槲皮素促进软脂酸诱导EA.hy926细胞合成IRS2

正2型糖尿病病因复杂,有遗传、环境等多因素参与,各因素相互作用互为因果。研究表明胰岛素抵抗(insulin resistence,IR)的发生与胰岛素信号传导通路障碍密切相关[1-2]。其中胰岛素受体底物2(irs-insulin receptor substrate 2,IRS2)是胰岛素信号传导通路中重要的信号蛋白[1]。本实验通过体外高浓度软脂酸诱导人脐静脉内皮细胞系(EA.hy926细胞),建立IR的血管内皮细胞模型,研究槲皮素对IR状态EA.hy926细胞中IRS2 mRNA和蛋白表达的影响。     

枸杞多糖减轻过氧化氢诱导的人内皮样细胞EA.hy926氧化损伤

目的:研究枸杞多糖(LBP)对过氧化氢(H_2O_2)诱导人内皮样细胞EA.hy926氧化损伤的作用及机制。方法:用H_2O_2建立EA.hy926细胞氧化损伤模型,细胞共分为5个组:正常对照(control)组、模型(damage)组(H_2O_2,50 mmol/L)、LBP(100 mg/L)组、抗损伤(anti-damage)组(50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L LBP+50 mmol/L H_2O_2)和LY294002(20μmol/L)组。采用CCK-8法检测细胞的活力;用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测不同处理后EA.hy926细胞的凋亡;吖啶橙(AO)/溴乙啶(EB)染色法观察细胞凋亡的形态特征;划痕法测定细胞的迁移能力;一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞培养上清中NO的水平;用ELISA法测定血管内皮生长因子(VEGF)的水平;Western blot检测cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、内皮型NO合酶(eNOS)、p-eNOS和p-Akt的蛋白水平。结果:量效结果显示浓度为100 mg/L的LBP预处理EA.hy926细胞1 h,然后加入H_2O_2(50 mmol/L)处理24 h对减轻H_2O_2诱导的EA.hy926细胞损伤的作用最显著。与damage组比较,LBP预处理可提高EA.hy926细胞的活力(P0.05),减少细胞凋亡(P0.05),并促进细胞迁移;上清液中VEGF和NO水平升高;Bcl-2/Bax比率明显升高,下调cleaved caspase-3蛋白水平,并上调eNOS和p-eNOS蛋白水平。此外,加入PI3K抑制剂LY294002后,LBP对H_2O_2损伤的EA.hy926细胞的保护作用减弱,表现为NO水平和p-Akt蛋白水平降低。结论:LBP能减轻H_2O_2对EA.hy926细胞的损伤作用,缓解H_2O_2诱导的凋亡,其机制与激活PI3K/Akt/eNOS信号通路密切相关。     

miR-126对EA.hy926细胞血管内皮生长因子表达的调控作用

 目的：探讨miR-126对EA.hy926细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：选用EA.hy926细胞株作为研究对象,采用阳离子介导的转染方式,将miR-126 inhibitor 和miR-126 mimics 进行细胞转染,分析miR-126对血管内皮细胞功能的影响。采用转染negative control作为阴性对照,转染36 h后提取细胞总RNA,利用 real-time PCR和Western blotting分别检测EA.hy926细胞 VEGF  mRNA 和蛋白水平的表达。结果：转染miR-126 inhibitor 50 nmol/L 36 h后,EA.hy926细胞的VEGF mRNA及蛋白水平各组间差异有统计学意义（P<001）,与阴性对照组相比,miR-126 inhibitor 使EA.hy926细胞的VEGF mRNA及蛋白水平显著上调（P<001）;转染miR-126 mimics 50 nmol/L 36 h后,EA.hy926细胞的VEGF mRNA及蛋白水平各组间有显著差异（P<001）,与阴性对照组相比,miR-126 mimics 使EA.hy926细胞的VEGF 在mRNA及蛋白水平显著下调（P<001）。结论：miR-126 能够抑制VEGF的表达,VEGF有可能是其调节的靶基因之一。     

丝胶对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用

目的:观察丝胶对Ⅱ型糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用.方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、丝胶组和二甲双胍组.模型组、丝胶组和二甲双胍组大鼠均建立链脲佐菌素致Ⅱ型糖尿病模型.待模型成功建立后,丝胶组和二甲双胍组大鼠分别给予丝胶和二甲双胍灌胃35d.分别检测各组大鼠的血糖;免疫印迹法检测各组大鼠胰腺Bax和Bcl-2蛋白、免疫组织化学显色观察各组大鼠胰岛细胞胰岛素和神经肽Y (NPY)蛋白的表达.结果:与模型大鼠相比,丝胶组和二甲双胍组大鼠的血糖、胰Bax和NPY蛋白的表达明显降低,Bcl-2和胰岛素蛋白的表达明显升高;且两组比较无明显差别.结论:丝胶对Ⅱ型糖尿病胰岛损伤具有保护作用;且作用与二甲双胍相当.     

