番荔枝总内酯平衡溶解度和油水分配系数的测定

目的:测定番荔枝总内酯的平衡溶解度以及表观油水分配系数,为体内吸收和设计其新剂型提供参考。方法:采用饱和法和超声振荡法分别测定番荔枝总内酯在不同溶剂中的平衡溶解度以及在正辛醇-水/缓冲溶液中的表观油水分配系数,采用比色法测定番荔枝总内酯的含量。结果:番荔枝总内酯在水和石油醚中的溶解度分别为0.06g·L-1和1.27g·L-1,其在乙醚中的溶解度最高,为482.28g·L-1;超声振荡80min后P值达到平衡,25℃下番荔枝总内酯的表观正辛醇/水分配系数P为54.91(logP=1.74),在pH 6.8的缓冲溶液中的表观分配系数最大为32.03(logP=1.51)。结论:番荔枝总内酯易溶于常用的有机溶剂,在中等极性溶剂的溶解度较大;平衡方法、平衡时间及pH对油水分配系数都有一定的影响。     

雷公藤红素纳米混悬剂的制备及其抗肿瘤作用研究

目的制备雷公藤红素纳米混悬剂,并进行体内外抗肿瘤作用研究。方法采用超声注入联合旋转蒸发法制备雷公藤红素纳米混悬剂,以粒径大小为指标,筛选合适的稳定剂;采用动态光散射法、透射电镜考察粒径和形态,并对其不同介质稳定性、体外释放、溶血性、体外抗肿瘤活性进行研究;建立H22荷瘤小鼠模型,以雷公藤红素注射液为对照组,2 mg/kg iv给药,考察体内抗肿瘤作用。结果聚乙二醇-聚己内酯(m PEG2000-PCL2000)为雷公藤纳米混悬剂的优良的稳定剂,所制备的纳米混悬剂粒径为(67.1±3.0)nm,Zeta电位为(-10.4±1.45)m V,多分散性指数为0.232±0.08,近乎为球形,分布比较均匀。在磷酸缓冲液(PBS)、血浆、生理盐水、5%葡萄糖中均稳定;体外缓慢释放,在144 h累积释放率达到74.04%;MTT结果显示雷公藤红素纳米混悬剂对HepG2细胞的毒性强于溶液(IC50,1.179μg/m L vs 2.377μg/m L,P0.05)。体内研究中雷公藤红素纳米混悬剂对H22荷瘤小鼠的的抑瘤率显著高于注射液组(70.36%vs 51.1%,P0.05)。结论制备的雷公藤红素纳米混悬剂粒径小、载药量高、稳定性好,显著提高了雷公藤红素的抗肿瘤效果,可以作为雷公藤红素作为抗肿瘤药物应用的合适剂型。     

槲皮素纳米混悬剂的制备及其性能研究

目的制备高载药量、小粒径的槲皮素纳米混悬剂,并进行性质考察。方法采用纳米沉淀–高压均质法制备,以粒径分布、药载比、稳定性为指标对处方和工艺进行优化,并对最优处方进行体外性质考察。结果以超声注入联合高压均质法制备,最佳处方为TPGS为稳定剂、DMF为有机试剂,药载比为5∶1;最佳工艺条件为低温10℃超声、200 MPa、循环5次。制备得到的槲皮素纳米混悬剂粒径为(173.21±0.90)nm,电位为(-19.02±0.15)m V,载药量为(80.40±1.44)%,包封率为(96.41±1.72)%。药物在纳米粒中以结晶状态存在,能够体外缓释36 h。结论利用TPGS可制备高载药量、小粒径的槲皮素纳米混悬剂,其体外具有明显缓释作用,解决了槲皮素水溶性差的难题,具有较好的应用前景。     

