅毒的病原体.梅毒的血清学检测试验根据抗原不同分为非特异性类脂质抗原试验和梅毒螺旋体抗原试验两大类[1].     

梅毒螺旋体特异性抗体试验方法探讨及临床应用价值评估

目的 分析化学发光微粒子免疫法(CMIA)检测梅毒螺旋体特异性抗体的性能价值,探讨其在临床应用的意义.方法 回顾性分析北京市海淀医院2019年3月至2020年7月所有采用CMIA法进行梅毒螺旋体特异性抗体检测的标本61 051例,阳性标本采用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确证,分析其相关性.结果 61 0...     

三种梅毒血清学试验在梅毒诊断中的应用

梅毒是由梅毒螺旋体感染的性传播疾病,具有高度传染性。梅毒诊断主要依据临床表现、镜检病原体和血清学检测。分泌物直接查找病原体,敏感性较低,应用很少。血清学检测在梅毒诊断和治疗中具有重要意义。梅毒的血清学检测方法较多,不同的检测方法有其特殊的临床诊断价值,也各有一定的局限性。为此,笔者用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)和化学发光法(CLIA)对2979份血清进行检测,并对TPPA和CLIA检测结果不一致的标本用免疫印迹法(WB)进行确证试验。     

梅毒特异性抗体的两种血清学检测方法比较

本文比较梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验法(TPPA)与酶联免疫吸附试验法(TP - EL ISA)两种方法的敏感性和特异性,评价两种方法在梅毒检测中的应用效果及临床意义.结论 发现明胶颗粒凝集试验法(TPPA)检测及酶联免疫吸附试验法(TP - EL ISA)两种检测方法都可以准确地检测梅毒螺旋体抗体,可根据具体情况选择需要的检测方法.     

酶联免疫吸附试验检测梅毒螺旋体抗体的分析性能评价

目的评价ELISA检测梅毒螺旋体（TP）抗体的分析性能,探讨未知诊断的定性实验的性能评价方法。方法参照临床实验室标准化协会（CLSI）发布的EP12-A2文件对ELISA法测定TP的临界值±20%范围的重复性进行分析,并与TP明胶凝集试验（TPPA）结果进行一致性比较。结果 ＋20%浓度临界值检测阳性率为≥95%,CV为14.8%;-20%浓度临界值检测阴性率≥95%,CV为19.6%;两种方法的一致程度百分比为99.6%,一致程度95%可信区间为98.8%~99.6%。结论 TP-ELISA法检测TP抗体的临界值±20%浓度范围之外标本,可得到可靠的检测结果。TP-ELISA法与TPPA法结果一致性好,可代替其作为TP诊断试验。     

RPR、TP-ELISA和TPPA在无偿献血者梅毒筛查中的应用评价

评价快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)在无偿献血者梅毒筛查中的应用价值,选择适用于血站血液筛查梅毒的检测方法.选择无偿献血者20200份血液,采用RPR和TP-ELISA方法检测梅毒抗体,经初筛、复检阳性标本再以TPPA法确认.结果表明:R...     

RPR、ELISA、TP-HA三种方法检测梅毒抗体的临床应用评估

梅毒是由苍白密螺旋体感染所引起的一种慢性经典的性传播疾病,几乎可引起人体全身所有组织和器官的损害和病变,乃至死亡[1];临床诊断梅毒的血清学方法主要有两种：一种是检测非梅毒螺旋体抗体,如RPR试验,它采用的是心磷脂作为抗原的非特异性检测;另一种是检测梅毒螺旋体特异性抗体,如ELISA、TP-HA试验。     

三种检测方法对梅毒血清学诊断价值的评价

目的：评价ELISA、RPR、TRUST对梅毒的诊断价值。方法：用ELISA与RPR、TRUST对205例阳性标本和1254例献血员标本检测结果进行对比试验。结果：ELISA明显优于RPR和TRUST法,结果有显著差异性（P〈0．05）。结论：ELISA在输血工作中应用可提高输血安全性。     