尿酸抑制人脐静脉内皮细胞合成一氧化氮

目的 研究尿酸(UA)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及分泌一氧化氮(NO)的影响.方法 不同浓度UA(0、0.5、1、1.5及2 mg/L)及50 mg/L ox-LDL(阳性对照)分别作用HUVEC 24、48及72 h,用real-time PCR法测定HUVEC eNOS mRNA;Western blot法检测细胞eNOS蛋白;酶法检测上清液NO的含量.结果 UA 0.5 mg/L组eNOS mRNA表达水平明显高于对照组(P＜0.05);随着UA浓度升高(1、1.5及2 mg/L组),及其作用时间延长,HUVEC eNOS mRNA及蛋白表达水平及上清液NO分泌最相比对照均明显下降(72 h N02-/N03-2 mg/L组与对照组分别为0.52±0.18与1.00±0.10,P＜0.05),且趋势与ox-LDL组相同.结论 0.5 mg/L以上浓度的UA呈浓度及时间依赖性抑制HUVEC eNOS表达及NO合成,提示高浓度的UA可能损伤血管内皮功能.     

四逆汤对同型半胱氨酸损伤的EAhy926细胞caveolin-1和eNOS表达的影响

 目的：探讨四逆汤（Sini decoction,SND）防治内皮细胞损伤的机制及陷窝蛋白1（caveolin-1）和一氧化氮（NO）系统在其中的作用。方法：建立同型半胱氨酸(Hcy)损伤的人脐静脉内皮融合细胞（EAhy926细胞）模型,观察四逆汤的保护作用及其对NO系统和caveolin-1的影响。结果：Hcy加入后细胞生长缓慢,贴壁细胞数明显减少,NO浓度明显减低（P<0.05）,caveolin-1 mRNA和蛋白表达明显增强（P<0.05）,内皮型NO合酶(eNOS) mRNA和蛋白表达明显减弱（P<0.05）;四逆汤处理组贴壁细胞及细胞形态明显改善,NO浓度较Hcy模型组明显升高（P<0.05）,caveolin-1 mRNA和蛋白表达较Hcy模型组明显减弱（P<0.05）,eNOS mRNA和蛋白表达较Hcy模型组明显增强（P<0.05）,其中以四逆汤1.0 kg/L +Hcy 4.0 μmol/L组最明显。结论：Hcy可能通过增加caveolin-1表达和抑制eNOS表达而损伤人脐静脉内皮细胞,而四逆汤通过抑制caveolin-1表达和增加eNOS的表达拮抗Hcy对细胞的损伤。     

丹参多酚酸盐对过氧化氢诱导人内皮细胞EA.hy926氧化应激损伤的保护作用及机制

目的:探讨丹参多酚酸盐(salvianolate)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926氧化损伤的保护作用及机制。方法:体外培养EA.hy926细胞,随机分为:正常对照组、损伤组和抗损伤(丹参多酚酸盐+过氧化氢)组。采用CCK-8法检测细胞活性,Transwell实验检测内皮细胞迁移能力;一氧化氮(nitric oxide,NO)试剂盒和ELISA法分别检测细胞培养液中NO和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平;流式细胞术检测细胞内超氧化物阴离子水平、线粒体跨膜电位和细胞凋亡情况;采用Western blot法检测caspase-3、cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax、NF-κB和p53蛋白表达水平。结果:与损伤组比较,不同剂量的丹参多酚酸盐预处理可提高EA.hy926细胞的活性、降低内皮细胞的凋亡,并促进细胞的迁移(P0.05);细胞上清液中VEGF和NO含量及细胞内线粒体膜电位水平显著升高(P0.05);细胞内ROS水平显著下降;NF-κB、p53、Bax和cleaved caspase-3蛋白水平显著降低(P0.05);Bcl-2蛋白水平显著升高(P0.05)。结论:丹参多酚酸盐能减轻过氧化氢对EA.hy926细胞氧化应激的损伤作用,其机制可能与NF-κB通路的阻滞相关。     