番荔枝子不同部位提取物总内酯含量及其急性毒性比较

目的：测定番荔枝子的醇提物与石油醚萃取物总内酯含量;观察番荔枝子醇提物及其石油醚萃取物的急性毒性。评价其安全性。方法：渗漉法帝】备番荔枝子醇提物,并从醇提物中萃取得到石油醚部位．对醇提物及石油醚萃取物同时进行急性毒性试验,比较LD,,值。同时,测定醇提物及石油醚萃取物的番荔枝总内酯含量。结果：番荔枝子醇提物的LD9,值为（1．04＋0．18）g·kg^-1【折合成生药量为（4．34±0．75）g·kg^-1,石油醚萃取物LD50值为（2．53±0．39）g·kg^-1。【折合成生药量为（14．10±2．17）g·kg^-1,而醇提物的番荔枝总内酯含量为12．00％,石油醚萃取物的番荔枝总内酯含量为9．84％,且石油醚中番荔枝总内酯量占整个醇提物中总内酯量的61．36％。结论：番荔枝子石油醚萃取物中含低极性番荔枝内酯较多,其毒性也降低。     

西瑞香素纳米混悬剂的制备及其体外抗肿瘤作用研究

目的制备西瑞香素纳米混悬剂,并考察其对多种肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法以粒径、Zeta电位、多分散性指数(PDI)为指标,考察稳定剂、药载比、超声温度、均质温度、均质次数对西瑞香素纳米混悬剂反溶剂沉淀法制备的影响,优化最佳处方和工艺条件。观察西瑞香素纳米混悬剂的透射电镜表征,并进行X射线衍射、差示扫描量热分析,考察其在血浆、PBS中的稳定性以及载药量、体外释放情况,采用MTT法比较其对BT474、SKBR-3、A549、He La、Hep G2细胞的体外细胞毒性。结果最佳处方和工艺条件:TPGS为稳定剂,药载比1∶1,共同溶解于DMSO中,在超声(25℃,250 W)条件下,缓慢滴注于去离子水中,透析除去有机溶剂,高压均质(25℃,150 MPa)20次,即得西瑞香素纳米混悬剂,其平均粒径为(163.1±5.4)nm,Zeta电位为(-11.4±0.7)m V,PDI为0.15±0.04。西瑞香素纳米混悬剂近乎为球形,大小较均匀;在血浆中稳定存在,不存在溶血现象,满足静脉注射需求,平均载药量为(39.16±1.09)%。西瑞香素纳米混悬剂对5种受试细胞的生长抑制作用显著提高,并呈现剂量相关性,尤其是对SKBR-3、A549、He La、Hep G2细胞,IC_(50)在2.1~3.4μg/m L。结论西瑞香素纳米混悬剂具有小粒径、高载药量、显著肿瘤细胞毒性等优点,在抗肿瘤研究方面具有良好的应用前景。     

紫杉醇纳米混悬剂的制备与表征

目的 制备紫杉醇纳米混悬剂,并表征其理化性质.方法 采用重结晶结合高压均质法制备紫杉醇纳米混悬剂,以纳米粒的粒径和Zeta电位为指标,考察紫杉醇纳米混悬剂的影响因素,并对制得的纳米混悬剂进行表征.结果 紫杉醇纳米混悬剂的粒径为214.4 nm,跨距为0.46,平均Zeta电位为-22.7 mV,体系稳定.结论 制备的纳...     

夫西地酸纳米混悬剂原位凝胶的制备与评价

目的制备夫西地酸纳米混悬剂原位凝胶并评价其质量。方法采用反溶剂沉淀-超声法制备夫西地酸纳米混悬剂,并通过单因素实验考察了纳米混悬剂的处方和制备工艺;以泊洛沙姆作为凝胶基质将夫西地酸纳米混悬剂制备成原位凝胶,并以泊洛沙姆407 (P407)与泊洛沙姆188 (P188)的质量浓度作为考察因素,以凝胶化温度作为评价指标,采用星点设计-效应面法优化原位凝胶处方,得到满足凝胶化温度范围的设计空间;评价了夫西地酸纳米混悬剂的外观形态、粒径分布和Zeta电位等理化性质;比较了夫西地酸原料药、夫西地酸纳米混悬剂以及原位凝胶的体外药物释放行为。结果制备的夫西地酸纳米混悬剂平均粒径为335.7±34.5 nm,多分散性指数(PdI)为0.216±0.015,Zeta电位为-9.4±0.8 mV;扫描电镜下显示夫西地酸纳米混悬剂呈球形或近球形分布;通过实验优化得到夫西地酸纳米混悬剂原位凝胶的设计空间,在设计空间内任取一点:P407的质量浓度为22.0 mg·mL~(-1),P188的质量浓度为6.0 mg·mL~(-1),凝胶温度为34.0℃;夫西地酸纳米混悬剂与原料药相比释药速度及程度显著提高,1 h内药物累积释放完全,而原位凝胶可减慢夫西地酸纳米混悬剂的释药速率。结论将夫西地酸制备成纳米混悬剂,可提高药物溶解度,改善药物释放速度,进一步制备成原位凝胶有望提高药物的治疗效果。     

