大鼠脑缺血预处理再灌注模型Bcl-2和Bax的表达

目的研究大鼠脑缺血预处理再灌注模型Bcl-2和Bax的表达。方法采用线栓法建立大鼠脑缺血预处理再灌注模型,缺血预处理后分别再灌注6h、12h、1d、2d、3d、5d和7d,免疫组化染色观察Bcl-2和Bax蛋白表达。结果Bcl-2阳性细胞数于缺血再灌注后第1d明显增加,第3d达到高峰,并维持到第7d,均明显高于对照组(均P<0·01)。不同缺血再灌注时间Bax阳性细胞数与对照组比较差异无显著性(均P>0·05)。结论上调Bcl-2表达可能是缺血预处理产生脑保护作用的机制之一。     

硫酸镁对大鼠脑弥漫性轴索损伤海马区Bcl-2和Bax蛋白表达影响的研究

目的研究脑弥漫性轴索损伤后神经细胞迟发性死亡的机制,探讨镁离子对大鼠脑弥漫性轴索损伤后神经元的保护作用。方法采用Marmarou方法制备大鼠重度脑弥漫性轴索损伤模型,分为创伤组(n=25)、生理盐水组(n=40)和硫酸镁组(n=40)。硫酸镁组伤后半小时给予25%硫酸镁(750μmol/kg),生理盐水组在相同时间给予等量的生理盐水腹腔注射,于伤后6小时、24小时、3天、5天及7天5个时相点处死。采用HE染色、免疫组织化学技术动态观察大鼠海马区的组织病理改变,Bcl-2和Bax蛋白的表达情况,以及使用硫酸镁干预后对上述表达的影响。结果①Bcl-2蛋白的表达:假手术组大鼠海马区仅见极少量Bcl-2阳性细胞,着色淡。在伤后6小时即有大量的Bcl-2阳性细胞,随时间渐增,24小时达到高峰,3～7天逐渐减少。②Bax蛋白的表达:在DAI后大鼠海马区有大量Bax阳性细胞,在伤后6小时就有所增加,24小时显著增加,3天达到高峰。Bcl-2/Bax值在损伤后随时间逐渐上升。③硫酸镁组中,海马区的Bax表达与对照组相比有所减少,而Bcl-2相应增加,Bcl-2/Bax比值也是上调的,均有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠脑弥漫性轴索损伤后,海马区神经元存在有迟发性细胞死亡即凋亡现象。Bax与Bcl-2参与细胞凋亡过程。硫酸镁可通过抑制Bax蛋白,上调Bcl-2蛋白,减少神经细胞凋亡,对促进神经细胞修复和功能重塑有益。     

高剂量灵芝孢子粉干预戊四氮致痫模型大鼠海马及皮质区神经细胞Bcl-2、Bax的表达

采用中药灵芝孢子粉低、中、高剂量（150, 300, 450 mg/kg）干预戊四氮致癫痫模型28 d,并设空白对照组。经免疫组织化学染色和TUNEL检测后发现,与模型相比,灵芝孢子粉高剂量组大鼠海马和皮质区神经细胞TUNEL阳性细胞数及Bax阳性细胞数均减少,而Bcl-2阳性表达细胞数增加。Morris水迷宫实验检测结果显示,灵芝孢子粉高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短,跨过原平台次数增加。说明高剂量灵芝孢子粉上调癫痫模型大鼠海马和皮质区神经细胞Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax免疫反应及癫痫所致的神经细胞凋亡,明显改善其学习记忆功能。     

Syn Bax 与 Bcl-2在帕金森病模型大鼠结肠中的表达及意义

目的：检测Syn、Bax、Bcl-2蛋白在帕金森病大鼠模型结肠中的表达及意义,探讨帕金森病消化系统功能紊乱的可能机制。方法采用羟多巴胺（6-hydroxydopamine ,6-O HDA ）损毁大鼠中枢黑质多巴胺能神经元,诱导制备实验性帕金森病大鼠模型。应用免疫组化法S-P法检测Syn、Bax、Bcl-2在帕金森病模型大鼠及正常对照组大鼠结肠组织中的表达情况。结果造模成功后,用免疫组化法S-P法,发现帕金森模型大鼠结肠中的Syn和 Bax表达水平较对照组增加,而Bcl-2表达水平较对照组减少。结论帕金森大鼠结肠组织中的Syn及Bax表达增加,Bcl-2表达减少,为研究帕金森患者肠道功能紊乱的机制提供线索。     

