RP-HPLC同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rg1、Rh1、Rd、Rg3和C-K的含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rg1、Rd、Rh1、Rg3和C-K的含量。方法:采用WelchromC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;流速为1.0mL/min;柱温为30℃;检测波长为203nm。结果:人参皂苷Rg1,Rh1,Rd,Rg3和C-K的线性范围分别为0.740~7.400μg(r=0.9999);0.536~5.360μg(r=0.9999);1.128~11.280μg(r=0.9999);0.3080~3.080μg(r=0.9999);0.376~3.7600μg(r=0.9999)。平均加样回收率分别为97.12%(RSD=1.22%),98.50%(RSD=0.87%),98.00%(RSD=1.06%),98.12%(RSD=1.66%)和96.65%(RSD=1.48%)。结论:该法操作简便,结果可靠,适用于西洋参转化产物的含量测定。     

抵挡汤对糖尿病大血管病变小鼠主动脉NLRP3炎症小体活化炎症级联反应的作用机制

目的:观察糖尿病大血管病变进程,探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响.方法:选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大血管病变模型,并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂量组和辛伐他汀组;并以同批次同周龄ApoE-/-小鼠仅高脂喂养,作为ApoE-/-组...     

人参皂苷Rg3含量的变化

目的:建立经真菌转化前后三七中人参皂苷Rg3的含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Phenomex C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱;柱温30℃,检测波长为203nm,流速1.0mL/min,进样量为20μL。结果:人参皂苷Rg3的回归方程:Y=35672013X-2413,r=0.99992,在0.0019～0.2488 mg/mL范围内有良好的线性关系,平均回收率为99.56%,RSD=1.48%(n=8)。结论:该方法简便、快捷、准确、重复性好,可用于三七发酵产物中人参皂苷Rg3的含量测定。     

人参皂苷Rg2对大鼠化学性心肌缺血的影响

目的 :观察人参皂苷Rg2 对化学性心肌缺血的保护作用。方法 :采用异丙肾上腺素、亚硝酸钠、垂体后叶素制备大鼠心肌缺血模型 ,iv给予人参皂苷Rg₂2.5～10.0mg·kg^-1,观察心电图及心肌病理变化。结果 :人参皂苷Rg₂ 能明显抑制心电图S T段J点偏移 ,减小心肌坏死面积 ,降低肌酸激酶 (CK)、过氧化脂质 (MDA)含量 ,升高超氧化物歧化酶 (SOD)。结论 :人参皂苷Rg₂ 对大鼠心肌缺血有明显改善作用。     

HPLC测定明目颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷Rb1的含量

目的:建立明目颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定方法。方法:采用HPLC,DikmaDiamonsil(钻石)C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈(A)-水(B)进行梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长203nm,柱温25℃,进样量10μL。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.352～2.112μg(r=0.999 3),0.914～5.484μg(r=0.999 2),0.910～5.460μg(r=0.999 1);平均加样回收率分别为99.4%,102.72%,101.89%,RSD分别为2.56%,2.16%,2.16%。结论:本试验建立的测定方法简便、重复性好、精密度高,可用于该制剂的质量控制。     

NLRP3炎症小体在糖尿病神经病变中的作用及中医药防治的研究进展

糖尿病神经病变是糖尿病最常见的并发症之一,常累及周围神经系统和中枢神经系统。神经炎症是糖尿病继发神经损伤的关键致病因素。NOD样受体热蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain-containing 3,NLRP3)炎症小体是一组亚细胞多蛋白复合物,包括NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck-like protein, ASC)和前天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(pro-cysteinyl aspartate specific proteinase 1,pro-caspase-1),其作为先天免疫反应的诱导剂,激活后诱发的炎症级联反应通过产生和释放炎症介质、触发细胞焦亡和自噬失控、诱导神经胶质细胞活化、增加外周免疫细胞浸润以及促进淀粉样蛋白β(amyoid β,Aβ)-tau级联等参与糖尿病继发的中枢神经、躯体神经、自主神经以及视网膜神经细胞的损伤。因此,作为诱导神经炎症的核心位点,NLRP3炎症小体可能为糖尿病神经病变的治疗提供新的靶点。中医药具有多靶点、低毒、副作用少的优势,在糖尿病神经病变中扮演重要角色,并且...     

HPLC测定冠心丹参胶囊中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、 三七皂苷R1

目的:建立冠心丹参胶囊中三七的含量测定方法。方法:采用RP-HPLC梯度洗脱法对制剂中人参皂苷Rg1,Rb1三七皂苷R1进行定量测定,波长203 nm。结果:人参皂苷Rg1线性范围5.359～37.641μg;平均加样回收率99.51%;RSD为0.46%。人参皂苷Rb1线性范围5.401～35.732μg;平均加样回收率100.06%;RSD为0.39%。三七皂苷R1线性范围2.867～16.631μg;平均加样回收率99.78%;RSD为0.36%。结论:所建立的方法简便、重复性好、准确度高,可作为该产品的质量控制方法。     

HPLC测定复方丹参胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、 人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量

