麦角新碱对电针红藻氨酸所致大鼠海马痫样放电的作用

本实验通过侧脑室注射红藻氨酸(KA)致癫,观察电针大椎、腰俞,微电泳麦角新碱(Ms)对海马痫样放电和海马脑电的影响,初步分析5—HT与电针抑制癫痫的关系。结果表明:1.电针穴位能抑制海马痫样放电和脑电,而电针穴位同时微电泳Ms时,Ms能80％翻转电针中的作用,表明内源性5—HT和5—HT能神经元能被电针穴位     

电针对红藻氨酸所致实验性癫痫大鼠海马单位丛状放电的影响

侧脑室注入红藻氨酸(Kainic acid,KA)所诱发的大鼠海马癫痫放电,可被电针大椎、肾俞穴所抑制。表现为1):电针后海马EEG幅度和频率均减少;第一分钟里主要以痫波幅度的减低为主。2):电针后正性痫样放电被抑制,负性痫样放电被激活,并且正性、无关痫样放电转为负性痫样放电。3):电针使海马痫样丛状放电的每一丛     

癫痫大鼠海马神经元Fas、FasL和Caspase-3的表达

目的观察Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达,探讨Fas、FasL和Caspase-3表达与癫痫的关系,为癫痫的生物治疗提供实验依据。方法通过腹腔注射戊四氮建立癫痫大鼠模型,用免疫组织化学方法和图像分析技术检测Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达。结果 Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达水平和阳性细胞数量与正常对照组相比均明显增多(<0.05)。结论 Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马过表达。     

电针耳甲对癫痫大鼠行为学和脑电图的影响

目的: 探讨电针耳甲对癫痫大鼠的抑制效应及机制。方法: 健康成年雄性SD大鼠48只。行为学实验分为模型组、大椎组和耳甲组,每组8只。模型组大鼠腹腔注射戊四唑(PTZ)60 mg/kg造成急性癫痫模型。大椎组和耳甲组分别电针"大椎"和耳甲后腹腔注射PTZ。比较3组大鼠行为学的变化。电生理实验分为大椎组、颈迷走神经刺激组(VNS)组和耳甲组,每组8只,比较电针"大椎"、VNS和电针耳甲对癫痫大鼠脑电图的影响。结果: 与模型组和大椎组相比,耳甲组大鼠第1次大发作潜伏期延长,第1次大发作持续时间缩短,行为学积分减少。电针耳甲抑制脑电图癫痫波的时间与电针"大椎"相比增加;与VNS相比差异无显著。结论: 电针耳甲抑制癫痫发作的效应优于电针"大椎",与VNS相比无明显差异。由于电针耳甲创伤小,费用低,而且无明显副作用,可以作为治疗癫痫的替代疗法之一。     

电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制研究

目的 探讨电针结合康复训练通过SDF-1/CXCR4信号通路对癫痫大鼠的保护机制.方法 70只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=30)、治疗组(n=20)与中和组(n=10),采用氯化锂联合戊四氮致构建癫痫大鼠模型,观察癫痫大鼠认知功能、癫痫发作频次、持续时间;TUNEL方法检测癫痫大鼠海马区凋亡程度...     

电针、刺激中缝核对红藻氨酸所致海马痫样放电无协同作用

实验在21只红藻氨酸所致大鼠癫痫模型上进行。共观察60个海马痫样放电单位的变化过程。结果:1、电针后1min内55％单位痫样放电减少,32％增加,13％不变。2、刺激中缝核后1min64％单位抑制,14％兴奋,22％不变。3、电针、同时刺激中缝核后1min抑制单位占47％兴奋占31％,无关     