奈韦拉平纳米混悬液的制备及大鼠体内药动学研究

目的：：制备奈韦拉平纳米混悬剂,考察其在大鼠口服给药后体内的药动学特征。方法：采用高压均质法制备奈韦拉平纳米混悬剂,以纳米混悬剂粒径分布、PdI和Zeta电位为指标,考察了奈韦拉平纳米混悬剂的影响因素,并对制得的纳米粒进行表征;采用高效液相色谱法测定大鼠血浆中的奈韦拉平浓度,使用3P97软件计算相应的药动学参数。结果：奈韦拉平纳米混悬液平均粒径为(456.1±72.1) nm,PdI为(0.441±0.072),Zeta电位为(-24.4±4.7) mV。奈韦拉平混悬液和奈韦拉平纳米混悬剂在大鼠体内的AUC0-12分别为(7.57±0.52)和(11.72±1.83) mg·h·L-1;t1/2分别为(2.45±0.31)和(3.16±0.39) h;Tmax分别为(1.43±0.38)和(1.61±0.32) h;Cmax分别为(1.62±0.42)和(3.15±0.52) mg·L-1。结论：奈韦拉平纳米混悬液能够明显改善大鼠体内奈韦拉平的药动学行为,与奈韦拉平混悬液相比显著提高了药物的生物利用度。     

番荔枝内酯三种不同提取方法的比较

目的 比较不同提取方法从光叶番荔枝种子中提取番荔枝总内酯的得率.HT5"H方法 以番荔枝总内酯及具有显著抗肿瘤活性的番荔枝内酯单体成分Squamocin提取率为考察指标,以HPLC及比色法为含量测定方法,比较不同提取方法所得总内酯及Squa mocin的含量.结果 醇浸渍、水浸渍醇渗漉和超临界CO2萃取法所得总内酯在原药材中含量分别为2.28%,3.59%,17.85%,Squamocin含量分别为0.1467%,0.1307%,0.1138%.结论 超临界CO2萃取番荔枝内酯得率较溶剂提取法高,且操作简单,为较好的提取方法.     

番荔枝内酯类化合物体外抗肿瘤活性研究

目的研究不同结构类型的番荔枝内酯对多种人肿瘤细胞的体外抗肿瘤活性,探讨其构效关系。方法选取代表不同结构类型的番荔枝内酯单体,以人宫颈癌细胞株(Hela)、人肺癌细胞株(A-5408)、人乳腺癌细胞株(MCF-7)、人胃癌细胞株(SGC-790 1)和人肝癌细胞株(SMMC-75 41)为瘤株,用MTT法筛选各番荔枝内酯单体的抗肿瘤活性。结果邻双四氢呋喃番荔枝内酯(1~5)的抗肿瘤活性大于间位双四氢呋喃番荔枝内酯(6~10)和单四氢呋喃番荔枝内酯(11~12);间位双四氢呋喃番荔枝内酯对部分肿瘤细胞的抗癌活性比单四氢呋喃番荔枝内酯强;赤式双四氢呋喃环番荔枝内酯(6)比苏式构型(7)活性更强;顺式番荔枝内酯(12)有时显示更显著的抗癌选择活性;S构型比R构型的番荔枝内酯具有更好的选择活性。结论通过体外抗肿瘤活性研究,进一步揭示了番荔枝内酯的构效关系。     

