ITP患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B-1a细胞的变化

目的研究免疫性血小板减少症(ITP)患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B-1a细胞水平的动态变化。方法用流式细胞仪和CD5CD19双标抗体检测20名正常对照,31例ITP患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B细胞和B-1a细胞占淋巴细胞的比例和绝对值,并比较地塞米松治疗有效和无效患者之间B-1a细胞变化的差别。结果 ITP患者治疗前外周血B-1a细胞占淋巴细胞比例为(4.01±3.32)%,绝对值为(74.8±26.6)×106/L,均较正常对照组明显升高(P<0.01),地塞米松治疗结束后ITP患者外周血B-1a细胞水平下降至(31.9±14.5)×106/L,其中地塞米松有效和无效患者治疗前B-1a细胞分别为(91.8±44.3)×106/L和(48.9±25.8)×106/L(P<0.05),治疗结束后有效和无效患者外周血B-1a细胞分别为(22.5±12.3)×106/L和(43.9±13.2)×106/L。结论 ITP患者外周血B-1a细胞水平升高,接受大剂量地塞米松治疗后,B-1a细胞绝对值明显下降,治疗前B-1a细胞水平较低者提示对大剂量地塞米松治疗反应较差。     

内皮祖细胞在创伤后多器官功能障碍中的变化及意义

Objective To investigate characteristics of changes in bone marrow endothelial progenitor cells (EPCs) and implications on multiple organ dysfunction syndrome (MODS) as a result of trauma.Methods Eighteen mini-pigs were randomized into two groups: MODS group (n=9) and control group (n=9).The animal models of MODS were reproduced by "two-hit" injury with hemorrhagic shock and lipopolysaccharide (LPS) injection.Bone marrow and peripheral blood of them were collected at five time points: normal condition (T1), before injection of LPS (T2), and 0 (T3), 24 (T4) and 48 hours (T5) after injection of LPS.Erythrocytic lysate was added to the samples, and the number of leucocytes in every sample was counted.The rate of EPCs in each sample was determined by flow cytometry.Number of EPCs in bone marrow and peripheral blood were calculated, and the results were analyzed statistically.Results The number of EPCs (×106/L) in bone marrow of control group at T1-5 was 7.64±0.68,7.32±0.55, 7.58±1.13, 7.77±0.70, and 7.88±0.84, respectively, and in peripheral blood control group was 3.54±0.26,4.06±0.64, 3.74±0.55, 3.61±0.37, and 3.98±0.63, respectively.The number of EPCs (×106/L) in bone marrow in the experimental group was 7.45 ± 1.55, 6.58 ± 0.80, 11.27 ± 1.20, 10.88±1.15, and 8.36 ± 2.88, respectively.The number of EPCa (× 106/L) in peripheral blood in the experimental group was 3.21±0.48, 8.71±2.04, 5.98±0.77, 1.27±0.91, and 2.14±0.96, respectively.The number of EPCs in bone marrow of experimental group was larger than that of control group at T3, T4, T5.The number of EPCs in the experimental group in peripheral blood was larger than that of control group at T2, T3, T4, T5.The number of EPCs in bone marrow was larger than that in peripheral blood at every time point (all P＜0.05).Conclusion The number of EPCs in peripheral blood elevates sharply in the earlier period, then plummetes quickly during MODS after a trauma.While the number of EPCs in bone marrow descends mildly at first, then rises obviously.Along with the aggravation of MODS, a declination of EPCs in bone marrow emerges.The change in bone marrow EPCs plays an important role in recovery of MODS.     

