西洋参药材皂苷类成分HPLC-UV-ELSD特征图谱及模式识别研究

采用HPLC-UV-ELSD串联技术,建立西洋参药材皂苷类成分HPLC-UV-ELSD特征图谱的质量控制方法。色谱柱为Agilent Extend-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水二元梯度洗脱模式,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为203 nm,漂移管温度为106.5℃,空气流速为2.9 L·min-1,对20批西洋参药材进行HPLC-UV-ELSD测定,采用聚类分析和主成分分析对特征图谱数据进行了模式识别研究,并指认了人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd及拟人参皂苷F11等8个色谱峰。所建立的西洋参皂苷类成分特征图谱特征性和专属性强,方法快速、简便、可靠,可用于西洋参质量控制及综合评价。     

活性三七饮片指纹图谱研究及单体皂苷含量测定

目的:探讨活性三七饮片指纹图谱及单体皂苷含量测定结果.方法:采用高效液相色谱法,检测活性三七药材的五个指标成分含量,分析指纹图谱,并测定单体皂苷含量.结果:传统干燥三七供试液与活性三七供试液67min内均呈现所有成分的色谱峰,指纹图谱峰数无明显变化;相比传统干燥三七药材,活性三七药材中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re及Rd含量明显提升,分别为0.28％、1.84％、1.88％、0.24％、0.45％.结论:活性三七指纹图谱峰能用于活性三七饮片的质量控制,且活性三七饮片中皂苷药效成分可最大限度保留.     

白芍药材主根与根茎的HPLC指纹图谱比较研究

目的:建立白芍药材主根与根茎的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并比较两者的异同。方法:色谱柱为Phenomenex C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为230 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以芍药苷为参照,测定白芍药材主根与根茎部分的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行共有峰指认和相似度评价。结果:白芍药材主根与根茎的HPLC图谱有9个共有峰;白芍药材主根与根茎之间相似度>0.9。结论:该研究所建指纹图谱可为白芍药材的鉴别和质量评价提供参考,白芍药材主根与根茎有效成分一致,差异性较小。     

竹节参化学成分及指纹图谱初步研究

目的:研究竹节参中皂苷类化学成分,并对其指纹图谱进行初步研究。方法:利用大孔吸附树脂柱、硅胶柱、制备型高效液相色谱(HPLC)法进行化合物的分离纯化,根据其理化性质和光谱数据进行结构鉴定;并研究湖北恩施产竹节参药材的HPLC指纹图谱。结果:从竹节参中分离得到3种皂苷类化合物,鉴定了其中2种,分别为人参皂苷Rd和人参皂苷Re。2个已鉴定化合物在湖北恩施产竹节参药材中含量较低。结论:本试验可为科学评价及有效控制竹节参药材的质量奠定基础。     

西洋参血清指纹图谱及其抗疲劳谱效关系初步观察

目的观察灌胃给药西洋参后大鼠血清指纹图谱与抗疲劳间的谱效关系,以探讨西洋参抗疲劳的物质基础。方法利用UPLC-Q-TOF-MS建立给药后大鼠血清指纹图谱,并通过大鼠游泳时间、肝糖原含量、血尿素氮(BUN)含量和血清乳酸(LA)含量观察西洋参的抗疲劳作用,用偏最小二乘回归(PLSR)法对西洋参入血成分指纹峰与抗疲劳指标进行相关性分析。结果从西洋参血清指纹图谱中筛选出8个入血成分,通过PLSR分析发现人参皂苷Re、Rb1、Rb2与抗疲劳呈显著正相关性。结论人参皂苷Re、Rb1、Rb2为西洋参抗疲劳的潜在生理活性物质。     

骨痨敌注射液HPLC指纹图谱研究

目的建立中药复方制剂骨痨敌注射液的HPLC指纹图谱分析方法,对制剂的质量进行控制。方法采用ECOSIL C_(18)柱(250 mm×4.60 mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长:203 nm,进样量:10μL。结果通过对25批制剂进行指纹图谱分析,标定出9个共有峰。采用对照品指认了毛蕊异黄酮葡萄糖苷、柚皮苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1 5个色谱峰。并运用"中药指纹图谱计算机辅助相似度计算软件",计算25批注射液的相似度在0.985~0.997之间。结论所建立的HPLC指纹图谱分析方法专属性强、重复性良好,可用于骨痨敌注射液的质量评价。     

