川芎嗪预处理对大鼠移植肾保护作用的实验研究

目的研究川芎嗪预处理对大鼠移植肾的保护作用.方法采用原位大鼠肾移植模型,将SD大鼠肾移植给Wistar大鼠作为同种异体移植,Wistar大鼠肾移植给Wistar大鼠作为同品系移植(空白对照).共设3个实验组,观察各组大鼠的移植肾功能、粘附分子、细胞因子、MHC-Ⅱ分子的表达及排斥反应发生的程度.结果川芎嗪预处理能减少移植肾粘附分子ICAM-1及细胞因子IL-2、TNF-α的表达;并抑制MHC-Ⅱ分子在移植肾内表达,改善移植肾功能.结论川芎嗪预处理对移植肾有保护作用,可明显减轻移植肾排斥反应的程度.     

草药S在抑制大鼠移植肾排斥反应中MHC Class Ⅱ分子表达的研究(摘要)

本研究采用改进的Fisher和Kamada大鼠原位肾移植模型，选用SD大鼠肾移植结Wistar大鼠为同种异体移植，Wistar－to－Wistar同品系移植为正常对照，根据使用药物不同分五个实验组，观察移植后受体鼠存活、肾功能及定量测定移植肾内MHCClassⅡ在移植肾内的表达。结果表明，草药S能延长受体鼠存活时间，并抑制MHCClassⅡ在移植肾内的表达（VS．未治疗组P＜0．01），S药加小剂量环孢素A（CsA）治疗组与同系组相比差异无显著性（P＞0．05）。这些结果提示，移植肾内MHCClassⅡ表达的多少与其排斥的强弱有相关性，草药S的抗排斥机理之一可能与抑制移植紧排斥反应中MHCClassⅡ分子表达有关。     

草药S抑制大鼠移植肾排斥反应中MHC ClassⅡ分子表达的研究

为探索草药Ｓ抗大鼠同种异体肾移植急性排斥的作用机理，采用改进的Ｆａｂｒｅ和Ｋａｍａｄａ大鼠原位移植模型，将ＳＤ大鼠肾移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同种异种异体移植，Ｗｉａｔａｒ移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同品系移植（空白对照），共设五个实验组，观察移植后受体鼠存活、检测移植肾功能及定量测定移植肾内ＭＨＣ ＣｌａｓｓⅡ抗原分子的表达。结果表明，草药Ｓ能延长受体鼠存活时间，并抑制ＭＨＣ ＣｌａｓｓⅡ在移植肾内的     

草药S抑制大鼠移植肾排斥反应中MHC Class Ⅱ分子表达的研究

为探索草药Ｓ抗大鼠同种异体肾移植急性排斥的作用机理，采用改进的Ｆａｂｒｅ和Ｋａ－ｍａｄａ大鼠原位肾移植模型，将ＳＤ大鼠肾移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同种异体移植，Ｗｉｓｔａｒ移植给Ｗｉｓｔａｒ大鼠为同品系移植（空白对照），共设五个实验组，观察移植后受体鼠存活、检测移植肾功能及定量测定移植肾内ＭＨＣＣｌａｓⅡ抗原分子的表达。结果表明，草药Ｓ能延长受体鼠存活时间，并抑制ＭＨＣＣｌａｓⅡ在移植肾内的表达（与不用药物组比较Ｐ＜０．０１），Ｓ药加小剂量环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ，ＣｓＡ）治疗组与同系组相比差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。这些结果提示，移植肾内ＭＨＣＣｌａｓｓⅡ表达水平的高低与其排斥的强弱有相关性。     

急性排斥反应时移植肾组织HLA-Ⅱ的表达

【目的】检测肾功能异常尤其是急性排斥反应时移植肾组织内HLA-Ⅱ的表达情况。【方法】对同种异体移植肾患者在出现肾功能异常时,随时行经皮肾穿刺活检获取植肾组织,用免疫组化方法检测活检组织中HLA-Ⅱ的表达情况。【结果】53例肾移植受体因肾功能异常共行肾活检64次,其中急性排斥反应28例次,非急性排斥反应27例次,抗排斥后7 d 9例次。急性排斥反应时(AR)HLA-Ⅱ抗原在系膜细胞、肾小管上皮细胞、血管内皮细胞和炎性细胞上的表达均较非急性排斥反应(N-AR)组增加,抗排斥治疗7 d后明显下降。【结论】移植肾组织内HLA-Ⅱ类分子表达与急性排斥反应密切相关。     

