卵巢切除股骨骨折大鼠骨愈合中降钙素的作用

背景：降钙素可活化腺苷酸环化酶蛋白激酶A通路及磷脂酶C通路,抑制破骨细胞的活性,可能治疗骨质疏松性骨折。 目的：观察降钙素对去卵巢大鼠股骨骨折愈合的作用。 方法：构建双侧卵巢切除骨质疏松右股骨骨折SD大鼠模型,然后分别皮下注射生理盐水和降钙素(16 IU/kg),隔日1次,于骨折后3周和6周测量右股骨行骨密度,苏木精-伊红及抗酒石酸酸性磷酸酶染色,骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子免疫组化染色。 结果与结论：骨折后给予降钙素治疗的大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性细胞积分吸光度值较生理盐水治疗的大鼠显著减少(P < 0.05)。骨折后3周,两组骨折线均较清晰,骨痂体积无明显差别,骨折愈合以软骨内化骨过程为主,骨密度无显著性差异(P > 0.05)。骨折后6周,两组骨折线较模糊,骨痂体积无差别,骨小梁排列较有序,用药组股骨骨密度较对照组升高(P < 0.05)。两组在骨折后3周和6周的骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子差异无显著性意义(P > 0.05)。证实降钙素可以抑制去卵巢大鼠骨折部位破骨细胞活性,但无明显促进大鼠股骨骨折愈合的作用。     

仙灵骨葆对骨质疏松性骨折骨痂血管形成的影响

背景：骨质疏松对骨折愈合早期的影响尚存争议,仙灵骨葆对骨质疏松性骨折愈合的影响及其机制尚有待深入研究。 目的：观察骨质疏松对大鼠股骨干骨折愈合的影响,以及仙灵骨葆对骨质疏松性骨折愈合的作用。 方法：将50只雌性12周龄Sprague-Dawley大鼠随机分成5组：假手术组、骨折组、去卵巢组、去卵巢+骨折组及治疗组,后3组切除大鼠双侧卵巢制备去卵巢模型,骨折模型于去卵巢后4周制备,为股骨干中段横行骨折。治疗组在去卵巢及骨折基础上灌胃给予仙灵骨葆250 mg/(kg•d)。给药3周,取去卵巢+骨折组、骨折组和治疗组大鼠骨折侧标本行X射线摄像仪摄片后,测量其骨密度,苏木精-伊红染色观察骨痂组织的病理学改变并计数血管,免疫组织化学染色检测骨痂组织骨形态发生蛋白2的表达。 结果与结论：去卵巢处理后大鼠的骨密度、计算机X射线摄像仪摄片评分显著降低(P < 0.05),仙灵骨葆可在一定程度上提高去卵巢后骨折大鼠的骨密度及X射线摄像仪摄片评分,但差异无显著性意义(P > 0.05);仙灵骨葆可提高去卵巢后骨折大鼠骨痂组织的血管数量(P < 0.05),但对骨形态发生蛋白2的表达无影响。提示,去卵巢后大鼠骨折早期愈合过程延迟,仙灵骨葆可促进骨质疏松大鼠骨折愈合早期血管的形成。     

骨质疏松性骨折愈合中骨改建的动态参数及骨密度变化

背景：当骨质疏松骨强度下降时，遭受轻微创伤或其他各种风险因素均易发生骨折。 目的：观察骨质疏松性骨折愈合过程中骨小梁组织学变化，骨密度及骨矿化沉积率的改变。 方法：SD大鼠随机分为骨质疏松组与对照组，骨质疏松组大鼠切除双侧卵巢，术后3个月，建立骨折模型。骨折后4，8，12，16 周，荧光显微镜下观察骨改建的动态参数，双能X线骨密度仪下测定骨痂组织的骨密度；骨折后1，2，4，6，8，12，16 周，应用自动图像系统测量骨组织形态。 结果与结论：骨质疏松组大鼠成熟小梁骨占骨痂面积比对照组小，且小梁骨厚度变薄、小梁骨间距较宽，骨质疏松组骨小梁表面荧光标记百分比及骨痂组织骨密度低于对照组；而骨矿化沉积率高于后者对照组。说明在骨质疏松性骨折愈合过程中，骨痂组织的组织学的异常改变导致骨折愈合质量的降低。     

