不同产地宁夏枸杞活性成分比较研究

目的研究不同产地宁夏枸杞子中药用活性成分差异,对不同产地宁夏枸杞品质及采样地气候进行相似性评价。方法基于药典规定的宁夏枸杞有效成分的检测方法,对国内不同产地宁夏枸杞中的枸杞多糖、甜菜碱及总糖进行含量测定,应用单因素方差分析法分析不同产地宁夏枸杞中各有效成分差异,并应用主成分分析及聚类分析法对不同产地枸杞品质及气候相似性进行分析。结果不同产地的枸杞多糖及甜菜碱含量存在显著性差异,各产地总糖差异不明显,不同省份(甘肃、宁夏、新疆、河北)宁夏枸杞品质存在一定的相似性,各采样点气候分析存在新疆及宁夏两大气候区。结论不同产区枸杞药用活性成分存在差异,其总体品质具有一定的相似性,但以宁夏枸杞品质较优。     

宁夏枸杞主要害虫发生规律与防治策略

目的:明确枸杞主产区主要害虫为害特点、发生规律及防治关键点,指导枸杞害虫绿色防控。方法:结合作者2009、2013、2015年7~9月对我国宁夏、青海、甘肃、新疆、内蒙古枸杞主产区枸杞生产现状调研结果,以及2012—2015年连续4年4~10月份对宁夏中宁县枸杞害虫种群发生动态及田间不同防控措施的效果调查,对枸杞害虫发生规律及集成防控策略进行了分析探讨。结果与结论:枸杞不同产区各害虫的发生为害各有特点,不同害虫占据不同生态位,从时间和空间上各害虫避免了直接竞争。秋季和早春是防治越冬代害虫的关键期,生长季节根据害虫防治关键点实施相应防治措施可有效提高防控效果,降低农药使用量。不同产区之间同种害虫具有共性特点,该研究为指导生产实践提供了理论依据。     

宁夏枸杞产区调研及商品鉴别

1　宁夏枸杞的生长环境与自然分布宁夏枸杞适宜生于地势高寒、气候干燥、昼夜温差大、日照时间长的温带大陆性地域 ,多生于土层深厚、地下水位低的碱性土壤 (ＰＨ7～ 9)中 ,集中分布在我国青海至山西的黄河两岸 ,以及青海柴达木盆地和河西走廊。野生种分布零散 ,纯群落少见 ,多生于我国西北及华北的广大干燥草原及荒原中的丘陵坡地、沟梁峁地、村旁断垣处。2　引种栽培及主要产区2 1　西北引种栽培区宁夏、内蒙古、甘肃、青海、新疆 ,以及陕西、山西北部地区。该区地势高寒 ,气候干燥 ,气温的日较差和年较差大 ,日照时间长 ,最适宜于枸杞生…     

枸杞子品质区划研究

枸杞子为常用大宗中药材,由于野生资源有限,市场上流通的枸杞子主要来源于茄科植物宁夏枸杞的栽培品。相关研究表明不同地区的枸杞子品质存在一定差异。该课题组于2017年8月赴宁夏、甘肃、青海、新疆和内蒙古等地的13个有宁夏枸杞种植的县(区)进行实地采样,获取枸杞子样品71批。根据71批枸杞子中枸杞多糖、蛋白质、维生素和柚皮苷4种化学成分含量的高低,利用SPSS,Arc GIS等对枸杞子品质进行区划研究。结果显示:采样区域内枸杞子中枸杞多糖、蛋白质、维生素和柚皮苷的含量存在较大的差异,其中:内蒙古的维生素含量相对较高;新疆的枸杞多糖含量相对较高;宁夏的蛋白质含量相对较高;内蒙古的柚皮苷含量相对较高。通过对枸杞子中4种化学成分与生态环境因子之间的相关性分析,百分含量占比高的化学成分受气候因素影响较大、占比低的化学成分受土壤因素影响较大。不同产区枸杞子品质的优劣,需要综合多个指标进行整体评价,或者根据枸杞子特定功能需求及对应成分选择合适产区。《中国植物志》等文献资料中多记录在西北和中南部,尚没有关于东北地区人工种植宁夏枸杞的记载,通过该研究发现辽宁和吉林省也有宁夏枸杞的少量种植,可知在中温带和暖温带等地均有宁夏枸杞的种植。     

