六亚甲基二乙酰胺体外对白血病细胞株的抗增殖作用及其机理研究

目的　研究抗肿瘤药物六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)在体外对人白血病细胞株U937,K5 6 2增殖和凋亡的作用 ,初步从细胞周期调控的角度探讨其作用机理。方法　应用MTT比色法和锥虫蓝拒染法观察HMBA对细胞增殖的抑制作用。用细胞周期素A/DNA双染色法检测不同浓度HMBA(1、2、4mmol/L)实验组细胞胞浆内细胞周期素A蛋白表达水平 ,并进行DNA含量分析。用异硫酸盐荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶双染色法 ,DNA片段变化和亚G1峰检测细胞凋亡。结果　 (1)HMBA能明显地抑制K5 6 2 ,U937细胞增殖 ,呈剂量依赖性 (K5 6 2细胞经HMBA干预后第六天 ,对照组、1、2、4mmol/L组MTT法的 5 95nm吸光度值分别为 1 0 3、0 81、0 5 8、0 36 )。 (2 )HMBA能剂量依赖性地下调胞浆内细胞周期素A表达水平 ,(K5 6 2细胞经HMBA干预后 ,对照组 ,1、2、4mmol/L组细胞周期素A阳性率分别为 34 4 %± 5 2 % ,16 1%± 2 5 % ,9 9%± 1 7% ,7 6 %± 2 0 % ) ,S期细胞比例与细胞周期素A的改变趋势是一致的。 (3)各实验组均未检测到有凋亡发生。结论　HMBA通过下调S G2期周期素A表达而打破了K5 6 2 ,U937细胞增殖的环节 ,是其发挥抑制白血病细胞增殖的机理之一     

六亚甲基二乙酰胺体外诱导HL-60 细胞分化的机制

目的探讨六亚甲基二乙酰胺(HMBA)体外诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60细胞分化的分子机制。方法HL-60细胞与HMBA体外培养3d；运用流式细胞仪测定细胞分化抗原CD11b、CD14及细胞内Cyclin D、Cyclin E、p27抗原；半定量PT-PCR分析c-myc、Rb基因 mRNA的表达。结果HL-60细胞经HMBA处理后显示CD11b表达显著增高；胞内抗原Cyclin E表达显著下降，Cyclin D、p27表达显著增高，并呈剂量依赖关系；RT-PCR反应显示c-myc mRNA表达显著下调，Rb mRNA表达显著增高。结论HMBA能体外诱导HL-60细胞分化，其机制可能是通过下调Cyclin E、上调p27；同时使得增殖分化相关基因c-myc mRNA表达下调、Rb mRNA表达上调而使细胞阻滞于G1期，抑制细胞增殖，诱导细胞分化。     

格列卫与六亚甲基二乙酰胺对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究格列卫和六亚甲基二乙酰胺(HMBA)对K562细胞增殖、凋亡、细胞周期及周期蛋白表达的影响．方法：MTT法观察细胞生长指数和细胞存活率,流式细胞仪、电镜检测细胞周期和凋亡,半定量RT-PCR检测bcr-abl基因的表达,Western blotting检测蛋白表达．结果：联合应用两种药物后细胞存活率明显下降,凋亡比例略下降,细胞周期阻滞于G0／G1期,cyclinD1、cyclinE、cyclinA、CDK4、c-myc蛋白表达下调．结论：两种药物应用后出现细胞存活率下降、细胞周期阻滞、周期蛋白表达下调、凋亡比例下降,联合作用对细胞的增殖抑制具有协同作用,进入凋亡途径细胞减少。     

六亚甲基二乙酰胺对粘液表皮样癌细胞增殖的影响

目的：探讨分化诱导剂六亚甲基二乙酰胺（HMBA）对人粘液表皮样癌细胞的增殖抑制作用。方法：用2mmol/L HMBA对培养的粘液表皮样癌细胞体外诱导后,分别采用MTT比色试验、光学显微镜、免疫组织化学、图像分析等方法对处理与未处理细胞的增殖活性进行检测。结果：MTT比色试验显示,HMBA处理的粘液表皮样癌细胞较未处理的细胞增殖活性明显降低。增殖细胞核抗原（PCNA）的表达HMBA处理组明显低于对照组（P＜0.01)。结论：HMBA能够明显抑制粘液表皮样癌细胞的增殖。     

N,N-二甲基乙酰胺合成路线与市场前景

随着我国石油化工,尤其是合成树脂,丙烯腈纤维和芳烃生产能力快速增长,N,N-二甲基乙酰胺需求有很大幅度增长,市场前景良好.本文评述了N,N-二甲基乙酰胺合成路线、市场需求和应用领域,倡导大力发展N,N-二甲基乙酰胺工业生产.     

