储藏条件对柏子仁污染黄曲霉毒素的影响及脱除方法探讨

目的:了解不同储藏条件对柏子仁药材黄曲霉毒素污染的影响,并探讨洗脱方法对柏子仁中黄曲霉毒素的脱除效果,为确定柏子仁药材的合理储藏条件及脱毒技术提供参考。方法:HPLC方法测定10个批次柏子仁黄曲霉毒素的污染程度,并设计2个温度及2种包装进行储藏试验,对比不同储藏条件下柏子仁黄曲霉毒素B1(AFB1)及黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2之和(AFs)的污染量。采用乙醇洗、水洗两种方法对柏子仁中黄曲霉毒素进行脱除。结果:有9个批次柏子仁存在黄曲霉毒素污染,其中5个批次的污染程度超出2015版《中国药典》限量标准。在10℃和25℃两个储藏温度下,AFB1和AFs均随储藏时间的延长而逐渐增加,储藏2个月时,AFB1的最大增加量达到起始的8.3倍,AFs的最大增加量达到7.8倍。真空包装与普通塑料袋相比,并不能显著降低毒素的增加量。乙醇洗对柏子仁中AFB1和AFs脱除率达到90%以上,水洗可以达到87%以上。结论:柏子仁在10℃、25℃时采用塑料袋及真空包装储藏期不宜超过1个月,两种清洗方法可部分脱除柏子仁中黄曲霉毒素。     

远志加工过程中黄曲霉毒素和污染真菌的分析研究

目的研究远志加工过程中4种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2(AFB1、ATB2、AFG1、AFG2)的污染情况以及污染真菌的类群及变化,分析黄曲霉毒素的主要污染途径。方法对远志采收、加工过程的21份样品,利用免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生法测定黄曲霉毒素含量,通过稀释平板法分离污染真菌,结合形态学和分子生物学特征对菌株进行鉴定。结果有15份远志样品检出黄曲霉毒素,但均未超出《中国药典》2015年版中AFB1、黄曲霉毒素总量的限量标准,阳性样品分布在每个生产环节。新采收的远志根上真菌总数在堆放发汗后升高,新鲜去木质心的远志筒上真菌总数达到2.0×10~8CFU/g以上,晾晒干燥后有所降低;直接干燥的远志棍上真菌总数在加工过程中变化不大;真菌总数与药材水活度呈显著正相关。分离鉴定的209株真菌归属到5个属,青霉属Penicillium为所有加工环节样品上的优势属,堆放发汗过程中枝孢属Cladosporium和镰刀菌属Fusarium数量明显增加,加工后的晾晒过程曲霉属Aspergillus真菌明显增加。获得的1株寄生曲霉Aspergillus parasiticus可以产AFB1、AFB2、AFG1和AFG_2。结论田间生产和采后加工都有可能造成远志黄曲霉毒素污染,青霉菌大量污染有可能带来的毒素问题需要引起重视。     

中药中黄曲霉毒素检测概况

介绍了近10年来中药污染黄曲霉毒素检测概况,早期研究主要采用TLC和ELISA法均发现部分中药污染了黄曲霉素,但实验报告结果差异很大,而且尚未形成公认的标准方法。评述了TLC、ELISA和IAC-衍生化HPLC荧光检测法。认为ELISA法可能发展成为样品的快速检测方法,而IAC-HPLC检测法是最有前途的方法,目前国内外在食品检测中采用的多种衍生物方法均可引入用于中药检测。     

中国市场柏子仁真菌污染调查研究

中药柏子仁在采收、生产加工、储藏、运输等环节中,受自身及环境因素的影响极易发生霉变,滋生产毒真菌或致病真菌,甚至产生真菌毒素,影响临床用药安全.2020年版《中国药典》限制柏子仁中黄曲霉毒素含量最高标准.然而,对于柏子仁药材上的真菌污染状况鲜有研究,难以有针对性地进行防控.因此,该文基于Illumina NovaSeq...     