葫芦素B-聚乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的构建与药效学评价

目的 以聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）作为纳米制剂载体材料将葫芦素B制备成纳米粒,并考察其对HepG2肝癌细胞的抑制效果。方法 使用乳化溶剂蒸发法制备葫芦素B-PLGA载药纳米粒,以PLGA浓度（X₁）、PVA浓度（X₂）和药物浓度（X₃）作为考察因素,以载药纳米粒的粒径大小（Y₁）和包封率（Y₂）作为评价指标,应用中心复合设计-效应面法优化葫芦素B-PLGA载药纳米粒处方;测定了纳米粒的粒径分布和Zeta电位值,通过透射电镜观察其微观形态,并考察了葫芦素B-PLGA载药纳米粒的体外药物释放特性;比较了葫芦素B与葫芦素B-PLGA载药纳米粒对HepG2肝癌细胞的抑制效果。结果 葫芦素B-PLGA载药纳米粒的最优处方组成为：PLGA浓度为9.0%,PVA浓度为2.0%,药物浓度为4.5%,制备的纳米粒粒径为（145.4±15.8） nm,Zeta电位值为（-7.6±0.8） mV;透射电镜下可观察到纳米粒表面光滑,分布均匀;葫芦素B-PLGA载药纳米粒释药前期出现突释,后期平缓,48 h药物释放达到86%;葫芦素B-PLGA载药纳米粒对HepG2肝癌细胞的抑制作用显著高于葫芦素B。结论 葫芦素B-PLGA载药纳米粒可延缓药物释放,提高对HepG2肝癌细胞的抑制活性,为进一步临床研究奠定实验基础。     

香菇多糖–番荔素纳米粒的性能考察及其对小鼠黑色素瘤肺转移癌的抑制作用

目的 考察香菇多糖–番荔素纳米粒的性能,及其对小鼠黑色素瘤肺转移癌的体内外抑制效果。方法 采用反溶剂沉淀法制备香菇多糖–番荔素纳米粒,以动态光散射法测定粒径、分散系数（PDI）及Zeta电位,及其在不同生理介质（5%的葡萄糖、生理盐水、PBS的混悬液）中的稳定性;采用透射电子显微镜观察纳米粒的形态、大小;精确称量香菇多糖–番荔素纳米粒质量,并采用HPLC法测量番荔素中番荔辛,计算载药量;用酶标仪在540 nm处测量不同浓度（2、1.5、1、0.5、0.25、0.125 mg/mL）香菇多糖–番荔素纳米粒与5%葡萄糖溶液等渗液的吸光度,并计算溶血率;采用透析袋法考察香菇多糖–番荔素纳米粒的体外释放行为。用划痕实验与MTT实验对香菇多糖–番荔素纳米粒进行体外药效学考察。构建黑色素瘤肺转移癌小鼠模型,以紫杉醇注射液为阳性对照,对不同剂量香菇多糖–番荔素纳米粒进行体内药效学研究。结果 香菇多糖–番荔素纳米粒的粒径为（160.6±1.0）nm,PDI为0.082±0.023,Zeta电位为（-28.10±1.14）m V,透射电镜下呈球状。香菇多糖–番荔素纳米粒在5%的葡萄糖、血浆中稳定,无溶血...     

卡巴他赛白蛋白纳米粒的制备及其体外生物相容性评价

目的 制备卡巴他赛白蛋白纳米粒（CBZ-BSA-Gd-NP）以降低药物毒性,并评价其体外生物相容性。方法 采用生物矿化法制备CBZ-BSA-Gd-NP,对其处方工艺进行优化,对粒径、Zeta电位、载药量等性质进行表征,并采用体外溶血试验考察其体外血液相容性。结果 制得的纳米粒包封率为63.04%,载药量为10.51%,平均粒径为（166.1±4.7） nm,粒径的多分散系数（PDI）为0.256,Zeta电位为（-18.14±1.16） mV,与卡巴他赛-吐温溶液相比,体外溶血作用显著降低。结论 该方法操作简便,制备的CBZ-BSA-Gd-NP载药量高,粒径均匀,体外血液相容性好,增加了药物使用的安全性。     

