白血病与非白血病骨髓间充质干细胞对HL-60细胞影响的比较研究

本研究比较急性髓系白血病（AML）骨髓间充质干细胞（BMMSC）,完全缓解AMLBMMSC以及非白血病BMMSC对HL-60细胞的影响。HL-60细胞分为3组：与AMLBMMSC共培养组、与完全缓解AMLBMMSC共培养组以及与非白血病BMMSC共培养纽。在规定时间比较各组HL-60细胞计数、各纽HL-60细胞的CD11b和survivin蛋白表达、各组HL-60细胞周期分布;在光学显微镜下观察各组HL-60细胞形态并比较其分化率。结果表明：第5天和第7天各组HL-60的细胞计数无统计学差异（P值均〉0．05）;各组HL-60细胞G0／G1期细胞分布比例、survivin表达和CD11b表达无统计学差异（P值均〉0．05）;各组HL-60细胞的形态皆向成熟方向转化,分化率分别为18．0±3、17．0±1．3、19．0±2．0,比较表明无统计学差异（P=0．23）。结论：未发现各组骨髓MSC对HL-60细胞增殖分化的影响有差异。     

急性髓性白血病完全缓解患者残留白血病细胞检测研究

本研究的目的是观察急性髓性白血病患者完全缓解后血液和骨髓中微小残留病变变化情况 ,并探讨微小残留病变在监测急性髓性白血病复发中的应用价值。用流式细胞术检测 3 3例化疗达完全缓解的急性髓性白血病患者血液和骨髓中残留白血病细胞 (residualleukemiccells,RLC)。结果显示 :急性髓性白血病完全缓解组和正常对照组外周血RLC分别为 ( 4 .75 18± 4 .15 3 7) %和 ( 0 .4 83 5± 0 .2 0 0 5 ) % ,二者比较有统计学差异 (P <0 .0 0 1) ;完全缓解组骨髓和正常对照组骨髓RLC分别为 ( 17.90 82± 2 0 .4 819) %和 ( 0 .72 85± 0 .2 2 0 9) % ,二者比较有统计学差异 ( P <0 .0 0 1) ;持续缓解组与复发组外周血RLC分别为 ( 2 .2 3 3± 1.5 92 3 ) %和 ( 10 .2 3 69± 9.4 714 ) % ;持续缓解组与复发组骨髓RLC分别为 ( 4 .779± 3 .0 3 3 6) %和 ( 3 8.0 685± 19.4 2 95 ) %。二组比较有统计学差异 (P <0 0 0 1)。结论 :应用流式细胞术检测残留白血病细胞对及时预测复发有重要意义 ,有利于在复发早期进行治疗。     

造血干细胞移植后患者间充质干细胞增殖功能的研究

为了研究造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation,HSCT）后造血植活患者中骨髓源的间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的增殖能力,本研究选择造血干细胞移植后临床植活的34例患者作为研究对象,抽取34例患者及30例正常健康供者骨髓,进行微环境成纤维细胞集落形成单位（colony-formingunit-fibroblast,CFU-F）集落培养,同时对MSC进行培养传代,记录MSC的融合时间及传代总数;利用流式细胞术（flowcytometry,FCM）检测患者MSC表面抗原的表达;将此34例患者培养结果与30例正常对照结果进行比较统计。另外对其中骨髓加外周血加第二供者脐血移植的10例患者与骨髓加外周血移植的19例患者的MSC体外扩增指标进行比较统计。结果表明：34例患者中有31例（91.1%）患者的MSC原代培养能达到贴壁融合,有1例（2.9%）达到部分融合,2例（5.9）未达融合;与正常对照相比,患者的MSCs融合时间明显延长,传代总数明显减少,CFU-F数明显降低,即其MSC的体外扩增能力明显受损。骨髓加外周血加第二供者脐血移植的10例患者与骨髓加外周血移植的19例患者相比,MSC达到融合的时间短,体外传代总数多,CFU-F计数高。结论：移植后患者的MSC呈明显受损状态,加用第二供者脐血细胞能部分改善患者MSC体外增殖功能。     