骨密度与骨折合并颅脑损伤患者骨折愈合的评价

背景：颅脑损伤患者下肢骨折愈合过程中,骨折周围新生骨形成加速现象在临床上较为常见。这种快速形成的骨痂或异位骨化是否是颅脑损伤合并下肢骨折患者的常见并发症,至今仍有争论。 目的：利用骨密度检测来评估创伤性脑损伤对股骨干骨折愈合的影响。 方法：纳入创伤性脑损伤合并股骨干骨折患者和单纯股骨干骨折患者各25例,以切开复位后钢板螺钉内固定。术后第6,12周行X射线测量骨痂体积。术后1,3,5周利用双能X射线骨密度测定仪测定两组患者骨折区骨密度值。 结果与结论：单纯股骨干骨折患者术后第12周较第6周骨痂体积明显增加。合并颅脑损伤患者术后第6,12周骨痂体积均有明显增加,且大于单纯骨折组骨痂体积。在第1,3,5周时骨折区骨密度值逐渐增大,并且高于同时间点单纯骨折组骨折区骨密度值。说明创伤性脑损伤可增加股骨干骨折愈合时的骨痂体积,提高骨折区骨密度值,缩短骨折愈合时间。     

不同质量浓度阿仑膦酸钠干预牙槽骨吸收模型兔牙周组织破骨细胞分化因子和骨保护素的表达

背景：有研究表明阿仑膦酸钠能够防治骨质疏松症,但其应用到口腔牙周组织干预牙槽骨吸收较为罕见。 目的：建立兔牙槽骨吸收模型,观察不同质量浓度阿仑膦酸钠干预下炎症牙周组织破骨细胞分化因子和骨保护素的表达。 方法：将大耳白兔建立牙槽骨吸收模型,建模成功后随机分成5组,胶原+0.5 g/L阿仑膦酸钠组、胶原+1 g/L阿仑膦酸钠组、胶原+2 g/L阿仑膦酸钠组、胶原组、对照组。各组分别于用药后2和4周用免疫组织化学方法检测破骨细胞分化因子和骨保护素表达情况,并进行药效评价。 结果与结论：破骨细胞分化因子和骨保护素阳性细胞在5组成骨细胞、破骨细胞、成纤维细胞中均有表达,胞浆呈棕色或棕褐色颗粒状着色。对照组和胶原组牙槽嵴吸收区破骨细胞分化因子和骨保护素比率明显大于其他3组(P < 0.05),胶原+1 g/L阿仑膦酸钠组在用药后2和4周均高于胶原+0.5 g/L阿仑膦酸钠组(P < 0.05)。结果证实,阿仑膦酸钠能够降低牙槽骨破骨细胞分化因子和骨保护素的比率,应用含1 g/L 阿仑膦酸钠胶原海绵载体更适合抑制牙槽骨吸收。     

骨质疏松性骨折愈合过程中Ⅰ，Ⅱ型胶原蛋白表达与其力学性能*☆

背景：研究显示骨质疏松症是涉及Ⅰ型胶原数量及理化性质改变的一种复杂病理生理过程，但有关骨质疏松与Ⅰ，Ⅱ型胶原间的相关性，至今少有报道。 目的：观察骨质疏松性骨折愈合中Ⅰ，Ⅱ型胶原蛋白表达的变化规律，及其与生物力学性能的相关性。 方法：将大鼠随机分为骨质疏松性骨折组与一般性骨折组。骨质疏松性骨折组切除卵巢建立骨质疏松模型。分别于骨折损伤后1，2，4，5，8，12 周采用Western blot 方法检测骨痂中Ⅰ，Ⅱ型胶原的蛋白表达，于损伤后4，8，12，16 周进行骨密度测定与生物力学性能测试。 结果与结论：骨质疏松性骨折组Ⅰ，Ⅱ型胶原的表达及骨密度值在损伤后各时间点与一般性骨折组相比均差异有显著性意义(P < 0.05)，且随着损伤时间的延长，下降趋势更明显。骨质疏松性骨折组中Ⅰ，Ⅱ型胶原与最大转矩、弹性模量、最大扭转角均有相关性(P < 0.05)。结果显示，骨质疏松性骨折愈合过程中Ⅰ，Ⅱ型胶原的分泌异常改变导致了其力学强度乃至骨折愈合质量的降低，影响骨折愈合，是再次骨折发生的主要原因。     