Wortmannin通过抑制癫痫大鼠海马自噬活性发挥神经保护作用

目的:探讨癫痫大鼠海马自噬活性的变化及自噬抑制剂wortmannin(WM)对致痫大鼠海马神经元的保护作用。方法:实验大鼠分为对照组、致痫2 h、8 h、16 h、24 h、72 h组和WM干预组。应用HE染色和Nissl染色观察癫痫大鼠海马神经元损伤的变化。免疫印迹检测海马组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ的比值作为自噬活性的指标。结果:LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值在大鼠癫痫发作2 h时开始升高,24 h达到高峰,持续升高至少72 h。致痫24 h时海马CA1区出现明显神经元损伤和丢失。WM干预组CA1区存活神经元数目(100.88±18.73)显著高于癫痫组(70.16±5.09)(P0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值低于癫痫组(P0.05)。结论:癫痫发作导致的海马损伤时存在自噬激活现象;WM通过抑制自噬活性减轻癫痫发作所致的海马损伤,具有神经保护作用。     

抗坏血酸对癫痫大鼠海马分子伴侣介导的自噬激活的影响

目的: 探讨癫痫大鼠海马氧化应激反应和分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)活性的变化,以及抗氧化剂抗坏血酸 (ascorbic acid, AA)神经保护作用的可能机制。方法: 实验大鼠分为空白对照组、癫痫24 h组、AA预处理癫痫组和AA对照组。应用RT-PCR和免疫印迹法检测海马组织2a型溶酶体相关膜蛋白(lysosome-associated membrane protein type 2a,LAMP2a)mRNA和蛋白的变化,采用化学法检测海马组织丙二醛(malondialdehyde, MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平。结果: 癫痫组大鼠海马组织LAMP2a转录和合成明显高于空白对照组,MDA含量明显升高,而SOD的水平显著下降。AA预处理可显著减低癫痫大鼠海马LAMP2a的转录和合成,并明显降低MDA的含量,却显著提高SOD的水平。结论: 癫痫发作导致的海马损伤时存在CMA激活现象和显著的氧化应激反应;抗氧化剂AA通过抑制CMA活性和降低氧化应激反应来减轻癫痫发作中的海马损伤,具有神经保护作用。     

电针结合康复训练对缺血脑卒中大鼠VEGF与MMP2表达的影响

目的探讨电针结合康复训练治疗对脑卒中大鼠学习记忆能力及大鼠海马血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-2(MMP2)表达的影响。方法 60只SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组与电针+康复训练组,采用大脑中动脉阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)建立局灶性脑缺血动物模型。采用Morris水迷宫实验评估大鼠的学习、记忆能力,免疫组织化学与Western blot方法检测大鼠海马VEGF与MMP2表达,real time PCR方法检测大鼠海马VEGF与MMP2基因表达水平。结果与模型组相比,电针+康复训练组大鼠在实施治疗后,逃避潜伏期明显缩短(P0.01)。与假手术组相比,模型组大鼠海马VEGF与MMP2蛋白和mRNA表达水平显著升高(P0.01),而与模型组相比,电针+康复训练组大鼠海马VEGF与MMP2蛋白和mRNA表达水平显著降低(P0.01)。结论电针结合康复训练能够改善脑卒中大鼠的学习记忆能力,并能降低大鼠海马VEGF与MMP2的表达。     

外源性硫化氢保护实验性癫痫持续状态大鼠海马神经元作用的研究

目的:为研究外源性硫化氢(H_2S)对实验性癫痫持续状态(status of epilepticus,SE)大鼠海马神经元的保护作用,我们用供体Na HS对氯化锂-匹罗卡品所致幼鼠SE海马神经元的影响,并对SE引起的脑损伤进行靶点干预。方法:用氯化锂-匹罗卡品建立大鼠SE模型,并分为正常+Na HS组,癫痫组,癫痫+Na HS组和癫痫+羟胺组,另设正常组(对照组),每组6只。用比色法测定血浆和海马H_2S浓度,用Real-Time PCR检测海马胱硫醚-β合酶(CBS)基因mRNA表达,用HE染色和Nissl染色观察海马神经元形态。结果:癫痫组血浆和海马组织H_2S浓度和CBS mRNA表达明显低于正常组(P0.01),癫痫+Na HS组血浆和海马组织H_2S浓度和CBS mRNA表达明显高于癫痫组(P0.01),癫痫+羟胺组血浆和海马组织H_2S浓度和CBS mRNA表达显著低于癫痫组(P0.05)。HE染色显示,癫痫组海马CA3区锥体细胞明显减少,细胞层次紊乱,形态不规则;尼氏染色显示,癫痫组海马CA3区尼氏体明显减少,锥体细胞排列紊乱;与癫痫组比较,癫痫+Na HS组海马尼氏体缺失和锥体细胞排列紊乱明显改善。结论:外源性H_2S对实验性癫痫持续状态大鼠海马组织CBS mRNA表达具有上调作用,并提高血浆和海马组织H_2S含量。同时,外源性H_2S对实验性癫痫大鼠海马组织神经元具有保护作用。     