内皮祖细胞在创伤后多器官功能障碍中的变化及意义

Objective To investigate characteristics of changes in bone marrow endothelial progenitor cells (EPCs) and implications on multiple organ dysfunction syndrome (MODS) as a result of trauma.Methods Eighteen mini-pigs were randomized into two groups: MODS group (n=9) and control group (n=9).The animal models of MODS were reproduced by "two-hit" injury with hemorrhagic shock and lipopolysaccharide (LPS) injection.Bone marrow and peripheral blood of them were collected at five time points: normal condition (T1), before injection of LPS (T2), and 0 (T3), 24 (T4) and 48 hours (T5) after injection of LPS.Erythrocytic lysate was added to the samples, and the number of leucocytes in every sample was counted.The rate of EPCs in each sample was determined by flow cytometry.Number of EPCs in bone marrow and peripheral blood were calculated, and the results were analyzed statistically.Results The number of EPCs (×106/L) in bone marrow of control group at T1-5 was 7.64±0.68,7.32±0.55, 7.58±1.13, 7.77±0.70, and 7.88±0.84, respectively, and in peripheral blood control group was 3.54±0.26,4.06±0.64, 3.74±0.55, 3.61±0.37, and 3.98±0.63, respectively.The number of EPCs (×106/L) in bone marrow in the experimental group was 7.45 ± 1.55, 6.58 ± 0.80, 11.27 ± 1.20, 10.88±1.15, and 8.36 ± 2.88, respectively.The number of EPCa (× 106/L) in peripheral blood in the experimental group was 3.21±0.48, 8.71±2.04, 5.98±0.77, 1.27±0.91, and 2.14±0.96, respectively.The number of EPCs in bone marrow of experimental group was larger than that of control group at T3, T4, T5.The number of EPCs in the experimental group in peripheral blood was larger than that of control group at T2, T3, T4, T5.The number of EPCs in bone marrow was larger than that in peripheral blood at every time point (all P＜0.05).Conclusion The number of EPCs in peripheral blood elevates sharply in the earlier period, then plummetes quickly during MODS after a trauma.While the number of EPCs in bone marrow descends mildly at first, then rises obviously.Along with the aggravation of MODS, a declination of EPCs in bone marrow emerges.The change in bone marrow EPCs plays an important role in recovery of MODS.     

手足口病患儿外周血T淋巴细胞亚群的检测及临床意义

目的 检测手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群,探讨其免疫功能变化与疾病的关系.方法 采用流式细胞仪检测2010年5～10月北京佑安医院感染科病房诊治的119例手足口病患儿急性期的T淋巴细胞亚群,对其中96例患儿咽拭子标本进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以确定病原.对不同样本进行独立样本t检验及单因素方差分析.结果 手足口病患儿CD3+、CD4+、CD8+绝对数均数随着患儿年龄组的增长而下降.重症病例各T淋巴细胞亚群均数值均低于普通病例(P ＜0.05),其中重症组CD3+、CD4+、CD8+绝对数分别(1 989.17±1 224.08)×106/L,(1 027.00±771.87)×106/L,(734.00±438.99)×106/L,普通病例组分别为(2 918.08±2 221.74)×106/L,(1 560.38±742.94)×106/L,(1 010.37±687.67)×106/L,CD4+/CD8+差异无统计学意义(P＞0.05).肠道病毒(EV)71阳性与阴性组患儿T淋巴细胞亚群各值比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 手足口病患儿存在细胞免疫功能紊乱.     

ITP患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B-1a细胞的变化

目的研究免疫性血小板减少症（ITP）患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B-1a细胞水平的动态变化。方法用流式细胞仪和CD5CD19双标抗体检测20名正常对照,31例ITP患者大剂量地塞米松治疗前后外周血B细胞和B-1a细胞占淋巴细胞的比例和绝对值,并比较地塞米松治疗有效和无效患者之间B-1a细胞变化的差别。结果 ITP患者治疗前外周血B-1a细胞占淋巴细胞比例为（4.01±3.32）%,绝对值为（74.8±26.6）×106/L,均较正常对照组明显升高（P〈0.01）,地塞米松治疗结束后ITP患者外周血B-1a细胞水平下降至（31.9±14.5）×106/L,其中地塞米松有效和无效患者治疗前B-1a细胞分别为（91.8±44.3）×106/L和（48.9±25.8）×106/L（P〈0.05）,治疗结束后有效和无效患者外周血B-1a细胞分别为（22.5±12.3）×106/L和（43.9±13.2）×106/L。结论 ITP患者外周血B-1a细胞水平升高,接受大剂量地塞米松治疗后,B-1a细胞绝对值明显下降,治疗前B-1a细胞水平较低者提示对大剂量地塞米松治疗反应较差。     

