骨骼肌小热休克蛋白在离心运动后的表达*☆

背景：研究证明离心方式的训练可使骨骼肌产生保护作用，避免离心运动引起的损伤，但是机械负荷引起的小热休克蛋白的保护作用至今却少有报道。 目的：观察骨骼肌小热休克蛋白家族中αB-晶体蛋白在离心运动后的表达，以此探讨机械负荷诱导的小热休克蛋白对骨骼肌细胞的保护作用机制。 方法：将Wistar大鼠随机分为安静对照组和运动训练组。运动训练组使用动物跑台进行6周间歇性离心运动训练，每周训练5 d，安静对照组正常喂养。训练6周休息48 h后，安静对照组与运动训练组随机选出6只大鼠做1次性大负荷离心运动。观察两组血清肌酸激酶变化；蛋白免疫印迹法检测两组腓肠肌αB-晶体蛋白含量变化，用免疫荧光组织化学法分析两组腓肠肌αB-晶体蛋白亚细胞表达特征。 结果与结论：大负荷离心运动后，安静对照组血清肌酸激酶与运动前相比显著增高(P < 0.05)，说明骨骼肌细胞出现严重的损伤，而运动训练组这种损伤不明显。蛋白免疫印迹结果表明，运动训练组做一次性大负荷离心运动后αB-晶体蛋白表达水平比安静对照组增加(P < 0.05)。从免疫荧光组化切片可见，αB-晶体蛋白在细胞内发生了移位变化，从胞浆移位于Z盘和细胞膜。提示αB-晶体蛋白在离心运动训练后表达增多，并通过移位于肌细胞Z-盘和细胞膜发挥对骨骼肌细胞的保护作用。     

高压氧对递增负荷训练大鼠腓肠肌P53、Bcl-2蛋白表达的影响

背景：研究显示高压氧疗法在运动损伤与疲劳恢复方面具有较好的应用效果,但其机制尚不清楚。 目的：观察高压氧对递增负荷跑台运动后大鼠腓肠肌P53、Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-03/05在苏州大学运动人体科学实验室完成。 材料：2个月龄雄性SD大鼠24只,随机分为3组,安静对照组、递增负荷训练组、高压氧恢复组,每组8只。 方法：递增负荷训练组：坡度10%,递增负荷训练,第1~4周,每天20 m/min运动10 min,25 m/min运动10 min,30 m/min运动10 min,35 m/min运动10 min。第5~8周,每天20 m/min运动10 min,25 m/min运动10 min,30 m/min运动20 min,35 m/min运动20 min。高压氧恢复组：运动方案相同,运动后即刻用0.2 MPa压力的高压氧恢复60 min。安静对照组自由喂养,不进行训练。递增负荷训练组末次运动后1 h、高压氧舱恢复组恢复1 h及相应安静对照组分批麻醉处死,快速取腓肠肌立即用体积分数为0.1甲醛固定,制作切片。 主要观察指标：①苏木精-伊红染色观察各组大鼠骨骼肌细胞凋亡情况。②免疫组织化学检测各组大鼠骨骼肌细胞P53与Bcl-2蛋白表达情况。 结果：24只大鼠进入结果分析。①递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞凋亡数量增多,经高压氧恢复后细胞凋亡数量减少。②递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞P53蛋白表达增多,经高压氧恢复后表达显著减少。③递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞Bcl-2蛋白表达增多,高压氧恢复后未见减少。 结论：高压氧能够抑制递增负荷训练大鼠骨骼肌P53蛋白的表达,减少运动导致的大鼠骨骼肌细胞凋亡的发生。     