布洛芬通过下调环氧化酶2降低癫痫大鼠海马神经元兴奋性

目的:研究布洛芬对慢性癫痫大鼠海马区环氧化酶2(COX-2)和神经元兴奋性的影响。方法:选用雄性健康SD大鼠48只,随机分为3组,分别为对照组(control)、癫痫组(epilepsy)和治疗组(ibuprofen)。运用戊四氮(PTZ)诱导建立慢性癫痫大鼠模型并用布洛芬干预,采用行为学观察检测大鼠癫痫发作水平,运用免疫组织化学染色和Western Blot技术检测大鼠海马区COX-2的表达情况,运用全细胞膜片钳技术收集并分析大鼠海马区动作电位的变化情况。结果:与对照组相比,癫痫组大鼠癫痫发作明显,海马区COX-2表达升高,海马神经元兴奋性升高(P 0.05);治疗组大鼠癫痫发作等级降低,海马区COX-2表达明显降低,海马神经元兴奋性降低(P 0.05)。结论:布洛芬通过下调COX-2降低癫痫大鼠海马神经元的兴奋性,降低癫痫发作强度,具有一定的保护作用。     

电针改善慢性脑低灌注大鼠空间学习记忆能力和海马IL-6/JAK2/STAT3的信号调节

目的:观察电针调节慢性脑低灌注(chronic cerebral hypoperfusion,CCH)对大鼠海马JAK2/STAT3通路和炎症反应的影响,探讨电针减轻CCH所致空间学习记忆能力障碍的作用机制。方法:将成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组(n=10),行改良永久性双侧颈总动脉结扎术造模,电针组采用2/15 Hz频率刺激(30 min/d,持续4周)大鼠百会和大椎穴,其余2组动物进行平衡处理。采用Morris水迷宫实验和激光多普勒血流仪评估及检测大鼠的空间学习记忆能力和局部脑血流量(regional cerebral blood flow,r CBF);采用ELISA、RTPCR与Western blot法分别检测大鼠海马组织中炎性因子白细胞介素6(IL-6)和IL-1β浓度,海马JAK2和STAT3的mRNA表达及其磷酸化蛋白含量;HE染色观察海马组织的病理变化。结果:电针组大鼠r CBF、各时点平均逃避潜伏期和原平台象限停留时间均较模型组动物有明显改善(P0.01或P0.05)。电针组大鼠海马组织中IL-1β与模型组相比显著降低(P0.05),而IL-6的含量有显著升高(P0.05),海马JAK2和STAT3的mRNA表达及pJAK2和p-STAT3蛋白含量也均比模型组明显升高(P0.05),海马CA1区神经细胞损伤减轻。结论:电针可通过调节IL-6/JAK2/STAT3信号通路抑制炎症反应,从而减轻海马神经细胞损伤和认知障碍。     

戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素和神经营养因子-4表达的变化及灵芝孢子粉的干预作用

目的: 观察戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素(N-cadherin)和神经营养因子-4(NT-4)表达的变化及灵芝孢子粉的干预治疗作用,研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法: 健康雄性Wistar实验大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组均用致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化和Western blotting检测皮质和海马区N-cadherin和NT-4的变化。结果: 实验性癫痫大鼠模型制作成功,灵芝孢子粉组和癫痫模型组实验动物均达到点燃标准,与癫痫模型组动物相比,灵芝孢子粉组大鼠潜伏期明显延长, 但持续时间无显著差异。免疫组化和Western blotting检测实验结果表明:癫痫模型组实验大鼠脑海马和皮质N-cadherin含量比正常对照组增高(P<0.01);灵芝孢子粉组N-cadherins含量比癫痫模型组下降(P<0.01)。同时癫痫模型组大脑海马和皮质NT-4含量比正常对照组增加(P<0.05);灵芝孢子粉组NT-4含量比癫痫模型组增加(P<0.01)。结论: 灵芝孢子粉能够降低N-cadherin的表达,调整病变神经元兴奋性,起到抗癫痫作用,还能增强NT-4的表达从而减轻癫痫发作对神经系统的损伤。     

电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆及海马神经细胞凋亡的影响

目的：探讨电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆及海马神经细胞凋亡的影响及机制。方法：采用递增法建立海洛因成瘾大鼠模型,设对照组、成瘾组、成瘾＋电针处理组（电针组）,三组大鼠跳台实验测试大鼠学习记忆,并取三组大鼠脑海马组织,运用流式细胞仪检测细胞凋亡）。结果：跳台实验结果表明：与对照组比较,成瘾组大鼠学习记忆成绩降低（P〈0．01）,电针组大鼠学习记忆成绩有所改善（P〈0．01）;流式细胞仪结果显示：与对照组相比,成瘾组大鼠海马细胞凋亡率增加（P〈0．01）,电针组大鼠海马神经细胞凋亡率较成瘾组降低（P〈0．05）。结论：海洛因成瘾大鼠海马神经细胞凋亡增加;电针针刺治疗可抑制海洛因引起的海马神经细胞凋亡;海洛因引起海马神经细胞凋亡可能是海洛因损害学习记忆的机制之一,电针针刺治疗可改善海洛因成瘾大鼠的学习记忆,其机制可能与针刺可抑制海马神经细胞凋亡有关。     

GIRK1、2在慢性颞叶癫痫大鼠海马内的表达变化

目的:探讨G蛋白偶联内向整流钾通道(GIRK)在海人酸诱导慢性颞叶癫痫大鼠海马内的表达变化及其在癫痫中的作用。方法:采用海人酸颞叶癫痫模型,运用原位杂交、免疫细胞化学检测海马齿状回、CA1、CA3区GIRK1、2mRNA和蛋白表达;Westernblotting检测海马整体GIRK1、2蛋白变化。结果:GIRK1、2mRNA和蛋白在大鼠海马内分布广泛;慢性颞叶癫痫海马DG区GIRK2mRNA和蛋白表达增高有显著差异(P＜0.01);GIRK1mRNA在海马DG区表达有差异(P＜0.05);Westernblotting检测海马GIRK1、2未有明显变化。结论:GIRK1、2在慢性癫痫大鼠海马内的表达增高,特别在齿状回,提示是机体对神经元网络过度兴奋的代偿或适应性反应;其合成增加将降低神经元的兴奋性,阻止海马内过度兴奋的扩散(DG-CA3-CA1)。     