负载阿霉素的黄芩苷纳米粒的制备及其体外性能评价

目的 制备负载阿霉素的黄芩苷纳米粒（DOX/SA-SS-BAI NPs）,并评价其体外性能。方法 构建以胱胺为连接臂的海藻酸钠–黄芩苷聚合物,并负载阿霉素,得到DOX/SA-SS-BAI NPs。对DOX/SA-SS-BAI NPs的理化性质进行表征;采用HepG2细胞进行MTT实验验证其细胞毒性。结果 DOX/SA-SS-BAI NPs粒径为（158.2±2.8）nm,PDI为（0.241±0.008）,Zeta电位为（-24.1±0.3）m V,包封率为（64.34±0.25）%,载药量为（16.22±0.06）%。体外释放显示载药纳米粒具有良好的还原响应性;MTT实验证明DOX/SA-SS-BAINPs对HepG2细胞具有良好的抑制作用;细胞摄取实验表明DOX/SA-SS-BAI NPs在HepG2细胞内较快地释放阿霉素。结论 制备的DOX/SA-SS-BAI NPs具有较好的理化性质和体外抗癌作用。     

Lipid nanoparticles loaded with 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin-phospholipid complex: in vitro and in vivo studies

Abstract

7-Ethyl-10-hydroxy-camptothecin (SN38), the active metabolite of irinotecan (CPT-11), is an effective antineoplastic agent against many malignancies. Although it is 100-fold to 1000-fold more potent than CPT-11, the clinical utility of SN38 has been extremely restricted because of its poor solubility in any pharmaceutically acceptable solvents. The aim of this study was to develop SN38 nanoparticles (SN38-PC-LNs) using pharmaceutically acceptable excipients, and investigate the therapeutic efficacies in vitro and in vivo. SN38-phospholipid complex (SN38-PC) was prepared and loaded into lipid nanoparticles. The particle size was approximately 200?nm with a narrow size distribution. A high encapsulation efficiency of 88.11%?±?1.41% and drug loading of 9.55%?±?0.84% were achieved under the optimal condition. SN38-PC-LNs exhibited potent cytotoxic effects against a panel of human tumor cell lines (HT-29, HepG2, A549 and MCF-7). In vivo evaluation proved the enhanced antitumor efficacy of SN38-PC-LNs in mice bearing S180 tumor as well. The results from this study demonstrated an effective formulation of SN38 has been developed, which is promising for the delivery of SN38 for tumor chemotherapy.     

pH敏感型热休克笼形蛋白纳米载体的构建及其理化性质评价

目的 设计并制备具有靶向肿瘤且pH敏感的热休克蛋白（heat shock proteins,HSP）笼形蛋白纳米递药系统,并对其理化性质进行表征。方法 采用基因全合成与蛋白质重组表达技术纯化HSP为母版,通过表面官能团功能化制备得到修饰穿膜肽Tat、聚乙二醇包衣的热休克笼形蛋白纳米载体（PT-HSP）。通过透射电镜、纳米粒度与Zeta电位测定仪对其形态、粒径及Zeta电位进行表征,并建立HPLC测定其载药量与包封率。考察载紫杉醇（paclitaxel,PTX）的PT-HSP在生理pH条件（pH 7.4）与肿瘤pH条件（pH 6.5）下的体外释药行为。结果 形态学结果表明,PT-HSP是呈现典型双层结构的均一球体,平均粒径为（154.4±23.6） nm,Zeta电位为（-2.6±0.7） mV。HPLC测得载PTX的PT-HSP的包封率为（75.3±3.6）%,载药量为（7.0±0.2）%。体外释药试验结果表明PT-HSP在pH 7.4条件下的释放速率显著慢于pH 6.5条件下的释放速率（P<0.01）。结论 本研究制备得到的pH敏感的HSP笼形蛋白智能纳米递药系统具有载药量高、稳定性强及智能靶向等优点,有望成为一种安全、有效、智能的抗肿瘤药物载体。     