离心运动对大鼠骨骼肌细胞增殖和波形蛋白表达的时序性影响

背景：骨骼肌损伤后是通过肌卫星细胞的增殖形成新核来生长和修复的,但关于骨骼肌细胞增殖和波形蛋白表达的关系很少报道。 目的：探讨骨骼肌细胞增殖与波形蛋白表达的关系以及运动性骨骼肌微损伤后修复的机制。 设计、时间和地点：随机对照动物实验,于2007-12/2008-09在湖南师大运动人体科学实验中心完成。 材料：健康成年8周龄雄性SD大鼠50只,随机分成对照组和运动后即刻、运动后3 h、运动后24 h和运动后48 h组,每组10只大鼠。 方法：运动组大鼠进行重复3 d的力竭性离心运动,力竭模型采用跑台运动,速度为16 m/min,坡度为-16°,持续运动至力竭,对照组为正常大鼠,未做运动。 主要观察指标：运动组分别于运动后即刻,3,24,48 h取材,对照组一次性取材,免疫组织化学法检测各组大鼠肱三头肌内侧头不同恢复时相增殖细胞核抗原PCNA的表达和波形蛋白的表达。 结果：骨骼肌细胞增殖出现时序性变化,运动后即刻增殖指数显著大于对照组,运动后24 h达到峰值,运动后48 h增殖指数有所下降。骨骼肌细胞中波形蛋白表达出现时序性,而且其免疫反应分值的时序性与增殖指数出现一致性,但与增殖指数不具有相关性。 结论：3 d重复性力竭离心运动后骨骼肌细胞增殖和波形蛋白的表达出现时序性变化。波形蛋白的表达与肌细胞增殖具有一定的关系,但不是惟一的影响的因素。     

热应激预处理对离心运动大鼠骨骼肌自由基代谢的影响

背景：研究表明热预处理能够提高肌肉抗损伤的能力，但具体的机制尚不清楚。 目的：观察热应激预处理对离心运动大鼠骨骼肌超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的影响。 方法：雄性Wistar大鼠随机分为对照组、离心运动组、预热应激+离心运动组。热应激温度为43 ℃，时间约35 min。采用-16°下坡跑台跑做大负荷间歇性离心运动，跑速为26.8 m/min，运动5 min，间歇1 min，共进行10组。分别于运动前1 h、运动后1，24，48 h取大鼠腓肠肌，采用硫代巴比妥酸法测定大鼠丙二醛含量，黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性。 结果与结论：与对照组比较，离心运动组大鼠腓肠肌丙二醛含量显著增高(P < 0.05)，并随运动后时间的延长逐渐升高，超氧化物歧化酶活性随运动后时间的延长显著降低(P < 0.05)。与离心运动组比较，预热应激+离心运动组大鼠腓肠肌超氧化物歧化酶活性显著增高(P < 0.05)，丙二醛含量显著降低(P < 0.05)。说明热应激预处理可增强骨骼肌超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛含量，对离心运动损伤有保护作用。     

急性低氧及不同强度急性常氧运动与高住低练大鼠腓肠肌血管内皮细胞生长因子的表达

背景：通过运动和/或低氧来增加机体对低氧的应激程度和时间,可提高机体对运动和/或低氧的适应水平,但目前对急性运动和/或低氧对骨骼肌血管内皮生长因子表达的影响所知甚少。 目的：观察急性运动和/或低氧对大鼠腓肠肌血管内皮生长因子表达的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2005-09/2006-09在江苏省人民医院临床实验研究室完成。 对象：选用健康雄性SD大鼠108只,随机分为6组：即常氧安静组、急性常氧高强度组、急性常氧中强度组、低氧安静组、急性低练高住高强度组和急性低练高住中强度组,每组18只。段氏PT型鼠跑台为杭州产。 实验方法：急性常氧运动模型：运动前48 h进行适应活动。高强度运动：运动50 m/min×1.5 min休2 min;中强度运动：运动30 m/min×30 min。低氧模型：采用低氧仪产生低氧气分压的混合气体,低氧3 d,22 h/d,氧气12.8%,温度22 ℃,湿度55%。急性低练高住模型：在急性高、中强度运动后实施上述低氧计划。于各组处理后即刻、2,4 h分别处死大鼠4只取大鼠腓肠肌。 主要观察指标：用Western-blot法测定大鼠腓肠肌血管内皮生长因子表达。 结果：低氧和急性常氧运动增强了血管内皮生长因子表达,运动后低氧削弱了运动诱导的血管内皮生长因子表达,长时间中等强度的运动诱导更多的血管内皮生长因子表达。急性运动和/或低氧后即刻、2 h血管内皮生长因子表达最多,其恢复速度由快向慢排序为：低氧或低练高住、常氧运动。 结论：急性运动和/或低氧诱导的大鼠骨骼肌血管内皮生长因子的表达属早期速发效应,且存在强度阈值,其恢复速度与表达的幅度成反比,低练高住可能能增强骨骼肌对运动的适应。     