目的:采用高效液相色谱法测定复方丹参胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。方法:样品经70%甲醇超声处理,采用色谱柱Thermo ODS-HYPERSIL(4.6 mm×200 mm,5μm),柱温30℃,流动相乙腈-水,梯度洗脱,检测波长203 nm。结果:三七皂苷R1在0.053 45～5.345μg,人参皂苷Rg1在0.224 25～7.475μg,人参皂苷Re在0.044 05～4.405μg,人参皂苷Rb1在0.225 15～7.505μg线性关系良好(r=0.999,n=6)。三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的平均加样回收率(n=9)分别为96.2,95.6%,105.6%,100.4%。结论:该方法灵敏度高、专属性好、操作简便、重复性好。     

HPLC法同时测定高冠平胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定高冠平胶囊中三七、红参所含皂苷类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为HibarC18(250mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈,B为水;流速为1.0mL.min-1;检测波长为203nm;洗脱程序:0～35min,A相为19%,B相为81%;35～85min,A相为19%→35%,B相为81%→65%;85～100min,A相为35%→19%,B相为65%→81%。结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1分别在0.4104～3.2832μg、2.0884～16.7072μg、1.222～9.776μg、2.0072～16.0576μg范围内呈良好的线性关系,其回收率分别为98.92%、98.97%、99.01%、99.25%,RSD分别为1.08%、1.06%、0.85%、1.15%。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于高冠平胶囊的质量控制。     

人参皂苷Rg1鼻腔喷雾剂的药效学研究

目的:考察人参皂苷Rg1(GRg1)鼻腔喷雾剂的药效学。方法:采用水迷宫考察GRg1鼻腔喷雾剂对正常小鼠空间学习能力的影响:小鼠随机分成空白组、GRg1生理盐水溶液鼻腔给药组、GRg1鼻腔喷雾剂组。每组16只,每天给药2次,连续7 d。GRg1生理盐水溶液鼻腔给药组、GRg1鼻腔喷雾剂组给药剂量均为30 mg·kg–1;空白组给予等体积的生理盐水。采用跳台法考察GRg1鼻腔喷雾剂对模型小鼠记忆获得障碍、记忆巩固障碍和记忆再现障碍的影响:小鼠随机分为5组:正常组、模型组、GRg1生理盐水溶液ig组、GRg1生理盐水溶液鼻腔给药组、GRg1鼻腔喷雾剂组,每组14只,每天给药2次,连续7 d。GRg1生理盐水溶液ig组、GRg1生理盐水溶液鼻腔给药组、GRg1鼻腔喷雾剂组给药剂量均为30 mg·kg-1;正常组和模型组鼻腔给予等体积的生理盐水。于末次给药30 min后,除正常组外各组均造模,用跳台法测试。结果:GRg1鼻腔喷雾剂使正常小鼠第3天和第7天在水迷宫中到达平台时间缩短(P<0.05)、在水迷宫中5 min内错误次数减少(P<0.05);对东莨菪碱致记忆获得障碍小鼠在跳台内的错误次数减少(P<0.01)、潜伏期延长(P<0.05);对亚硝酸钠所致记忆巩固障碍小鼠在跳台内的错误次数减少(P<0.05)、潜伏期延长(P<0.01);对35%乙醇所致记忆再现障碍小鼠在跳台内的错误次数减少(P<0.05)、潜伏期延长(P<0.01)。结论:GRg1鼻腔喷雾剂鼻腔给药使正常小鼠和记忆障碍小鼠的学习和记忆功有不同程度的改善。     

Coriolus versicolor alleviates diabetic cardiomyopathy by inhibiting cardiac fibrosis and NLRP3 inflammasome activation

Coriolus versicolor (CV) is a traditional medicine and food mushroom. Our previous study demonstrated that CV extract exhibited anti‐hyperglycemia and anti‐insulin resistance effects. However, the effect of CV on cardiac function in diabetic cardiomyopathy (DCM) remains unclear. Therefore, we aimed to investigate the effect of CV on cardiac function in diabetes mellitus (DM) rats. We found that the cardiac dysfunction of DM rats was markedly improved by CV extract treatment. CV extract administration significantly attenuated cardiac fibrosis in DM rats, which was accompanied by suppressed transforming growth factor beta 1 (TGF‐β1)/Smad signaling as indicated by decreased levels of TGF‐β1, p‐Smad2, and p‐Smad3 and increased Smad7 expression. Moreover, CV extract treatment significantly alleviated cardiac inflammation as shown by decreased levels of NLRP3 receptor, cleaved caspase‐1, IL‐1β, and IL‐18 in DM rats at least partly due to the inhibition of the NF‐κB. In addition, high‐glucose treatment induced cardiac fibrosis and increased cardiac inflammation in cardiac fibroblast cells, but these effects were ameliorated by CV extract treatment. Therefore, we conclude that the protective effect of CV on DCM is associated with the suppression of TGF‐β1/Smad signaling and attenuation of NLRP3 inflammasome activation, suggesting that CV extract may be a potential therapeutic agent for DCM.     