宁夏重点中药材产业种植基地信息

宁夏枸杞生产基地宁夏回族自治区是宁夏枸杞的原产地,人工栽培历史已 600余年。宁夏枸杞因具备生态、社会、经济三位一体的经济效益,而成为我国北方干旱半干旱荒漠地区的营林先锋树种,同时果实具有滋补肝肾、益精明目的保健功效而被列入药食同源植物,是我国传统的名贵药材和出口创汇产品。     

基于微卫星群体遗传学的栽培枸杞遗传多样性和遗传结构评价

该研究利用7对SSR引物,应用GenALEx 6.5,NTSYS,STRUCTURE等软件分析17个栽培宁夏枸杞居群178个个体的遗传多样性和遗传结构,旨在阐明栽培对宁夏枸杞遗传多样性和遗传结构的影响,并提出枸杞种质资源遗传管理及可持续利用的策略。结果显示栽培宁夏枸杞遗传多样性较低,其平均等位基因数N_A、期望杂合度H_E、观察杂合度H_O、Shannon′s信息指数H′分别为3.9,0.443 7,0.556 6,0.788 1。STRUCTURE,UPGMA聚类及PCA分析均表明宁夏枸杞品种间基本没有遗传分化,品种内存在明显的种质混杂。Mantel Test检测显示遗传距离与地理距离不相关。AMOVA分析揭示遗传变异主要发生在居群内个体间(84.58%,P0.001),几乎没有遗传变异发生在居群间(11.79%,P0.001)和品种间(3.63%,P0.001)。栽培已经引起枸杞遗传多样性的明显下降,可能引起近交衰退,应从野生资源寻找新的种质资源,以改良现有栽培枸杞的种质。另一方面,栽培宁夏枸杞品种间、居群间存在明显的均质化和种质混杂,需要品种提纯且要避免混杂种质流入其他野生居群,污染其他野生枸杞种质。     

地骨皮的多重位点特异性PCR鉴别

目的 使用多重位点特异性聚合酶链式反应（PCR）的方法，简单高效地鉴定地骨皮（Lycii Cortex）的2种基原植物枸杞（Lycium chinense）和宁夏枸杞（L. barbarum）。方法 在使用植物叶绿体基因组数据库（CGIR）获取枸杞和宁夏枸杞叶绿体基因组序列的基础上，利用IdenDSS软件筛选出两基原间特定的单核苷酸多态性（SNP）位点，并利用Primer 5.0软件设计获得特异性鉴别引物，包括鉴别枸杞的引物GQ-F/R、鉴别宁夏枸杞的引物NX-F/R。对引物浓度比、退火温度、循环次数、Taq酶进行优化，形成最适的PCR鉴别体系和条件，并对采集自不同地区的地骨皮进行适用性考察。结果 对影响PCR结果的各个条件进行考察优化后，最终确定枸杞和宁夏枸杞的引物浓度比为2∶1、退火温度为59 ℃、循环次数为30次时，来自不同产区地骨皮的2个基原枸杞和宁夏枸杞分别在183、295 bp的位置出现特异性鉴别条带。结论 通过一次PCR即可方便、快捷、高效地鉴定地骨皮的基原，为枸杞和宁夏枸杞的专属性鉴别提供新方法，同时对含有地骨皮成分的经典名方的研发提供一定的技术支撑。     