缺血预适应对缺血再灌注大鼠肾脏黏附分子表达的影响

目的 研究缺血预适应对缺血再灌注大鼠肾脏黏附分子表达的影响.方法 采用缺血6 min,再通血4 min,循环4次的缺血预适应方案,对Wistar大鼠肾脏进行缺血预处理,再缺血60 min后进行再灌注,与缺血再灌注大鼠肾脏进行比较,观察大鼠肾功能及肾内黏附分子ICAM-1、P-Selectin、E-Selectin的表达变化.结果 缺血预适应大鼠肾脏内的黏附分子ICAM-1、P-Selectin、E-Selectin表达明显低于缺血再灌注组,在第48 h 其血清肌酐也明显低于缺血再灌注组大鼠.结论 缺血预适应对肾功能有保护作用,其机制与减少缺血再灌注肾脏内黏附分子的表达有关.     

脂质过氧化抑制剂对同基因大白鼠移植肾MHC基因表达调控的研究

同种肾移植术后，宿主T细胞对移植物主要组织相容性复合物（MHC）抗原的识别并对移植物排斥，为宿主抗移植物反应的关键环节。抑制宿主T细胞免疫活性或抑制移植物MHC表达，将减轻器官移植术后排斥反应发生的频率和强度。本研究以Wistar大白鼠间肾脏低温保存后移植为模型，选用细胞脂质过氧化抑制剂对供体和受体进行治疗，观察对移植肾MHC表达的影响，结果表明：脂质过氧化抑制剂能有效地抑制移植肾MHC的基因表达，同时对移植肾脏的功能起保护作用，这种对MHC表达的抑制以及对肾功能的保护与脂质过氧化抑制剂对肾脏低温保存期及移植术过程中缺血再灌注所致器官组织的细胞脂质过氧化反应的抑制有关。     

NF-κB在急性移植肾排异中的作用

目的研究转录因子NF-κB在肾移植急性排斥反应中的作用。方法 ACI大鼠为供体，LEW大鼠为受体建立急性排斥动物模型，将移植肾分离制成核蛋白提取液，采用gelshift方法观察移植肾组织NF-κB与炎性基因启动子中特殊基因序列的结合能力，并以LEW大鼠同为供受体的移植肾作为对照。结果 在急性排斥反应移植肾中，NF-κB的结合能力明显高于无排斥反应的同系移植肾。结论 NF-κB在同种异体移植物中的强表达可能是急性排斥中的关键因素，提示可通过抑制NF-κB活性来降低移植物的排斥反应。     

抑制一氧化氮合酶/一氧化氮表达与减轻移植肾排斥反应

目的探讨氨基胍和骨化三醇联合抑制诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮(iNOS/NO)表达与减轻肾移植急性排斥反应之间的关系。方法以健康雄性Wistar大鼠和SD大鼠作为供、受体建立肾移植模型。实验随机分为5组:I组为同基因移植组,II组为急性排斥对照组,III组为氨基胍治疗组,IV组为骨化三醇治疗组,V组为联合用药组;观察各组受鼠生存期和移植后5d肾组织病理学变化,检测血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及肾组织匀浆中iNOS/NO的变化。结果I～V组受者存活时间分别为(9.1±1.9)d、(5.3±0.8)d、(9.7±2.1)d、(8.6±1.6)d和(12.9±3.4)d。III、IV组受者存活期、肾功能、移植肾排斥反应程度及肾组织iNOS/NO表达水平较II组明显改善或降低(P<0.05);V组效果更佳(P<0.05),但对进一步减轻排斥反应无统计学意义(P>0.05)。结论氨基胍和骨化三醇联用对减少移植肾iNOS/NO的表达有正协同作用,但不能进一步减轻排斥反应。     