白血病患者骨髓中CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA、蛋白的表达及其临床相关性研究

本研究旨在探讨白血病患者骨髓单个核细胞中结缔组织生长因子（CTGF）、富含半胱氨酸蛋白61（CYR61）、血管内皮生长因子-c（VEGF—C）和血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）mRNA及蛋白的表达水平以及它们在白血病发生、发展、浸润转移中的作用和临床意义。初发白血病100例患者,26例完全缓解后急性白血病患者,30例对照者纳入本研究。收集骨髓单个核细胞,应用realtimePCR和Westernblot分别检测白血病患者及对照者CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA及蛋白的表达水平。结果表明,急性白血病患者骨髓中上述4种因子mRNA、蛋白水平明显高于对照组（P〈0．05）。急性白血病缓解后只有CTGFmRNA表达与对照组比较有差异（P〈0．05）,且CTGFmRNA表达在急性白血病不同骨髓增生中有统计学意义（P〈0．05）。CTGF蛋白表达在白血病不同染色体核型组有差异（P〈0．05）,CYR61和VEGF—C蛋白表达在急性白血病不同程度骨髓增生组中比较差异有统计学意义（P〈0．05）。CML组CTGF、CYR61、VEGF—CmRNA和蛋白表达高于对照组（P〈0．05）,CLL组CTGF和CYR61蛋白表达水平高于对照组。在性别、髓外浸润等因素分组比较中,上述4种因子mRNA和蛋白表达水平比较均无差异有统计学意义（P〉0．05）。在相关性分析中,白血病患者上述4种因子mRNA表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关（P〈0．05）,CTGF、CYR61、VEGF—C蛋白表达水平与其呈正相关（P〈0．05）。除了VEGFR-2与骨髓原始细胞计数无相关性外,这些因子的mRNA及蛋白表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关。结论：CYR61、CTGF、VEGF-C和VEGFR-2mRNA和蛋白表达在急慢性白血病中都有作用。在急性白血病（AML／ALL）中上述4种因子高表达,在CML中除了VEGFR-2外其他因子也高表达,多数因子的表达与骨髓原始细胞计数呈正相关。联合阻断这些相关的血管性因子可能对白血病靶向治疗有重要作用。     

骨髓白血病细胞下降指数在评估急性非淋巴细胞白血病预后中的意义

目的：探讨化疗后骨髓白血病细胞数及骨髓白血病细胞下降指数（MBCDI）在急性非淋巴细胞白血病预后评估中的意义。方法：回顾性分析120例初发急性非淋巴细胞白血病（除外急性早幼粒细胞白血病），建立MBCDI，分别比较持续缓解组、复发组、未缓解组和早期死亡组的初发骨髓白血病细胞数、化疗后白血病细胞数和MBCDI，分析初发时骨髓白血病细胞数、化疗后骨髓白血病细胞数、MBCDI与总生存时间、无病生存时间的相关性。结果：化疗前的骨髓白血病细胞数与总生存时间、无病生存时间均不相关（P值分别为0．6200和0.2451），持续缓解组、复发纽、未缓解纽和早期死亡组化疗前的骨髓白血病细胞数差异无显著性（P=0.2778）；化疗后的骨髓白血病细胞数与总生存时间、无病生存时间均相关（P值均为0．0001），并成负相关（相关系数分别为-0．33298和-0．34373）。持续缓解组、复发组、未缓解组和早期死亡组的化疗后骨髓白血病细胞数差异有显著性（P=0.0001）；化疗后MBCDI与总生存时间、无病生存时间均相关（P值均为0．0001），并成正相关（相关系数分别为0．35869和0．38607），持续缓解组、复发组、未缓解组和早期死亡组的MBCDI依次下降，相互之间差异有显著性（P=0．0001）。结论：急性非淋巴细胞白血病化疗前的骨髓白血病细胞数与预后无关，化疗后的骨髓白血病细胞数和MBCDI均可用于预测患者完全缓解、持续缓解及长期生存的可能性。MBCDI的相关性更强。     