阿魏酸对戊四氮致癫痫大鼠海马组织中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨阿魏酸(Ferulic acid,FA)对戊四氮致癫痫大鼠海马组织中Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,近而讨论FA对戊四氮致癫痫鼠海马神经元的保护作用。方法将60只雄性健康的Wister大鼠随机分为生理盐水组、模型组(PTZ 35 mg/kg)和阿魏酸干预组(50 mg/kg),均采用腹腔注射的方式,连续注射28 d,停止给药1 d后处死实验大鼠、取材。应用免疫组织化学技术和Western blot方法来检测Bax和Bcl-2的表达情况,用来判断癫痫所导致的细胞凋亡情况。结果阿魏酸干预组大鼠的海马组织Bax的表达量明显低于模型组,差异有显著性(P0.01),Bcl-2的表达量高于模型组,差异有显著性(P0.01);生理盐水组大鼠的海马组织内Bax的表达量明显低于模型组,差异有显著性(P0.01),Bcl-2表达量明显高于模型组,差异有显著性(P0.01)。结论阿魏酸对戊四氮致癫痫大鼠海马神经元损伤具有保护作用,其保护作用机制可能与其抑制鼠脑细胞凋亡有关。     

雌激素对血管性痴呆大鼠认知功能、海马Bcl-2、Bax蛋白表达及神经元凋亡的影响

目的 探讨雌激素对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能、海马Bcl-2、Bax蛋白表达和神经元凋亡的影响.方法 60只雄性大鼠随机分为假手术组、VD组和雌激素组,每组20只.采用双侧颈总动脉结扎法制备VD大鼠模型;雌激素组腹腔注射17-β雌二醇(花生油溶解)200 μg/kg,同时假手术组和VD组腹腔注射等量的花生油,均为隔日1次,共30次.60 d后,Y-型迷宫试验检测大鼠学习记忆能力;HE染色观察大鼠海马神经元形态;免疫组化染色检测海马Bcl-2、Bax蛋白的表达,原位缺口末断标记(TUNEL)法检测神经元凋亡程度.结果 与假手术组相比,VD组及雌激素组认知能力明显下降, 海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达增加,TUNEL 阳性细胞数明显增多(均P<0.001);与VD组比较,雌激素组认知能力改善,海马CA1区Bcl-2蛋白表达明显增加,Bax蛋白的表达明显减少,TUNEL 阳性细胞明显减少 (均P<0.001).结论 17-β雌二醇可调节Bcl-2、Bax蛋白表达而抑制神经元凋亡,有助于改善VD大鼠的认知能力.     

丙戊酸钠对戊四氮致癎大鼠海马Bax和Bcl-2表达的影响

目的探讨丙戊酸钠(VAP)对戊四氮(PTZ)致癎大鼠海马Bax和Bcl-2表达的影响.方法将24只成年Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、PTZ组和VAP组,PTZ组和VAP组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTZ 35 mg/(kg·d),直至达到点燃标准.点燃后,VAP组大鼠经腹腔注入VAP 15 mg/(kg·d),PTZ组大鼠经腹腔注入生理盐水,30 min后,再腹腔注射PTZ诱发癫癎发作.应用免疫组化法检测大鼠海马神经元Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果大鼠海马神经元Bax阳性细胞数和光密度,PTZ组均明显高于VAP组和NC组(均P<0.01),VAP组明显高于NC组(P<0.05);大鼠海马神经元Bcl-2阳性细胞数和光密度,PTZ组明显高于NC组(P<0.05),VAP组均明显高于PTZ组和NC组(均P<0.01).结论 VAP可以增强癫癎大鼠海马神经元Bcl-2的表达和降低Bax的表达,有对抗癫癎发作导致细胞凋亡的作用.     

AAV介导AB单链抗体改善阿尔茨海默病模型小鼠行为受损

Intracranial delivery of human Fc-deleted antibody specific to amyloid-βpeptide(Aβ,anti-Aβ single-chain Fv,scFv)via adeno-associated virus(AAV)inhibits amyloid deposition in transgenic mice.However,the effects of AAV-mediated Fc-deleted antibody on animal behavior remain unclear.In this study,the anti-AβscFv antibody gene,isolated from phage display,was fused to the 5’end of the scFv antibody gene for antibody secretion by 2 rounds of polymerase chain reaction amplification.The fused antibody cDNA was cloned into a pSNAV2 plasmid under the control of the cytomegalovirus promoter.The sequence verified expression vector pSNAV2/scFv was transferred to BHK-21 cells,and stable transfected BHK-21/scFv cells were established by G418 selection and infected with the recombinant herpes simplex virus rHSV/repcap for AAV production.Recombinant AAV was injected into the left quadriceps femoris of PDAPP transgenic mice.After 3 months,Morris water-maze results confirmed significantly improved cognitive function in a mouse model of Alzheimer’s disease.     