多器官功能障碍综合征患者外周血白三烯B4与p38丝裂原活化蛋白激酶的变化

目的　探讨多器官功能障碍综合征( MODS)患者外周血白三烯B4( LTB4)与p3 8丝裂原活化蛋白激酶( p3 8MAPK)含量的变化及与MODS病情的关系。方法　对2 6例MODS患者进行病情评分,采用酶联免疫吸附法( ELISA)检测血中LTB4与p3 8MAPK含量,并与1 2例健康体检者进行对照。比较MODS患者MODS评分与外周血L TB4和p3 8MAPK的相互关系,及MODS组死亡与存活患者的MODS评分、外周血LTB4与p3 8MAPK含量。结果　MODS患者血清LTB4含量为( 92 3 .96±3 0 8.65) ng/L,明显低于健康对照组( 2 453 .3 1±40 0 .93 ) ng/L( P<0 .0 5) ;MODS患者血清中p3 8MAPK含量为( 1 93 .83±1 0 6.3 2 ) ng/L,与健康对照组( 1 2 4.3 6±84.50 ) ng/L比较差异无显著性( P>0 .0 5)。MODS组中死亡患者的血清L TB4含量为( 4 44 .98±2 0 6.3 0 ) ng/L,明显低于存活患者的( 1 3 3 4 .51±53 0 .3 5) ng/L( P<0 .0 5) ;p3 8MAPK含量为( 2 72 .0 8±2 0 7.3 7) ng/L ,明显高于存活患者( 1 1 5.59±57.99) ng/L ( P<0 .0 5)。结论　MODS晚期病理生理变化与一般炎症反应有所不同。外周血L TB4与p3 8MAPK可作为MODS病情严重程度及预后判断指标。     

血液透析滤过对多器官功能障碍犬高迁移率族蛋白-1、转化生长因子-β的影响

目的观察连续性血液透析滤过(continuous venovenous haemodiafltration,CVVHDF)对多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)犬脂多糖(LPS)、脂多糖结合蛋白(CD14)、高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)、转化生长因子-β(TGF-β)的影响,并探讨CVVHDF治疗MODS的作用机制。方法经失血性休克+复苏灌注+内毒素血症建立犬MODS模型,随机分为MODS组和CVVHDF组。内毒素注射完毕后CVVHDF组接受CVVHDF治疗24 h;MODS组未接受CVVHDF治疗。测定各时间点血浆及超滤液LPS、CD14、HMGB-1、-TGF-β浓度。结果 CVVHDF治疗后,LPS、CD14和HMGB-1浓度水平下降,均在T6、T7、T8及T9时间点显著低于MODS组(P<0.01),差异有统计学意义;TGF-β浓度水平缓慢升高,在T5、T6、T7、T8及T9时间点显著高于MODS组(P<001)差异有统计学意义。在超滤液中能检测出CD14、HMGB-1和TGF-β,SC分别为0.78±0.10ng/ml、0.7±0.09μg/L、0.82±0.09ng/ml;未能检测出LPS。CVVHDF治疗后明显减轻了心脏和肝脏的组织组损害。结论 CVVHDF能清除MODS相关炎症介质和抗炎介质,重建机体免疫系统内稳状态,阻止脏器进一步损害,起到防治MODS的作用。     

