榄香烯对小鼠脾洒巴细胞亚群及其调节的辐射保护效应

目的 探讨榄香烯对受照小鼠脾淋巴细胞及亚群间调节作用的保护效应和剂量范围。方法 应用单克隆抗体铺皿法分离受＾６０Ｃｏγ射线分次照射的小鼠脾脏Ｌ３、Ｔ４、Ｌｙｔ２和Ｂ细胞，分别测定榄香烯对以上三种亚群细胞和Ｌ３、Ｔ４，Ｙｙｔ２对Ｂ细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入的影响，同时测定ＳＯＤ活力和ＬＰＯ含量。结果 榄香烯提高了受照２．５Ｇｙ（０．５Ｇｙ×５ｄ）小鼠脾淋巴细胞亚群的辐射抗性，增强了Ｌ３Ｔ４对Ｂ细胞的辅助     

低剂量辐射诱导蛋白对正常人外周血淋巴细胞亚群的刺激效应

目的 探讨低剂量辐射(LDR)诱导蛋白对淋巴细胞亚群功能的影响。方法 观察LDR诱导蛋白对单克隆抗体铺皿法—直接法分离出的淋巴细胞亚群CD4、CD8、CDl9细胞转化功能的影响。结果 经LDR诱导蛋白作用后，亚群细胞14C—TdR掺入值增高，分别为对照组的118．23％、115．18％和121．62％。结论 LDR诱导蛋白能不同程度地刺激CD4、CD8、CDl9细胞DNA合成。     

淋巴细胞亚群微核表达的辐射效应研究

简述了淋巴细胞亚群微核检测方法、淋巴细胞亚群自发微核率和影响因素，以及关于电脑射效应的研究现状，为微核法用于辐射生物剂的未来发展提供了有益信息。     

裂变中子照射对小鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响Ⅰ.胸腺淋巴细胞亚群对裂变中子的辐射敏感性

小鼠经梯度剂量的裂变中子和６０Ｃｏγ射线照射后１ｄ，其胸腺细胞数和胸腺重量指数的变化，都显示了对中子和γ射线有辐射敏感和辐射抗性两种成分的存在，而同一种成分对中子辐射的敏感性又高于对γ射线的辐射敏感性。对中子辐射敏感成分的Ｄ０值依次为０．６４和０．３４Ｇｙ，对γ射线的Ｄ０值则相应为０．８３和０．８７Ｇｙ。ＲＢＥ值分别为１．３０和２．５６。照射后小鼠胸腺Ｔ细胞亚群的变化表明，两种Ｔ细胞亚群的辐射敏感性也是非均质性的，粗略评价，对中子和γ射线的辐射敏感性均是Ｌｙｔ＋２细胞高于Ｌ３Ｔ４＋细胞，而两类细胞对中子的辐射敏感性又均高于对γ射线的辐射敏感性，经计算各类细胞对中子照射的Ｄ３７值，Ｌ３Ｔ４＋细胞为６．１４Ｇｙ，Ｌｙｔ＋２细胞为３．２８Ｇｙ；对γ射线则分别为１１．３８和１０．４２Ｇｙ，由此得到的ＲＢＥ值分别为１．８５和３．１８。     

裂变中子照射对小鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响 Ⅱ.小鼠经裂变中子照射后胸腺淋巴细胞及亚群的动力学变化

目的：研究小鼠胸腺细胞及其亚群在裂变中子照射后损伤和修复的规律，并与大约相同致死效应的６０Ｃｏγ射线照射后的规律进行比较。方法：测定照后不同时间小鼠胸腺细胞总数和胸腺重量指数，并采用间接免疫荧光法，测定照后不同时间小鼠胸腺淋巴细胞Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞亚群的百分数。结果和结论：裂变中子和６０Ｃｏγ射线照射后小鼠胸腺重量指数均在照后第３天降至最低，而后的恢复速度差不多，但恢复水平前者一直低于后者，３１ｄ时的水平二者无显著差异。两种辐射照射后第３天胸腺细胞数几乎降至为０，随后的恢复中子照射稍逊于γ射线照射，３１ｄ的恢复水平基本一致。小鼠经裂变中子２．３Ｇｙ和６０Ｃｏγ射线４．５Ｇｙ照射后，第１天Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞百分率均下降，水平基本一致。中子照射第３天的Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞百分率降至更低（７０％以下），而γ射线照射的Ｌｙｔ＋２和Ｌ３Ｔ＋４细胞百分率则开始恢复。中子照射后经第７天明显恢复后，又出现第２次下降，３１ｄ仍未恢复至照前水平。γ射线照射后第３１天，Ｌｙｔ＋２细胞已恢复至照前水平，Ｌ３Ｔ＋４细胞则仍低于照前水平。     