寻苗枸杞香

正晴风雨气收,满眼山光秀。寻苗枸杞香,曳杖桄榔瘦。——元·邓玉宾子[健康话题]我国是盛产枸杞的国度,几乎全国各省都有出产,尤以宁夏中宁县出产的最受青睐,有"天下枸杞出宁夏,中宁枸杞甲天下"的美誉。在中宁,它已有600多年的栽培史,有"红宝"之称,是宁夏驰名的"五宝"之一。1961年,中宁县被国家确定为全国唯一的枸杞生产基地县;1995年,中宁县又被国务院命名为"枸杞之乡";1999年1月,中宁枸杞在国家工     

有机栽培条件下宁夏枸杞6个品种生长特性及抗性差异比较

目的 比较有机栽培条件下宁夏枸杞不同品种生长特性及抗性差异，为筛选适合有机生产的枸杞品种提供参考。方法 以宁夏枸杞6个品种（“宁杞1号”“宁杞4号”“宁杞5号”“宁杞7号”“杞鑫10号”和枸杞品系“0909”）为实验材料，按中国有机标准种植于同一地块并统一管理，分别调查枸杞物候期、生长量、果实性状、产量、枸杞群落5种主要害虫种群数量、黄叶率，测定枸杞多糖和甜菜碱含量并进行综合比较分析。结果 6个参试品种中，“宁杞7号”植株长势较好，产量和品质较高；“宁杞4号”“宁杞1号”产量次之，但抗性较强；“宁杞5号”长势旺，瘿螨问题较严重，果粒较大但整体产量较低；“杞鑫10号”长势较好，果粒较大但对修剪管理技术要求较高，本试验期间未高产；枸杞品系“0909”长势较弱，产量较低，抗性较差。结论 推荐将“宁杞7号”“宁杞4号”和“宁杞1号”作为宁夏枸杞产区有机种植优选品种。     

宁夏枸杞黄酮类化合物HPLC指纹图谱研究

目的 建立宁夏枸杞黄酮类化合物高效液相色谱指纹图谱,为鉴别不同来源的宁夏枸杞提供依据.方法 以10个宁夏不同产地的宁夏枸杞主栽品种"宁杞Ⅰ号"样品建立枸杞黄酮类化合物指纹图谱共有模式,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件进行数据处理,对15个不同来源的枸杞样品进行了分析.结果 本研究建立的方法 重现性较好;16个特征峰构成了宁夏枸杞黄酮类化合物色谱指纹图谱的特征;不同产地、不同品种的枸杞样品黄酮类化合物组成与量存在差异.结论 所建立的枸杞黄酮类化合物的HPLC指纹图谱对不同产地、不同品种枸杞的鉴别具有参考价值.     

连作对穿心莲基因组DNA甲基化的影响

目的:探究连作条件下穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式变化情况。方法:结合甲基化敏感扩增多态性(methylation-sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术和液相色谱-质谱(LC-MS/MS)法对3个连作年限(0,1,2年)穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式进行分析。结果:LC-MS/MS测定的连作0~2年穿心莲基因组DNA甲基化水平为13.91%,12.72%,10.26%,MSAP测定的结果则为10.16%,9.64%,8.98%,两者均表明穿心莲基因组DNA的甲基化水平与连作年限呈现负相关,即DNA甲基化水平随着连作时间的延长而逐渐下降。MSAP技术对DNA甲基化模式分析也显示,穿心莲基因组DNA的CCGG位点在连作过程中主要发生了去甲基化。结论:连作条件下,穿心莲基因组DNA的甲基化水平和模式发生改变并以此来响应连作胁迫。     