胞壁酰二肽对儿童急性白血病骨髓树突状细胞体外扩增的影响

本研究旨在探讨胞壁酰二肽（muramyl dipeptide,MDP）对急性白血病儿童骨髓树突状细胞（DC）体外扩增及成熟的影响。采用Ficoll—Hypaque法分离急性白血病患儿骨髓单个核细胞。实验分为4组：对照组DC以含10％FCS的RPMI 1640培养液培养;实验1组：DC单独应用胞壁酰二肽;培养实验2组：DC用rhGM—CSF＋rhIL-4＋rhTNF—α培养;实验3组：DC用rhGM—CSF＋mIL-4＋rhTNF-α＋MDP培养,分别诱导培养DC。每日光学显微镜下观察细胞生长情况及细胞形态,培养8天后,计数各组细胞数量,并应用流式细胞术检测各组细胞免疫表型。结果表明：①实验各组均得到一定数量典型的DC,对照组DC数（0．85±0．23）×10^5／L,而实验1组、实验2组、实验3组DC数分别为（2．31±0．24）、（3．26±0．37）及（4．16±0．34）×10^5／L,均明显高于对照组（P均〈0．01）;实验1组DC数低于2组及3组（P均〈0．01）;实验3组DC数明显高于2组（P〈0．01）。②对照组、实验1组、实验2组及实验3组的札A—DR细胞比例分别为19．98±3．74、37．24±4．32、58．81±2．08、77．48±5．57,实验1组明显高于对照组（P〈0．01）,而低于实验2组、实验3组（p均〈0．01）;实验3组明显高于2组（P〈0．01）。对照组、实验1组、实验2组及实验3组的CD1a细胞比例分别为11．46±2．43、28．71±6．64、46．92±4．78、57．03±3．07,实验1组明显高于对照组（P〈0．01）,而低于实验2组、实验3组（P均〈0．01）;实验3组明显高于2组（t=3．98,P〈0．01）。对照组、实验1组、实验2组及实验3组的CD83细胞比例分别为（13．05±5．70）％、（36．32±5．61）％、（54．95±7．83）％、（75．70±6．67）％,实验1组明显高于对照组（P〈0．01）,而低于实验2组、实验3组（P均〈0．01）;实验3组明显高于2组（P〈0．01）。结论：MDP不仅对急性白血病患儿骨髓DC有扩增作用,而且能促进其成熟,并能协同细胞因子促进DC增殖和成熟,但MDP促进DC增殖的能力弱于其与细胞因子的联合作用。     

白血病与淋巴瘤患者PICC置管术后静脉炎的发生情况比较

目的探讨白血病及淋巴瘤患者中经外周置入中心静脉导管（PICC）术后机械性静脉炎的发病率及其与全身炎症反应水平的关系。方法选取首次进行化疗且接受PICC术的白血病患者（68例）及淋巴瘤患者（37例）为研究对象,比较两组PICC术后机械性静脉炎的发病率、外周血白细胞（WBC）计数及C反应蛋白（CRP）的水平并研究其相关性。结果白血病组静脉炎发病率（35．3％）高于淋巴瘤组（10．8％）,差异具有统计学意义（x^2=7．345,P〈0．01）。白血病组中机械性静脉炎患者的外周血WBC计数（17．4±5．48）×10^9／L,显著高于非静脉炎患者（6．13±2．31）×10^9/L,差异具有统计学意义（t=11．9,P〈0．05）,且WBC计数水平与静脉炎级别呈正相关（r=0．998,P〈0．05）。而淋巴瘤组中机械性静脉炎患者的外周血WBC计数与非静脉炎患者差异无统计学意义（P〉0．05）,且WBC计数水平与静脉炎级别无相关关系（P〉0．05）。白血病组中静脉炎患者的血CRP（48．80±21．10）mg／L显著高于非静脉炎患者（13．90±5．51）mg／L,差异具有统计学意义（t=10．4,P〈0．05）,且血CRP水平与静脉炎级别呈正相关（r=0．989,P〈0．05）。淋巴瘤组静脉炎患者CRP（37．0±7．74）mg／L显著高于非静脉炎患者（12．8±5．84）mg／L,差异具有统计学意义（t=7．88,P〈0．05）,但与静脉炎级别无相关关系（P〉0．05）。结论在白血病及淋巴瘤患者中,发生HCC术后机械性静脉炎患者具有较高的全身炎症反应水平,提示在临床工作中对于这类患者应加强静脉炎的预防及护理。     