自身免疫相关疾病患者外周血淋巴细胞亚群检测及其意义

目的探讨自身免疫相关疾病患者淋巴细胞亚群的变化特点。方法采用流式细胞术检测23例自身免疫病患者及20例正常人的外周血中T淋巴细胞（CD3＋细胞）、辅助性T细胞（CD4＋细胞）、T抑制性细胞毒细胞（CD3＋/CD8＋）、NK细胞（CD3-/CD16＋56）和NKT细胞（CD3＋/CD16＋56）,对两者百分比进行比较分析。结果患者组中T抑制性细胞毒细胞（CD3＋/CD8＋）的百分比和绝对值高于正常对照组（P〈0.05）。而患者组中CD4/CD8数值上低于正常对照组,但无明显差异。NK细胞（CD3-/CD16＋56）的百分比和绝对值明显低于对照（P〈0.01）,有显著统计学差异。结论可通过对淋巴细胞亚群的检测了解自身免疫病在其发生发展的过程中免疫系统的变化,并为采用的相关治疗提供依据。     

裂变中子照射对小鼠胸腺淋巴细胞亚群的影响：Ⅲ.小鼠？…

目的：研究小鼠胸遥细胞及其亚群在裂变中子照射后损伤和修复的规律，并与大约相同致死效应的＾６０Ｃｏγ射线照射后的规律进行比较。方法：测定照后不同时间小鼠胸腺细胞总数和胸腺重指数，并采用间接免疫荧光法，测定照后不同时间小鼠胸腺淋巴细胞Ｌｙｔ＾＋２和Ｌ３Ｔ＾＋４细胞亚群的百分数。结果和结论：裂变中子和＾６０Ｃｏγ射线照射后小鼠胸腺重量指数均在照后第３天降至最低，而后的恢复速度不多，但恢复水平前者一直低于     

慢性丙型肝炎外周血T淋巴细胞亚群的实验研究

应用抗人Ｔ淋巴细胞单克隆抗体ＣＤ系列检测３０例慢性丙型肝炎病例以及２０例健康成人的外周血Ｔ淋巴细胞ＣＤ_３、ＣＤ_４、ＣＤ_８、ＣＤ_１６亚群，以ＡＰＡＡＰ免疫酶标染色法测定。结果发现：慢性丙型肝炎组ＣＤ_４细胞数较正常对照组明显降低，ＣＤ_８细胞数较正常对照组明显升高，ＣＤ_３、ＣＤ_１６细胞数与正常对照组无显著差异。认为Ｔ淋巴细胞亚群异常所致的细胞免疫紊乱可能是慢性丙型肝炎发病的重要原因。     

局部放疗对肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群的影响

应用抗人T淋巴细胞单克隆OKT系列以间接免疫酶染色法检测了局部放疔的72倒恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群比率和数量, 结果表明, 40侧乳癌术后单纯放疗患者, 放疗后外周血血小板、白细胞数。淋巴细胞数都非常显着地减少, T₃、T₄、比率无显着变化, 而T₆比率显着地增加；T₃、T₄、T₆.淋巴细胞教都非常显着地减少。患者免疫功能明显下降, 32例实体瘤放疗后完全消失的患者。放疗后外周血血小板、白细胞数。淋巴细胞都无显着减少T₃, T₄T₆比率都无显着变化；T₃, T₄、T₆淋巴细胞数都无显着减少。患者免疫功能无明显下降。两组各免疫参数减少率的比较进一步表明：有实体瘤经款疗完全消失组白细胞数。淋巴细胞数, T淋巴细胞各亚群数的减少都显着少于单纯术后放疗组。结果提示放射线对实体瘤的杀伤效应有助于提高机体免疫功能, 减轻放射线杀伤外周血备免疫细胞尤其是T淋巴细胞的副作用, 乳癌术后放疗引起免疫功能下降应引起重视。     

