清毒饮和养正片对L7212白血病小鼠Fas基因及其可溶性受体的影响

[目的]探讨复方中药清毒饮和养正片抗急性白血病的疗效机理。[方法]采用L7212白血病小鼠模型,用原位末端标记法(TUNEL)观察清毒饮(由七叶一枝花、白花蛇舌草、大青叶、山慈菇等组成)、养正片(由黄芪、人参、补骨脂、赤灵芝、三七片等组成)和足叶乙甙(VP16)化疗对L7212的白血病细胞凋亡的影响;用免疫组化法检测L7212白血病小鼠骨髓有核细胞的Fas基因表达;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测可溶性Fas(sFas)。[结果]清毒饮组、养正片组、化疗组都可见较多凋亡阳性白血病细胞,清毒饮组优于养正片组,与化疗合用则更明显,凋亡指数均大于模型组(P<0.01);L7212白血病细胞Fas表达减低,给予清毒饮、养正片、化疗处理后Fas升高,清毒饮组亦较养正片组明显,清毒饮加化疗组则尤其明显(P<0.01);清毒饮组sFas较模型组明显降低(P<0.05),并接近正常空白组水平(P>0.05),养正片组则无明显变化。[结论]清毒饮、养正片能诱导L7212小鼠白血病细胞凋亡,并可促进化疗的诱导凋亡作用,以清毒饮尤为明显;清毒饮、养正片均能提高Fas的表达水平,清毒饮还可使L7212小鼠增高了的sFas水平降低。提示在急性白血病早期,采用祛邪攻毒中药可诱导其细胞凋亡并与化疗有协同作用;而此期采用扶正补虚中药则作用较差。     

清毒饮、养正片对化疗所致骨髓抑制小鼠的影响

[目的]观察清毒饮及养正片对化疗所致骨髓抑制小鼠的影响.[方法]将66只NIH小鼠随机分为11组,分别为清毒饮高、中、低剂量组,养正片高、中、低剂量组,清毒饮 养正片高、中、低剂量组,正常组和模型组.除正常组外,其他各组均腹腔注射环磷酰胺(CTX)复制小鼠骨髓抑制模型,将清毒饮、养正片、清毒饮加养正片均分为2、1、0.5kg/L 3个浓度,每组于造模3 d后灌服中药0.3 mL/d,连续7 d.检测各组外周血常规及骨髓有核细胞计数.[结果]清毒饮、养正片单用或合用均能不同程度提高环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠的外周血细胞各组分及骨髓有核细胞计数,尤以改善白细胞(WBC)、中性粒细胞(N)及血小板(PLT)计数为佳;在各给药组中,以养正片高、中剂量组效果最佳.[结论]清毒饮和养正片均能不同程度地减轻化疗所致的骨髓抑制.     

NF-κB活性变化对HL-60细胞凋亡及WT1、Bcl-2基因表达的影响

目的为探讨NF-κB变化对白血病细胞凋亡的影响及其机制。方法 用PDTC抑制HL-60细胞NF-κB的活性，观察NF-κB活性抑制前后阿糖胞苷诱导的HL-60细胞凋亡的变化及WT1、Bcl-2表达水平的变化。结果 NF-κB活性抑制能明显增强阿糖胞苷诱导的HL-60细胞凋亡作用，同时明显下调WT1、Bcl-2的表达。结论 NF-κB活性抑制使白血病细胞凋亡增加，其作用可通过直接下调WT1的表达和间接下调Bcl-2的表达来实现.     

香菇多糖协同阿糖胞苷对HL-60白血病细胞增殖力的影响

目的：研究香菇多糖协同阿糖胞苷(Ara—c)对HL-60白血病细胞增殖力的影响。方法：观察HL-60细胞,分别经香菇多糖、Ara—c或香菇多糖协同Ara—c处理后,HL-60活性、抑制率及集落形成能力的变化,并与对照组(不含处理因素)比较。结果：香菇多糖协同Ara—c组HL-60细胞集落形成能力、增殖抑制率与其他三组比有显著差异,HL-60细胞活力与Ara—c组比无显著差异;香菇多糖组与对照组比各项指标均无显著差异。结论：香菇多糖能增强Ara—c对HL-60细胞的杀伤力。     

清毒饮和养正片对急性白血病人Bcl-2、P53、Fas基因及其mRNA表达的影响

目的探讨清毒饮和养正片抗人类白血病的作用机理.方法选取急性白血病初治或未缓解的病人以清毒饮和养正片治疗,采用免疫组化法检测治疗前后Bcl-2、P53、Fas基因;用原位杂交法检测上述基因mRNA水平表达.结果治疗后,患者Bcl-2基因及其mRNA水平表达下调,Fas基因及其mRNA水平表达上调,P53mRNA水平表达下调.治疗前后比较,差异有显著或非常显著性意义(P＜0.05～＜0.01);P53基因似略有上调,但差异无显著性意义(P＞0.05).结论清毒饮和养正片通过以上作用可介导白血病细胞凋亡.     