大鼠骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达与4周耐力运动的影响

背景：已有研究提示，雷帕霉素靶蛋白信号调控骨骼肌蛋白翻译过程，在运动引起的蛋白质合成变化中起作用。 目的：观察耐力运动对骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达的影响，以及雷帕霉素靶蛋白在运动诱导骨骼肌生长中的作用途径。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006-10/12北京体育大学运动人体科学学院实验室完成。 材料：健康雄性、SPF级2月龄的SD大鼠12只，体质量180~200 g，随机为运动组和对照组，每组6只。 方法：运动组先进行适应性训练：上坡跑，坡度为5°，速度分别为10，15，20 m/min强度递增的跑台运动，30 min/次， 1次/d，共6 d；然后进行正式运动：上坡跑，跑台坡度5°，速度20 m/min，60 min/次，1次/d，6 d/周，共4周的跑台运动。②对照组均不运动，其他生活条件与运动组相同。 主要观察指标：采用反转录-聚合酶链反应方法测定腓肠肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达，采用BCA方法测定腓肠肌总蛋白含量。 结果：实验纳入的12只大鼠全部完成训练，均进入结果分析，中途无脱落。①运动组腓肠肌总蛋白含量显著高于对照组 (67.0±11.7, 46.8±7.9；P < 0.05)。②运动组雷帕霉素靶蛋白表达量显著高于对照组表达量（0.43±0.04, 0.25±0.03；P < 0.05）。 结论：耐力运动后大鼠腓肠肌总蛋白含量上升，骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达上升，提示雷帕霉素靶蛋白可能参与肌肉生长对运动适应的调控。     

大强度离心运动大鼠不同时相骨骼肌结构及血白细胞介素6、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶的变化

背景：运动预处理可在一定程度上减轻运动性骨骼肌微损伤,从而避免延迟性肌肉酸痛的发生。目前应用白细胞介素6和CK-MM评定骨骼肌微细损伤还较缺少实验性研究。 目的：观察运动预处理对大鼠大强度离心运动后不同时相骨骼肌结构损伤及血液白细胞介素6、肌酸激酶和CK-MM变化的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,2006/2007在成都体育学院动物实验室完成。 材料：成年健康雌性SD大鼠80只,体质量(231.3±12.44) g。每组又随机分别分为运动前和运动后即刻、运动后24,48,72 h 5个亚组,每组8只。 方法：无预处理组：除对运动前组外其他大鼠进行一次速度19~21 m/min,坡度为-16°的90 min的跑台运动。运动预处理组：进行2周离心跑台训练,2周后,除运动前组外,其他大鼠进行一次性跑台运动,运动方式同无预处理组。 主要观察指标：一次性离心运动后即刻、24,48和72 h观察比目鱼肌结构及血液白细胞介素6、肌酸激酶、CK-MM的变化。 结果：运动后两组大鼠比目鱼肌均出现损伤性改变,尤以无预处理组更为明显,且以运动后24~48 h较为严重。无预处理组运动后即刻血浆白细胞介素6显著增高,随后逐渐下降,72 h再次显著增高。运动预处理组运动后即刻略降低,随后逐渐升高,于48 h达峰值。运动后运动预处理组血浆白细胞介素6水平低于无预处理组。运动前运动预处理组肌酸激酶和CK-MM均低于无预处理组。运动后无预处理组、运动预处理组两组肌酸激酶和CK-MM先升后降,除运动后72 h 外,运动预处理组CK和CK-MM水平及变化幅度低于无预处理组。 结论：运动预处理有助于减轻离心运动导致的骨骼肌超微结构损伤及运动应激所引起的相关血液指标变化。肌酸激酶和CK-MM活性水平的个体差异较大,更适用于个体自身的纵向比较。     