淋巴细胞亚群及T淋巴细胞亚群在过敏性哮喘及肺炎中的意义

目的 研究过敏性哮喘、肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群及T淋巴细胞亚群改变情况,了解两种疾病患儿的免疫状况,为临床诊治提供参考.方法 收集过敏性哮喘及肺炎患儿各15例,同期选择15例健康儿童为对照,应用多色免疫荧光标记方法,检测患儿的淋巴细胞亚群,包括T细胞(CD3+)、T辅助/诱导细胞(CD4+)、T抑制/毒性细胞(CD8+)、自然杀伤细胞( CD16+ 56+)及B细胞(CD19+);应用细胞内免疫荧光标记方法,检测CD4+ IFN -y +Th1(简称Th1)、CD4+ IL -4+Th2(简称Th2)、CD4+IL- 17 +Th17(简称Th17).结果 过敏性哮喘患儿Th2、Th17与对照组比较均升高,CD3+、CD4+、CD8+、CD16+ 56+百分率明显则低于对照组及肺炎组,而CD19+及CD4+/CD8+均较对照组偏高(P＜0.05).肺炎组与对照组比较,仅CD4+有明显降低.结论 过敏性哮喘与肺炎患儿存在着不同的免疫学改变,过敏性哮喘改变较肺炎更明显;检测淋巴细胞亚群及Th1、Th2和Th17,对小儿过敏性哮喘与肺炎的诊断及治疗均有参考意义.     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对小鼠抗氧化酶和免疫细胞的辐射防护作用

目的探讨重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ）的辐射防护作用。方法观察６０Ｃｏγ射线５～７Ｇｙ照射对小鼠体内抗氧化酶和免疫细胞的影响，以及给予ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ后的抗放效应。结果与照射对照组比较，ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ可明显减轻受照小鼠血液和肝细胞浆中总超氧化物歧化酶（Ｔ－ＳＯＤ）、铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）的活性下降的程度。ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ亦可明显增强受照小鼠脾Ｔ淋巴细胞对刀豆蛋白Ａ的增殖反应和自然杀伤细胞的活性；提高小鼠全脾淋巴细胞、外周血白细胞和相对淋巴细胞计数；以及延长了３０天平均生存时间。不同给药方法中，辐射前后给药组的效果优于辐射前或辐射后给药组。结论抗氧化酶活性的降低和氧自由基作用的增强可能是电离辐射引起机体过氧化损伤，导致组织细胞功能异常的重要原因。ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ对小鼠抗氧化酶和免疫细胞以及整体均具有辐射防护作用，可能主要由于其直接清除氧自由基的功能，其次通过这种保护功能也促进其他抗氧化酶发挥了一定的协同作用。     

直肠癌术前放疗对癌巢内浸润T淋巴细胞亚群的影响

 目的 观察直肠癌术前放疗对癌巢内浸润T淋巴细胞亚群的影响.方法 选择1999年1月～2007年8月我院直肠癌单纯术前放疗患者1 07例入组研究,术前放疗30 Gy/10 f/12 d,2周后手术.回顾分析术前放疗对癌巢内T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8数量的影响,并进行放疗前后自身对照分析.结果 放疗后CD3比放疗前显著增多(P<0.01),放疗后CD8数量显著下降(P<0.05), 放疗后CD4/CD8比放疗前升高(P<0.01).放疗后CD3数量级别与直肠癌术前放疗近期局部疗效关系密切(P<0.01).结论 直肠癌术前放疗后的癌巢组织中CD3 浸润数目增多,CD4/CD8比值升高,放疗后CD3数量与近期局部疗效相关.     

低剂量辐射诱导小鼠胸腺细胞及其亚组的适应性反应

目的研究低剂量辐射预先照射以及随后大剂量照射后小鼠胸腺细胞Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）、ＣＤ３、ＣＤ４和ＣＤ８分子表达的变化。方法ＴＣＲ、ＣＤ３表达采用间接荧光流式细胞术检测,ＣＤ４、ＣＤ８表达采用双参数直接免疫荧光流式细胞术检测。结果实验结果表明：单纯１５ＧｙＸ射线全身照射后ＴＣＲ,ＣＤ３阳性细胞数以及ＣＤ４－Ｄ８－,ＣＤ４＋ＣＤ８＋,ＣＤ４＋ＣＤ８－和ＣＤ４－ＣＤ８＋细胞数明显减少,当１５ＧｙＸ射线全身照射前６小时预先照射００７５Ｇｙ时,可明显减轻其后１５Ｇｙ照射对ＴＣＲ＋,ＣＤ３＋,ＣＤ４＋ＣＤ８＋,ＣＤ４＋ＣＤ８－和ＣＤ４－ＣＤ８＋的损伤作用。表现为各亚组细胞数显著高于单纯１５Ｇｙ照射组。ＣＤ４－ＣＤ８－亚组的细胞数无明显变化。结论００７５ＧｙＸ射线全身照射能够诱导胸腺细胞ＴＣＲ＋,ＣＤ３＋,ＣＤ４＋ＣＤ８＋,ＣＤ４＋ＣＤ８－和ＣＤ４－ＣＤ８＋亚组细胞的适应性反应。     