初诊急性髓系白血病患者来源的骨髓间充质干细胞调节HL-60细胞的增殖、细胞周期和免疫表型

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者的骨髓微环境在发病过程中的作用及AML患者间充质干细胞(MSC)对HL-60细胞的增殖、细胞周期和免疫表型的影响。方法:分离初诊AML患者骨髓MSC,将其和HL-60细胞共培养,以3H-TdR掺入法检测MSC对HL-60细胞增殖的影响,应用流式细胞术检测HL-60的细胞周期和免疫表型。结果:3H-TdR掺入法的结果表明,初诊AML患者骨髓MSC显著抑制HL-60增殖,并且具有良好的量效关系(r=0. 998)。细胞周期分析结果显示,MSC使HL-60细胞更多的阻滞在G0/G1期。免疫表型分析结果表明,与单独培养的HL-60细胞相比,与正常MSC和患者MSC共培养的HL-60细胞CD11a的阳性率均显著下降,分别为(50. 80±10. 41)%vs (36. 23±8. 82)%(P 0. 05)和(50. 80±10. 41)%vs (16. 93±9. 25)%(P 0. 001),患者MSC共培养组和正常MSC共培养组之间也存在显著差异(16. 93±9. 25)%vs (36. 23±8. 82)%(P 0. 001)。同样,与正常MSC和患者MSC共培养的HL-60细胞CD154表达也显著降低,分别为(65. 67±11. 91)%vs (39. 85±12. 11)%(P 0. 01)和(65. 67±11. 91)%vs (17. 18±9. 29)%(P 0. 001),且与患者MSC共培养组CD154表达降低更明显(39. 85±12. 11)%vs (17. 18±9. 29)%(P 0. 05)。CD54的表达未见改变。结论:初诊的AML患者骨髓中存在的MSC具有与健康人骨髓MSC相似的调节HL-60增殖、细胞周期和免疫表型的能力,其抑制CD11a和CD154的能力更强于健康人骨髓MSC。     

中药与高锰酸钾溶液熏洗坐浴防治白血病肛周感染的效果观察

[目的]探讨中药与高锰酸钾溶液熏洗坐浴防治急性白血病肛周感染效果。[方法]干预组病人采用中药熏洗坐浴防治肛周感染,对照组病人采用1：5000高锰酸钾溶液坐浴,观察急性白血病病人骨髓抑制期中性粒细胞计数与肛周感染的愈合时间。[结果]两组病人骨髓抑制期外周血中性粒细胞最低值及骨髓抑制期使用粒细胞集落刺激因子（G—CSF）时间比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;肛周感染治愈时间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。[结论]中药熏洗坐浴防治急性白血病肛周感染的效果优于1：5000高锰酸钾溶液坐浴。     

免疫组化检测急性白血病HMGA1表达情况及临床意义探讨

目的通过免疫组化的方法来研究急性白血病骨髓细胞高迁移率蛋白A1（HMGA1）的表达情况并探讨其临床意义。方法建立免疫组化检测HMGAI蛋白的方法：采用HMGA1蛋白特异性抗体与相应抗原反应,加生物素化的二抗及酶标底物显色。观察染色情况并比较各组细胞阳性率的差异。结果急性白血痛（AL）组HMGA1多呈阳性表达（阳性率86．7％）,非白血病（对照）组多呈阴性表达（阳性率15％）,两组比较有显著性差异（P〈0．01）;AL各组以M7原始巨核细胞表达阳性率最高（47．8±12．0％,P〈0．05）,其它各组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论HMGA1蛋白在急性白血病患者中呈过度表达,尤其在M7中表达率最高,可作为M7的鏊别诊断指标。     

