实用免疫组化组织微阵列对照体系的构建及其蜡块、切片的制作方法

目的 构建一种经济实用的免疫组化组织微阵列对照体系,并介绍组织微阵列蜡块、切片的简易制作方法.方法 根据实际临床工作经验,在遵循国际特殊专家委员会建议、免疫组织化学检测技术共识的基础上构建组织微阵列对照体系;利用临床病理外检中满足临床诊断后剩余组织,常规脱水处理,镜下筛选目的区域,用废旧一次性病理刀片,将组织目的区域切...     

ELISA实验条件的改变对临界质控品和阳性对照的影响

目的　比较ELISA定性试验中临界质控品和阳性对照对试验影响因素的敏感性。方法　用ELISAHBsAg试剂盒 ,改变系列试验条件 ,对临界质控品和阳性对照吸光度值进行比较。结果　部分试验条件改变时 ,临界质控品吸光度值的改变有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,阳性对照吸光度值的改变没有显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　临界质控品对试验条件改变比阳性对照敏感 ,用临界质控品代替阳性对照可提高试验结果的准确性。     

关于免疫组化假阴性或假阳性发生的原因及预防

目的 探讨导致免疫组化假阴性或假阳性发生的相关因素及预防措施。方法 对1995～2002年间，本科室应用SP所做的6769例免疫组化进行回顾性分析。结果 因组织固定、抗体质量、染色方法及标记失误等因素导致假阴性15例，而切片不良、反常表达及标记失误所致假阳性3例。结论 免疫组化假阴性或假阳性发生的原因与组织固定、切片质量、染色方法、抗体质量、病理医生的经验等因素有关。     

人胎小肠NOS阳性神经元发育的免疫组化观察

目的探讨人胎小肠一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元生长发育规律。方法用免疫组织化学法对人胎小肠NOS阳性神经元的表达进行观察。结果从第3个月开始,随着胎龄的增加,NOS阳性神经元的细胞体逐渐增大,细胞质逐渐增多,阳性反应逐渐增强;NOS阳性神经纤维由短小突起逐渐伸长,并形成膨体纤维,在肌层分布由稀疏逐渐变为致密。结论小肠壁内NOS阳性神经元的生长发育与各层组织细胞的发育有密切关系。     

不同的抗原修复方法在免疫组化染色中的应用

目的:选择最适宜的抗原修复法.方法:在免疫组织化学染色中,选用鼠抗人5种单克隆抗体,用不同的抗原修复法,对不同染毒剂量、正常对照暴露大脑皮质及海马,石蜡组织切片,依阳性颗粒表达的情况,确定适宜的抗原修复.结果:抗原修复的方法直接影响到组织中抗原的暴露,高压加热法能把被掩盖或交联变性的抗原暴露或修复,使免疫组化的结果更准确可靠,特别是核阳性组织,适用于高压加热法;电炉煮沸法,阳性结果不佳;酶消化抗原修复法,与高压锅加热抗原修复法的阳性结果无区别.结论:核阳性表达的抗体应选用高压锅抗原修复法,推测核阳性表达的抗体也适用于酶消化抗原修复法.     

食管癌组织角蛋白表达的免疫组化研究

角蛋白是广泛存在于多种上皮及肿瘤细胞内的一种中间丝，它对肿瘤的起源，分化程度的鉴别诊断具有重要价值。我们对56例食管石蜡包埋组织采用免疫组化法进行了角蛋白表达的研究，旨在了解食管癌不同病期、分化程度、淋巴结转移和病变浸润深度与角蛋白表达的关系及对临床预后的判断价值。     

组织悬液HER2阳性标本在免疫组化室内质控中作为阳性对照的作用和价值

【目的】为了更好的建立人类表皮生长因子受体2（HER2）免疫组化室内质控,探讨一种简易的HER2阳性对照方法。【方法】收集2015年1月至2018年12月安徽省肿瘤医院乳腺癌根治标本,挑选20例HER2表达3+的肿瘤样本制作成组织悬液,分别经HE染色及免疫组化染色证实癌细胞HER2的表达,1个月及3个月后再次HER2免疫组化验证。选取乳腺癌、胃癌HER2明确表达0、1+、2+、3+的归档蜡块与作为对照的悬液样本进行HER2染色对比。【结果】20例组织悬液中的癌细胞HER2定位明确,染色强度3+,3个月后再次染色结果无差异,可为乳腺癌、胃癌HER2染色提供阳性参考。【结论】组织悬液HER2阳性对照可作为免疫组化室内质控使用,该方法简便、可靠、实用、易推广。     

全自动免疫组化染色仪在临床病理的应用

目的 探讨全自动免疫组化染色仪在,临床病理工作中的应用.方法 利用全自动免疫组化染色仪替代手工操作,对临床病理工作中60余种常用抗原指标进行检测.结果 切片着色均匀、定位准确、背景清晰.结论 全自动免疫组化染色仪可以避免各种手工操作误差对免疫组化染色的影响,有利于促进免疫组化的标准化,从而可以广泛地应用于临床病理.     