黄曲霉毒素检测方法研究进展

黄曲霉毒素是花生,玉米等农产品中普遍存在的危害性很大的污染物。30余年来对黄曲霉毒素的检测方法开展了许多研究,各国先后制定了食品、农产品中黄曲霉毒素的限量。我国原来的一些食品标准所采用的检测方法已不适应国际上新的限量规定,已有文献报道一些中药中也检测出黄曲霉毒素,现行药典尚未制定有关限量标准和检测方法。综述了黄曲霉毒素分析方法,可供从事中药和食品卫生检测工作者参考,重点介绍了免疫亲和柱净化,结合柱后衍生化HPLC分析法。黄曲霉毒素可以特异性的吸附在免疫亲和柱上,然后被有机溶剂洗脱,是检测草药中黄曲霉毒素时最好的固相萃取净化法。样品通过各种衍生化反应,用带有荧光检测器的HPLC检测方法具有较高的灵敏度、精密度,是各国普遍使用的方法。作者的研究也证明,免疫亲和柱净化、柱后衍生化HPLC分析法是适合中药中黄曲霉毒素检测的最好方法。     

IAC-HPLC-ESI-MS/MS法测定不同产地柏子仁中4种黄曲霉毒素

目的 建立 IAC-HPLC-ESI-MS/MS法测定不同产地柏子仁 Platycladus orientalis(L.)Franco中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量.方法 柏子仁70％甲醇提取物的分析采用HALO 90A C18色谱柱(2.1 mmx100 mm,2.7 μm);流动相0.1％甲酸-甲醇,梯度...     

免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光法测定动物药中黄曲霉毒素

目的采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法测定动物药中黄曲霉毒素,考察该方法在动物药黄曲霉毒素测定中的可行性。并对动物药中黄曲霉毒素污染情况进行筛查,为动物药的监管提供依据。方法样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后,利用高效液相色谱-光化学衍生-荧光检测器进行分析测定。对部分动物药,尤其是可能污染黄曲霉毒素的动物药进行加样回收率考察,测定动物药中黄曲霉毒素残留量,并对测定结果进行分析。结果动物药中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的回收率均在70%~120%。16种64批动物药中有6种24批动物药检出了黄曲霉毒素,检出率为37.5%,其中4种13批动物药均出现了超过《中国药典》2015年版限度的现象,不合格率为20.3%。结论免疫亲和净化HPLC柱后光衍生荧光检测法适用于动物药中黄曲霉毒素的测定。动物药的个别品种黄曲霉毒素污染情况较为严重,应尽快完善动物药的质量标准,保障用药安全。     

七种药物中黄曲霉毒素测定与分析

人类于 196 2年发现黄曲霉毒素有致癌作用。黄曲霉毒素是由黄曲霉菌 (Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｌａｖｕｓ)、寄生曲菌 (Ａ .ｐａｒａｓｉｔｉｅｕｓ )和温特曲霉等霉菌产生 ,易污染食品 ,故在食品卫生方面对其监测工作引起国内外重视[1] ,但在食品、药品等生产部门尚未引起应有的重视。本实验用常规方法对神曲、麦芽、杭菊花、蘑菇、越鞠保和丸、肥儿片和大山楂丸等 7种中药进行了黄曲霉毒素的检验和测定 ,证明神曲及其主要制剂越鞠保和丸以及肥儿片中都含有不同程度的黄曲霉毒素 ,应引起重视。消除药物中黄曲霉素对保障用药安全有效有着十…     

植物精油及活性成分防控黄曲霉生长及其毒素产生的研究进展

黄曲霉Aspergillus flavus是一种病原性真菌,极易污染中药材、食品和农作物等。黄曲霉次生代谢产生的黄曲霉毒素(aflatoxins,AFT)具有致癌性和剧毒性,给动物和人类的健康带来严重的威胁。因此,寻求黄曲霉及AFT产生的抑制剂受到各国科研工作者的广泛关注。植物精油是一种从高等植物中提取并高度浓缩的天然抑菌剂,具有抑菌效果好、污染小、对人体相对安全等优点。目前,已有研究报道具有抗真菌活性的植物精油主要包括百里香、牛至、紫苏、小茴香等多种精油,其中醇、醛、酚类等活性成分抑真菌效果相对较好。对黄曲霉及AFT的致病性及精油防控的研究进展进行综述,为进一步探究植物精油的抑菌机制以及开发天然、绿色的抑菌产品提供参考。     