雷公藤甲素叶酸靶向纳米胶束的制备及其体外抗炎作用研究

目的 制备雷公藤甲素叶酸靶向纳米胶束（TP@PCL-PEG-FA）,并研究其体外抗炎效果。方法 采用薄膜水化法制备TP@PCL-PEG-FA胶束,对粒径和电位进行表征,观察其形态特征,采用超滤法测定包封率和载药量,同时考察药物的体外释放。观察胶束的摄取效率,考察体外抗炎作用。结果 TP@PCL-PEG-FA胶束的平均粒径为（34.1±5.1）nm,Zeta电位为（-10.1±2.2）m V,呈类球形,粒径分布均一。包封率为（85.7±5.8）%,载药量为（1.8±0.5）%。TP@PCL-PEGFA胶束均能够相对缓慢释放药物,具有缓释效果。与普通非靶向PCL-PEG胶束相比,PCL-PEG-FA胶束在脂多糖刺激的RAW 264.7细胞中的摄取效率明显提高,TP@PCL-PEG-FA胶束有更强的体外抗炎效率。结论 制备了雷公藤甲素的叶酸靶向的TP@PCL-PEG-FA胶束,具有更好的体外靶向抗炎作用,为雷公藤甲素的纳米递药系统提供了一种新策略和新思路。     

1,3-二羟基异丙氧基-琥珀酸-8-莪术醇酯纳米混悬剂的制备及其性能研究

目的制备1,3-二羟基异丙氧基-琥珀酸-8-莪术醇酯纳米混悬剂(Cur-p-NS),并考察其一般特性、载药量和体外释放特性。方法采用超声–溶剂沉淀法制备Cur-p-NS,考察其粒度大小,多聚分散系数和Zeta电位。结果 Cur-p-NS的平均粒径为162.60±2.12 nm,多分散系数为0.182±0.002,Zeta电位为-24.60±8.97 m V,平均载药量为0.942 mg/mg,累积释放率可达到77%。结论 Cur-p-NS制备工艺简单和效果好,具有持续释放的特性。     

载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒的制备及其体外抗肿瘤活性

目的 制备载姜黄素的透明质酸-熊果酸-硫辛酸交联纳米粒（Cur/cLA-HU NPs）,并进行体外抗肿瘤活性评价。方法 以载药量、包封率为指标,采用超声法,通过单因素考察优化Cur/cLA-HU NPs的制备工艺,并对Cur/cLA-HU NPs的粒径、Zeta电位、形态和体外释药情况进行评价。通过荧光倒置显微镜分析HepG2细胞对Cur/cLA-HU NPs的摄取,以MTT法考察Cur/cLA-HU NPs对HepG2细胞的毒性。结果 最佳载药工艺为：以甲醇为药物姜黄素有机溶剂,以药质比4∶10进行投料,超声于100 W下次数为3次,每次处理3 min,超声程序设置为开2 s、停4 s。Cur/cLA-HU NPs的包封率为（87.91±1.51）%,载药量为（16.64±0.45）%,粒径为（172.3±2.57）nm,PDI为（0.174±0.021）,分散均匀,Zeta电位为（−35.3±2.12）mV。Cur/cLA-HU NPs具有还原响应性,释放药物的快慢受到GSH浓度的影响;靶向肿瘤细胞,且被细胞快速摄取;对HepG2人肝癌细胞增殖具有明显抑制作用。结论 Cur/cLA-HU NPs载药量和包封率高,其体外抗肿瘤活性稍优于姜黄素,具有肿瘤靶向性。     

土贝母皂苷甲长循环脂质体的制备及体外性质考察

目的 制备土贝母皂苷甲长循环脂质体（tubeimoside A long-circulating liposomes,TA-LC-Lipo）,并进行体外性质考察。方法 乙醇注入法制备TA-LC-Lipo;采用HPLC测定包封率及体外释放率;通过Marlvern激光粒径分析仪测定粒径和Zeta电位;肉眼观察法和紫外分光光度法评价其溶血作用。结果 确定处方为大豆磷脂浓度10 mg·mL^-1、药脂比1：10、大豆磷脂：胆固醇=4：1、DSPE-PEG 2000的摩尔含量为5%。制备得到的TA-LC-Lipo的平均粒径、PDI、电位、包封率分别为123.0 nm,0.134,-1.20 mV,86.2%。结论 制得的TA-LC-Lipo粒度分布均匀,包封率较高,有较好的缓释作用,并能有效改善土贝母皂苷甲的溶血现象。