细胞蜡块及免疫组化在肺腺癌癌性胸水诊断中的应用

目的 研究胸水沉渣包埋制成细胞蜡块联合免疫组化检测对肺腺癌癌性胸水与非癌性胸水的诊断及鉴别诊断价值.方法 选取梅州市人民医院2015年1~12月经组织病理确诊的肺原发腺癌伴有胸水的患者57例及炎症性胸水患者36例,采用胸水沉渣包埋制成细胞蜡块,并行甲状腺转录因子1(TTF1)、癌胚抗原(CEA)、天门冬氨酸蛋白酶A(NapsinA)、间皮细胞(MC)、钙结合蛋白(CR)、肾母细胞瘤1(WT1)等6种免疫标记的免疫组化检测.结果 癌性胸水细胞蜡块中肿瘤细胞TTF1、CEA、NapsinA、MC、CR、WT1的阳性表达率依次为89.47%、78.94%、92.98%、17.54%、19.30%及7.54%;炎症性胸水细胞蜡块中间皮细胞TTF1、CEA、NapsinA、MC、CR、WT1的阳性表达率依次为8.33%、13.89%、22.22%、80.56%、97.22%及52.78%.癌性胸水中肿瘤细胞与炎症性胸水中的间皮细胞的免疫组化表达率比较差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论 胸水沉渣包埋制成细胞蜡块联合免疫组化检测对肺腺癌癌性胸水的肿瘤细胞与炎症性胸水中不典型间皮细胞的鉴别诊断有重要临床意义.     

胸水细胞蜡块在肺腺癌诊断及EGFR/ALK/ROS1基因突变检测中的应用

目的：探索肺腺癌胸水细胞蜡块在肺腺癌病理诊断及EGFR /ALK /ROS1 基因突变检测中的应用价值。方法：选取2017年1月至2021年12月在温州医科大学附属第一医院诊断为肺腺癌的41例患者胸水细胞,采用常规细胞涂片与细胞蜡块切片进行病理HE染色鉴定,并采用NGS及ARMS方法进行EGFR /ALK /ROS1 基因突变检测。结果：恶性胸腔积液（MPE）细胞涂片癌细胞鉴定敏感性为90.2%,假阴性率为9.8%,MPE细胞蜡块癌细胞鉴定敏感性为100%,假阴性率为0;MPE细胞涂片样本EGFR /ALK /ROS1 总体突变率为70.7%（29/41）,其中EGFR 突变率为61.0%（25/41）,ALK 融合基因检出率为7.3%（3/41）,ROS1 融合基因检出率为14.6%（6/41）;MPE细胞蜡块样本中EGFR /ALK /ROS1 总体突变率为73.2%（30/41）,其中EGFR 突变率为68.3%（28/41）,ALK 融合基因检出率为2.4%（1/41）,ROS1 融合基因检出率为4.9%（2/41）;此外,胸水细胞涂片及细胞蜡块的基因突变阳性的肺腺癌患者较未突变肺腺癌患者具有显著增加的总生存率、无进展生存率及疾病控制率。结论：与胸水细胞涂片相比,胸水细胞蜡块肿瘤检出率及EGFR /ALK /ROS1 总体突变率相对更高,可用于指导病理诊断及分子检测的靶向治疗。     

胸水细胞蜡块结合免疫组化学技术在晚期肺腺癌中的应用

目的 分析胸水细胞蜡块结合免疫组织化学在肺腺癌中的应用。方法 收集东阳市中医院2008年6月~2015年12月 7年间50例可疑恶性胸水样本,分析其临床病史、涂片、细胞蜡块切片、免疫组织化学及基因检测等资料。结果 50例可疑恶性胸水患者,增生反应性间皮细胞4例,确诊恶性肿瘤46例,其中肺腺癌27例,其他组织来源及组织类型19例,与细胞学常规涂片相比,细胞蜡块切片镜下可见背景干净,染色对比清晰,细胞数目明显增多、厚薄均匀,且可以寻找组织来源及基因检测。结论 细胞蜡块结合免疫组织化学技术极大地提高了胸水细胞学的诊断准确率及明确组织来源;同时为肿瘤精准医疗提供了平台,值得推广。     

EGFR基因在肺腺癌中突变的研究

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因酪氨酸激酶域体细胞在肺腺癌患者中突变的相关因素。方法:分析和检测64例肺腺癌石蜡包埋标本EGFR基因突变状况,采用PCR和序列分析技术进行EGFR基因18、19和21外显子突变分析。结果:64例PAC患者中有16例(25%)酪氨酸激酶域存在体细胞突变。其中2例(3.1%)为18外显子,7例(10.93%)为19外显子,7例(10.93%)为21外显子。结论:肺腺癌(PAC)患者肿瘤组织中EGFR基因突变主要集中于19、21外显子突变,女性高于男性。     