急性髓系白血病免疫分型特点及与疗效相关性分析简

本研究旨在探讨急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）的免疫分型特点及其与疗效的关系.收集516例初发AML患者骨髓标本,采用流式细胞术检测AML的免疫表型.结果表明,①516例AML中髓系相关抗原阳性表达率较高,依次为MPO（95.0％）、CD33（93.0％）、CD13（88.8％）、CD117 （69.4％）,而CD14、CD15、CD64、CD71表达较低,其中145例AML伴淋系抗原表达,分别为CD7 21.5％、CD19 6.0％、CD2 0.78％、CD100.58％、CD20 0.58％;CD71在M6中阳性表达率为100％,CD64在M5中阳性表达率最高（30.2％）;CD34总阳性表达率为57.8％.②首次化疗后完全缓解（CR）率为64.7％,M3组中CD34＋患者CR率低于CD34-组（P=0.019）.非M3组CD34阳性组的CR明显低于CD34阴性组（P=0.002）;CD19＋患者CR率高于CD19-组（P=0.028）;CD7＋患者CR率明显低于CD7-组（P =0.002）;CD71＋患者CR率低于CD71-组（P=0.013）;MPO＋患者CR率高于MPO-组（P=0.015）;CD11b、CD13、CD33表达阳性组与相应阴性组的CR率相比,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：免疫分型是诊断AML的必备条件,它有助于指导白血病的临床分型诊断、治疗方案的选择及预后的判断.     

乌苯美司片联合改良FLAG方案治疗难治性急性髓系白血病的疗效观察

【目的】观察鸟苯美司片联合改良FLAG方案治疗难治性急性髓系白血病（AML）的临床疗效、不良反应及对免疫功能的影响。【方法】将30例难治性AML患者分为治疗组与对照组各15例,两组患者均给予改良FLAG方案（由氟达拉滨、阿糖胞苷与粒细胞集落刺激因子组成）化疗,治疗组在治疗开始时给予乌苯美司30mg每日清晨顿服或每次10mg,3次／日,连用8周。比较两组患者治疗后的疗效。【结果】治疗组完全缓解率（CR）为60％,明显高于对照组（40％）,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组总有效率（0R）为73．3％;高于对照组的60％,但差异无显著性（P〉0．05）。治疗组粒细胞缺乏发生率、发热持续时间及粒细胞缺乏持续时间均低于对照组,且差异均有显著性（P〈0．05）。治疗组T淋巴细胞（CD3＋）,T辅助、诱导淋巴细胞（CD3＋、CD4＋）,NK细胞（CDl6＋、CD56＋）水平较用药前有所提高,而对照组均较化疗前下降,两组相比较差异有显著性（P〈0．05）。【结论】乌苯美司片能提高化疗药物对难治性AML的疗效,提高患者免疫功能,减轻化疗不良反应,改善化疗患者的生活质量。     

急性髓系白血病FANCG基因表达的研究

本研究探讨FANCG基因表达与成人散发性急性髓系白血病（AML）的相关性。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测54例AML初诊患者、46例AML完全缓解（CR）患者及36例对照样本骨髓中单个核细胞FANCG基因表达的情况,以β-Actin基因作为内参,根据相对定量公式2^-△△C_T计算AML初诊患者与对照样本、AML初诊患者与AMLCR患者、AMLCR患者与对照样本FANCG基因表达差异的倍数。结果表明,AML初诊组FANCGmRNA的相对表达量为0．56±0．27,AMLCR组为0．75±0．54,对照组为0．85±0．45;AML初诊组FANCGmRNA的表达量较对照组和AMLCR组明显降低（P〈0．05）;AMLCR组FANCGmRNA的表达量与对照组比较无统计学差异。结论：FANCG基因在初诊AML患者中表达降低,AMLCR患者的FANCG基因表达与对照组无明显差异,提示FANCG基因可能与AML的发病有相关性,同时在判断AML的化疗疗效方面具有一定的临床参考价值。     