人参药材的高效液相色谱特征图谱及聚类分析

目的建立人参药材的特征图谱研究方法并进行聚类分析。方法色谱柱:Waters Symmetry Shield RP18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水进行梯度洗脱;柱温:35℃,流速:1 m L·min-1,检测波长为203 nm。结果建立了18批不同产地人参药材皂苷类成分的HPLC特征图谱,特征图谱中有20个共有色谱峰,对其中7个主要色谱峰进行了化学指认。方法的精密度,稳定性和重复性试验的相对保留时间和相对峰面积RSD均<5%。根据聚类分析结果,可将人参药材分为两类,一类人参药材的生长年限在5~8年,另一类人参药材生长年限在15~20年。结论该方法操作简便、准确可靠,可用于人参质量的评价。     

绞股蓝总苷片的指纹图谱及含量测定

目的采用超高效液相色谱法建立中药制剂绞股蓝总苷片的指纹图谱,并同时测定其中人参皂苷Rb1和绞股蓝皂苷XLIX的含量。方法采用Kromat Universil XB C18色谱柱(150 mm×2.1mm,3μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2mL·min-1,检测波长为203nm,柱温为30℃;建立绞股蓝总苷片指纹图谱,运用中国药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件"对10批制剂进行相似度评价,并对其中2个色谱峰进行指认及含量测定。结果 10批绞股蓝总苷片指纹图谱中标定了17个共有色谱峰,相似度值为0.983~0.995。人参皂苷Rb1和绞股蓝皂苷XLIX质量浓度分别在4.2~42.0mg·L-1和9.4~94.0mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.5%和99.4%。结论用该方法所建立的皂苷类指纹图谱方法,结合有关成分的含量测定能更好地控制其质量,对提高绞股蓝总苷片的整体质量控制提供参考依据。     

人参饮片、水煎液、配方颗粒的HPLC指纹图谱相关性研究

摘要：目的:建立人参饮片、水煎液及配方颗粒的HPLC指纹图谱,对其相关性进行评价。方法:采用HPLC法,色谱柱为XBridge BEH C18柱（150 mm×3.0 mm, 2.5μm）,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为0.45 ml·min-1,柱温为32℃,气体流速为3.0 L·min-1,漂移管温度为100℃。测定15批人参饮片、水煎液、配方颗粒的HPLC指纹图谱,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版）进行相似度分析,并采用SPSS 20.0软件、SIMCA 14.1软件对指纹图谱信息进行皮尔逊相关性分析、聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）。结果:15批人参饮片、水煎液及配方颗粒HPLC指纹图谱均确定了9个共有峰,并指认1、2、3、4、8号峰分别为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd。15批人参饮片、水煎液、配方颗粒的指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均在0.95以上,三者对照指纹图谱的相似度均在0.98以上。CA和PCA结果表明人参水煎液和颗粒结果较接近。OPLS-DA发现4种成分是造成不同批次样品差异性的主要标志性成分。结论:建立的HPLC指纹图谱反映了人参饮片、水煎液及配方颗粒多成分的整体面貌,三者间的化学成分基本一致,可为人参配方颗粒质量控制提供借鉴。     