脂肪油和总二萜含量与柏子仁质量的相关性分析

目的:建立柏子仁中二萜类成分的含量测定方法,探讨柏子仁含油量和总二萜含量的关系,考察不同炮制法对柏子仁中脂肪油和二萜类化合物含量的影响。方法:采用香草醛-高氯酸比色法测定柏子仁中二萜类成分的含量,利用石油醚测定脂肪油含量,采用蒸、炒、制霜等方法炮制柏子仁。结果:总二萜在0.011 7~0.058 3 g·L-1呈良好线性关系,回收率RSD0.7%。脂肪油含量和总二萜含量具有显著的相关性,相关度达87%。柏子仁生品经蒸制、炒制后脂肪油和总二萜含量明显增加,制霜后二者含量明显下降。结论:柏子仁中脂肪油和二萜类成分的含量有较强的正相关性。蒸或炒制后有利于柏子仁中油脂性成分提出;制霜后脂肪油和二萜类成分含量减少,减小了滑肠的弊端。     

柏子仁生品及霜品中总皂苷的含量测定

目的:测定柏子仁生品及霜品中总皂苷含量.方法:通过比较不同的显色体系,采用正交设计优选出显色条件,建立了测定柏子仁总皂苷含量的分光光度法.结果:确定了香草醛-冰醋酸-硫酸显色体系,优选出显色的条件为80%(φ)硫酸,85℃水浴加热10 min.经测定柏子仁生品中总皂苷0.142%;霜品中总皂苷0.319%.结论:该方法稳定、简便、快速,适用于柏子仁总皂苷的含量测定.柏子仁炮制制霜前后总皂苷几乎没有损失.     

不同产地柏子仁中氨基酸成分比较分析

目的：测定并对比不同产地柏子仁药材中18种氨基酸的含量。方法：采用柱前衍生-HPLC测定氨基酸含量,以6 mol·L^-1盐酸溶液在110 ℃下对柏子仁中的氨基酸进行水解,2,4-二硝基氟苯作为柱前衍生化试剂;以Elite-AAK氨基酸专用分析柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）为色谱柱;以乙腈-水（1：1）-缓冲盐为流动相,流速1.2 mL·min^-1梯度洗脱,检测波长360 nm,柱温27 ℃。结果：18种氨基酸线性相关度r均>0.999 1,各氨基酸的加样回收率在98.03%~103.21%,加样回收率均值为100.36%,RSD≤1.77%。结论：柱前衍生-HPLC测定柏子仁中氨基酸的方法可行,为柏子仁药材质量和产地的关系提供一定的依据。     

不同含油量柏子仁药效学作用研究

目的：观察不同含油量柏子仁对小鼠便秘模型和肠推进作用的影响,为柏子仁含油量质量标准的建立提供药效学依据。方法：建立小鼠便秘模型,分别观察模型小鼠排便潜伏期、排便次数、便重及含水量,及小肠推进作用。结果：0%～16%含油量柏子仁对小鼠便秘模型的相关指标均无明显影响,与模型组比较均无显著性差异（P〉0.05）,小肠推进率随含油量增加而呈现不同程度提高。20%～40%含油量柏子仁霜对小鼠便秘模型的相关指标亦无明显影响。20%～40%含油量柏子仁对小肠推进率影响较为明显,含油量在30%时小肠推进作用明显增强,与空白组比较有显著性差异（P〈0.05）,并随含油量增加,推进作用增强。结论：柏子仁含油量增加可提高小鼠小肠推进率,但对便秘模型影响不明显,提示其泻下作用缓和,符合临床润肠通便的功效,同时认为其作用部位主要为小肠。     

炮制抑制莱菔子中萝卜苷酶解转化的初步研究

目的:探索莱菔子炒制前后量变与质变特征成分A209,B221的生成机制.方法:提取、分离、鉴定A209与B221的前体物质C3,C3,并证明它们之间的转化关系.结果:莱菔子中的萝卜苷可在内源性酶作用下生成莱菔子素,莱菔子在不同的煎煮条件下可生成含硫化合物A209,B221.结论:为探讨莱菔子炮制机制提供了一定的实验依据.     

