乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸

目的 建立一种测定乳酸的新方法。方法 采用乳酸氧化酶氧化乳酸产生丙酮酸和Ｈ２Ｏ２，然后应用Ｔｒｉｎｄｅｒ显色反应测定血浆中乳酸。结果 该方法乳酸氧化酶用量为２００Ｕ／Ｌ，酶反应时间１０分钟，线性范围可达１１ｍｍｏｌ／Ｌ，变异系数（ＣＶ）为２．３１－３．２５％，回收率为９８．４－１０１．０％，与法车生物－酶里埃试剂盒比较具有良好的相关，ｒ＝０．９８５，Ｙ＝０．９８７Ｘ＋０．０４０，４０例健康人血浆乳     

偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

紫外酶促终点法测定全血乳酸

对紫外酶促终点测定全血乳酸进行了实验探讨，并对该法进行了方法学评价，该法批内ＣＶ空白，标准和测定分别为１．５４％，１．８１％和１．５５％；批间ＣＶ分别为４．９６％，２．９６％和２．８７％，平均回收率１０３．８％，线性范围可达１３．６ｍｍｏｌ／Ｌ，参考范围０．３－１．８ｍｍｏｌ／Ｌ。该法简便，精密度好，准确，适于作为常规方法。     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批内不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０．９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５６μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９５）。     

偶氮胂Ⅲ比色法测定血清（浆）钙

对偶氮肿Ⅲ（ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ）比色法测定血清（浆）钙的方法学作了系统研究。结果表明：反应混合液的吸收光谱呈Ｍ型，两个吸收峰分别为６００ｎｍ和６５０～６６０ｎｍ，但以６６０ｎｍ为适。试剂中ＡｒｓｅｎａｚｏＩＩＩ的最适浓度为１５０μｎｏｌ／Ｌ，试剂空白Ａ（吸光度曾称光密度ＯＤ）受ｐＨ的影响，当ｐＨ为７．０　时Ａ值最低。本法批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．８％～２．９６％、３．１５％～３．３７％，平均回收率为９９．３％，线性高达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１７Ａ。本法Ｙ与ＥＤＴＡ自动滴定法Ｘ比较：Ｙ＝１．００５９Ｘ－０．０１４１，ｒ＝０．９９８５、Ｐ＜０．００１、ｎ＝２０。Ｍｇ￣（２＋）、Ｃｕ￣（２＋）、Ｆｅ￣（２＋）、Ｚｎ￣（２＋），Ｈｂ、Ｂｉｌ均不干扰测定。     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批向不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５     

血清无机磷的酶法测定

建立了一种酶偶联测定血清无机磷的方法，方法线性范围为０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，变异系数批内ｘ＝１．０３ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝１．２１％，批间：ｘ＝１．２８ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝３．７％，与钼酸铵紫外光度法相关性为ｒ＝０．９９４２，Ｙ＝０．９５０９Ｘ＋０．０５４１，参考值范围为０．９８～１．５５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

高密度脂蛋白胆固醇直接测定法与硫酸葡聚糖50-镁法比较

目的评价高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）直接测定法在临床应用的可行性。方法将直接测定法与硫酸葡聚糖（ＤＳ５０）－氯化镁沉淀法进行比较，并分析其线性范围、准确度和干扰因素。结果直接法与ＤＳ５０沉淀法相关良好，Ｙ＝０．９２７Ｘ＋０．２１４，ｒ＝０．９６４，ＨＤＬ－Ｃ浓度为２．４５ｍｍｏｌ／Ｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９，ＨＤＬ－Ｃ浓度两组低、中、高值血清标本（０．８４、１．３１、２．３１；０．９２、１．４２、２．５３ｍｍｏｌ／Ｌ）的批内和批间ＣＶ值分别为２．３８％、１．１５％、２．４７％和３．４８％、０．９９％、２．０６％。浓度为１０．５８ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯并不影响ＨＤＬ－Ｃ直接测定法。结论ＨＤＬ－Ｃ直接测定法简易快速，结果准确，适于自动化分析。     