致敏受体排斥异基因供体骨髓细胞的实验研究

目的 建立致敏动物模型,研究致敏对异基因骨髓细胞植入的影响及机制.方法 将C57 BL/6小鼠脾细胞经尾静脉注射到BALB/c小鼠体内建立致敏动物模型,应用二抗结合实验及补体依赖细胞毒性反应检测血清抗体.以非致敏或致敏BALB/c小鼠为受鼠,经照射预处理后予以1 ×10 7C57BL/6供鼠骨髓细胞.移植后于不同时间点(2、12和48 h)分离受鼠外周血、脾脏及骨髓等细胞,检测供鼠细胞在致敏受鼠体内各组织的分布.移植后记录各组受鼠的生存情况,监测造血重建与骨髓恢复情况.体外分离非致敏或致敏受鼠的血清及脾细胞,与异基因骨髓细胞相孵育,通过免疫实验计算细胞毒性指数.结果 二抗结合实验和补体依赖细胞毒性反应均证实致敏受鼠血清中含有高滴度的供鼠反应性抗体.骨髓移植归巢实验结果表明,与非致敏组相比,异基因骨髓细胞在致敏受鼠的外周血、脾脏及股骨的分布均明显减少.生存分析结果发现非致敏组小鼠于照射后能长期存活,而致敏组小鼠于照射后12～15 d全部死亡.移植后第14天,非致敏组受鼠外周血白细胞和股骨骨髓细胞计数分别为(3240±300)×106/L和(396±27)×106/股骨,而致敏组受鼠外周血白细胞和股骨骨髓细胞计数分别为(320±80)×106/L和(6±2)×106/股骨,两组差异有统计学意义(P＜0.01).移植后第7天,供鼠细胞在非致敏组和致敏组骨髓所占的百分比分别为(48.07±4.70)％和(0.77±0.11)％,两者差异有统计学意义(P＜0.01).体外通过补体依赖细胞毒性反应实验、细胞毒性淋巴细胞的杀伤作用和抗体依赖细胞介导细胞毒性作用实验表明,致敏组受鼠的细胞毒性指数均明显高于非致敏组.结论成功建立脾细胞输注致敏的小鼠动物模型,致敏受体完全排斥异基因供体骨髓细胞,作用机制与免疫损伤途径有关.     

高容量血液滤过对多器官功能障碍综合征患者降钙素原影响的初步探讨

目的 探讨高容量血液滤过(HVHF)对多器官功能障碍综合征(MODS)患者血浆降钙素原(PCT)的影响.方法 选择MODS患者40例,随机分为对照组和HVHF组,对照组采用传统的西医治疗方法,HVHF组在传统治疗基础上行HVHF治疗,分别测定2组患者血白细胞总数(WBC)、中性粒细胞(N)百分比、血乳酸(Lac-)、血浆PCT以及APACHE Ⅱ评分.比较2组患者的病死率以及存活组和死亡组PCT、APACHE Ⅱ的差别.结果 2组患者治疗前各项指标无差别,对照组经传统西医治疗后5～7 d部分指标才开始下降(P＜0.05或P＜0.01),而HVHF组治疗后第1天各项指标即开始下降(P均＜0.05),HVHF治疗后5～7 d各项指标均显著低于对照组(P均＜0.01).HVHF组病死率明显低于对照组(P＜0.05),分别为10%和40%;存活组PCT水平、APACHE Ⅱ评分明显低于死亡组(P均＜0.01),分别为(3.8±2.6)μg/L、(7.6±3.8)分和(12.9±7.8)μg/L、(14.5 ±8.4)分.结论 HVHF能降低MODS患者的血浆PCT,降低MODS病死率,改善MODS患者预后.     

定期双份单采血小板捐献者部分免疫指标变化的研究

目的了解定期捐献双份机采血小板捐献者免疫功能的变化。方法随机抽取本站男性单采血小板捐献者42例,其中首次捐献单采血小板捐献者为对照组,共22例;双份血小板捐献者为实验组,共20例。分别用流式细胞术和免疫比浊法检测其外周血T淋巴细胞亚群和免疫球蛋白IgG、IgM、IgA的水平。结果实验组外周血中CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+分别为(57.23±10.7)%、(40.65±6.89)%、(1.77±0.41)%,对照组上述指标分别为(55.18±9.84)%、(37.32±8.30)%、(1.61±0.64)%,实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组外周血中IgG、IgM、IgA分别为(12.25±2.13)g/L、(1.39±0.48)g/L、(2.68±0.62)g/L,对照组上述指标分别为(11.55±1.95)g/L、(1.08±0.40)g/L、(2.20±0.91)g/L,实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论定期捐献双份单采血小板不会影响捐献者外血T淋巴亚群和免疫球蛋白IgG、IgM、IgA的水平。     