大鼠局灶性脑缺血Bcl-2和Bax的表达与细胞凋亡

目的:研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后凋亡相关基因Bcl-2和Bax在缺血皮层表达的变化及其与神经元凋亡的关系。方法:线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,免疫组化法观察Bcl-2和Bax的表达变化,TUNEL法观察神经元凋亡的情况。结果:再灌注2h后皮层神经元Bcl-2表达开始明显上调,6h为高峰,之后开始下降。再灌注早期 Bax在皮层神经元的表达即明显增强,24～48h达高峰。Bcl-2／Bax的比率在再灌注开始时升高,6h达高峰,随后开始下降。TUNEL阳性细胞主要分布在缺血中心的边缘,再灌注48h之内,随时间的延长而不断增加。结论:Bcl-2／Bax的比率改变与缺血再灌注后的神经元存亡相关。     

阿尔茨海默病大鼠海马额叶Bcl-2蛋白表达的改变

目的研究珂尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆及Bcl-2蛋白表达的改变。方法β淀粉样蛋白(βAP)注入大鼠迈内特基底核(NBM)建立AD型．Y迷宫测定学习记忆能力,流式细胞仪检测Bcl-2蛋白含量。治疗组腹腔注射尼莫的平2周。结果模型组大鼠学习记忆能力下降,海马和额叶Bcl-2蛋白含量增高;治疗组Bcl-2水平下调,学习记忆有所改善,但与对照组比仍有差异。结论βAP注入NBM引起大鼠学习记忆损害,Bcl-2蛋白的表达增加。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马Bcl-2、Bax蛋白的表达

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白在海马表达的变化.方法 线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组化染色检测Bcl-2、Bax蛋白表达,应用TUNEL法检测海马区细胞凋亡.结果 缺血再灌注2h后海马神经元Bcl-2、Bax蛋白开始表达,Bcl-2蛋白12h达高峰,Bax蛋白12h～24h达高峰,之后开始下降.再灌注2h后海马凋亡细胞开始表达,随着再灌注时间的延长,其表达不断增加.Bcl-2/ Bax的比率在再灌注开始时升高,再灌注12h达高峰,随后开始下降.结论 凋亡是脑缺血再灌注损伤的重要形式之一,Bcl-2/ Bax的改变与缺血再灌注后海马的神经元存亡有关,缺血再灌注可导致海马神经元凋亡.     

反义c-fos对海马缺血神经元Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

脑缺血再灌注是一个在时间和空间上多环节、多变量的病理生理过程。这些过程的发生都以细胞内损伤性信号传导过程和基因调控过程为基础。近年来的研究表明，c-fos的表达及调控变化与脑缺血再灌注后密切相关。脑缺血后数小时，c-fos的表达即可达高峰。目前对应激而产生的FOS蛋白是否有利于受损神经元的存活尚有争论。Bcl-2和Bax参与神经元凋亡的调节。Bax可能通过与Bcl-2相关蛋白形成异源二聚体，使其失去抑制细胞凋亡的活性；另一方面Pax可能也独立地参与促凋亡的调控。因此，Bax与Bcl-2蛋白质分子的比率对于细胞是否进入凋亡状态极为重要。     

亚低温治疗对大鼠脑梗死后Bax和Bcl-2表达的影响

目的探讨亚低温对大鼠急性脑梗死Bax、Bcl-2表达的影响。方法清洁级（SPF）雄性健康SD大鼠,采用线栓法建立局灶性脑梗死模型,分别于缺血3、6、12 h给予亚低温治疗,缺血24 h取材观察。实验分常温组（大鼠10只）、亚低温3、6、12 h组（每组大鼠各10只）,假手术组（大鼠6只）,用TTC染色测定脑梗死体积,用免疫组化的方法检测Bax、Bcl-2的表达水平。结果与常温组比较,亚低温组脑梗死体积明显减少（P〈0.01）、Bcl-2表达上调、Bax表达下调（P〈0.05）。亚低温组脑梗死体积3 h〈6 h〈12 h组,Bcl-2表达3 h〉6 h〉12 h、Bax表达3 h〈6 h〈12 h（P〈0.05）。结论亚低温治疗可能通过抑制Bax和Bcl-2表达,从而抑制神经元凋亡、降低脑梗死体积,脑缺血后越早期给予亚低温治疗效果越好。     

大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达

目的探讨大鼠脑缺血再灌注后caspase-3、Bcl-2和Bax在脑皮质神经元中的表达。方法将动物随机分为假手术组及缺血组,参照zea longa线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,各组大鼠分别在左侧MCAO2h再灌注不同时间点断头取脑,脑皮质神经元中caspase-3、Bcl-2和Bax的表达通过免疫组化法来测定。结果缺血组大鼠脑皮质caspase-3的表达较假手术组显著增强(P<0.01),缺血组大鼠脑皮质Bcl-2的表达较假手术组显著增强(P<0.01),缺血组大鼠脑皮质Bax的表达较假手术组显著增强(P<0.01)。结论短暂性脑缺血再灌注上调脑皮质神经元中caspase-3和Bax的表达促细胞凋亡,上调脑皮质神经元中Bcl-2的表达抗细胞凋亡。     