血清乳酸全自动测定方法的建立

目的建立一种测定血清乳酸的全自动分析方法。方法采用氧化酶法在贝克曼LX20全自动生化分析仪上进行血清乳酸测定结果所建立的氧化酶法全自动血清乳酸测定方法其血清乳酸回收率为98．49％,线性范围可达16．0mmol／L．批内变异系数（CV）1．83％、批间CV2．25％,轻、中度黄疸和溶血标本对血清乳酸的测定无显著干扰,210例健康儿童血清乳酸值为0．56～2．60mmol／L（x^-±2s）。结论采用氧化酶法测定血清乳酸快速、准确、简便、可靠,线性范围宽,适合临床应用。     

血清钾离子的丙酮酸激酶法测定

建立一种用螯合物以替代离子载体（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２１）的丙酮酸激酶测定血清钾的方法。使用酶偶联多标准固定时间法检测。该法与定值血清的相对误差为０．３７２％～２．１５８％；批内ＣＶ＜２．０１％，批间ＣＶ＜２．１０％；线性２．０～８．０ｍｍｏｌ／Ｌ；回收率９９．８％～１０２．８％，脂血、黄疸、内源性酶（ＬＤＨ和ＰＫ）、镁及氨等对测定无干扰；与火焰光度法回归方程为Ｙ＝０．０１８８＋１．００９２Ｘ，ｒ＝０．９８７５，Ｐ＜０．０１，与离子电极法对比，回归方程为Ｙ＝０．３９６７＋０．９３５７Ｘ，ｒ＝０．９８６７，Ｐ＜０．０１；试剂复溶后（４℃）至少稳定９天。该法准确度高、重复性好、测定范围宽、抗干扰能力强，与火焰光度法及电极法相关性好，试剂稳定、价廉，可在多种全自动与半自动生化分析仪上应用。     

乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸

采用乳酸氧化酶氧化乳酸产生丙酮酸和H2 O2 ,然后偶联Trinder显色反应测定血浆中乳酸。方法线性可达 13 2mmol/L ,批内变异系数 (CV)为 0 86 %～ 1 5 6 % ,回收率为 98 9%～ 10 1 5 % ,与LD NBT法比较具有良好的相关 ,r =0 989,Y =0 989X 0 0 3 ,5 0例健康人血浆乳酸参考值为 0 6 1～ 2 5 1mmol/L (x± 2s)。本法简便 ,可靠 ,适合作为乳酸的常规测定方法。     

乳酸和乳酸清除率对危重病患者预后的意义

目的 探讨血乳酸水平和乳酸清除率对危重病患者预后的早期评估作用.方法 分析北京大学人民医院286例高乳酸血症患者的临床、实验室资料及预后情况,分析不同乳酸水平的病死率、APACHE Ⅱ评分差异;根据入院7d内的转归分为存活组、死亡组,比较两组pH、HCO3-、BE、Lac等参数的差异,并对严重高乳酸血症进行上述分析,比较存活与死亡组乳酸清除率、APACHE Ⅱ评分的差异;对严重高乳酸血症患者按照乳酸清除率分为高、低清除率组,比较两组间参数的差异.结果 按乳酸水平分层(≥2,＜4 mmol/L; ≥4,＜10mmol/L;≥10 mmol/L),其对应的病死率分别为14.04％、46.67％、78.79％,随着乳酸上升,pH失代偿比例上升,APACHEⅡ评分增加,病死率也上升.存活组与死亡组之间的乳酸、乳酸清除率、APACHE Ⅱ评分均差异有统计学意义(P＜0.01).高、低乳酸清除率组间治疗6h后APACHE Ⅱ评分、病死率差异具有统计学意义(P＜0.01);两组乳酸和初始APACHE Ⅱ评分差异无统计学意义(P＞0.05).乳酸与APACHE Ⅱ评分呈正相关(r=0.868,P＜0.01),乳酸清除率与APACHE Ⅱ评分呈负相关(r=-0.823,P＜0.01).结论 乳酸分层、早期乳酸清除率对评估危重患者预后有重要价值,结合动态APACHEⅡ评分,三者能更好地指导临床治疗、评价预后.     