川芎嗪与氨基胍联合治疗对新生链脲佐菌素糖尿病大鼠肝功能的影响

 目的： 研究川芎嗪与氨基胍联合治疗对新生链脲佐菌素糖尿病大鼠（n0-STZ大鼠）肝功能的影响。方法：用出生当日Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素复制n0-STZ大鼠模型。设立正常对照组、模型组、二甲双胍治疗组及川芎嗪+氨基胍联合治疗组。第32周检测空腹血糖（FPG）、空腹血浆胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(IRI)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性、肝组织中NO浓度、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性及iNOS、caspase-3、Fas和Bcl-2蛋白的表达。结果：两组治疗均可以降低FPG及IRI,也可以降低肝组织NO浓度、iNOS活性及iNOS表达水平,改善肝功能,而联合治疗作用强于二甲双胍。与二甲双胍相比,联合治疗在降低肝组织caspase-3、Fas蛋白表达方面作用较强,在增加Bcl-2蛋白表达方面作用无显著差异。结论：川芎嗪+氨基胍联合治疗和二甲双胍单独治疗都能抑制iNOS活性,降低iNOS、caspase-3及Fas蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达,从而改善肝脏功能,但川芎嗪与氨基胍联合治疗保护肝功能的作用优于二甲双胍。     

川芎嗪与氨基胍联合治疗对n0-STZ大鼠肾功能的影响

目的: 研究川芎嗪与氨基胍的联合治疗对新生链脲佐菌素糖尿病大鼠(n0-STZ)肾功能的影响。方法: 出生当日Wistar大鼠,一次性腹腔内注射STZ诱导n0-STZ大鼠模型。实验大鼠分4组:(1)正常对照组;(2)胰岛素抵抗组;(3)二甲双胍组;(4)川芎嗪与氨基胍联合治疗组。第32周检测空腹血糖(FPG)、空腹血浆胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(IRI)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿蛋白和肾小球滤过率(GFR),外周血白细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达,肾组织中NO浓度和iNOS活性以及iNOS和3-硝基酪氨酸(3-NT)的蛋白表达。结果: (1)造模第8周,82.5%的Wistar大鼠空腹血糖≥7.0 mmol/L,肾功能受损。(2)两种治疗均能降低FPG、FINS、IRI,以联合治疗组提高胰岛素敏感性更显著;两种治疗方案都能改善大鼠肾功能,联合治疗组降低血BUN、Cr,提高肾小球滤过功能作用更强。(3)两种治疗都能下调iNOS活性和NO浓度,抑制肾组织中3-NT和iNOS表达,联合治疗组效果更显著。结论: 二甲双胍和川芎嗪与氨基胍联合治疗都能通过抑制硝基化应激改善肾功能,但川芎嗪与氨基胍保护肾功能的作用优于二甲双胍。     

肝X受体对血管内皮细胞EA.hy926内皮素1表达的调节作用

目的 研究肝X受体(liver X receptor,LXR)对血管内皮细胞珠EA.hy926中内皮素1(endo-thelin-1,ET-1)表达的影响,并初步探讨LXR调节ET-1表达的分子机制.方法 在培养的EA.hy926中加入LXR的特异性配体GW3965,作用28 h后收集细胞及培养上清液.细胞经Trizol法提取总RNA,以RT-PCR检测ET-1 mRNA水平的变化,以放射免疫法测定细胞上清液ET-1含量的变化;将克隆有ET-1启动子区的荧光素酶报告基因质粒phET1-Luc(克隆于pGL3-Basic)、pCMX-LXRα、pCMX-RXRα和内参照质粒psv-β-gal共同转染于EA.hy926细胞,经荧光素酶报告基因检测研究LXR对ET-1启动子活性的影响,从而初步了解LXR调节血管内皮细胞ET-1表达的分子机制.结果 LXR特异性配体GW3965能够抑制血管内皮细胞EA.hy926中ET-1的mRNA和蛋白表达水平,并且抑制ET-1启动子的转录活性.结论 活化血管内皮细胞LXR可下调ET-1的表达,且该作用与LXR抑制ET-1基因启动子的活性有关.     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.

     

Aspects of the problem of direct introduction of Standards of International Organizations

Editorial note. This article is published as part of a discussion. Particular issues of the article are disputable. First of all, this concerns the so-called “folder” method of introduction of international standards for medical devices to domestic medical practice (i.e., by direct translation of the standards and their publication as standardizing documents). Nevertheless, at least one of the problems, the problem of coordination between domestic state standards for medical devices and international recommendations of ISO and IEC, is undoubtedly of topical importance. Advancement of new health service legislation which is to be approved by law-makers will definitely introduce corrections into the present situation. The Editorial Board of Meditsinskaya Tekhnika believes this article will lessen these problems and to be welcomed by readers.