缺氧诱导因子1α小干扰RNA对骨髓间充质干细胞缺氧诱导因子1α、基质细胞衍生因子1α和血管内皮生长因子基因表达的影响*

背景：缺氧可以影响骨髓间充质干细胞分泌细胞因子,其机制可能是通过缺氧诱导因子1α起作用的。 目的：观察缺氧诱导因子1α RNA干扰对骨髓间充质干细胞缺氧诱导因子1α、基质细胞衍生因子1α和血管内皮生长因子基因表达的影响。 方法：贴壁法培养骨髓间充质干细胞,取第3~5代细胞用于实验,倒置显微镜下观察细胞形态,并用流式细胞仪检测其表面标志物CD34、CD44、CD90表达。将骨髓间充质干细胞分四组：常氧对照组(无干预因素)、缺氧组(缺氧24 h)、脂质体对照组(转染空载脂质体后缺氧24 h)、RNA干扰组(转染脂质体介导的RNA干扰序列后缺氧24 h)。RT-PCR法检测骨髓间充质干细胞的缺氧诱导因子1α、基质细胞衍生因子1α和血管内皮生长因子 mRNA表达水平, ELISA检测骨髓间充质干细胞培养上清缺氧诱导因子1α、基质细胞衍生因子1α和血管内皮生长因子蛋白表达水平。 结果与结论：同常氧对照组比较,缺氧组缺氧诱导因子1α、基质细胞衍生因子1 α和血管内皮生长因子基因及蛋白表达增高(P < 0.05);同脂质体对照组比较,RNA干扰组缺氧诱导因子1α、基质细胞衍生因子1α和血管内皮生长因子基因及蛋白表达降低(P < 0.05)。证实了缺氧条件可以使骨髓间充质干细胞血管内皮生长因子和基质细胞衍生因子1α的表达增加,抑制缺氧诱导因子1α的表达可以使血管内皮生长因子和基质细胞衍生因子1α的表达减少,缺氧诱导因子1α很可能是干细胞移植细胞因子分泌的调控因素。     

有氧运动对小鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2基因表达及胰岛素受体底物1丝氨酸磷酸化的影响**☆

背景：研究表明,胰岛素受体底物蛋白1(insulin receptor substrate 1,IRS1)的丝氨酸磷酸化和结节性硬化复合物蛋白2的表达及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体S6激酶1信号通路的异常可诱导机体产生胰岛素抵抗。 目的：观察有氧运动对小鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2基因表达及IRS1丝氨酸磷酸化的影响。 方法：将C57BL/6小鼠随机分为安静组和运动组,运动组进行6周的75%VO2max强度的有氧跑台运动,安静组不做任何干预。采用RT-PCR,Western blot和免疫荧光组织化学染色等方法检测各组大鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2,IRS1,pIRS1-Ser307和pIRS1-Ser636/639的表达和定位。 结果与结论：运动组结节性硬化复合物蛋白2 mRNA及蛋白表达高于安静组(P < 0.05),两组间胰岛素受体底物蛋白1 mRNA及蛋白表达差异无显著性意义。运动组胰岛素受体底物蛋白1的丝氨酸307和丝氨酸636/639位点的磷酸化明显低于安静组(P < 0.05)。结果提示,有氧运动可增强骨骼肌组织结节性硬化复合物蛋白2基因表达,进而抑制胰岛素受体底物蛋白1的丝氨酸磷酸化。     