外周血单核细胞表面表达功能分子与移植排斥

早期了解移植排斥反应,是临床医生面临的重要问题。移植排斥反应是与外周血单核细胞有密切关系,当器官移植术后发生排斥及应用免疫抑制剂后,外周血单核细胞表面表达细胞因子、主要组织相容性复合物(MHC)分子和协同刺激分子都有所变化。细胞因子如白细胞介素-2(IL-2)、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)等有较大变化,MHC分子主要是MHC-Ⅱ分子表达升高,协同刺激分子主要为CD80和CD40 L有不同的变化。     

氨基胍对大鼠心脏移植急性排斥期细胞凋亡与诱导型一氧化氮合酶的影响祆

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂氨基胍(AG)对大鼠心脏移植后急性排斥反应期细胞凋亡的影响。方法:分3组建立大鼠腹腔异位心脏移植模型:同系移植组、同种移植组、同种移植后AG治疗(应用AG(600mg/(kg·d))皮下注射)组。各组分别在术后第3d,5d,7d采集移植心肌的心室组织,观察移植心脏排斥反应情况,细胞凋亡情况及心肌组织中iNOS活性的变化。结果:①同种移植组和同种移植后AG治疗组排斥反应差异有统计学意义(χ2分别为11.98,12.70,P<0.05);②心脏移植后各级排斥反应中均可见细胞凋亡的存在,且随着心脏移植排斥反应的加重,心肌细胞凋亡的量也在增加;③同种移植后AG治疗组与同种移植组相比各时间段iNOS活性均明显升高,而与同系移植组相比,差异无统计学意义。结论:AG可以通过抑制心脏移植术后急性排斥期的iNOS活性,从而抑制细胞凋亡,保护移植心脏的功能。     

肾、带血管蒂肾上腺联合移植的实验研究

目的：建立肾、带血管蒂肾上腺移植大鼠模型，探索肾、肾上腺联合移植对移植肾的免疫保护作用。方法：分别建立假手术、肾移植和肾、带血管蒂肾上腺联合移植模型，对各组在血皮质醇、肾功能、移植肾病理等方面进行比较。结果：肾、带血管蒂肾上腺联合移植组血皮质醇浓度明显高于肾移植组（P〈0．05），血尿素氮及肌酐明显低于肾移植组（P〈0．05），移植肾排斥反应明显减轻。结论：肾、肾上腺联合移植对移植肾可产生免疫保护作用，其机制可能是通过移植肾上腺分泌内源性皮质激素产生免疫抑制作用。     

青藤碱对大鼠肾移植急性排斥反应的抑制作用

目的探讨青藤碱免疫抑制作用,为其在器官移植免疫抑制治疗上的应用提供实验依据.方法建立48个大鼠原位肾移植急性排斥反应模型(Wistar-SD)分为四组:分别于腹腔注射生理盐水(1 ml/(kg.d))、青藤碱(30 mg/(dg.d))、环孢菌素A(2.5 mg/(kg.d))、青藤碱(30mg/(kg.d)) 环孢菌素A(2.5 mg/(kg.d)),每组12例,随机抽取6例观察受者存活时间,另6例于术后第六天处死,取腔静脉血测尿素氮及肌酐,取移植肾组织标本病检.分析青藤碱协同环孢菌素A对大鼠肾移植受者存活时间、肾功能指标BUN、Cr以及对移植肾组织病理变化的影响.结果青藤碱[30mg/(kg·d)]可延长受体鼠存活时间至(9.67±0.52)d,与环孢菌素A[2.5mg/(kg·d)]联用后可明显延长受体鼠存活时间至18天以上(25.00±4.65)d;青藤碱对移植肾的功能表现出保护作用并改善移植肾组织的病理变化.结论青藤碱对大鼠肾移植的急性排斥反应起到一定的抑制作用,并与亚治疗剂量的环孢菌素A产生协同作用,青藤碱是一种从自然药物中提取的具有开发前景的免疫抑制药物.     