小剂量阿糖胞苷诱导HL—6O细胞分化的作用

目的 观察小剂量阿糖胞苷对HL-60细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 阿糖胞苷(10^-8M)作用HL-60细胞2—6天，观察细胞生长，用流式细胞仪分析细胞周期，用免疫组化法检测P53、P21蛋白表达的变化，原位杂交法检测P53 mRNA表达水平的改变。结果 小剂量阿糖胞苷可诱导HL—60细胞向单核／巨噬细胞分化，抑制HL—60细胞的增殖，使细胞停滞于G1期，P53，P21蛋白和P53 mRNA表达明显增强。结论 小剂量阿糖胞苷对HL—60细胞具增殖抑制和诱导分化作用，该作用与G1期阻滞及P53，P21表达增高有关。     

定清片对人白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响

目的研究定清片对人白血病HL-60细胞增殖的影响及其作用机制。方法制备定清片含药血清,并以不同浓度含药血清体外干预培养HL-60细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞术检测细胞周期及凋亡率。结果不同浓度定清片(5%、10%、20%)作用于HL-60细胞,均能抑制细胞生长,其抑制作用随药物浓度增加呈递增趋势,相同浓度组24 h、48 h、72 h抑制率递增。流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,与正常对照组比较,定清片组G_1期细胞停滞率及凋亡率明显升高,且药物浓度越高,G_1期细胞停滞率和凋亡率越高。结论定清片能抑制人白血病HL-60细胞增殖,其作用机制可能与影响细胞周期和诱导细胞凋亡相关。     

白藜芦醇合阿糖胞苷对HL-60细胞的增殖抑制作用

目的：观察白藜芦醇（resveratrol，Res）体外单独及联合阿糖胞苷（Ara-c）对白血病HL-60细胞的抑制作用。方法：在体外培养条件下观察不同浓度Res、Ara-c作用48小时后分别对HL-60细胞增殖的影响。然后根据以上抑制结果，选择对HL-60细胞抑制率15％～30％的Ara-c药物浓度，再与不同浓度的Res联合用药。在联合药物处理HL-60细胞48小时后，同样用MTT法检测联合用药对细胞增殖抑制作用。结果：Res、Ara-c体外单独用药均能显著抑制HL-60细胞的生长增殖，Res联合Ara-c（2．5μg／m1）后，对HL-60细胞的增殖抑制作用显著提高，与单独用药组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：Res体外能显著抑制人HL-60细胞的增殖，Res联合Ara-c能显著提高对HL-60细胞的增殖抑制作用。     

三七皂苷R1诱导HL-60细胞凋亡中survivin、bcl-2的表达

[目的]探讨三七皂苷R1对人白血病细胞株HL-60细胞凋亡作用及其机制。[方法]光镜下观察三七皂苷R1作用下HL-60细胞形态,采用MTT比色法观察三七皂苷R1对人白血病细胞株HL-60细胞增殖的抑制作用。采用流式细胞术检测细胞凋亡改变,并以RT-PCR检测凋亡调节基因survivin、bcl-2mRNA的表达。[结果]三七皂苷R175-1200μg.ml-1可抑制人白血病细胞株HL-60细胞的生长,且呈时间和浓度依赖性。三七皂苷R1作用后人白血病细胞株HL-60细胞呈现凋亡特征,流式细胞术显示凋亡细胞比例升高,凋亡率随作用剂量的增高而升高。RT-PCR检测可见三七皂苷R1150μg/ml作用下survivin、bcl-2mRNA表达减少。[结论]三七皂苷R1能诱导人白血病细胞株HL-60细胞凋亡,其作用可能与凋亡调节基因survivin、bcl-2的下调有关。     