腹腔注射脂多糖对幼鼠癫痫发作及海马TLR4/HMGB1/P-IκB-α表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)预处理对幼鼠癫痫发作及海马炎症介质Toll样受体4/高迁移率族蛋白1/磷酸化核因子抑制蛋白α(TLR4/HMGB1/P-IκB-α)表达的影响。方法出生21d的SD鼠随机分为生理盐水组(对照组),模型Ⅰ组和模型Ⅱ组,模型Ⅰ组采用海人酸(KA)诱导癫痫发作,模型Ⅱ组在应用KA前2h腹腔注射LPS,观察幼鼠癫痫发作的行为学表现,荧光定量PCR检测癫痫持续状态(SE)后3h和24h各组海马TLR4和HMGB1基因的表达,Westernblot法检测SE后3h、24h各组海马TLR4、HMGB1、P-IκB-α蛋白的表达。结果与对照组相比:模型Ⅰ组、模型Ⅱ组海马TLR4基因在SE后3h表达均显著增加(t=4.806,P0.05;t=4.954,P0.05),SE后24h也显著增加(t=3.924,P0.05;t=3.792,P0.05),模型Ⅰ组、模型Ⅱ组海马TLR4蛋白表达在SE后3h均显著增加(t=7.804,P0.05;t=8.385,P0.05),SE后24h也显著增加(t=4.256,P0.05;t=4.262,P0.05);模型Ⅰ组、模型Ⅱ组海马HMGB1基因在SE后3h表达均显著增加(t=3.626,P0.05;t=5.255,P0.05),SE后24h也显著增加(t=4.046,P0.05;t=2.836,P0.05),模型Ⅰ组、模型Ⅱ组海马HMGB1蛋白在SE后3h均无显著性增加(t=0.389,P0.05;t=0.213,P0.05),SE后24h也无显著性增加(t=0.106,P0.05;t=0.279,P0.05)。模型Ⅰ组、模型Ⅱ组海马P-IκB-α蛋白表达在SE后3h均显著增加(t=4.383,P0.05;t=6.627,P0.05),SE后24h也显著增加(t=14.521,P0.05;t=19.458,P0.05)。模型Ⅱ组与模型Ⅰ组相比,LPS预处理可显著增加海马TLR4基因在SE后3h的水平(t=2.362,P0.05),及SE后3hTLR4蛋白表达(t=4.284,P0.05);且显著增加SE后3h、24hPIκB-α蛋白表达(t=4.249,P0.05;t=9.120,P0.05);但对SE后3h、24hHMGB1基因水平无显著性影响(t=0.569,P0.05;t=0.691,P0.05),对SE后3h、24hHMGB1蛋白表达也无显著性影响(t=0.168,P0.05;t=0.385,P0.05)。结论LPS预处理加重幼鼠癫痫发作,使TLR4/P-IκB-α表达升高,对HMGB1表达无显著改变。     

Denervation study of synapses of organ of corti of old world monkeys

Fine structural characteristics of synapses in the spiral organ of Corti were examined, with reference to differences between inner and outer haircell systems, and to location of neurons of origin of efferent axons. Surgical interruption of crossed olivocochlear bundle, of vestibular nerve, of facial nerve, and excision of superior cervical ganglia were used to determine the pathways of efferent axons. Interruption of the vestibular nerve near the brainstem results in degeneration of all efferent terminals on outer hair cells. Mid-line lesions at, and caudal to, the facial colliculus result in degeneration of about half of these efferent terminals. Efferent synaptic bulbs to the inner hair-cell system are small, of the order of one micron, and form type 2 junctions with afferent dendrites. They tend to have more large dense-core vesicles (about 80 nm) than the large efferent terminals of the outer hair-cell system, and appear to be the terminals of axons in the habenula perforata, which exhibit varicosities laden with large dense core vesicles. The varicosities are unaffected by excision of the superior cervical ganglia. So far as our material can reveal, it appears that the varicosities in the habenula perforata do not survive vestibular root interruption, nor do the efferent processes in the internal spiral bundle or at the base of inner hair cells. Most interestingly, the afferent processes of the inner hair-cell system, as identified for example by their relation to pre-synaptic bodies in the inner hair cells, are subject to a trans-synaptic reaction after severance of the vestibular root. They undergo a dramatic cytological transformation, characterized by increase of volume, engorgement with microtubules, microfilaments, microvesicles of various sizes, and clusters of lysosomes. Thus, both the efferent and afferent terminals of the inner hair-cell system show marked cytological differences from the corresponding terminals of the outer hair cell system.     