Dose-response effects of lactate infusions on gluconeogenesis from lactate in normal man

Abstract. Lactate is the predominant gluconeogenic precursor in man. To determine the dose-response relationships between plasma lactate concentration and rates of lactate incorporation in plasma glucose (lactate gluconeogenesis, LGN), we infused 17 normal volunteers with sodium lactate for 180 min at rates ranging from 6 to 40 γmol kg^-1 min^-1 and measured [U-¹⁴C]lactate incorporation into plasma glucose, as well as rates of lactate and glucose appearance in plasma. With the highest lactate infusions, plasma lactate increased up to 7 mM (compared to 1.1±0.13 mM during control sodium bicarbonate infusions, n=10) and LGN averaged 4.73 ± 0.23 μmol kg^-1 min^-1 (compared to 1.57 ± 0.26 μmol kg^-1 min^-l in bicarbonate control experiments, P< 0.001). The data relating plasma lactate concentration to LGN best fit a sigmoidal curve which plateaued at plasma lactate concentrations of approximately 6 mM and yielded an ED₅₀ of 2.04 ± 0.20 (SD) mM and a Vmax (6.25±1.2) (SD) (mUmol kg^-1 min^-1). The sum of the basal rate of lactate appearance and the rate of lactate infusion was not significantly different from the overall rates of lactate appearance during the lactate infusions (35.8±2.2 vs. 34.8±2.9 μmol kg^-1 min^-1, P = 0.23). Thus, our results support the view that infusion of exogenous lactate does not suppress endogenous lactate appearance in plasma.     

Reversible loss of lactate dehydrogenase isoenzymes and lactate dehydrogenase activity in patient's serum

An abnormal lactate dehydrogenase (LD; EC 1.1.1.27) electrophoretogram (only one band, at the application site) and a low LD activity (7 U/L) was seen for a patient's serum during storage at 22 and 4 degrees C. Both reverted to normal when the serum was incubated at 37 degrees C.     

乳酸清除率和乳酸脱氢酶对急性肺损伤预后的评估

目的评估早期乳酸清除率和乳酸脱氢酶(LDH)与急性肺损伤(ALI)患者预后的关系。方法回顾性分析我院2007年5月至2009年5月收治的63例ALI病例的临床资料;按有无并发多脏器功能不全综合征(MODS)和是否28d内死亡分为两组,比较两组间早期乳酸清除率和LDH水平;按早期乳酸清除率和LDH均值为界分为高低两组,比较两组间的病死率和MODS发生率。结果各组间性别、年龄等比较,差异无统计学意义(P均0.05);但MODS组和死亡组早期乳酸清除率分别低于非MODS组和存活组,MODS组和死亡组LDH值分别高于非MODS组和和存活组,差异均有统计学意义(P0.05)。低早期乳酸清除率组和高LDH组死亡率和MODS发生率分别高于高早期乳酸清除率组和低LDH组,差异有统计学意义(P均0.05)。结论早期血乳酸清除率和LDH对ALI患者预后的评估有较大价值。     

注射乳酸环丙沙星的配伍禁忌

合并重度肺动脉高压行联合瓣膜置换的患者由于术前存在严重的肺血管病理改变，体外循环过程加重，肺泡及血管内皮损伤，使其术后较普通体外循环患者更易出现呼吸系统并发症，撤机风险高。因此，术后围撤机期的护理至关重要。我院1999年7月-2005年10月实施联合瓣膜置换术351例，其中合并重度肺动脉高压49例，在进行了细致的撤机护理后，取得了显著的效果，现报道如下。