交叉表达淋系和髓系抗原的急性白血病免疫表型及预后分析

本研究探讨交叉表达淋系和髓系抗原的急性白血病患者的免疫表型及其与预后的关系。用流式细胞术检测白血病细胞的免疫表型,根据免疫标记和FAB亚型将交叉表达髓系和淋系相关抗原的急性白血病进行分组,对于急性髓系白血病（AML）所分析的淋系抗原标志物包括CD2、CD7、CD19、CD56以及其他多个同时表达的淋系抗原,对于急性淋巴细胞白血病（ALL）所分析的髓系抗原标志物包括CD13及同时表达的CD13/CD33。以同期无交叉抗原表达的AML和ALL作为对照,比较各组白血病的完全缓解（CR）率和无复发生存期（RFS）有无差别。结果表明：161例确诊并接受治疗的患者中,91例交叉表达淋系和髓系抗原的急性白血病分为仅伴CD7表达的AML即CD7（＋）AML24例,仅伴CD19表达的AML即CD19（＋）AML14例,伴CD2表达的AML即CD2（＋）AML（包括CD2与CD19共表达病例）8例,伴CD56表达的AML即CD56（＋）AML（包括CD56与CD2或CD19共表达病例）10例,表达2个及2个以上淋系相关抗原的AML即Ly≥2（＋）AML16例,仅伴CD13表达的ALL即CD13（＋）ALL9例,伴CD13、CD33同时表达的ALL即CD13/CD33（＋）ALL10例。无淋系抗原表达的AML即Ly（-）AML和无髓系抗原表达的ALL即My（-）ALL分别为41例、29例。与Ly（-）AML相比,Ly≥2（＋）AMLCR率、RFS均明显偏低;CD56（＋）AML的RFS较低,但CR率无明显差别;其余各组与Ly（-）AML相比CR率、RFS均无明显差别。CD13（＋）ALL组、CD13/CD33（＋）ALL组与My（-）ALL组相比CR率、RFS亦无明显差别。结论：急性白血病中各抗原标志物的交叉表达对预后的意义应区别对待。AML伴CD56表达或多个抗原交叉表达时预后较差,而其他交叉表达的髓系或淋系抗原标志物对预后无明显影响。     

一氧化氮在人骨髓间充质干细胞抑制淋巴细胞异基因增殖反应的初步研究

本研究探讨一氧化氮在骨髓间充质干细胞（MSC）抑制淋巴细胞增殖中的作用及机制。从人骨髓中分离培养MSC,预先接种在培养板上,建立混合淋巴细胞培养（MLC）体系,利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖情况,并用Griess法检测培养体系NO的产生,real—timePCR检测淋巴细胞FOXP3mRNA表达水平。结果表明：MSC干预组淋巴细胞增殖活性下降,其OD值为0．49±0．03,NO含量明显升高为（21．05±1．14）μmol／L,淋巴细胞FOXP3mRNA表达水平为（1．56±0．34）％,而无MSC的MLC组NO含量为（3．30±0．36）μmol／L,FOXP3表达水平为（0．74±0．15）％,两组相比具有显著性差异。结论：MSC产生的NO上调淋巴细胞FOXP3mRNA的表达水平,从而抑制淋巴细胞增殖。     

急性早幼粒细胞白血病143例免疫表型研究

为了探讨急性早幼粒细胞白血病（APL）免疫表型特征,以CD45／SSC设门,对143例APL进行多参数流式细胞术免疫分型,比较初发和复发时免疫表型变化。随机选择同期42例HLA—DR阴性的非APL的急性髓系白血病（AML）患者作为对照,其中31例CD34也为阴性,探讨其与初发APL的免疫表型的差异。结果表明：①初发APL中91．9％表现为cD34和HLA—DR共阴性,复发时CD34和HLA—DR阳性率增高（37．5％vs3．0％,37．5％vs3．9％）。初发APL组CD34阳性率低于DR^-AML组（3．0％vs23．4％）,初发APL组CD34即使阳性,其表达水平也较低（P〈0．05）。②初发APL组CD33阳性率高于各对照组（97．0％vs75．0％,83．3％,83．9％）,其表达水平亦高于各对照组（P〈0．05）。③初发APL组淋系抗原中仅见CD2的表达,未见CD7的表达,而DR—AML组、CD34^-／DR—AML组CD7阳性率分别为12．0％,6．5％,高于初发APL组（P〈0．05）。结论：免疫表型检测可以为APL的快速诊断提供依据,对HLA—DR^-的AML可以从CD34的表达与否、CD33的表达水平、淋系抗原表达情况以及SSC特征等方面与APL进行鉴别。     