放射性榄香烯三羰基铼配合物在荷小细胞肺癌裸鼠体内的分布及其对肿瘤的生长抑制作用

目的 观察放射性榄香烯三羰基铼(ETRC)对荷小细胞肺癌裸鼠模型的肿瘤生长抑制作用,并分析其在裸鼠体内的分布、靶向性。方法 以中草药有效成分β-榄香烯为起始原料,人工合成ETRC;制备荷H128小细胞肺癌BALB/c裸鼠模型,12只荷瘤裸鼠尾静脉注射ETRC,分别在不同时间测量肿瘤组织及各器官的放射性,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。将20只荷瘤裸鼠随机分为4组:①对照组;②榄香烯治疗组;③188Re治疗组;④ETRC治疗组。尾静脉注射相应试剂后24d比较肿瘤的体积和质量。结果 给药后6h肿瘤组织的放射性最强,为(6.35±0.33)%ID/g,此时肿瘤/血液放射性比值为2.59,肿瘤/肝放射性比值为4.07,肿瘤/脾放射性比值为3.87.给药后24d,肿瘤体积和质量分别为①组:(2.945±0.567)cm3,(5.438±1.232)g;②组:(1.860±0.263)cm3,(4.876±0.621)g;③组:(1.861±0.896)cm3,(4.691±1.595)g;④组:(0.601±0.152)cm3,(1.602±0.194)g。ETRC治疗组显着好于其他各组。结论 ETRC能有效抑制裸鼠小细胞肺癌的生长,对小细胞肺癌治疗有潜在的应用前景。     

榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性影响及其机制的研究

目的 探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响及其分子机制。方法 克隆形成实验检测10、20 μg/ml榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞的放射敏感性影响。细胞分为空白对照组、单纯照射组(4 Gy X射线照射)、单纯药物组(给予10、20 μg/ml榄香烯乳);联合照射组(给予10、20 μg/ml 榄香烯乳24 h后4 Gy X射线照射)。Western blot检测DNA-PKcs、Bcl-2及P53蛋白的表达变化,并分析DNA-PKcs与Bcl-2、P53表达之间的相关性。结果 10 μg/ml榄香烯乳的放射增敏比SER_D0、SER_Dq 为1.54±0.20和1.43±0.15;20 μg/ml榄香烯乳SER_D0、SER_Dq 为1.63±0.32及1.75±0.19。与单纯照射组相比,10、20 μg/ml榄香烯乳联合照射组细胞的DNA-PKcs蛋白表达明显减少(t=7.52、8.33, P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显减少(t=10.74、11.33, P<0.05),P53蛋白表达明显增加(t=-9.25、-7.66P<0.05)。DNA-PKcs与P53蛋白表达显著负相关(r=-0.569,P<0.05),与 Bcl-2蛋白表达显著正相关(r=0.755, P<0.05)。结论 榄香烯乳可增加人肺腺癌A549细胞的放射敏感性,其机制与下调DNA-PKcs表达抑制DNA双链损伤修复和上调p53,下调Bcl-2表达促进细胞凋亡有关。     