细胞调控因子SKP2的表达与HL-60/A耐药的关系

【目的】观察细胞周期调控因子SKP2、P27kip1在白血病耐药细胞株HL-60/A和非耐药细胞株HL-60细胞中的表达及细胞周期比例,探讨细胞增殖与耐药的关系。【方法】RT-PCR、Western blot检测SKP2、P27kip1、MRP mRNA及蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期,采用药物毒性分析方法检测细胞对化疗药物的敏感性。【结果】白血病耐药细胞株HL-60/A对阿霉素、柔红霉素、阿糖胞苷的耐药倍数分别为49.14倍、39.20倍和6.43倍;HL-60/A细胞MRP的表达高于HL-60;HL-60/A和HL-60细胞株G0/G1细胞期比例分别为（35.10&#177;0.81）%和（43.96&#177;1.12）%,两组比较P〈0.05;HL-60/A细胞中SKP2的表达高于HL-60细胞;P27kip1的表达低于HL-60细胞。【结论】HL-60/A细胞多药耐药机制产生与MRP的表达增高有关。耐药HL-60/A处于增殖期的细胞比例高,具有更高的增殖活性。     

盐酸小檗碱与七、八元瓜环包合作用的光谱学研究及体外释药行为

目的研究七元瓜环（Q[7]）、八元瓜环（Q[8]）与盐酸小檗碱（BH）的包合作用,以及体系pH值对包合作用的影响,为构建瓜环-盐酸小檗碱药物释放体系提供理论依据。方法紫外可见光谱法和荧光光谱法研究体系包合作用和包合比;荧光光谱法测定包合常数;紫外分光光度法测定包合物的体外药物累积释放。结果七元瓜环-盐酸小檗碱（Q[7]-BH）发生2∶1的包合作用,包合常数为6.71×104L/mol;八元瓜环-盐酸小檗碱（Q[8]-BH）发生1∶2的包合作用,包合常数为1.44×104L/mol。Q[7]、Q[8]对BH均有荧光增敏作用。BH原药400 min在人工肠液（pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液）中的累积释放度为94.8%、在人工胃液（pH 1.2）中的累积释放度为29.4%;Q[7]-BH及Q[8]-BH的溶出曲线相似,400 min在人工胃液中的累积释放度分别为63.9%和64.4%,在人工肠液中的累积释放度分别为69.8%和75.7%。结论七、八元瓜环与盐酸小檗碱在酸性和碱性条件下均能形成包合作用,且对盐酸小檗碱有增溶作用和荧光增敏作用。     

安非他酮缓释片治疗抑郁症患者的效果及对血清 P 物质和神经肽 Y 水平的影响

目的 探讨安非他酮缓释片对抑郁症患者血清P物质（SP）和神经肽Y（NPY）水平的影响及疗效观察.方法 将70例抑郁症患者随机分为实验组与对照组,分别予以安非他酮缓释片和氟西汀治疗6周,观察两组治疗前后血清SP和NPY水平变化,并比较其疗效及不良反应.结果 治疗6周后,两组血清SP水平[（40.12±12.73）、（48.43±12.17） ng/L]均较治疗前[（55.17±14.76）、（54.97±15.01）ng/L]明显下降,NPY水平[（138.4923.17）、（119.53±22.86）ng/L]均较治疗前[（104.64±21.37）、（103.26±20.56）ng/L]明显上升（P＜ 0.05或P＜0.01）,且实验组下降或上升值明显大于对照组（P＜0.05）;同时实验组患者的临床总有效率（94.3％）明显优于对照组（77.1％）（x2=4.20,P＜0.05）,不良反应发生率（14.3％）明显低于对照组（37.1％）,差异有统计学意义（x2=4.79,P＜0.05）.结论 安非他酮缓释片治疗抑郁症效果确切,安全性较好,其作用机制与其能降低血清SP水平及升高NPY水平密切相关.     