桔梗同源四倍体诱导及其基因组DNA甲基化差异分析

为探究桔梗同源四倍体与二倍体试管苗外观形态差异的表观遗传变化,先将桔梗二倍体不定芽用不同浓度的秋水仙素(加0.02 g·m L-1二甲亚砜)混合液浸泡后进行组织培养,并通过流式细胞仪和根尖染色体鉴定相结合的方法鉴定倍性。在获得桔梗同源四倍体的基础上,采用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术探究二倍体与四倍体植株之间的DNA甲基化水平及其模式变化。结果表明0.2%的秋水仙素(加0.02 g·m L-1二甲亚砜)混合液处理桔梗不定芽12 h是诱导桔梗同源四倍体的最适条件,其诱导率达到32.0%;四倍体与二倍体植株在外观形态上存在明显差异,经过DNA甲基化差异分析,20对引物扩增的1 586条带中二倍体有764条,四倍体有822条。二倍体总甲基化率、全甲基化率和半甲基化率分别为92.15%,61.52%,30.65%,而四倍体为86.13%,54.38%,31.75%,与二倍体相比,其同源四倍体总甲基化率降低6.02%,全甲基化率降低7.14%,而半甲基化率升高1.6%,说明染色体加倍后其DNA表观遗传模式发生了变化。     

三叶木通MSAP反应体系的优化及引物筛选

目的研究三叶木通表观遗传多样性,建立并优化三叶木通甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplifiedpolymorphism,MSAP)反应体系。方法以三叶木通叶片为材料,利用正交试验建立三叶木通MSAP的预扩增和选择性扩增的最佳反应体系。结果建立的MSAP最佳反应体系为酶切反应:HpaII/MspI 10 U,EcoR I 10 U;预扩增反应:总体积20μL,连接产物2μL,E00、HM00各125 ng,dNTPs 0.312 5 mmol/L,Mg2+1.875 mmol/L,Taq DNA聚合酶2 U;选择性扩增反应:总体积20μL,稀释200倍的预扩增产物5μL,引物E-ACT、HM-CAT各50 ng,dNTPs 0.250 mmol/L,Mg2+1.250mmol/L,Taq DNA酶1 U。利用优化的体系,最终从MSAP的80对引物中筛选出有效引物6对。结论建立的MSAP反应体系可用于后续三叶木通DNA甲基化的相关研究。     

遮荫影响半夏DNA甲基化的MSAP分析

半夏为天南星科药用草本植物,其块茎入药,为我国一种常见的大宗中药材,市场需求量大。半夏在生长过程中遭遇高温强光易倒苗减产,遮荫可有效缓解半夏的倒苗,进而提升其块茎产量,但相关调控机制并不明确。DNA甲基化作为生物响应环境变化的一种自我修饰方式,常参与调控植物的生长发育。该研究以宿半夏为实验材料,选取自然光下生长的半夏为对照组,90%遮荫处理的半夏为实验组,对其基因组DNA甲基化进行甲基化敏感扩增多态性(MSAP)分析。结果表明,20对选扩引物共检测到617个基因位点,其中光照组占311个、遮荫组为306个。光照组和遮荫组中发生甲基化的位点分别占58.2%,71.57%,甲基化位点中全甲基化比率分别为27.65%,29.41%,表明遮荫显著诱导半夏基因组甲基化水平的提升。另外,相比光照组,遮荫促进32.51%的基因发生甲基化,同时诱导了16.25%基因去甲基化。该研究揭示了遮荫处理条件下半夏基因组的DNA甲基化变异水平,为进一步从表观遗传水平探析遮荫调控半夏生长的机制奠定了初步的理论基础。     

醇型和酮型广藿香DNA甲基化的MSAP分析

目的使用MSAP技术对2种化学型广藿香Pogostemon cablin的基因组DNA进行甲基化分析。方法使用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplification polymorphism,MSAP)技术检测2种化学型、共计197个广藿香样本的DNA甲基化程度。结果 4类MSAP位点信息的Shannon多态性指数的最高值或较高值均在阳春、德庆、高州大垌、禄步、广宁5个产地中产生;石牌广藿香(酮型)与其余产地的广藿香(醇型)形成2个分支;广藿香居群间的变异所占百分比远大于居群内变异所占百分比,达60.66%;共筛选出10条石牌产地与其余产地的差异性片段并进行测序分析,其中一条属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族。结论可通过MSAP技术在不同来源的样品中鉴别出石牌产地的广藿香;广藿香不同化学型的形成与其DNA甲基化水平有着密切的联系,尚需更进一步的研究。     