血管内皮生长因子在卵巢切除大鼠骨折愈合骨痂中的表达

背景：血管内皮生长因子在骨折愈合过程中起着重要作用,研究发现去卵巢大鼠影响骨折愈合,但其作用机制尚未明确。 目的：观察去卵巢大鼠股骨骨折愈合中骨痂组织学变化以及血管内皮生长因子的表达与分布,探讨骨质疏松对大鼠骨折修复的影响与血管内皮生长因子对其的作用。 方法：取12周龄雌性Sprague-Dawley 大鼠20只,随机分成假手术组和去卵巢组。制造股骨骨折模型,于术后4周处死,各组截取大鼠右侧股骨标本后行计算机X射线摄像仪摄片观察骨折愈合情况,并应用双能X射线骨密度仪测量右股骨骨密度,苏木精-伊红染色观察骨痂生长情况及其组织形态,免疫组织化学染色测定血管内皮生长因子表达。 结果与结论：骨折后4周,去卵巢组形成的骨痂中含有的软骨骨痂比例高与假手术组。去卵巢组中表达血管内皮生长因子的成骨细胞数目少于假手术组。提示骨质疏松大鼠骨折愈合形成的骨痂质量较差,血管内皮生长因子在成骨细胞中的表达减少是骨质疏松骨折愈合质量下降的可能因素之一。 关键词：骨质疏松;骨折愈合;血管内皮生长因子;雌激素;组织构建;组织工程     

卵巢切除骨质疏松小鼠骨折愈合不同时期骨微结构及力学性能变化★

背景：骨组织力学性能除受其自身的材料力学性能影响外，与骨量及结构形态等密切相关。骨质疏松的发病机制、微结构和力学性能还不是很清楚。 目的：检测骨质疏松性骨折愈合不同时期骨密度、骨微结构与力学性能的变化，以期能为临床治疗提供科学指导与理论依据。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005年在上海第二医科大学实验室完成。 材料：选择6周龄雌性C57 BL/6J小鼠, 体质量25 g，共40只。 方法：将小鼠分别行双侧卵巢切除的骨质疏松组与行假手术的对照组，每组20只，3周后所有小鼠行右侧股骨横断骨折建立骨质疏松性骨折模型，采用髓内钉固定，并与对照侧比较。 主要观察指标：于术后1，2，4和8周采用X射线检测骨折愈合情况,采用双能X射线检测骨痂组织骨密度；Micro-CT测定骨痂形成和矿化；3点弯曲法测定力学性能。 结果：①卵巢切除组骨痂骨密度明显低于对照组。②与对照组比较，卵巢切除组骨痂体积在骨折后1，2周明显减少，骨折后4，8周没明显改变。卵巢切除组在骨折后2周有明显高的矿化比例，在1，4和8周没有明显改变。③骨折后2，8周，对照组小鼠股骨最后负载和最后压力大于卵巢切除组。 结论：骨质疏松性骨折修复过程中，显微结构、骨密度等随愈合时间而不断改变，并最终影响着骨痂组织的力学性能。     