癌细胞分化诱导剂多亚甲基二甲酰胺吡啶酮衍生物的合成

根据极性平面化合物的构效关系,以吡啶酮为基本母核设计合成了4个多亚甲基二甲酰胺吡啶酮衍生物,其结构由元素分析及红外光谱证实。经生物活性测试表明,中间链为4个亚甲基的化合物B在0.1mmol/L的低浓度下对HL-60细胞有明显的分化作用,分化率为60.2%,且细胞存活率较高。     

癌细胞分化诱导剂多亚甲基二甲酰胺噻唑啉衍生物的合成

根据极性平面化合物的构效关系,设计合成了4个多亚甲基二甲酰胺噻唑啉衍生物,其结构由元素分析、红外吸收光谱和核磁共振谱证实。     

聚六亚甲基胍消毒剂对海产养殖动物的毒性试验研究

目的测定聚六亚甲基胍消毒剂对海产养殖动物的毒性,探索其作为水产养殖环境消毒的安全性、实用性和可行性。方法用模拟现场试验法,以聚六亚甲基胍消毒剂对南美白对虾、大菱鲆、刺参、刺参苗和杂色鲍作急性毒性试验。结果48h半数致死浓度(LC50)南美白对虾为25.87μL/L,大菱鲆为179.91μL/L,刺参为6.67μL/L,刺参苗为4.68μL/L;聚六亚甲基胍消毒剂20μL/L以内,48h杂色鲍无死亡。结论聚六亚甲基胍消毒剂在使用浓度内,对南美白对虾、大菱鲆、刺参、杂色鲍的毒副作用不明显,应用于水产养殖环境消毒是安全的可行的。     

六亚甲基双乙酰胺与紫杉醇合用对人骨肉瘤OS-9901细胞的抑制作用

目的 :研究六亚甲基双乙酰胺 (HMBA)与紫杉醇合用对人骨肉瘤OS 990 1细胞的抑制作用。　方法 :用MTT法检测HMBA、紫杉醇单用或二者合用对体外培养的人骨肉瘤OS 990 1细胞增殖变化的影响。　结果 :在单用紫杉醇处理组中 ,不同药物浓度均未使增殖细胞抑制达到生长半数。在先用 1.0 μg/ml紫杉醇处理 6h后再加用 1mmol/LHMBA组中 ,抑制率由 18%增至 5 9%。 0 .1μg/ml紫杉醇先处理 2 4h组中 ,抑制率由 2 3 %增至 67%。HMBA明显增强了紫杉醇的抗癌作用。　结论 :HMBA与紫杉醇联合应用对骨肉瘤保肢术后的治疗可能有一定的价值。     

VP16对人类白血病细胞系K562细胞诱导分化作用的研究

目的 研究足叶乙甙（VP16）对K562细胞分化的诱导作用。方法 K562细胞在含0．4μg/mlVIP16的培养液中培养72h，观察K562细胞NBT还原能力和吞墨功能，以及细胞化学和超微结构的变化。结果 0．4μg/mlVP16可使K562细胞NBT还原能力和吞墨功能增强，细胞内过氧化物酶、糖原和α-萘酚酯酶含量增加，电镜下可见细胞体积变小，微绒毛和线粒体减少，核异染色质增加。结论 VP16诱导K562细胞向粒单细胞系分化。     

六神丸及其加味抗急性白血病的实验研究

本研究从血象、骨髓、病理、骨髓细胞增殖动力学的角度证明:六神丸具有明显的抑制和杀伤实验白血病小鼠(L7212)白血病细胞的作用(主要机理类似细胞毒剂),具有缓解、减轻白血病细胞对肝脾浸润,明显延长白血病小鼠生存期的作用;六神丸加味(加用清热解毒方、活血化淤方、益气养阴方、补气养血方、补肾方)和六神丸具有明显的协同作用。     

狼毒大戟对L_(615)白血病患鼠细胞增殖及肝肾中SOD,GSH-Px活性的恢复作用

灌胃给予Ｌ６１５白血病患鼠狼毒大戟水提物３．０ｇ／ｋｇ（相当生药）７ｄ，小鼠Ｔ淋巴白血病细胞增殖受到了较强地抑制（Ｐ＜０．０２），显著增加了由于Ｌ６１５白血病细胞攻击所致的肝中谷胱甘肽过氧化酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和超氧化物歧化酶活力（ＳＯＤ）下降（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。但狼毒大戟１．８ｇ／ｋｇ水提物对白血病细胞增殖的抑制作用较弱，对ＧＳＨ－Ｐｘ与ＳＯＤ活力的恢复无效，提示其抗Ｌ６１５白血病的有效剂量应大于１．８ｇ／ｋｇ。     

小鼠SRS白血病病毒感染的细胞株的建立及其生物学特性

用小鼠SRS腹水瘤的无细胞提取液感染体外培养的小鼠NIH/3T3细胞,建立可传递的、感染SRS白血病病毒(SRSV)的细胞株。感染的NIH/3T3细胞,电镜下可见A型和C型病毒颗粒,X-C检测和逆转录酶活性测定均为阳性。感染SRSV的细胞形态变圆,并出现集落性生长,给3只BALB/c(nu nu)裸鼠皮下接种,在15d内都产生纤维肉瘤。Southern blot分子杂交法证明,感染的NIH/3T3细胞内有游离的前病毒DNA存在,将其无细胞提取液注入SW-1近交系新生乳鼠,在191d内有52.38％诱发了淋巴细胞白血病和胸腺淋巴瘤。     