血性胸水细胞蜡块制作的体会

目的研究血性胸水细胞蜡块制作的效果。方法南京大学附属鼓楼医院病理科2013—2015年临床2 h内送检新鲜血性胸水20例,每份标本均分3份,95%乙醇固定3种不同时间进行细胞蜡块制作,常规切片HE染色观察结果。结果本研究方法制作的细胞蜡块常规HE切片完整、镜下细胞结构清楚、背景干净;三种不同时间做出细胞蜡块个数率并无统计学意义,但从获取细胞量和时间上综合考虑95%乙醇固定4 h的制作效果最好。结论本研究方法选取95%乙醇固定4 h时间段,可得到最佳血性胸水的细胞蜡块制作效果。     

胸水细胞蜡块在肺癌诊断和EGFR 基因 检测中的应用研究

目的 探讨胸水细胞蜡块结合免疫组织化学染色技术在肺癌诊断和EGFR 基因检测中的应用 价值。方法 胸水标本常规离心、涂片后,沉渣包埋制成细胞蜡块,结合免疫组织化学染色明确诊断,应 用ARMS-PCR 法检测175 例肺腺癌EGFR 基因突变情况,并与同期活检或手术的305 例肺腺癌组织块的 EGFR 基因突变进行对比。结果 细胞蜡块结合免疫组织化学染色的癌细胞检出率高于常规涂片者（P <0.05）, 且不确定构成比低于后者（P <0.05）。用细胞蜡块与组织块检测EGFR 基因突变的阳性率及男女构成比比较, 差异无统计学意义（P >0.05）。结论 胸水细胞蜡块可作为实体瘤组织的良好替代样品,有助于明确肿瘤类型、 来源,并可用于肺癌的EGFR 基因突变检测,有效指导其分子靶向治疗。     

EGFR突变的肺腺癌转化为小细胞肺癌一例

<正>靶向治疗给晚期肺癌的治疗带来了突破性进展,对于行手术治疗的早期肺癌也有一定的辅助治疗作用,其中最具代表性的靶向治疗是采用表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)对肺腺癌患者的治疗,然而,令人遗憾的是,随着治疗时间的延长,耐药的情况逐渐增多。耐药的机制以T790M突变为主,其次包括C-Met及HER-2扩增、PI3K旁路激活等,此外,还有一种少见的情况就是腺癌转化为小细胞肺癌。我院近年收治一例表皮生长因子受体(EGFR)突变的肺腺癌,该患者在肺癌根治术后给予化疗联合靶向治疗三年,后转化为小细胞肺癌,现报道如下：     

EGFR基因对肺腺癌脑转移放疗的影响

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因状态对肺腺癌脑转移放疗的影响,为临床脑转移治疗模式和个体化治疗提供参考。方法回顾性分析郑州大学第一附属医院收治的肺腺癌脑转移患者57例,均接受全脑放疗(30 Gy/10 F或40 Gy/20 F)及病灶局部推量治疗(20 Gy/10 F)。比较EGFR突变型(mtEGFR)和野生型(wtEGFR)患者的有效率(RR)、颅内无疾病进展生存期(iPFS)。采用Chi-square Test和Fisher确切概率法分析RR,采用Logrank法、Cox-Regression模型进行单因素和多因素分析。结果 57例患者,突变型与野生型RR为79.41%和47.83%(P=0.013),中位iPFS是12.0个月和6.0个月(P<0.01)。19外显子缺失突变和21外显子L858R突变亚组的RR和中位iPFS无差异(P>0.05)。结论 mtEGFR肺腺癌脑转移对放疗敏感性更高,iPFS更长,mtEGFR亚组之间无显著差异。     

恶性胸水细胞蜡块在肺癌诊断及治疗中的应用研究

目的 探讨恶性胸水细胞蜡块在肺癌诊断、组织学分型及EGFR/ROS1/ALK及PD-L1检测中的价值.方法 制备细胞蜡块行HE染色,选取不同的免疫组化抗体进行标记,结合组织学形态及免疫组化表达对其进行分型,对确诊的肺腺癌的标本,行EGFR/ROS1/ALK及PD-L1检测.结果 429例样本中查见癌细胞138例,肺腺癌...     

肺腺癌病人胸腔积液与相应肿瘤组织EGFR基因突变检测的对比研究

目的：探讨利用胸腔积液检测EGFR基因突变的临床可行性。方法：在分别获取肺腺癌病人的肿瘤组织和胸腔积液以后,使用 ARMS-PCR法对肿瘤组织EGFR基因突变情况进行检测分析。结果：（1）从EGFR基因突变率上来看,女性病人普遍高于男性病人(P=0.013),非吸烟患者高于吸烟病人(P=0.002)。（2）两种检测样本中的EGFR基因突变热点都包含19-del突变、L858R突变。（3）配对样本中突变率无明显差异(P=0.532),通过分析EGFR基因突变检测情况可得,突变一致率高达84.78%,一致性Kappa值约0.697,表明这二者有良好的一致性(P<0.001)。结论：（1）在晚期肺腺癌病人中,EGFR基因突变风险相对就高的病人包括女性病人和非吸烟病人,这种基因的突变率并不会受到肿瘤组织获取方式和病人年龄的影响。（2）本次研究获取的两种检测样本中的EGFR基因突变热点均有19-del突变、L858R突变。（3）EGFR基因突变在两种检测样本中有良好的一致性,在临床上可以考虑使用患者胸腔积液对EGFR基因突变情况进行检测。     