锌螯合剂对匹罗卡品致痫小鼠行为学及海马神经元的影响

目的:研究锌螯合剂氯碘羟喹对匹罗卡品致痫小鼠行为学及海马神经元的影响。方法:将CD1小鼠随机分成3组,对照组小鼠腹腔注射等量的生理盐水;癫痫组小鼠腹腔注射匹罗卡品300 mg/kg;氯碘羟喹治疗组(治疗组)小鼠腹腔注射匹罗卡品300 mg/kg,30 min之后腹腔注射氯碘羟喹15 mg/kg。观察各组小鼠的癫痫发作次数。Morris水迷宫实验测定逃避潜伏期和目标象限停滞时间。应用尼氏染色计数海马神经元数量;利用免疫组织化学方法、免疫印迹结合图像分析技术检测凋亡基因caspase-3在各组小鼠海马的表达变化。结果:与对照组相比,其他2组小鼠的癫痫发作次数明显增多,发作级别明显增高;其中,治疗组小鼠的发作次数和发作级别均低于癫痫组。水迷宫实验结果显示,与对照组相比,其他2组小鼠的逃避潜伏期明显延长,目标象限停滞时间明显缩短;其中,治疗组的逃避潜伏期比癫痫组短,目标象限停滞时间比癫痫组长。其他2组小鼠海马神经元数量明显少于对照组;治疗组的海马神经元数量比癫痫组多。其他2组小鼠海马caspase-3表达明显高于对照组,阳性细胞数量增多,光密度增加;治疗组海马caspase-3的表达低于癫痫组,阳性细胞数量减少,光密度降低。结论:锌螯合剂氯碘羟喹能抑制癫痫发作,保护海马神经元,提高癫痫小鼠的学习记忆能力。     

遗传性癫痫大鼠海马NOs、SOD、MDA、LDH的异常变化

目的比较遗传性癫痫大鼠(tremor,TRM)海马与正常Wistar大鼠海马的一氧化氮合酶(NOs)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化,进一步揭示癫痫的发病机制。方法应用Western Blot法检测TRM海马区NOs蛋白的表达;应用试剂盒检测TRM海马区LDH和SOD的活性以及MDA的含量。结果与正常Wistar大鼠相比,遗传性癫痫大鼠海马中NOs表达水平升高,MDA含量和LDH活性升高(0.01),SOD活性无变化。结论 NOs、LDH、MDA的异常变化可能与遗传性癫痫大鼠的癫痫发生与发展相关。     

癫痫患者血清E_2及海马内β-雌激素受体表达

目的:探讨癫痫患者血清雌二醇(E2)及海马内β-雌激素受体(β-ER)对癫痫发作的影响.方法:用放射免疫分析测定男性、女性癫痫患者及非癫痫患者血清E2水平,用免疫组化方法检测其海马内β-ER的表达水平,进行统计学对比.结果:男性和女性癫痫患者血清E2β水平与非癫痫患者均无明显差异(P>0.05),经期性癫痫患者海马内β-ER水平明显升高(P<0.05).结论:血清E2水平对癫痫患者痫性发作无明显影响,经期性癫痫发作可能与海马内β-ER水平增高有关.     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织GDNF与NT-3表达的影响

目的:观察和探讨灵芝孢子粉干预后戊四氮(PTZ)致痫大鼠皮质和海马区胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和神经营养因子-3(NT-3)的变化,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法:Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组采用PTZ腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。实验后断头迅速取脑,采用免疫组化方法检测皮质和海马区GDNF和NT-3表达的变化;同时用Westernblotting检测海马各指标蛋白的变化。结果:灵芝孢子粉干预后,免疫组化显示:皮质和海马区GDNF和NT-3较癫痫模型组明显增加;Western blotting检测显示:海马中GDNF和NT-3表达较癫痫组显著增加。结论:灵芝孢子粉能够增强GDNF和NT-3的表达从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用。     

lncRNA-UCA1靶向miR-204调控PI3K/Akt信号通路抑制癫痫模型海马神经元凋亡的作用机制

目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)-UCA1抑制癫痫模型海马神经元凋亡的作用机制。方法:将小鼠癫痫模型海马神经元细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-UCA1组(转染si-UCA1)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-204组(转染miR-204 mimics)、si-UCA1+anti-miR-NC组(共转染si-UCA1与anti-miR-NC)、si-UCA1+anti-miR-204组(共转染si-UCA1与anti-miR-204),另取未转染小鼠癫痫模型海马神经元、小鼠正常海马神经元细胞分别记为癫痫模型组和正常对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞UCA1和miR-204表达量;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测UCA1和miR-204的靶向关系;蛋白质免疫印迹法(Western Blotting)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达。结果:与正常对照组比较,癫痫模型组中海马神经元细胞UCA1表达量显著升高,mi...