人参皂甙对K562红白血病细胞系的诱导分化作用

本文以K562人类红白血病细胞系为实验模型,研究了人参皂甙对该细胞系的诱导分化作用。结果表明人参皂甙不仅能诱导K562细胞生成血红蛋白,而且可使该细胞产生明显的形态学上的分化。1mg/ml浓度的人参皂甙对K562细胞还有明显的抑制作用。鉴于人参皂甙对于人类红白血病细胞兼有诱导分化和细胞毒作用,提示人参皂甙有可能应用于人类红白血病的治疗。     

一组抗人髓系细胞分化抗原单克隆抗体的制备和初步应用

用新鲜白血病细胞或细胞株免疫BALB/c小鼠,经细胞融合技术制备得6株能稳定分泌抗人髓系细胞分化抗原单克隆抗体(以下简称单抗)的杂交瘤株.经鉴定该组单抗各自所识别的特异性抗原分子量为46～150kd.这些抗原在粒单系细胞膜上均有程度不等的表达,6种单抗中有5种具有结合兔补体的能力,其对白血病细胞株补体依赖的特异性细胞毒为73%～94%.两种单抗(Zh_(820),Zh_(114))对正常CFU-GM生长有抑制作用外,余4种单抗无明显影响.6种单抗均与FAB M_1～M_5型急性髓系白血病细胞有不同程度的阳性反应.     

人重组白细胞介素－9对白血病细胞株TF－1的刺激效应

发现人红白血病细胞株ＴＦ－１可在人重组白细胞介素－９（ＩＬ－９）刺激下长期生长达５个月，ＩＬＬ－９可抑制ＴＦ－１细胞的ＤＮＡ片段化，抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体可抑制ＩＬ－９刺激的ＴＦ－１细胞增殖，从而提供了ＩＬ－９的一个新生物学效应。     

神经节苷脂GM3对国人单核样白血病细胞系J6—2细胞的促分化作用及促分化前后鞘糖脂、磷脂、蛋白激酶C活性的比较研究

神经节苷脂(Gls)广泛存在于各种脊椎动物细胞质膜的外侧面。它不仅是细胞膜的组分之一,而且与细胞的物质代谢、分化、增殖及肿瘤发生也密切相关。Gls GM_3对白血病细胞系促分化的研究还刚刚起步,对 Gls 促分化前后细胞     

P-170蛋白过度表达与髓细胞性白血病预后的关系

为探讨髓细胞性白血病（ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ）患者Ｐ－１７０ 蛋白过度表达与预后的关系,用免疫组化ＬＳＡＢ法（ｌａｂｅｌｌｅｄ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎ ａｓｓａｙ）检测６６ 例急性髓细胞性白血病（ａｃｕｔｅ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ,ＡＭＬ）及２０ 例慢性髓细胞性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ, ＣＭＬ）患者外周血单个核细胞的Ｐ－１７０ 蛋白表达。结果表明,初治组ＡＭＬ患者Ｐ－１７０ 表达率为２６．５％ （９／３４）;难治／复发组为６８．４％ （１３／１９）,比初治组明显增高（Ｐ＜ ０．００５）;完全缓解组为２３．１％ （３／１３）,与初治组差异无显著性。诱导化疗Ｐ－１７０＋ 者完全缓解（ＣＲ）率为２２．２％ （７／９）,Ｐ－１７０－ 者为８０％ （２０／２５）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．００３６）。ＣＭＬ慢性或加速期８ 例患者无１ 例Ｐ－１７０ 表达,急变期患者Ｐ－１７０ 表达率为５０％ （６／１２）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．０４２）。提示Ｐ－１７０ 蛋白过度表达是髓细胞性白血病化疗耐药和不良预后的标志     

姜黄素对卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的增敏作用及其机制的研究

目的:探讨姜黄素对卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP的增敏作用并探讨其机制.方法:采用MTT法检测姜黄素对COC1/DDP细胞的增敏作用;用流式细胞仪检测单用顺铂、单用姜黄素、顺铂与姜黄素合用作用于COC1/DDP细胞48 h后的细胞凋亡率;Western blot法检测单用顺铂及顺铂与姜黄素合用后各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3、Survivin的表达.结果:姜黄素浓度在15～35 μmol/L以内时以一定的剂量-效应关系对COC1/DDP有明显的增殖抑制作用.顺铂的浓度在1.25～5 mg/L时加入20 μmol/L姜黄素后耐药细胞生存率下降明显(P＜0.05),尤以2.5 mg/L顺铂和20 μmol/L姜黄素联合作用时,耐药细胞生存率下降最明显;COC1/DDP中顺铂与姜黄素联合用药与单独用顺铂及单用姜黄素相比,凋亡率明显增加(P＜0.05);顺铂与姜黄素联合用药与单独用顺铂相比Bcl-2、Survivin蛋白的表达明显降低(P＜0.05),Caspase-3蛋白的表达明显增高(P＜0.05).结论:姜黄素能够显著抑制COC1/DDP增殖,并能增强该细胞系对顺铂的敏感性,其机制可能与降低Bcl-2、Survivin蛋白的表达,增加Caspase-3蛋白的表达有关.