TpN17重组抗原的表达及在梅毒血清学诊断中的初步应用

目的用基因工程技术表达梅毒螺旋体TpN17重组抗原,并建立操作简便、特异性好、敏感性高的梅毒血清抗体间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。方法采用PCR技术扩增梅毒螺旋体TpN17基因,再进行T-A克隆及测序,然后亚克隆到原核表达载体中,以亲和层析法纯化重组蛋白。将重组蛋白包被于反应板,建立检测血清中梅毒抗体的ELISA间接检测法,利用该法与梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)同时检测血清样品,对其结果进行比较研究。结果TpN17重组蛋白在大肠杆菌BL21中得到稳定表达,并成功建立了检测血清中梅毒抗体的ELISA间接检测法及试剂。对135例梅毒可疑患者血清进行检测,ELISA、TPHA和TRUST的检出阳性率分别为82.96%、98.52%和71.11%,而TRUST测出的8例可疑样品及31例阴性样品中,TPHA结果全部阳性、而ELISA只有2例阴性。结论TpN17重组抗原ELISA试剂在特异性和敏感性上明显优于TRUST法。     

梅毒螺旋体抗原基因的克隆、表达及其在临床检验中的应用

目的　克隆、表达并纯化梅毒螺旋体相对分子质量为 47× 10 3 抗原 ,并检测梅毒患者的血清标本。方法　应用基因扩增技术分离此蛋白的全长基因 ,采用基因工程的方法 ,应用融合表达载体pGEX 2T ,重组、克隆得到带有梅毒螺旋体 47× 10 3 特异性抗原基因的重组菌株 ,经大肠杆菌表达系统获得重组融合蛋白。再经亲和层析获得纯品 ,并联合应用ELISA检测梅毒患者的血清标本 30份 ,同时检测非梅毒患者的血清标本 30份。结果　纯化后获得了梅毒螺旋体相对分子质量为 47× 10 3 的特异性抗原。ELISA检测梅毒患者血清结果均阳性。非梅毒患者血清均阴性 ,无非特异性交叉反应。结论　此项方法具有操作简便、准确的特点 ,为临床检测梅毒开辟了新的领域     

TP-光激化学发光、TPPA、TRUST试验的临床应用评价

目的 通过对TP-光激化学发光、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）的临床应用进行评价,为临床医生在不同情况下选择梅毒螺旋体抗体检测方法提供依据。方法 选取2019年4月1日~7月31日我院11619例住院患者、2458例门诊患者及2983例健康体检者进行TP-光激化学发光和TRUST检测,将TP-光激化学发光检测阳性或TRUST检测阳性的标本进行TPPA法检测,比较TP-光激化学发光及TRUST检测结果,TP-光激化学发光、TRUST检测及TPPA法检测结果及检测梅毒螺旋体抗体的诊断价值,TP-光激化学发光、TRUST检测梅毒螺旋体抗体的诊断价值及TP-光激化学发光法S/CO值与TPPA结果。结果 TP-光激化学发光检测门诊阳性率为6.18%,住院阳性率为3.46%,体检阳性率为0.67%;TRUST检测门诊阳性率为3.42%,住院阳性率为1.11%,体检阳性率0.27%。对557例TP-光激化学发光阳性和222例TRUST检测阳性的标本同时进行TPPA法检测,TPPA法阳性率为79.73%,TP-光激化学发光阳性率为98.30%,TRUST阳性率为37.82%,三种方法检测结果两两比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。TRUST检测梅毒螺旋体抗体的敏感度低于TP-光激化学发光,差异有统计学意义（P＜0.05）。以TPPA结果为标准,通过对TP-光激化学发光结果的S/CO值分段分析,结果显示S/CO值越高,与TPPA的阳性符合率越高。结论 TP-光激化学发光灵敏度高,适用于梅毒的感染筛查及辅助诊断;TPPA法检测适用于梅毒感染的确诊,能有效排除TP-光激化学发光和TRUST假阳性的问题;TRUST检测灵敏度较低,对梅毒螺旋体的筛查结果准确性不及TP-光激化学发光和TPPA法检测,不适合用于梅毒感染的筛查,可联和使用TP-光激化学发光以提高诊断梅毒的准确率。     