免疫组化S-P法操作1010例病理切片体会

免疫组织化学染色方法繁多,正确选择染色方法对免疫组化技术的普及和开展至关重要.S-P方法是(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法)20世纪90年代出现的免疫组化染色方法,因其灵敏度高、操作简便、价格较低而在我国逐渐普及.近年来,我科共做了1010例免疫组化,结果较稳定,现总结如下.     

免疫组化质量控制的标准化管理

探讨免疫组化室内质量控制的标准化管理,根据本科室免疫组化质量控制管理实际,从实验前、实验中、实验后三方面阐述免疫组化质量控制标准化管理细则．总结在实验过程中的经验和体会．提高免疫组化检测结果的准确性和可靠性。     

免疫组化染色质量控制在肝脏穿刺组织切片中的应用

目的:探讨肝脏穿刺组织HE染色切片及免疫组化染色切片的质量控制与标准化操作在提高病理诊断准确率中的意义。方法:按照质控标准化对298例肝脏穿刺组织行HE制片和免疫组化染色,盲法比较标准化前后病理诊断结果。结果:按照质控标准化制备的常规HE染色切片优良率为92.3%,免疫组化染色切片优良率为91.1%;明显高于未标准化制备的HE切片和免疫组化染色切片(78.9%,74.9%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。298例肝脏穿刺组织,标准化后做出明确诊断的有259例(86.9%),标准化前为219例(73.5%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:此实验流程提高了肝脏穿刺组织免疫组化染色的质量,诊断率提高,可作为肝脏穿刺组织制片的标准流程应用。     

串珠聚糖在肝细胞癌的分布及其免疫组化阳性判断标准的初探

目的 :初步建立串珠聚糖 (PLC)免疫组织化学 (免疫组化 )阳性判断标准 ,探讨PLC在肝细胞癌 (HCC)中的分布特征及其与转移复发的关系。方法 :用免疫组化SP法检测PLC及其配体碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在HCC中的分布 ,根据PLC分布特征初步建立阳性判断标准 ,分析PLC及bFGF表达与HCC临床病理指标及转移复发的关系。结果 :初步建立了一种PLC阳性判断标准 ;PLC在部分HCC中主要表现为基底膜连续和不连续线形染色 ,部分HCC主要为癌细胞胞质或胞膜棕黄色染色 ;bFGF主要为HCC癌细胞胞质和胞膜棕褐色染色 ;癌组织bFGF表达率及PLC和bFGF共同表达率明显高于癌周肝组织 (分别为P <0 .0 5和P <0 .0 1)。PLC、bFGF表达与HCC临床病理指标及转移复发无关 ;但PLC和bFGF共表达与HCC转移复发有关 (P <0 .0 5 )。结论 :所建立的PLC阳性判断标准具有一定的合理性 ,PLC和bFGF可能参与HCC转移复发和血管生成 ,二者共表达可以预测HCC转移复发。     

人胎舌内NOS阳性神经元发育的免疫组化观察

目的:探讨人胎舌内NOS阳性神经元的发育规律。方法:免疫组织化学方法。结果:第3~4个月龄时,在舌肌和舌粘膜固有层可见到胞体较小,淡染的NOS阳性神经元,分布稀疏。第6~8个月龄时,舌肌组织中NOS阳性神经元数目明显增多,胞体略大,核大,胞质极少。第9~10个月龄时,舌粘膜固有层和舌肌组织内NOS阳性神经元胞体明显增大,细胞质也相应增多,舌肌组织中可见小的NOS阳性神经节分布。结论:舌内NOS阳性神经元的发育与舌粘膜和舌肌的发育密切相关。     

Hodgkin's disease with CD 20 (B1) positive Reed-Sternberg cells--an immunohistochemical and immunoelectron microscopic study

20 cases of Hodgkin's disease, [five nodular sclerosis (NS), 12 mixed cellularity (MC), and three lymphocytic depletion (LD)] were studied immunohistochemically and immunoelectron-microscopically to clarify the origin of Reed-Sternberg (RS) cells. The majority of RS cells expressed activated lymphoid cell-associated antigens (CD 30, CD 25, HLA-DR) and granulocyte-associated antigen (CD 15). RS cells in seven cases (one NS, five MC and one LD) reacted with CD 20 (B1). Three of these cases (all three MC) were also positive with CD 19 (B4). These findings suggest that some RS cells may be of B cell lineage.     