y-氨基丁酸对炎性因子致胰岛细胞凋亡的保护作用

【目的】探讨1-氨基丁酸（gamma-aminobutyricacid,GABA）对炎性因子所诱导的胰岛细胞凋亡的保护作用,初步研究其作用机制。【方法】将胶原酶v：通过总胆管灌注到大鼠内,分离纯化大鼠胰岛细胞,并通过DTZ染色鉴定胰岛纯度。将新鲜分离的胰岛分为3组：正常对照组、通过白介素-1B（IL-1B）-y干扰素（IFN-7）建立胰岛细胞炎症模型（IL-1β＋IFN-1诱导组）、GABA干预组（GABA＋IL-1β＋IFN-1）。观察（IL-1β＋IFN-1）与GABA预孵育胰岛细胞的凋亡;二醋酸酯荧光素,碘化丙啶染色、流式细胞术及糖刺激实验检测胰岛细胞活性。凋亡率和功能,免疫荧光检测凋亡细胞Caspase-3蛋白表达。【结果】（IL-18＋IFN-7）组作用24h对胰岛细胞活性、凋亡率和糖刺激指数分别为20％、（32．7±5.3）％和（1．62±0．13）,对照组3项指标分别为90％、（5．5±2．8）％和（2．37±0．11）,两组比较差异显著（P〈0．01）;（GABA＋IL-1β＋IFN-y）组3项指标分别为70％、（18．0±6．3）％和（1．97±0．12）,与（IL-1β＋IFN-1）组比较,均有明显差异（P〈0．01）。（IL-1β＋IFN-1）组胰岛的Caspase-3蛋白表达明显增加,而（GABA＋IL-1β＋IFN-1）组胰岛的Caspase-3蛋白表达明显受到抑制。【结论】联合IL-1β及IFN-y明显诱导胰岛细胞凋亡,GABA显著抑制IL-1β及IFN-1诱导的胰岛细胞凋亡,其机制可能与降低Caspase-3蛋白的表达有关。     

西红花苷对高脂血2型糖尿病模型大鼠降血糖和降血脂作用

【目的】探讨西红花苷（crocin）对高脂血2型糖尿病模型动物的降血糖和降血脂作用。【方法】高脂饮食4周后,大鼠尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）30mg／kg,建立高脂血2型糖尿病动物模型,随机分为模型组,西红花苷组（低、中、高剂量）,拜唐苹组和二甲双胍组。模型组灌胃0．3％羧甲基纤维素钠（CMC）溶液,西红花苷组（低、中、高剂量）分别灌胃西红花苷50mg·（kg·d）^-1、100mg·（kg·d）^-1、200mg·（kg·d）^-1,拜唐苹组灌胃30mg·（kg·d）^-1,二甲双胍组灌胃100mg·（kg·d）^-1,给药体积均为10mg·（ks·d）^-1,连续给药28d,观察对血糖、蔗糖糖耐量和血脂的影响。【结果】中、高剂量西红花苷可明显降低血糖、胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白含量,升高蔗糖糖耐量和高密度脂蛋白含量。【结论】西红花苷能降低高脂血2型糖尿病模型大鼠血糖与血脂,提高蔗糖糖耐量。     

维生素E对剧烈运动所致肌肉损伤的保护作用

[目的]观察新兵入营后剧烈运动过程中血清肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)活力的变化,研究抗氧化剂维生素E对肌肉损伤的保护作用.[方法]将身体健康且没有经过正规体育训练的50名男性青年战士随机分为A、B、C、D、E组,其中E组为空白对照组,A、B、C组服用不同剂量的维生素E,D和E组口服相同ml/kg的橄榄油,2h后让A、B、C、D组战士尽全力跑5km,跑完3h后抽取5组战士静脉血测定血清CK与LDH活力.[结果]D、E组CK与LDH活力较维生素A、B、C组升高,且随着维生素E剂量的加大活性降低.[结论]维生素E能保护剧烈运动中所导致的肌肉损伤.     

子宫内膜异位症患者腹腔液及血清中IL-12的水平测定

目的:探讨子宫内膜异位症(EM)患者腹腔液及血清中白细胞介素-12(IL-12)水平的变化及意义。方法:采用ELISA法检测39例EM患者及16例非EM的对照者腹腔液及血清中IL-12水平。结果:EM组腹腔液及血清中IL-12水平均低于对照组(P<0.01)。EM组Ⅲ-Ⅳ期腹腔液IL-12[(62.37±13.7)ng/L]和血清IL-12[(53.64±17.4)ng/L]均低于Ⅰ-Ⅱ期患者腹腔液[(76.38±13.5)ng/L]和血清[(75.67±12.3)ng/L]水平(P<0.01)。结论:IL-12在EM发病中起重要作用,检测其含量变化对于该病的诊断治疗具有参考意义。     