HPLC指纹图谱结合正交试验优化红参的炮制工艺

目的:建立红参的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并优选其最优炮制工艺。方法:采用HPLC法。色谱柱为Waters SymmetryShieldTMRP18,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为203 nm,进样量为10μL。以人参皂苷Rb1为参照,绘制10批红参样品的HPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)》进行相似度评价,并确定共有峰。以蒸制温度、蒸制时间、干燥方法为考察因素,人皂苷类成分含量、指纹图谱相似度为指标,采用L16(43)正交试验优化红参的炮制工艺并进行验证;采用SPSS 19.0软件对10批红参样品和最优工艺炮制品进行聚类分析。结果:10批红参共有13个共有峰,相似度均大于0.920;共指认人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1等3个共有峰。最优炮制工艺为100℃蒸制150 min,60℃干燥;验证试验结果显示,3批红参最优工艺炮制品中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量分别为0.26%~0.29%、0.17%~0.20%、0.47%~0.54%,其指纹图谱与对照图谱相似度均大于0.970。聚类分析结果显示,10批红参及3批最优工艺炮制品可聚为两类,即HS3~HS10聚为一类、3批最优工艺炮制品及HS1、HS2聚为一类。结论:所建指纹图谱可用于红参的炮制工艺优化,能表征炮制工艺参数波动与药材整体质量的相关性变化;所得最优炮制工艺合理可行。     

Comparison of the pharmacological effects of Panax ginseng and Panax quinquefolium

Medical application of Panax ginseng was first found in "Shen-Nong Herbal Classic"around 200 AD Panax quinquefolium was first introduced in "Essential of Materia Medica" in 1694 in China. The most important bioactive components contained in P ginseng and P quinquefolium are ginseng saponins (GS). The contents of ginsenoside Rb1, Re, and Rd in P quinquefolium are higher than they are in P ginseng. In P ginseng, the contents of Rg1,Rb2, and Rc are higher than they are in P quinquefolium. P ginseng had a higher ratio of Rg1: Rb1, and which was lower in P quinquefolium. After steaming for several hours, the total GS will decrease. However, some ginsenosides (Rg2, 20R-Rg2, Rg3, Rh1 and Rh2) increase, while others (Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, and Rg1) decrease. However, variation, especially in P quinquefolium, is high. P ginseng and P quinquefolium are general tonics and adaptogens. Rg1 and Rb1 enhance central nervous system (CNS) activities, but the effect of the latter is weaker. Thus, for the higher contents of Rg1, P ginseng is a stimulant, whereas the Rb1 contents of P quinquefolium are mainly calming to the CNS. Re, Rg1, panaxan A and B from P ginseng are good for diabetes. Re and Rg1 enhance angiogenesis, whereas Rb1, Rg3 and Rh2 inhibit it. Rh2, an antitumor agent, can be obtained from Rb1 by steaming. The content of Re in P quinquefolium are higher than in P ginseng by 3-4 times. The vasorelax, antioxidant, antihyperlipidemic, and angiogenic effects of Re are reported. Thus, for the CNS "hot," wound healing and hypoglycemic effects, P ginseng is better than P quinquefolium. For anticancer effects, P quinquefolium is better.     

HPLC-ELSD法测定愈伤灵胶囊中5个皂苷类成分

目的建立愈伤灵胶囊中皂苷类成分的含量测定方法。方法用HPLC-ELSD法测定愈伤灵胶囊中的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的含量。色谱条件为色谱柱C18柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱:0²0 min,25%乙腈;2020 min,25%乙腈;20³0 min,25%30 min,25%³0%乙腈;3030%乙腈;30⁴5 min,30%45 min,30%⁵0%乙腈;4550%乙腈;45⁴8 min,50%48 min,50%⁹0%乙腈,柱温25℃,流速1 mL·min-1。ELSD漂移管温度110℃;载气流速2.5 L·min-1。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd分别在0.097 490%乙腈,柱温25℃,流速1 mL·min-1。ELSD漂移管温度110℃;载气流速2.5 L·min-1。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd分别在0.097 4⁰.974 2、0.379 30.974 2、0.379 3³.793、0.033 53.793、0.033 5⁰.334 8、0.330 90.334 8、0.330 9³.310和0.097 23.310和0.097 2⁰.972 4μg与峰面积线性关系良好,相关系数r均>0.999 3,平均回收率分别为100.1%、99.9%、100.2%、100.2%、100.5%。结论本方法可行,专属性强、重复性好,能有效地控制该制剂的质量。     