琼玉膏干预实验肺癌小鼠骨髓抑制的效应

背景骨髓抑制是应用抗肿瘤药物治疗的主要副反应.目的观察传统中药方琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗导致的骨髓抑制的干预效应.设计随机对照试验.单位暨南大学医学院.材料实验于2001-03/10在暨南大学医学院中心试验室完成.选用48只健康的6～8周龄C57/BL小鼠.方法使用癌细胞接种的方法制造小鼠肺癌模型,造模后随机均分3组,每组16只.①对照组,接种后次日用生理盐水0.2 mL灌胃,同时以5 μL/g体质量腹腔注射生理盐水,1次/d.②化疗组,顺氨氯铂20mg,用生理盐水稀释成0.2 g/L,以5 μL/g体质量腹腔注射,1次/d;同时以生理盐水0.2mL灌胃,1次/d.③联合组,除按化疗组用顺氨氯铂外,同时用琼玉膏0.2 mL灌胃,1次/d.于用药后21 d,检测外周血红细胞、白细胞、血小板数及骨髓有核细胞计数.主要观察指标各组小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及骨髓有核细胞计数.结果对照组有3只,化疗组有4只,联合组有4只未成瘤,被排除.在实验过程中对照组、化疗组各有2只死亡,联合组也有1只死亡,进入结果分析数对照组为11只、化疗组为10只、联合组为11只.①联合组及对照组的外周血红细胞、白细胞及血小板皆明显高于化疗组[红细胞(8.54±0.81),(8.65±0.77),(4.56±1.00)]×1012 L-1;白细胞[(9.04±0.60),(9.14±0.71),(3.31±0.96)]×109 L-1;血小板[(949.09±111.31),(955.54±87.13),(399.30±131.36)]×109 L-1,P＜0.01].②化疗组骨髓有核细胞数明显低于联合组与对照组[(5.30±1.12),(10.51±1.15),(14.36±1.02)]×106,P＜0.01).而联合组与对照组相比,对照组又高于联合组(P＜0.05).结论琼玉膏能提高肺癌小鼠化疗后外周血红细胞、白细胞、血小板及骨髓有核细胞计数,改善化疗所致的骨髓抑制状况,但尚不能完全拮抗化疗的骨髓抑制.     

高容量血液滤过对多器官功能障碍犬内毒素及CD14的影响

目的 观察高容量血液滤过(HVHF)治疗多脏器功能障碍综合征(MODS)犬中血浆内毒素(LPS)及其受体CD14的变化,探讨HVHF防治MODS的作用机制。方法 12只Beagle 犬采用失血性休克+复苏灌注+内毒素血症建立MODS模型,随机(随机数字法)分为HVHF组(n=6)和MODS组(n=6),HVHF组在LPS注射完毕后给于HVHF治疗24h。分别于术前(T1)、LPS注射前(T2)、LPS注射完后0 h(T3),3 h(T4),6 h(T5),9 h(T6),12 h(T7),15 h(T8)及24 h(T9),观察血浆LPS及其受体CD14、器官功能指标变化。LPS采用MB-80微生物快速动态检测系统测定。CD14采用ELISA测定。统计学方法各时间点前后采用重复测量资料方差分析。结果 HVHF治疗后血浆LPS及CD14明显下降,在T4-9时间点明显低于MODS组(P＜0.01)。超滤液中能检测出CD14,SC为(0.81±0.09)。超滤液中未能检测出LPS。HVHF组主要器官功能明显改善,平均动脉压在T4-9时间点显著高于MODS组(P＜0.0l)。动脉血氧分压逐渐升高,与MODS组在T4-9时间点比较差异有统计学意义(P＜0.01)。HVHF治疗后肌酐、尿素氮逐渐下降,与MODS组在T4-9时间点比较差异有统计学意义(P＜0.0l)。结论 HVHF能改善主要器官功能、降低血浆LPS及CD14峰值,有效遏制过度炎症反应。     