人胎大肠NOS阳性神经元发育的免疫组化观察

目的探讨人胎大肠NOS阳性神经元发育的规律。方法用免疫组织化学法对人胎大肠NOS阳性神经元的表达进行观察。结果第3个月龄时,肌间神经丛处有单个分布或三、五成群的NOS阳性神经元,胞体较小,圆形或椭圆形,胞质少,染色淡,有的神经元一端有小的突起。随着胎龄的增加,NOS阳性神经元胞体逐渐增大,粘膜下层也出现单个的NOS阳性神经元。第6-7个月龄时,肌间神经丛内NOS阳性神经元为多极神经元,稀疏地分布在靠内环肌一侧,肌间神经丛内形成神经纤维网,网中出现胞体较小淡染的NOS阳性神经元。在环肌层内可见到NOS阳性神经元分布。结论大肠壁内NOS阳性神经元的发育与各层组织细胞的发育有密切关系。     

人-人嵌合抗丙肝抗体检测阳性对照品的研制及应用

目的:获得人-人嵌合型抗丙肝抗体的阳性对照品。方法:采集20例具有高抗体滴度的抗丙肝抗体阳性患者外周血,混合后分离外周血单个核细胞,TRIzol提取总RNA,逆转录合成cDNA。PCR分别扩增重链可变区和轻链可变区并以其为模板,获得ScFv,导入到PCANTAB 5E载体上构建噬菌体展示库。分别用NS3、NS4、NS5和core抗原对噬菌体库进行5轮的富集和淘洗;通过Phage ELISA的方法对单克隆菌落进行特异性鉴定,分别获得抗丙肝NS3、NS4、NS5抗体和两个抗丙肝core抗体。将ScFv的VH和VL分别克隆到pcDNA3.4载体上,构建人IgG全长抗体并通过Lipo3000转染293T细胞。收集细胞上清,经protein A纯化,保存于-80℃。结果:成功构建了抗丙肝抗体噬菌体库;筛选并表达了5个分别针对NS3、NS4、NS5和core抗原的阳性抗体,经验证表达的抗丙肝阳性抗体在-20°C~37°C表现稳定。多次重复冻融后不会影响抗体的使用效果。且5种抗体在国内外多种丙型肝炎检测试剂盒间测试均为阳性,具备一定的通用性。结论:获得5种人-人嵌合型抗丙肝抗体的阳性对照品且适用于多种丙型肝炎检测试剂盒。     

人胎胃粘膜NOS阳性细胞的免疫组化观察

目的:探讨人胎胃粘膜NOS阳性细胞发育规律。方法:用免疫组织化学法对人胎胃粘膜NOS阳性细胞的表达进行观察。结果:第3~6个月龄时,胃粘膜固有层内皆可见胞体较小的NOS阳性细胞分布,随着胎龄的增加,NOS阳性细胞数目逐渐增多,染色逐步加深。第7个月龄时,NOS阳性细胞增殖达到高峰,胞体增大,构成胃腺的一部分。第8~10个月龄时,胃腺中NOS阳性细胞数目显著减少,但细胞胞体大,胞质多,深染。结论:胃粘膜内NOS阳性细胞的发育与胃粘膜上皮细胞及胃腺的发育密切相关。     

豚鼠耳蜗核SP阳性神经元向下丘的投射-HRP逆行追踪与免疫组化双标

目的 研究豚鼠耳蜗核P物质（SP）免疫反应阳性产物的分布特点及SP标记神经元向下丘投射方式。方法 采用辣根过氧化物酶（HRP）逆行追踪及免疫组织化学技术。结果 SP免疫反应（SP－IR）阳性的纤维和终末主要分布在耳蜗背侧核,而SP－IR阳性神经元主要分布在耳蜗腹侧核,在腹侧核尚可见SP阳性终末包绕SP阳性胸体形成环形结构,一侧下丘中央核注入HRP后,对侧耳蜗核HRP标记细胞分布于耳蜗前腹核及背侧核,耳蜗后腹核呈阴性反应。同侧耳蜗后腹核HRP标记神经元数量也较少,在对侧耳蜗前腹核,HRP－SP双标神经元约占标记细胞的44％,SP单标细胞占标记细胞的50％,HRP单标细胞占6％。耳蜗背侧核内侧也可见少量的双标细胞。结论 SP是耳蜗核上行投射神经元的递质或调质。     

阿苯达唑脂质体口服液质量控制中薄层层析条件的筛选与应用

目的：筛选确定阿苯达唑脂质体口服液质量控制中的阿苯达唑,磷脂的薄层层析色谱（TLC）优化条件。方法：采用正交试验设计,碘池显色,计算分离度,根据直观分析和方差统计分析。确定TLC条件。结果：分别确定了TLC分离阿苯达唑脂质体中阿苯唑脂质体中阿苯达唑及分解产物、磷脂及分解产物的优化条件。结论：此法应用于阿苯达唑脂质体的稳定性和质量考察中,直接点样分离,操作简便,分离效果满意,结果直观可靠。