Mechanism of action of tubocurarine on nicotinic cholinoreceptors of neurons of the sympathetic ganglia of rats

Tubocurarine (Tc) effect on membrane currents elicited by acetylcholine (ACh) was studied in isolated superior cervical ganglion neurons of rat using patch-clamp method in the whole-cell recording mode. The "use-dependent" block of ACh current by Tc was revealed in the experiments with ACh applications, indicating that Tc blocked the channels opened by ACh. Mean lifetime of Tc-open channel complex, tau, was found to be 9.8 +/- 0.5 s (n = 7) at -50 mV and 20-24 degrees C. tau exponentially increased with membrane hyperpolarization (e-fold change in tau corresponded to the membrane potential shift by 61 mV). Inhibition of the ACh-induced current by Tc (3-30 microM/1) was completely abolished by membrane depolarization to the level of 80-100 mV. Inhibition of ACh-induced current was augmented at increased ACh doses. It is concluded that the open channel block produced by Tc is likely to be the only mechanism for Tc action on nicotinic acetylcholine receptors in superior cervical ganglion neurons of rat.     

The effect of age of onset of PD on risk of dementia

Background Dementia occurs in the majority of patients with Parkinson’s disease (PD). Late onset of PD has been reported to be associated with a higher risk for dementia. However, age at onset (AAO) and age at baseline assessment are often correlated. The aim of this study was to explore whether AAO of PD symptoms is a risk factor for dementia independent of the general effect of age. Methods Two community-based studies of PD in New York (n = 281) and Rogaland county, Norway (n = 227) and two population-based groups of healthy elderly from New York (n = 180) and Odense, Denmark (n = 2414) were followed prospectively for 3–4 years and assessed for dementia according to DSM-IIIR. All PD and control cases underwent neurological examination and were followed with neurological and neuropsychological assessments. We used Cox proportional hazards regression based on three different time scales to explore the effect of AAO of PD on risk of dementia, adjusting for age at baseline and other demographic and clinical variables. Findings In both PD groups and in the pooled analyses, there was a significant effect of age at baseline assessment on the time to develop dementia, but there was no effect of AAO independent of age itself. Consistent with these results, there was no increased relative effect of age on the time to develop dementia in PD cases compared with controls. Interpretation This study shows that it is the general effect of age, rather than AAO that is associated with incident dementia in subjects with PD. Received in revised form: 22 December 2005     

Limits of deinstitutionalization--perspectives of relatives of psychiatric patients

After a hopeful beginning, the social process of the reintegration of those with severe mental illness has come to a standstill. I am led to wonder whether "the community" really wants to live together with people suffering from severe mental illness, and if so, how closely? As long as the medical treatment of mental illness provided by the general practitioners is fundamentally deficient, as they are not able to prescribe the necessary interventions--such as out-patient psychiatric nursing, and service providers in the out-patient sector are content with offering increasingly intensive forms of care for the less seriously ill at the cost of the Social Welfare System--the reintegration of those with serious mental illness remains an illusion--which is mainly to the benefit of providers of residential care in homes and hostels.     

Summary of Legislation of 1933 of interest to the Department of Mental Hygiene

Psychiatric Quarterly -