Bcl-2和Bax蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的　研究 Ｂｃｌ２ 和 Ｂａｘ 蛋白与人脑星形细胞瘤发生的关系。方法　收集人脑星形细胞瘤标本５８ 例, 行 Ｓ Ｐ 染色。结果　 Ｂｃｌ２ 在星形细胞瘤中阳性表达率为５６９ ％ , 且表达率随肿瘤恶性程度的增加而增高。 Ｂａｘ 的表达率为５５２ ％ , 显著高于对照组。 Ｂｃｌ２ 表达阳性的肿瘤中 Ｂａｘ 蛋白表达率（６６７ ％ ） 显著高于 Ｂｃｌ２ 表达阴性的肿瘤（４００ ％ ） 。结论　 Ｂｃｌ２ 和 Ｂａｘ 蛋白的表达与星形细胞瘤的发生和发展有较密切的关系, 且它们在星形细胞瘤的发生中可能存在相互作用的关系。     

Protective effects of curcumin in APPswe transfected SH-SY5Y cells

The APPswe plasmid was transfected into the neuroblastoma cell line SH-SY5Y to establish a cell model of Alzheimer’s disease.Graded concentration and time course experiments demonstrate that curcumin significantly upregulates phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K),Akt,nuclear factor E2-related factor-2(Nrf2),heme oxygenase 1 and ferritin expression,and that it significantly downregulates heme oxygenase 2,reactive oxygen species and amyloid-beta 40/42 expression.These effects of curcumin on PI3K,Akt and Nrf2 were blocked by LY294002(PI3k inhibitor) and NF-E2-related factor-2 siRNA.The results indicate that the cytoprotection conferred by curcumin on APPswe transfected SH-SY5Y cells is mediated by its ability to regulate the balance between heme oxygenase 1 and 2 via the PI3K/Akt/Nrf2 intracellular signaling pathway.     

实验性自身免疫性灰质病大鼠脊髓病理学、Bcl-2和Bax蛋白表达的研究

目的:观察实验性自身免疫性灰质病大鼠脊髓的病理改变及Bcl-2和Bax蛋白的表达。方法:利用猪脊髓前角匀浆作为抗原,免疫Lewis大鼠,观察大鼠行为学、肌电图、脊髓前角运动神经元的组织学改变,应用免疫组化方法,研究免疫介导的神经元损伤过程中Bcl-2和Bax表达的变化。结果:所有被免疫的大鼠均未出现肢体无力、明显的肌肉萎缩,肌电图表现有失神经改变,组织学证实脊髓运动神经元有不同程度的变性丢失,有卫星、噬节及墓穴现象形成。在实验性自身免疫性灰质病(experi mental autoi mmune gray matter disease EAGMD)大鼠的脊髓前角运动神经元中抗凋亡基因Bal-2的表达减少;促凋亡基因Bax的表达增加。结论:免疫可导致Lewis大鼠脊髓前角运动神经元的变性丢失,与细胞凋亡密切相关的基因蛋白Bcl-2和Bax参与了EAGMD的发病过程。     

女贞子对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡及Bcl-2、Bax的表达影响

目的 通过观察女贞子对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响,探讨其对脊髓损伤的保护作用.方法 选用90只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,制成脊髓损伤动物模型.治疗组取女贞子液3.0 g/(kg·d)腹腔注射,假手术组与模型组取等量生理盐水腹腔注射,于各时间点制成脊髓切片,行苏木素一伊红(HE)...     

缺氧-复氧对大鼠海马培养神经元Bcl-2、Bax表达和神经元凋亡的影响

目的 观察缺氧-复氧对体外培养海马神经元Bcl-2和Bax表达和神经元凋亡的影响。方法 取培养12d的海马神经元，置于恒温(36℃)密闭容器内，连续充以无氧气体[90％(体积分数)N2、10％(体积分数)CO2]，在缺氧条件下继续培养4h后，再于常氧培养箱内复氧培养24h和72h。于不同时间观察神经元存活数，并分别用抗Bcl-2和Bax抗血清进行免疫组织化学染色，观察缺氧-复氧后大鼠海马培养神经元Bcl-2和Bax表达。并用原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞术分别检测缺氧-复氧对体外培养海马神经元凋亡的影响。结果 缺氧-复氧后24～72h,海马神经元对Bcl-2的表达逐渐减弱，对Bax的表达逐渐增强，对Bax／Bcl-2比值逐渐增大，凋亡神经元百分率逐渐增多。结论 缺氧-复氧后24～72h神经元凋亡的发生与神经元Bcl-2表达逐渐减弱，Bax表达逐渐增强，Bax／Bcl-2比值逐渐增大有关。