全身与桡骨骨折局部应用伊班膦酸钠对骨折愈合影响的比较

背景：伊班膦酸钠是第3代二膦酸盐的典型代表之一,具有很高的抗骨质吸收作用。 目的：验证骨折局部及全身应用伊班膦酸钠对兔骨折愈合的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-10在东南大学医学院中心实验室完成。 材料：健康6~8月龄新西兰兔36只,体质量2.1~2.6 kg。伊班膦酸钠注射液(1 mL∶1 mg)由河北医科大学生物医学工程中心提供。 方法：新西兰兔36只,随机分成3组,对照组、全身组和局部组,每组12只,建立兔桡骨骨折标准模型。建模后对照组不予处理,全身组和局部组分别通过静脉和局部途径予以伊班膦酸钠0.1 mg。于建模后2,4,6,8周通过X射线观察骨折愈合情况,进行评分;于骨折模型建立后的第1,2,3,4周通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP-5b);于建模后2,4,6,8周分批处死兔,摘取骨痂标本,进行病理学观察和通过免疫组织化学检测Ⅰ型胶原的表达。 主要观察指标：①骨折愈合评分。②抗酒石酸酸性磷酸酶变化。③骨痂成分面积百分比。④破骨细胞指数。⑤免疫组织化学积分吸光度。 结果：36只兔全部进入分析。第2周,全身组和局部组X射线评分较对照组高(P < 0.05),第4,6周,局部组较对照组和全身组评分评分高(P < 0.05)。各周局部组抗酒石酸酸性磷酸酶水平较对照组和全身组低(P < 0.05)。4周,局部组骨小梁面积百分比高于对照组(P < 0.05);6周高于对照组和全身组(P < 0.05)。各周局部组破骨细胞指数均低于对照组和全身组(P < 0.05)。2,4,6周,局部组Ⅰ型胶原表达均高于全身组和对照组(P < 0.05)。 结论：局部应用伊班膦酸钠能够促进兔骨折愈合,相同剂量下(0.1 mg)比全身应用效用更显著。     

糖尿病骨折大鼠骨痂组织中成骨细胞增殖和骨钙素表达与骨形态发生蛋白2干预的关系☆

背景：有研究表明，糖尿病患者骨折愈合过程中局部骨形态发生蛋白2明显降低，成骨细胞增殖能力下降，骨折延迟愈合，或者不愈合。 目的：观察骨形态发生蛋白2治疗糖尿病大鼠骨折愈合过程中骨痂组织成骨细胞增殖和骨钙素的表达，分析骨形成蛋白在糖尿病大鼠骨折愈合过程中的作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2008-09/12在昆明医学院动物实验中心完成。 材料：SD雄性大鼠30只，20只腹腔内注射链脲佐菌素破坏胰岛细胞诱导为糖尿病大鼠后，随机均分为骨形态发生蛋白2组、模型对照组，另10只为正常对照大鼠，腹腔内注射等容量生理盐水。 方法：3组大鼠行右胫骨上段骨折建立大鼠胫骨骨折模型。骨形态发生蛋白2组用10 μg/kg骨形态发生蛋白2治疗，模型对照组及正常对照组给予等渗量生理盐水。 主要观察指标：伤后第1，2，4，6周X射线片观察骨折愈合情况，光镜下观察骨痂内成骨细胞数量，放射免疫法测定血清骨钙素表达。 结果：骨形态发生蛋白2、正常对照组X射线片显示骨痂生成量多，骨折愈合程度明显优于模型对照组(P < 0.01)。骨形态发生蛋白2组成骨细胞数量明显多于模型对照组，略低于正常对照组。各组血清骨钙素均呈上升趋势，在第2周达到峰值，第4周下降，至第6周进一步下降。模型对照组骨钙素升高幅度明显低于正常对照组(P < 0.01)，并且低于骨形态发生蛋白2组。骨形态发生蛋白2组、正常对照组的骨钙素差异无显著性意义。 结论：糖尿病大鼠骨折愈合过程中较正常大鼠，骨钙素水平降低，成骨细胞增殖下降，采用骨形态发生蛋白2治疗可提高骨钙素水平，促进成骨细胞增殖，促进骨折愈合。     