到卵叶五加及其复方佳蓉片对大鼠的抗衰老作用

目的观察倒卯叶五加及其复方对亚急性衰老大鼠血清丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）活性、总抗氧化能力（T-AOC）以及睾丸组织中NO、iNOS含量的影响。方法60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、倒卵叶五加组、佳蓉片组和维生素E组,每组12只。D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型,各组大鼠在腹腔注射D-半乳糖（正常组动物注射等量生理盐水）的同时,正常和模型组大鼠灌胃生理盐水[10mL／（kg·d）]、其他各组依次给予倒卵叶五加[1g／（kg·d）]、佳蓉片[6g／（kg·d）]、维生素E[20mg／（kg·d）1,用药50d。分别检测各组大鼠血清MDA含量、GSH-Px活性、SOD活性及T-AOC。结果①与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠MDA含量明显升高,GSH-Px活性、SOD活性、T-AOC明显降低（P〈0．01或P〈0．05）;睾丸组织NO和iNOS含量明显升高（P〈0．01）。②与模型组比较,倒卵叶五加、佳蓉片、维生素E三组大鼠血清MDA、睾丸组织NO和iNOS含量明显降低（P〈0．01或P〈0．05）,GSH-P活性、SOD活性、T-AOC明显升高（P〈0．01）。结论倒卵叶五加和佳蓉片可升高衰老大鼠的抗氧化能力,具有明显延缓衰老的作用;机制可能与其抗氧化和降低衰老大鼠睾丸组织中NO和iNOS的含量有关。     

曲美他嗪对急性低压缺氧大鼠心肌损伤的保护作用

【目的】研究曲美他嗪(Trimetazidin,TMZ)对低压缺氧致大鼠心肌损伤的保护作用。【方法】将60只雄性SD大鼠随机分为常氧对照组、低压缺氧模型组、TMZ高、中、低剂量组分别给予20、10、5 mg/kg,每组12只。除常氧对照组外,其他组均应用低压氧舱模拟海拔7 000 m高原,持续12 h,建立高原缺氧模型。HE染色观察心肌组织形态学变化;比色法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性;放免法检测血浆内皮素-1(ET-1)、心钠素(ANP)含量。【结果】与低压缺氧模型组比较,HE染色显示,各剂量TMZ均可减轻大鼠低压缺氧造成的心肌损伤,TMZ高、中、低剂量组均可显著降低低压缺氧小鼠血浆LDH活性(P<0.01,中、低剂量TMZ P<0.05),减少血浆中ET-1及ANP含量(P<0.01)。【结论】TMZ对急性低压缺氧大鼠心肌的损伤具有显著的保护作用。     

猪去氧胆酸对体外培养肝癌细胞HepG2 uPAR的影响

[目的]探讨中药清开灵注射液中主要有效成分之一的猪去氧胆酸对肝癌细胞HepG2上清液中uPAR的影响。[方法]将猪去氧胆酸逐个稀释为从10到30000倍的9个稀释倍数,采用MTT法测定各浓度药液的细胞增殖抑制率,ELISA法检测HepG2细胞uPAR的表达,观察药物各浓度下对细胞生长活力和uPAR表达的影响。[结果]猪去氧胆酸对HepG2细胞具有一定的增殖抑制作用,同时可使细胞培养上清中uPAR水平显著下降。[结论]清开灵注射液降低肝癌细胞uPAR活性表达的能力与其有效成分之一的猪去氧胆酸有关,猪去氧胆酸具有一定体外抑制肝癌细胞HepG2转移的能力。     

徐长卿提取物对损伤内皮细胞中乳酸脱氢酶、肿瘤坏死因子及白细胞介素-8活性的影响

目的 研究徐长卿提取物对损伤内皮细胞中炎症介质乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子（TNF-α）及白细胞介素-8（IL-8）活性的调节作用,探究徐长卿治疗动脉粥样硬化的作用机制.方法 应用补体蛋白纯品于体外在人脐静脉内皮细胞表面组装亚溶破剂量的C5b-9,建立内皮损伤模型,分别建立提取物高、中、低剂量组及空白、模型及标准品对照组,分别用不同浓度的徐长卿提取物及丹皮酚标准品处理细胞,应用紫外分光光度法及ELISA试剂盒测定细胞培养上清液中LDH、TNF-α及IL-8浓度.结果 提取物高剂量组LDH[（119.85±4.12）U/L]及IL-8[（33.65±2.48）ng/L]与模型对照组[（200.49±3.31） U/L,（40.98±0.60）ng/L]比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）;高剂量[（94.75±3.19）ng/L]及中剂量组[（92.81±1.78）ng/L]与模型对照组[（108.00±2.30）ng/L]比较,均可降低TNF-α水平（P＜ 0.01）.结论 徐长卿可能通过降低炎症介质LDH、TNF-α及IL-8活性,从而修复内皮细胞损伤来达到治疗动脉粥样硬化的目的.