老年胆总管结石患者开腹术后降钙素原T淋巴细胞亚群的变化及临床意义

 目的 探讨开腹手术对老年总管结石患者术后T淋巴细胞亚群的影响及降钙素原的变化。方法 将老年组与中青年组患者按胆总管结石分类分别行胆管切开取石、T管引流术或胆管空肠吻合术。于术前1 d和术后1、3、7 d分别测定外周血血常规、降钙素原、T淋巴细胞及其亚群的数量等指标,进行分析。结果 老年组降钙素原比中青年组各组均明显增加(P＜0.05),老年组组内第1、3 、7 天比术前均明显增加(P＜0.05),中青年组组内第1 、3 天比术前均明显增加(P＜0.05);老年组比中青年组CD3⁺细胞各组间明显减少(P＜0.05),老年组组内第3天比术前明显减少(P＜0.05);老年组比中青年组CD8+细胞组间术前及术后第7 天明显减少(P＜0.05);老年组与中青年组CD4⁺细胞组间术前、术后第1 、7 天明显减少(P＜0.05),老年组组内第3 天与术前明显减少(P＜0.05);中青年组组内术后第7天与术前明显减少(P＜0.05);老年组与中青年组CD4⁺/CD8⁺细胞各组间均明显减少(P＜0.05),老年组组内第3天与术前明显减少(P＜0.05)。结论 老年患者降钙素原比中青年增加,老年患者T淋巴细胞亚群数量减少,开腹手术对老年与中青年胆管结石患者免疫功能影响存在差异。     

电子射线照射大鼠胶原及自由基改变的研究

目的 探讨加速器电子射线局部照射SD大鼠致放射损伤后胶原表达的变化、自由基的改变及两者的相关性。方法 采用直线加速器局部照射制作SD大鼠的辐射损伤模型，观察MDA、NOS、SOD、GSH-PX及Ⅰ/Ⅲ型胶原mRNA表达及蛋白含量的改变。结果 照射后在一定剂量范围内MDA、NOS上升；SOD、GSH．PX则下降，血清中指标变化显著而皮肤中变化无明显规律性。受照射局部皮肤Ⅰ/Ⅲ型胶原mRNA表达及蛋白含量有明显改变，但其自由基的变化与胶原的变化无明显相关性。结论 辐射损伤后能在全身产生自由基，其对受照射局部皮肤组织中胶原表达改变的作用不大，在电子射线放射损伤中胶原可能起重要作用。     

hape反义核酸的构建及其对细胞辐射效应的影响

目的克隆人ＡＰ内切核酸酶基因（ｈａｐｅ）ｃＤＮＡ全长编码序列,研究ｈａｐｅ反义核酸对细胞辐射敏感性和Ｈ２Ｏ２细胞毒的影响。方法反转录ＰＣＲ克隆人ｈａｐｅｃＤＮＡ,应用基因重组技术构建真核反义表达载体,用Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ介导基因转染,细胞克隆形成法分析细胞存活。结果从人胚肺（ＨＥＬ）细胞中克隆出ｈａｐｅｃＤＮＡ全长编码序列,构建了ｈａｐｅ的真核反义表达质粒ｐＣＩＮ／ＡＳｈａｐｅ并转染ＨＯＣ８细胞,研究表明ｈａｐｅ反义核酸,提高了ＨＯＣ８细胞对γ射线和Ｈ２Ｏ２损伤的敏感性。结论利用分子生物学技术手段,阻断细胞ＤＮＡ修复过程中的某一环节,是细胞辐射或化疗药物增敏的一种有效途径。     

重组人Flt3配体联合其它细胞因子对免疫细胞的体外抗辐射作用研究

目的：研究重组人Flt3配体(rhFL）及其他细胞因子在体外免疫细胞的抗辐射作用及其可能机理。方法：用流细胞仪分析照射前后外周血单个核细胞（PBMC）表型及rhFL对受PBMC有型的影响。[^3H]-TdR测定细胞的增殖能力。PBMC来源贴壁细胞经细胞因子诱导树突状细胞（DC）,并观察辐射对诱导DC的影响及rhFLDC的抗辐射效应;用PI－Annexin,V、DNALadder分析细胞凋亡。结果：PBMC在体外经15Gy照射后,CD^8 、CD^56 细胞明显减少,照射产细胞培养液中加入100ng/mlrhFL,可促进CD^56 细胞的;有应用rhFL及照射后联合应用IL－2等细胞因子,可促进受照射CD^8 、CD^56 细胞的恢复;rhFL可协调,GM－CSF、IL－4、TNFα产生DC,并使DC细胞的数量较常规方法诱导产生的数量增加6倍,而rhFL对DC分化诱导的辐射作用有明显的抗性;rhFL可抑制照射所致的细胞凋亡。结论：rhFL单独或与其他细胞因子联合应用,对人外周血免疫细胞具有明显的抗辐射效应,对这辐射损伤机体遥调节和恢复具有重要的使用价值。