大鼠股骨开放截骨模型与闭合骨折模型制作的比较

背景：骨折动物模型无疑是研究骨折愈合的基石，其中开放截骨模型与闭合骨折模型是较成熟的两种长骨干骨折模型。就作者所查文献，未见关于大鼠两种模型比较研究的报道。 目的：比较大鼠股骨开放截骨模型与闭合骨折模型的制作过程，并通过X射线摄片比较二者的骨折愈合情况。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-01/05在苏州大学附属第二医院骨科实验室完成。 材料：SPF级雄性SD大鼠40只，体质量(220±30) g，随机分为开放截骨模型组与闭合骨折模型组，每组20只。电动摆锯；自行改良设计的闭合骨折模型打击器。 方法：开放组行开放截骨术造成股骨中段横行骨折，逆行克氏针固定；闭合组行逆行克氏针固后，使用造模支架致股骨中段闭合骨折。 主要观察指标：比较两组的平均造模时间，造模成功率及术后2，3，4，8周骨折愈合的X射线情况。 结果：开放截骨模型每只造模成功率90%,平均造摸时间为17 min，骨折畸形愈合及不愈合率40%；闭合骨折模型每只造模成功率85%，平均造模时间12 min，未见畸形愈合及不愈合。术后2，3，4周X射线评分开放组均低于闭合组(P < 0.05)，8周时开放组X射线评分仍较闭合组低，但差异无显著性意义(P > 0.05)。 结论：开放截骨模型造模时间长，骨折畸形愈合不愈合发生率高，近中期骨折愈合明显滞后，不适于近中期骨折愈合的研究。     

外固定方法制作的大鼠股骨骨折模型

背景：外固定器抗旋转能力强,不影响局部血运,不固定关节,动物可以自由活动,适合用于骨折模型的制作。 目的：创立一种新型的股骨骨折动物模型。 方法：SD大鼠24只于大鼠右侧股骨截骨,以自行研究设计的微型单边外固定器为固定装置,制成骨折模型,术后通过大体观察、影像学观察及组织学方法观察股骨对位情况和截骨端的愈合情况。 结果与结论：术后外固定器保持正常位置,未见螺纹钉拔出,针孔松动,骨折等现象,大鼠股骨保持正常生理位置。固定后第2周骨断端已经有模糊的原始骨痂形成。第4周时已有连续性骨痂通过,但骨断端仍较清晰。第8周时,骨断端已经愈合,髓腔再通,出现骨性愈合。证实微型单边外固定器可以为股骨骨折模型大鼠提供可靠的固定,并且右侧股骨截骨骨折模型大鼠制作合理。     

糖皮质激素作用下股骨远端松质骨超微结构与阿伦磷酸钠的干预★

背景：骨超微结构的变化是骨质疏松发生的重要原因，是骨脆性的决定因素，因此骨超微结构的改变可以更直接反映骨质疏松情况。 目的：观察阿伦磷酸钠对糖皮质激素作用下大鼠股骨远端松质骨超微结构的影响。 方法：选取3.5月龄SPF级雌性SD大鼠30只，随机分为3组，对照组给等量生理盐水皮下注射、等量生理盐水灌胃；模型组给予皮下注射甲泼尼龙3.5 mg/(kg•d)，诱导糖皮质激素性骨质疏松模型；干预组在造模同时给予阿伦磷酸钠 1.2 mg/kg灌胃。实验期9周后，扫描电镜观察大鼠股骨远端松质骨超微结构改变。 结果与结论：模型组大鼠骨小梁数目较其他各组减少且骨小梁变细、易断裂，微损伤增多，立体网状结构破坏；干预组大鼠较模型组大鼠骨小梁数量增加，骨吸收面减少，骨小梁表面胶原纤维排列规律紧凑、走向清晰。提示阿伦磷酸钠能有效改善糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨远端松质骨超微结构，具有对抗糖皮质激素性骨质疏松的作用。 关键词：糖皮质激素；骨质疏松；骨超微结构；扫描电镜；阿伦磷酸钠     