大鼠肾移植急性排斥反应中诱导型一氧化氮合酶的表达及其抑制剂的作用

目的:探讨大鼠移植肾组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及iNOS抑制药氨基胍(Aminoguanidine,AG)和免疫抑制药他克莫司(FK506)对移植术后急性排斥反应的影响。方法:实验分为同基因移植组(5只,供、受鼠均为SD大鼠)和异基因移植组,后者又分为急性排斥组、AG治疗组和他克莫司治疗组(各组大鼠均为5只,供鼠为SD大鼠,受鼠为Wistar大鼠)。术后第7 d取移植物进行病理检查,观察排斥反应发生情况,并运用RT-PCR、免疫组化法检测各组移植肾组织中iNOS的表达水平。结果:急性排斥组iNOS表达呈强阳性,与AG治疗组、他克莫司治疗组、同基因移植组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。AG治疗组、他克莫司治疗组、同基因移植组之间比较,差异无显著性意义。结论:在大鼠原位肾移植发生急性排斥反应时,iNOS表达明显增高,增高程度与排斥反应的强度移植物损伤有明显关系。应用AG和他克莫司可抑制iNOS的表达,从而减轻移植肾组织的急性排斥反应。     

大鼠肾移植后移植肾内树突状细胞的早期观察

目的 观察大鼠肾移植后早期移植肾内树突状细胞(DC)的变化规律,藉此探讨排斥反应的防治.方法 受体Wistar大鼠30只,按5只/组随机分为6组,35只SD大鼠作为供体,其中5只供肾作为对照组,不行受体手术.其余均行同种异体原位肾移植术,并分别于开放供肾循环后1、6、12、24、48、72 h切取移植肾,行石蜡包埋切片,抗S-100蛋白免疫组化染色和HE染色.观察移植肾病理学改变及肾小球内DC数量变化.结果 各组切片均未见肾小管肾炎、动脉内膜炎等AR表现.对照组及术后1 h组肾小球内DC数量基本为零;此后逐渐增加;24 h组达到顶峰,其均数与其他各组相比,差异显著(Pmax=0.038);随后DC数量缓慢下降.结论 大鼠肾移植术后72 h内,供肾肾小球DC数量呈单峰曲线变化:受体DC不断迁入、迁出供肾是其变化的主要原因;揭示移植肾内DC变化规律有助于进一步完善免疫抑制剂及抗炎药物的使用方案.     

Treatment of chronic dysfunction of transplantation kidney in rats —by tanshinone, lysimachiae combined with mycophenolate mofetil or cyclosporine alone

Objective: To evaluate the relationship between chronic kidney dysfunction after transplantation and chronic vascular rejection (CVR), and to evaluate the efficacy and safety of Tanshinone (Tan) and Herba Lysimachiae (Lys) combined with Mycophenolate Mofetil (MMF) to fight against CVR, and to reduce the incidence of chronic dysfunction in rat renal transplantation model.Methods: Sixty-five male SD rats as donors and sixty-five male Wistar rats as recipients were used. The recipients were divided into five Groups, including Group A: Lys + Cyclosporine A (CsA), Group B: Tan+CsA, Group C: MMF+CsA, Group D: CsA, and Group E: normal saline. Kidney function and morphological changes were assessed at 2, 4, and 6 weeks after transplantation. All sections of renal grafts were stained with monoclonal antibodies (McAB),. including major histocompability complex class II (OX-6), lymphocyte function antigen-1 (CDllb/CD18), intercellular adhesive molecular-1 (IA₂₉), CD₈ ⁺ (OX-8), and proliferation cell nuclear antigen (PCNA) (5A10, IgGlk) were used. Results:The two control groups developed typical chronic rejection episodes, and the histologic feature indication of kidney chronic rejection includes loss of renal units and presence of an obliteration arteriopathy involving large renal arteries. These were associated with serum levels of BUN and SCr increased and different degrees of glomerulosclerosis. Their mean survival time was lower than that of other groups. By contrast, serum levels of cytokine in control groups was significantly increased when compared with group B and C (P<0.05). Both group B and C had minimum changes in glomeruli and arteries, and expression levels of PCNA on the glomeruli and tubular cells were higher than those of other groups (P<0. 05). However, there was no significant difference (P>0.05) between group B and C.Conclusions: CVR may activate the risk of the factor responsible for the development of graft chronic dysfunction that causes slow, progressive destruction of the transplanted kidney. Tanshinone was extracted from Salvia miltiorrhiza and purified for use in medicine. Especially when Tanshinone combined with a low-dose of CsA, it may fight against the CVR by inhibiting cell infiltration, and improving microcirculation of the graft, and thus the incidence of CVR is reduced. It is suggested that Tanshinone can be applied to treat patients with chronic renal dysfunction when used in combination with a low-dose Cyclosporine. This work was supported by the Sciences Foundation of the Ministry of Health Grants (No. C 0103)     