女性供者特征对粒细胞集落刺激因子动员的骨髓和外周血混合采集物中造血和免疫细胞组份的影响

目的 探讨女性健康供者特征对粒细胞集落刺激因子（G CSF）预激的骨髓和外周血混合采集物造血细胞和免疫细胞组份的影响。方法 111名健康女性供者应用G CSF动员,用流式细胞仪测定骨髓和外周血混合采集物中的CD34+细胞和T细胞亚群的数量,并分析怀孕、年龄、身高等供者特征对骨髓和外周血采集物中细胞组份的影响。结果 111例女性健康供者骨髓和外周血混合采集物中的CD34+细胞、CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞和CD3+CD4-CD8-调节性T细胞的数量以每公斤供者体重计算的中位值分别为2.39×106/kg、226.57×106/kg、120.80×106/kg、89.99×106/kg和15.05×106/kg。①年龄对混合移植物中CD3+CD4-CD8-调节性T细胞的数量有影响。②体重指数（BMI）对混合采集物中的CD3+T细胞以及CD3+CD4-CD8-T细胞的数量有影响;③外周血干细胞采集当天的淋巴细胞（LYM）对混合采集物中的CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞的数量有影响;④骨髓干细胞采集当天的LYM对混合采集物中CD3+T细胞和CD3+CD4-CD8-调节性T细胞的数量有影响;⑤与怀孕供者相比,未怀孕供者混合采集物中含有更高数量的CD3+CD8+ T细胞。结论 供者年龄、BMI、是否怀孕以及骨髓干细胞和外周血干细胞采集当天的LYM是骨髓免疫组份的主要影响因素。     

白介素-1β在猪多器官功能障碍综合征中对内皮祖细胞的调控

目的 探讨猪多器官功能障碍综合征(MODS)中p38MAPK介导的白介素(IL)～1β对内皮祖细胞(EPC)的数量与功能的调控,从血管内皮祖细胞分化障碍来研究创伤后MODS的发病机制.方法 将30头家猪随机分为MODS组(n=15,M组)、对照组(n=15,C组),采用失血性休克与内毒素血症的"二次打击法"建立猪MODS模型,在体内Western-blot法检测外周血单核细胞p38MAPK的磷酸化变化;ELISA法测定外周血血浆IL-1β的浓度变化;流式细胞仪检测外周血EPC数量的变化;采用x2检验比较M组与C组的MODS发生率,采用成组t检验比较M组与C组的p38MAPK的磷酸化变化、外周血血浆IL-1β的浓度变化与外周血EPC数量的变化.结果 在MODS中外周血单核细胞p38MAPK的磷酸化增强,导致其外周血IL-1β浓度升高,从而使得外周血EPC数量下降,M组MODS的发生率均明显高于C组(P<0.01);M组的外周血单核细胞p38MAPK的磷酸化与外周血血浆IL-1β的浓度明显高于C组(P<0.01);M组外周血EPC数量明显低于C组(P<0.01).结论 在猪MODS的发病机制中,外周血单核细胞内的p38MAPK的磷酸化使血浆IL-1β浓度升高,使EPC的数量下降,致使MODS的炎症反应加重.     

末梢血与静脉血对化疗后骨髓抑制期白血病患者WBC、HB、PLT结果的对比分析

目的比较白血病患者化疗后骨髓抑制期末梢血与静脉血中白细胞（WBC）、血红蛋白（HB）、血小板（PLT）检测结果有无差别。方法采集2012年4月2013年4月我院血液科层流病房96名化疗后骨髓抑制期患者的末梢血和静脉血,用XT-2000i全血细胞分析仪测定白细胞（WBC）、血红蛋白（HB）、血小板（PLT）,统计分析两种检测手段的差异。结果末梢血的白细胞（WBC）检测结果为：1．106±0．684×10^9／L,静脉血检测结果为：0．918±0．780×10^9／L,末梢血白细胞检测值高于静脉血结果,两者具有统计学意义（P〈0．05）;末梢血中血红蛋白（HB）、血小板（PLT）检测结果分别为：69．875±15．437g／L,70．646±20．737×10^9／L,静脉血检测结果分别为：70．177±15．225g／L,70．583±20．625×10^9／L,两组血标本检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论为准确的判断白血病患者化疗后骨髓抑制的程度,血常规检测应以静脉血为佳,而不能采用末梢血检测以代替。     