正交试验法优选蒸苦杏仁炮制工艺

目的 优选蒸苦杏仁的最佳炮制工艺.方法 以灭酶程度和含苦杏仁苷量为评价指标,采用蒸汽流量、蒸制时间和厚度四因素、三水平k(34)正交试验法,优选苦杏仁的最佳蒸制工艺.结果 蒸苦杏仁最佳炮制工艺为杏仁厚度铺置3～5 cm,以大流量蒸汽蒸制30 min.结论 确定的苦杏仁蒸制工艺稳定可行,对于规范蒸杏仁的炮制工艺具有一定的意义.     

16种植物挥发油对柏子仁黄曲霉菌的抑制作用考察

目的:从16种植物(香茅、香叶、松节、山苍子、薄荷、干姜、丁香、姜黄、红花椒、肉桂、罗勒、迷迭香、青花椒、竹叶花椒、八角茴香、肉豆蔻)挥发油中筛选出对黄曲霉菌生长有较好抑制效果的植物挥发油。方法:采用平板培养法从柏子仁药材表面分离得到黄曲霉菌,利用水蒸气蒸馏法提取16种植物挥发油,采用滤纸片熏蒸后测定黄曲霉菌的菌落直径,对16种植物挥发油抑制黄曲霉菌生长的效果进行研究。结果:采用性状、显微及DNA条形码鉴定的方法从柏子仁药材上成功分离了黄曲霉菌,上述16种植物挥发油对黄曲霉菌的抑菌率分别为2. 93%,0. 05%,0. 37%,76. 07%,0. 34%,0. 15%,50. 05%,8. 51%,1. 43%,58. 20%,0. 07%,2. 60%,8. 73%,100. 00%,52. 62%,0. 07%。结论:16种植物挥发油对黄曲霉菌均有着不同程度的抑菌活性,其中竹叶花椒挥发油、山苍子挥发油、肉桂挥发油的抑菌效果较好,可为柏子仁生长储藏过程中防治黄曲霉菌的污染提供参考,并为植物挥发油作为中药仓储过程中的抑菌剂提供应用依据。     

侧柏叶炮制前后总黄酮的含量变化

目的建立侧柏叶总黄酮的含量测定方法,对侧柏叶、侧柏炭的总黄酮进行定量研究。方法采用紫外分光光度法对侧柏叶总黄酮含量测定方法进行研究。结果采用石油醚脱脂,乙醇加热回流提取侧柏叶中的总黄酮,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH为显色系统的含量测定方法,线性范围0.205～3.28mg,r=0.9997,平均加样回收率为98.96%,RSD=0.85%(n=6),侧柏叶总黄酮含量为4.29%,侧柏炭总黄酮含量为3.15%。结论该含量测定方法操作简便,重现性好。侧柏叶炒炭后总黄酮含量降低。     

HPLC法同时测定21种中药饮片中4种黄曲霉毒素的含量

目的:对21种中药饮片中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2进行含量测定,了解中药饮片的质量状况。方法:采用高效液相色谱(HPLC)-柱后碘衍生法进行含量测定,Waters Sunfire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温35℃,以甲醇-乙腈-水(33∶12∶55)为流动相,流速1.0 mL/min。荧光检测器激发波长λex=360 nm,发射波长λem=450 nm。以0.05%碘溶液为衍生溶液,衍生化泵流速为0.3 mL/min,衍生化温度为70℃。结果:21种中药饮片中,只有胖大海、酸枣仁、大枣、全蝎、淡豆豉、牛蒡子、千金子7个品种未检出黄曲霉毒素;4批柏子仁、6批薏苡仁全部检出黄曲霉毒素,检出率均为100%,其中3批柏子仁的黄曲霉毒素含量超出法定标准限量,不合格率75%;2批薏苡仁的黄曲霉毒素含量超出法定标准限量,不合格率33%。桃仁、陈皮等其余12个品种亦检出黄曲霉毒素,但含量未超出法定标准限度。结论:虽然黄曲霉毒素检测成本较高,但为保证用药安全、减少用药风险,对中药饮片进行合理的黄曲霉毒素监督检测具有必要性。