三种初筛方法检测HIV抗体的结果比较及评估

目的比较酶联免疫吸附试验（ELISA）、明胶颗粒凝集试验（PA）、胶体硒免疫层析法（ICA）检测人类免疫缺陷病毒抗体的结果，了解这三种方法的优劣，探讨临床实验室初筛诊断HIV方法的灵敏性和准确性。方法用卫生部HIV质控血清和免疫印迹法（WB）确认的HIV抗体阳性标本和阴性标本。分别用ELISA法、PA法及ICA法检测；用免疫印迹法确认的HIV阳性的标本作倍比稀释后，再分别用PA法、ELISA法及ICA法检测。结果80例经免疫印迹法确认的HIV阳性患者，ELISA法、PA法、ICA法的检出符合率分别为100％、98．8％、97．5％；经稀释法检测。ELISA法较PA法和ICA法敏感。其检测的准确性分别为97．5％、97．5％、92．5％。结论筛查HIV抗体方法最好选用ELISA法或PA法。以防漏检。     

丙型肝炎病毒抗原检测试剂在临床诊断中的初步应用

本文利用重组丙型肝炎病毒(HCV)多表位复合抗原免疫动物制备抗HCV多克隆抗体,建立HCAgELISA检测方法,对不同的临床样品进行检测,分析不同临床样品HCAg检出率,并与荧光定量PCR结果进行对比。95份HCAb阳性的样品中,51份样品HCAg阳性,阳性率为53.7%;88份重症肝病患者血清中检出HCAg阳性33份,阳性率为37.5%,均明显高于其它样品(P<0.05);73份肝功异常但HCAb阴性血清样品,检出HCAg阳性8份,阳性率为11.0%;HCAg与HCAb之间存在相关性(r=0.5076,P<0.01),HCAg与HCV-RNA符合率为85.7%。HCAg ELISA检测可作为临床HCV诊断的检测指标,为临床早期诊断及治疗预后提供依据。     

酶联免疫吸附法检测与甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检验中应用价值的比较

目的探讨酶联免疫吸附法(ELISA)检测与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)在梅毒检验中应用价值。方法回顾分析260例梅毒患者,均应用ELISA法与TRUST法检测血清梅毒螺旋体,比较梅毒螺旋体检出率,并分析其敏感性及特异性。结果 ELISA法对梅毒螺旋体检出率为95.8%(249/260),显著高于TRUST法64.6%(168/260),比较具有统计学差异(P0.05);ELISA法诊断梅毒螺旋体的特异性为35.4%(92/260),阳性预测值为59.7%(249/417),阴性预测值为89.3%(92/103),准确率为65.6%(341/520)。结论 ELISA法对梅毒螺旋体检出率较高,可作为大样本梅毒筛查检验,值得临床选择。     

CMIA法在输血前感染性指标检测中的应用研究

目的对化学发光微粒子免疫测定(CMIA)技术定量检测输血前感染性指标的临床应用进行评价。方法用CMIA技术对22235例患者进行输血前乙肝表面抗原(HBsAg)、抗丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV)、抗梅毒螺旋体特异性抗体(Anti-TP)及抗人类免疫缺陷病毒抗体(Anti-HIV)定量检测,所有阳性标本用相应的酶联免疫吸附法(ELISA)进行定性检测,Anti-TP阳性标本用梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确诊,Anti-HIV阳性标本送市疾控中心进行抗体确认,并对几种方法的检测结果进行分析。结果 HBsAg、Anti-HCV、Anti-TP、Anti-HIV定量检测阳性例数分别为3028、336、684、63;定量阳性标本经ELISA检测,定性阳性例数分别为2472,269,668,58;684例Anti-TP定量阳性样本中,用TPPA确认,阳性603例;63例Anti-HIV定量阳性样本送南充市疾控中心进行确认,48例确定为阳性,5例不确定,10例为阴性。结论 CMIA法定量检测输血前感染性指标可及早发现感染"窗口期"患者,降低漏检率,有利于患者的早期诊断和治疗,有利于医护人员自我防护及减少医疗纠纷。     

CLIA法检测高龄患者梅毒特异性抗体的临床应用

梅毒血清学检查已成为临床患者手术前、输血前及各种创伤性检查前的必检常规项目,由于高龄患者易受各种内外源性因素干扰,因而对梅毒抗体检测反应性较强标本的确认及弱反应性标本鉴别尤为重要。