rhG-CSF对小鼠骨髓间充质干细胞的动员作用

为了研究rhG-CSF体内应用对小鼠骨髓间充质干细胞（MSC）的动员作用,将30只小鼠随机分为2组：rhG-CSF组和对照组,分别给予皮下注射rhG-CSF80μg/（kg.d）和等量生理盐水,连续5天,在最后1次注射后分别于6,12和168小时取小鼠骨髓和外周血,以1×10^6单个核细胞（MNC）接种于12孔培养板14天,对形成的成纤维细胞集落（CFU-F）进行计数,用胰蛋白酶消化后应用流式细胞术测定表面抗原并进行成脂,成骨诱导。结果表明：rhG-CSF组骨髓形成的CFU-F数均较对照组明显增加（p〈0.01）。6小时取材较12小时,168小时取材形成的CFU-F数目多（p〈0.01）,12小时与168小时CFU-F差异无统计学意义。流式细胞术检测骨髓CFU-F显示CD34^-、CD133^-、CD90^＋、CD105^＋,骨髓CFU-F具有成脂、成骨分化的能力。rhG-CSF组6小时取材外周血具有类似骨髓的CFU-F,出现的频率为（0.50±0.11）×10^-6,与对照组比较差异有显著性（p〈0.05）。结论：rhG-CSF可使小鼠骨髓间充质干细胞增殖加速,但时间短暂,其高峰在rhG-CSF应用5天后的6小时内。rhG-CSF对小鼠间充质干细胞也有动员能力,但作用较弱。     

FoxO3a在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

本研究旨在探讨叉头框蛋白O3a(forkhead box protein O3a,FoxO3a)在急性髓系白血病(acute myeloidleukemia,AML)中的表达及其临床意义。收集44例急性髓系白血病初诊患者骨髓标本,5例正常人骨髓作为对照,应用Western blot方法检测骨髓细胞FoxO3a蛋白的表达,其中14例患者在完全缓解后复测骨髓FoxO3a的表达。结果表明:AML患者骨髓细胞FoxO3a蛋白表达上调,平均表达量(灰度值)为0.43±0.19,显著高于正常对照组0.19±0.06(P<0.001);化疗缓解后FoxO3a蛋白水平下降,与正常对照组比较无显著性差异(P>0.10)。相关分析显示,FoxO3a蛋白表达与AML患者外周血白细胞数呈正相关(r=0.48,P=0.012);尽管FoxO3a表达量对缓解率无明显影响,但高表达者缓解时间短。结论:FoxO3a在AML中可能是一种原癌蛋白,初诊时高表达者预后差。     

89例成人融合基因Aml1／Eto阳性急性髓系白血病长期生存分析

本研究探讨影响成人aml1／eto阳性急性髓系白血病患者长期生存的顸后因素。回顾性分析2004年1月至2008年7月本院89例成人aml1／eto阳性急性髓系白血病患者的临床资料,应用Log—Rank检验和Cox回归模型对患者的性别、年龄、初诊时白细胞计数、髓外白血病、中枢神经系统白血病、免疫表型、染色体、诱导缓解方案、诱导缓解疗程数、获得缓解时间、aml1／eto融合基因表达和异基因造血干细胞移植进行了单因素和多因素综合分析。结果表明：89例患者1—42个月随访（中位24个月）的5年预计总体生存率（OS）为（50．0±2．3）％,5年预计无复发生存率（RFS）为（47．0±1．9）％。单因素分析显示,初诊时白细胞计数、髓外白血病、中枢神经系统白血病、表达CD56、诱导缓解疗程数、获得缓解时间、aml1／eto融合基因表达、接受异基因造血干细胞移植均为影响中国成人aml1／eto阳性急性髓系白血病患者长期生存的主要因素。多因素分析显示,初诊时白细胞计数、中枢神经系统白血病、CD56表达、获得缓解所需时间、amll／eto融合基因变化以及接受造血干细胞移植均是影响aml1／eto阳性急性髓系白血病患者长期生存的重要的独立因素。结论：成人aml1／eto阳性急性髓系白血病具有不同于其他人群的特性,其预后相对较差,对于具有不良预后因素的aml1／eto阳性AML成年患者应该建议接受造血干细胞移植。