AFLP法构建人参、西洋参基因组DNA指纹图谱

目的　采用扩增片段长度多态性DNA(AFLP)分子遗传标志技术,分析人参、西洋参基因组DNA多态性。方法　人参、西洋参干燥根基因组DNA,经EcoRI/MseI酶切并与其相应的人工接头连接后,使用选择性引物进行PCR扩增。结果　经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,成功构建出多态性丰富和重复性好的人参、西洋参DNA指纹图谱。结论　AFLP法有望成为一种独立的切实可行的手段,将在人参、西洋参等药用植物的鉴定、生物进化、系统发育研究及指导道地性药材的科学栽培等方面发挥重要作用。     

高效液相色谱法用于西洋参与白参的分析和鉴别

采用高效液相色谱法测定了１０个不同地区栽培的西洋参与白参中人参皂苷 Ｒｂ１的含量,并利用相对保留时间和相对含量对两者进行定性鉴别     

定量用三七总皂苷对照提取物的协作定值

目的:建立定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质.方法:照<中国药典>2010年版一部三七总皂苷项下方法,以三七皂苷Rd、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd为指标,评价提取物备选原料的均匀性;5个实验室进行协作标定.结果:备选原料均匀性良好;对协作标定的测定结果进行统计分析确定了5种成分的标示值.结论:通过协作标定赋值,建立了首批定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质.     

Constitutive beta-glucosidases hydrolyzing ginsenoside Rb1 and Rb2 from human intestinal bacteria

When ginsenoside Rb1 and Rb2 were anaerobically incubated with human intestinal microflora, these ginsenosides were metabolized to 20-O-beta-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol (compound K) and 20(S)-protopanaxadiol. Several kinds of intestinal bacteria hydrolyzed these ginsenosides. Eubacterium sp., Streptococcus sp. and Bifidobacterium sp., which more potently hydrolyzed gentiobiose than sophorose, metabolized ginsenoside Rb1 to compound K via ginsenoside Rd rather than gypenoside XVII. However, Fusobacterium K-60, which more potently hydrolyzed sophorose than gentiobiose, metabolized to compound K via gypenoside XVII. Ginsenoside Rb2 was also metabolized to compound K via ginsenoside Rd or compound O by human intestinal microflora. Eubacterium sp., Streptococcus sp. and Bifidobacterium sp. metabolized ginsenoside Rb2 to compound K via ginsenoside Rd rather than compound O. Fusobacterium K-60 metabolized ginsenoside Rb2 to compound K via compound O.     

血府逐瘀丸高效液相色谱数字化定量指纹图谱研究

目的 建立血府逐瘀丸( Xuefuzhuyu Pill,XFZYP) HPLC数字化定量指纹图谱,对其进行数字化整体质量控制.方法 采用RP-HPLC法,以阿魏酸对照品(ferulic acid,FA)为参照物峰,确定42个共有指纹峰,建立了XFZYP-HPLC数字化定量指纹图谱.以47个数字化参数评价指纹图谱,并用6级系统指纹定量法(6-SFQM)鉴定1 5批XFZYPs质量.结果 用16个数字化指数鉴别出2批样品不合格,用6-SFQM鉴别出11批质量极好(1级),1批质量很好(2级),3批质量良好(4级).结论 所建立XFZYP-HPLC数字化定量指纹谱可准确反映XFZYP质量特征.     

舒筋活血片高效液相色谱数字化定量指纹谱和对数指纹谱研究

目的 建立舒筋活血片(Shujin Huoxue Pian,SJHXP)数字化定量指纹谱和对数指纹谱,从数字定量化角度监控SJHXP质量.方法 采用RP-HPLC法,以绿原酸为参照物峰,确定39个共有指纹峰,建立了SJHXPHPLC数字化定量指纹谱和对数指纹谱.应用46个数字化参数定量揭示SJHXP-HPLC指纹图谱特征,用整体定量法鉴别14批次SJHXP质量.结果质量由极好到劣依次可分为1、2、3、4、5、6、7、8级,其中S5质量为3级,S6、S7、S10质量为5级,S13质量为6级,S3、S8、S14质量为7级,S1、S2、S4、S9、S11、S12质量为8级;对数指纹谱鉴定质量结果普遍升高.结论 所建立SJHXP-HPLC数字化定量指纹谱和对数指纹谱能有效控制SJHXP质量,对数指纹谱能消除批间指纹差异,但却会导致鉴定信息失真.