脐带间充质干细胞对CD34+细胞在小鼠体内归巢的影响及其机制研究

目的 探讨脐带来源间充质干细胞(MSC)对脐血来源CD34+细胞在NOD/SCID小鼠体内归巢的影响及其可能的机制.方法 将CD34+细胞与MSC细胞共移植入经放射线照射后的NOD/SCID小鼠,采用流式细胞术和RT-PCR检测移植后20 h NOD/SCID小鼠骨髓及脾脏中人CD34+细胞,计算其相应的骨髓和脾脏的归巢效率.将脐血CD34+细胞与脐带MSC体外共培养,检测MSC细胞对CD34+细胞趋化功能的影响;并于培养4、7 d检测培养后CD34+细胞表面CD49e、CD31、CD62L、CD11a等归巢相关黏附分子表达情况.结果 ①移植后20 h采用流式细胞术成功在小鼠骨髓和脾脏中检测到人CD45+细胞.共移植组CD34+细胞骨髓归巢率[(7.2±1.1)%]高于单移植组[(5.4±0.9)%](P<0.05).②RT-PCR结果 显示共移植组小鼠骨髓细胞和脾脏细胞,单移植组小鼠脾脏细胞扩增得到人GAPDH基因片段,而单移植组小鼠骨髓细胞未见明显扩增条带.③MSC存在时,CD34+细胞的体外迁移能力为(35.7±5.8)%,显著高于CD34+细胞自发迁移率[(3.5±0.6)%,P<0.05].④CD34+细胞与MSC体外共培养后细胞表面CD49e、CD31和CD62L黏附分子的表达水平高于CD34+细胞单独培养组.结论 MSC细胞与CD34+细胞共移植有利于CD34+细胞向骨髓、脾脏等造血器官归巢,这可能与MSC促进CD34+细胞迁移以及维持CD34+细胞表面归巢相关黏附分子的表达相关.     

rhG-CSF对供者骨髓和外周血采集物中Th17细胞的影响

本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）供者体内应用对骨髓采集物（GBM）和外周血采集物（GPB）中Th17细胞的影响。对25名亲缘供者皮下注射rhG-CSF5μg/（kg.d）,连用5天,于第4、5天分别采集骨髓和外周血,注射前留取部分供者稳态骨髓（steady state bone mavrow,SSBM）和稳态外周血（steady state peripheral blood,SSPB）。采用流式细胞术测定动员前后供者骨髓和外周血中T细胞分泌IL-17的变化。结果显示：rhG-CSF体内应用后供者骨髓中CD4＋T细胞和CD8＋T细胞分泌Il-17的能力较稳态骨髓明显下降（GBM vs SSBM Th17/CD4＋T,0.74%±0.27%vs1.78%±1.19%,p〈0.05;Tc17/CD8＋T,0.19%±0.16% vs 0.36%±0.37%,p〈0.05）,外周血中的变化与骨髓相同（GPBvsSSPBTh17/CD4＋ T,1.82%±0.91%vs3.26%±1.89%,p〈0.01;Tc17/CD8＋T,0.21%±0.17%vs0.44%±0.28%,p〈0.01）。25例供者GBM与GPB相比,GPB中Th17/CD4＋ T和Tc17/CD8＋ T的比值均高于GBM（p〈0.05,p〈0.01）。结论：体内应用rhG-CSF能够抑制供者骨髓及外周血采集物中Th17细胞的产生,它可能是GPB和/或GBM混合移植对GVHD的发生率没有增加的部分原因。     

粒细胞集落刺激因子对急性肺损伤大鼠的治疗作用

目的观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对脂多糖(LPS)制备的急性肺损伤(ALI)大鼠的治疗作用。方法 Wistar大鼠42只随机分为两组:0.9%氯化钠注射溶液(NS)阴性对照组(NS组,n=6)和模型组(LPS组,n=36),LPS组又随机分为:G-CSF+LPS组(n=18)和NS+LPS组(n=18)。在1 h、6 h、12 h三个时间点通过血气分析、肺干湿重比、肺组织HE染色观察急性肺损伤的程度,通过流式细胞仪检测外周血内皮祖细胞(EPCs)数量。结果 G-CSF干预后,与NS干预组相比急性肺损伤程度明显减轻,PaO2显著改善(P<0.05),肺W/D比值显著降低(P<0.05),HE染色显示肺组织损伤减轻。同时发现G-CSF干预组血EPCs数量明显增多。结论 G-CSF可以改善急性肺损伤大鼠的肺损伤程度,其机制可能与外周血EPCs数量的增加参与内皮细胞再生和修复有关。