同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征研究

目的探讨同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征。方法采用RAPD技术对全国四大商品区的枸杞道地品种宁夏枸杞的主栽品种宁杞1号的叶片和宁夏商品区的制品枸杞子进行了DNA指纹图谱特征研究。结果四大商品区的宁夏枸杞叶片DNA指纹图谱一致,而制品枸杞子的DNA指纹图谱与叶片的有较大差异。结论DNA指纹图谱用于鉴定同种枸杞的叶片结果可靠。     

温度对菘蓝基因组DNA甲基化的影响

目的:分析高温对菘蓝基因组DNA甲基化模式的影响。方法:采用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitiveamplification polymorphism,MSAP)方法,筛选36对选择性引物进行扩增。结果:扩增共得到1 612条清晰的带纹,共检测到82(5.1%)个CCGG位点在高温胁迫后发生了甲基化状态的改变,其中58(3.6%)个位点发生了超甲基化,24(1.5%)个位点发生了去甲基化。结论:温度是调节菘蓝基因组DNA甲基化模式的一个重要环境因子。     

西伯利亚蓼EST-SSR引物开发和国内资源的遗传背景分析

目的:评价国内西伯利亚蓼资源的遗传分化程度,为种群分化、物种进化、资源保护和药材品质保障提供科学依据。方法:从国内4个省份13个采样点采集56份西伯利亚蓼,开发并筛选多态性EST-SSR标记,结合相关序列扩增多态性(SRAP)分子标记扩增结果,通过计算遗传距离和聚类分析,评价不同生态分布区域内西伯利亚蓼的遗传分化程度。结果:开发的45对EST-SSR引物中,38对引物有扩增产物,共扩增出660个条带,其中17对引物产生的多态性条带比率为100%,共扩增出多态性条带303条。96对SRAP通用引物中,67对引物有扩增产物,共扩增出1 347个条带,其中58对引物产生的多态性条带比率为100%,共扩增出多态性条带1 147条。种群遗传距离计算和聚类分析结果表明,西伯利亚蓼种群内和种群间均有遗传分化,分布区域相隔越远,遗传分化程度越高。结论:地理位置隔离、海拔高度均影响了国内西伯利亚蓼种质资源的分布和分化,人类活动可能也对其有影响。     

定西市栽培当归生态适宜性研究

目的:了解定西市栽培当归生态适宜性,筛选影响其分布的主要生态因子。方法:通过走访和实地调查,从定西市当归栽培县区获取857个采样点的经度、纬度、海拔等地理信息,结合全国生态因子数据,利用Maxent模型和ArcGIS软件的空间分析功能进行分析。结果:定西市栽培当归适宜分布区主要集中在定西市南部岷县、漳县,渭源县、临洮县、陇西县也有分布,但适宜区域较小。影响定西市当归适宜性分布的主要生态因子为海拔高度、降水量、温度。结论:本研究对定西市栽培当归生态适宜区进行了等级划分,生成了当归生态适宜性区划图,可为定西市当归合理引种栽培提供理论依据。     

四倍体菘蓝基因组DNA甲基化的甲基化敏感扩增多态性分析

目的 分析四倍体菘蓝Isatis indigotica基因组DNA甲基化水平和模式.方法 采用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplification polymorphism,MSAP)方法,对四倍体菘蓝基因组DNA的甲基化水平和模式进行分析.结果 筛选36对MSAP选择性引物进行扩增,共得到1733条清晰的条带.二倍体菘蓝基因组胞嘧啶甲基化水平为24.05％,四倍体菘蓝基因组胞嘧啶甲基化水平为23.70％.检测到83个(4.86％) CCGG位点在四倍体菘蓝基因组中发生了DNA甲基化模式的改变,其中37个(2.13％)位点发生了超甲基化,36个(2.08％)位点发生了去甲基化.结论 二倍体和四倍体菘蓝在CCGG位点上存在胞嘧啶甲基化状态的改变.