激素性股骨头坏死早期细胞凋亡相关基因表达及阿仑磷酸钠的干预

背景：近年研究发现激素性股骨头坏死病例中凋亡的骨细胞增多，因此认为激素性股骨头坏死是骨细胞凋亡所致，而并非缺血性坏死。 目的：观察大鼠激素性股骨头坏死早期bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific protease 3，caspase-3)的表达，以及阿仑磷酸钠的干预效果。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006-03/2007-02在吉林大学基础医学院病理实验室完成。 材料：健康Wister大鼠100只，随机分为正常对照组、激素模型组、藻酸双酯钠组、阿仑磷酸钠组、联合用药组，20只/组。藻酸双酯钠片为吉林东丰制药厂产品，阿仑磷酸钠为杭州默沙东制药有限公司产品。 方法：除正常对照组外，其余4组大鼠均给予醋酸泼尼松龙臀肌注射建立激素性股骨头坏死模型。藻酸双酯钠组、阿仑磷酸钠组分别灌服对应药物，联合用药组灌服藻酸双酯钠+阿仑磷酸钠。各组肌注用药1次/周，灌服药1次/d，实验持续6周。所有大鼠均强迫间断站立，4 h/d。 主要观察指标：光镜观察股骨头病理变化。S-P免疫组织化学染色法检测股骨头组织bcl-2、caspase-3的表达。 结果：给药第4周与正常对照组比较，激素模型组股骨头坏死现象明显，骨小梁变细甚至断裂，空骨陷窝数量明显增多(t=2.629，P < 0.01)；藻酸双酯钠组骨小梁和空骨陷窝数量介于前2组之间(t=1.713，P < 0.01)；阿仑磷酸钠组、联合用药组骨小梁和空骨陷窝数量接近正常对照组(t=1.462，t=1.657，P > 0.05)。与激素模型组比较，藻酸双酯钠组、阿仑磷酸钠组、联合用药组股骨头组织bcl-2阳性细胞率均明显升高(t=2.146，P < 0.05；t=2.815，P < 0.01；t=2.947，P < 0.01)，caspase-3阳性细胞率均明显降低(t=2.97，P < 0.01；t=2.462，P < 0.01；t=1.854，P < 0.05)，其中阿仑磷酸钠组及联合用药组升高尤为明显(t=2.503，t=1.959，P < 0.05)。 结论：大剂量激素可能通过抑制bcl-2表达和促进caspase-3表达引起股骨头坏死。阿仑磷酸钠可能通过与其相反的途径来防止骨细胞凋亡，从而预防早期激素性股骨头坏死。     

水疗与电刺激联合防治大鼠失用性骨质疏松

背景：电刺激和水疗均对失用性骨质疏松有治疗作用,二者联合应用未见报道。 目的：观察水疗与电刺激联合作用对失用性骨质疏松模型大鼠生物力学的影响。 方法：采用切断坐骨神经和股神经的方法制备SD大鼠失用性骨质疏松模型。伤口愈合后采用电刺激、水疗及二者联合干预8周,观察大鼠体质量及股骨生物力学指标的变化。 结果与结论：去神经后失用性骨质疏松大鼠体质量显著增加,股骨的材料力学和结构力学指标上均出现明显异常,经电刺激和(或)水疗干预后失用性骨质疏松大鼠的体质量有所下降,股骨的材料力学和结构力学指标有所改善,尤其是电刺激和水疗联合应用,可明显改善失用性骨质疏松大鼠股骨的最大载荷、破断载荷、弹性模量和极限强度。     

四种药物治疗骨质疏松模型大鼠股骨扭转力学特性对比

背景：骨质疏松的预防、诊断和治疗都需要了解药物治疗的效果。扭转力学性能指标是对药物治疗后骨质疏松质量评价的一种可靠方法。 目的：观察不同药物治疗动物骨质疏松的疗效。 方法：四五月龄雌性Wistar大鼠建立骨质疏松模型，以复方中药、阿仑膦酸钠、维生素K、钙剂进行治疗，饲养15周后处死大鼠，取大鼠股骨在扭转试验机上以1 (°)/s进行扭转实验，实验结束后通过试验机测量变盘读取转矩和扭转角数据，试样破坏后观察试样的断口形貌。 结果与结论：骨质疏松大鼠最大转矩、扭转角、切应力均低于正常大鼠(P < 0.05)，而经过复方中药或阿仑膦酸钠治疗后，最大转矩、扭转角、切应力得到恢复，但维生素K及钙剂治疗效果不明显。说明中药、西药、维生素K治疗动物骨质疏松模型大鼠均有一定疗效，钙剂效果不明显，中药的效果最好。