负载供肾抗原的受者DC2细胞可延长肾移植大鼠的存活时间

 【目的】观察负载供肾大鼠抗原的DC2（未成熟DC）在体内特异性抑制急性排斥反应及其对移植物的功能和存活时间的影响。【方法】健康成年BN大鼠65只和Lewis大鼠80只,以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者。利用受者大鼠骨髓细胞在体外诱导分化为未成熟的淋巴系DC前体细胞（DC2）,并对其进行免疫表型分析。将所获得DC2负载供肾大鼠抗原,观察DC2在体外抑制混合淋巴细胞反应（MLR）,以及在大鼠同种异体肾移植模型中特异性抑制移植排斥反应发生的情况,Kaplan-Meier生存分析研究对移植大鼠的存活时间的影响。【结果】负载供肾抗原的受者DC2对MLR具有抑制作用（P<0.05）;输注负载供肾抗原的DC2实验组的大鼠肾移植术后中位生存时间是62±6天,输注负载无关大鼠抗原和不负载抗原移植的实验组,术后中位生存时间分别是30±4天和27±5天,各实验组与对照组的血清肌酐和细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-10的mRNA表达之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】大鼠同系受体来源的负载供肾抗原的DC2具有体外抑制MLR的作用,体内能够预防和抑制急性排斥反应的发生,延长生存时间,提高远期存活率。     

不阻断腹主动脉和下腔静脉的 Fish-Lewis大鼠原位肾移植慢性排斥模型的建立

[目的] 建立大鼠原位肾移植研究肾移植慢性排斥的模型. [方法] 自 1998年 8月至 2003年 1月,以 Fisher大鼠作为供体, Lewis大鼠为受体.模拟活体供肾肾移植中供受体同步手术的顺序,采用显微外科技术,进行不阻断腹主动脉和下腔静脉的大鼠原位肾移植,共完成 650例. [结果] 此模型并发症少,移植肾术后成活率达 98.2%.术后第 14天; 1个月; 2个月; 3个月; 4个月; 5个月和 6个月成活率分别为 96.8%; 95.8%; 95.4%; 95.4%; 94%; 94%和 92.5%.术后 10～ 12周,开始出现蛋白尿,血肌酐升高的典型慢性排斥反应. [结论] 此模型具有手术简单、成功率高、影响肾功能因素少、结果稳定等优点.适应于研究肾移植慢性排斥反应.     

缺血预处理对大鼠移植肠冷缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 探讨缺血预处理(IP)对不同冷保存时间大鼠移植肠的保护作用.方法 将80只SD大鼠随机分为2组:即非预处理组(0-L组)与预处理组(L组),每组分别再分为4小组,按冷缺血时间分为3(L3)、6(L6)、12(L12)及18(L18)组,每组10只.建立大鼠缺血预处理模型,将各组供肠冷保存相对应时间.供肠行原位移植后再灌注1 h取材,对其进行组织学观察,并观测NF-κB的表达.结果 相同冷缺血时间的预处理组损伤明显较非预处理组轻,表现为预处理组较非预处理组小肠绒毛排列整齐,肌层水肿较轻,Chiu氏评分升高.预处理组较非预处理组上皮细胞NF-κB的表达减弱(P＜0.05).结论 缺血预处理对不同冷保存时间移植肠具有保护作用.