肺结核性及腺癌性胸水SDS-PAGE蛋白图谱分析

目的分析肺结核性及腺癌性胸水SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）图像之图谱特点及异同,为两者的鉴别诊断奠定基础。方法选用28例肺结核性胸水及36例肺腺癌性胸水,每例均以5%浓缩胶和不同浓度（6%、8%、10%、12%、15%）之分离胶行SDS-PAGE分离胸水中蛋白质,考马斯亮蓝染色,AlphaEaseFC Stand Alone图像分析软件分析10%分离胶凝胶图像。结果不同浓度（6%、8%、10%、12%、15%）的分离胶SDS-PAGE图像表明,肺结核性胸水及肺腺癌性胸水经10%SDS-PAGE分离,两者的胸水蛋白在40-200 kD范围内均可稳定分离得到10条蛋白条带。这些条带蛋白质分子量分别为200 kD、152kD、134 kD、118 kD、103 kD、98 kD、84 kD、62 kD、54 kD、43 kD。含量达60%以上的蛋白质分子量在54 kD至84 kD之间。50-60 kD区间的蛋白质含量肺结核性胸水高于肺腺癌性胸水,差异具有显著性。结论10%及12%的分离胶对胸水中的蛋白具有较好的分离效果;经10%的分离胶分离,肺结核性胸水分子量在50-60 kD区间内的蛋白含量高于肺腺癌性胸水,具有鉴别诊断价值。     

浙江地区肺腺癌患者EGFR和K-ras基因突变及临床表现研究

目的 探讨浙江地区肺腺癌患者中EGFR和K-ras基因的突变情况.方法 微分离富集肿瘤细胞,采用QIAGEN DNA 提取试剂盒提取基因组DNA,通过PCR 扩增及DNA 测序技术(Sanger测序法)分析肺腺癌患者EGFR 和K-ras基因突变情况.结果 54例肺腺癌患者中有20例(37.0%)存在EGFR 基因突变,其中外显子19 突变14例(25.9%);外显子21突变6 例(11.1%).未检测到外显子18和20突变.K-ras突变1例(2%).外显子19男性患者的突变率为29.2%(7/24),女性为23.3%(7/30);两者差异无统计学意义(P ＞0.05);外显子21男性患者的突变率为4%(1/24),女性为16.7%(5/30),两者差异无统计学意义(P ＞0.05).结论 浙江地区肺腺癌患者中,男性和女性的突变率无明显差异;EGFR 基因的突变以外显子19 的缺失突变最常见;K-ras突变较为罕见.     

肺腺癌EGFR基因突变与血清肿瘤标志物的关系

目的:分析肺腺癌患者EGFR基因突变与血清肿瘤标志物CEA、CA125和CYFRA211水平之间的关系。方法:收集2012年7月至2013年9月在郑州大学第一附属医院行EGFR突变检测的肺腺癌患者528例,采用电化学发光免疫法检测血清中CEA、CA125、CYFRA211的水平,分析EGFR基因突变与血清肿瘤标志物水平之间的关系。结果:肺腺癌患者中CEA、CA125、CYFRA211处于不同浓度梯度时,EGFR突变率差异均有统计学意义(P<0.05)。EGFR突变率随着CYFRA211水平的升高而降低;在CEA≤200 ng/ml的情况下,EGFR突变率随CEA水平升高而升高;当CEA>200 ng/ml或CA125>100 U/ml时,EGFR突变率降低。结论:肺腺癌患者中血清CEA、CA125、CYFRA211在一定程度上可以预测EGFR突变情况。     

肺炎型肺腺癌患者EGFR基因突变和ALK基因重排情况的临床分析

目的 探讨肺炎型肺腺癌患者EGFR基因突变、ALK基因重排的特点及其临床意义.方法 选取2016年1-8月第三军医大学新桥医院病理组织学确诊为肺腺癌患者154例为研究对象,根据影像学表现分为肺炎型(30例)、非肺炎型(124例).154例患者均进行EGFR基因检测,其中87例患者同时进行ALK基因重排检测.比较肺炎型与非肺炎型肺腺癌患者EGFR基因突变率、ALK基因重排率及临床特征的关系.结果 肺炎型组患者EGFR基因突变率为20.0％(6/30),非肺炎型组为47.6％(59/124),差异有统计学意义(P＜0.05).两组年龄、吸烟史、性别、肿瘤家族史、ALK基因重排、TNM分期比较,差异无统计学意义(P＞0.05).总体EGFR基因突变率为42.2％(65/154),吸烟史、性别与EGFR基因突变有关,年龄、肿瘤家族史与EGFR基因突变无明显相关性.总体ALK基因重排率为11.5％,吸烟史、肿瘤家族史、性别、年龄与ALK基因重排无明显相关性.87例同时行EGFR及ALK基因检测的患者,未发现EGFR基因突变、ALK基因重排共同存在的情况.结论 影像学表现为肺炎型的肺腺癌患者,应同时行EGFR基因突变和ALK基因重排检测,以便为晚期肿瘤患者制定全面的全程管理方案.