人参皂苷Rg3固体分散体的制备与体外特性研究

目的 采用固体分散技术,比较3种不同载体对人参皂苷Rg3的溶解度和体外溶出度的作用.方法 分别以泊洛沙姆188(F68)、聚维酮k29/32(PVP)和聚乙二醇6000(PEG)为载体,采用熔融法或溶剂法,制备人参皂苷Rg3固体分散体,测定溶解度,进行溶出度试验,并采用差热量热分析(DSC)法鉴别药物在固体分散体中的存在状态.结果 各种固体分散体均能显著增加人参皂苷Rg3的溶解度,加快其体外溶出.人参皂苷Rg3可充分分散在载体中并形成低共熔物.结论 F68作为载体制成固体分散体,对增加人参皂苷Rg3的溶解度和体外溶出度的效果优于PEG和PVP.     

HPLC法测定乌参醒脑滴丸中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd

目的建立乌参醒脑滴丸(人参、首乌,银杏叶提取物)中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd的HPLC测定方法。方法采用Diamonsil-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5.0μm),柱温30℃;流动相为乙腈和水进行梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min;检测波长为203 nm。结果人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd分别在11.68～58.4μg/mL、15.30～153.0μg/mL、13.25～132.5μg/mL、7.65～76.5μg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,4种皂苷类成分的平均回收率为97.5%(RSD为1.56%)、100.3%(RSD为2.13%)、97.6%(RSD为1.98%)、98.6%(RSD为1.53%)。结论该法灵敏、简便、准确,可用于乌参醒脑滴丸的质量控制。     

人参皂苷Rg1通过调控AMPK/NLRP3通路介导的细胞焦亡抑制大鼠肺纤维化研究

目的 探究人参皂苷Rg₁对大鼠肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的影响及作用机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg₁(72 mg/kg)组、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)激动剂(200 mg/kg)组、人参皂苷Rg₁(72 mg/kg)+AMPK抑制剂(20 mg/kg)组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠气管内注射博来霉素(5 mg/kg)构建大鼠PF模型。造模成功后2 d开始给药,连续给药28 d后检测大鼠肺功能指标;采用苏木素-伊红(HE)、Masson染色观察肺组织病理变化;采用免疫组化检测肺组织I型胶原(collagen I)和α-肌动球蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;采用试剂盒测定肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-...     

正交试验优选人参中人参皂苷Rg_1的酶解工艺研究

目的优化酶解法提取人参皂苷Rg1的工艺条件。方法采用高效液相色谱法为测定方法,以人参皂苷Rg1提取率为指标,通过正交设计试验进行优选。结果纤维素酶酶解为最优方法,且酶用量、酶解时间、酶解温度对人参皂苷Rg1提取率有显著性影响;提取人参皂苷Rg1的最佳工艺条件为:纤维素酶用量为1.4%,酶解60min,酶解温度为45℃。结论优化后的提取工艺简单、稳定、提取率高。     

HPLC-ELSD测定三七药材及其制剂中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及Rb1的含量

目的 :用HPLC-ELSD测定三七药材及其制剂血塞通注射液中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁的含量。方法 :色谱柱填料为十八烷基健合硅胶 ,流动相为乙腈 水 ,梯度洗脱 ;漂移管温度 10 5℃ ,载气流速 2.9L·min^-1。结果 :三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁分别在 0.4 5 0 6～ 2.2 5 30 ,1.4 772～ 7 386 0 ,1 2 0 6. 6～ 6 .0 330 μg呈良好线性关系 ;药材中 3种成分的平均回收率分别为 97 1% (RSD 1.9% ) ,96 8% (RSD 2.0 % ) ,97 0 % (RSD 2.2 % ) ;血塞通注射液中分别为 98.7% (RSD 1.9% ) ,98.5 % (RSD 1.8% ) ,98.1% (RSD 1.4 % )。结论 :该方法简便、准确、分离效果好 ,无干扰 ,可用于三七药材及血塞通注射液的质量评价。     

HPLC法测定林下山参制浆前后人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2含量的变化

目的分析林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2含量的变化情况。方法采用HPLC-UV法,Innoval ODS-2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水溶液进行梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;进样体积20μL;检测波长203 nm。结果林下山参中6种人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2质量分数分别由制浆前的0.651、0.506、0.363、0.014、0.023、0.031 mg/g变化为制浆后的0.517、0.413、0.105、0.122、0.214、0.098 mg/g。人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2分别在2.5~100 mg/L具有良好的线性关系,r2均大于0.999 5;精密度、稳定性及重复性良好;平均加样回收率为95%~105%,RSD为1.25%~3.05%。结论林下山参中6种人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1、Rg_3、Rh_1、Rh_2的含量在制浆前、后发生变化。林下山参制浆后人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量降低,稀有人参皂苷Rg_3、Rh_1、Rh_2的含量分别增高8.7、9.3、3.2倍。基于HPLC最佳分离参数建立的6种人参皂苷成分同时分析的方法具有较好的准确性和可靠性,可为林下山参浆的质量评价提供科学依据。     

Narirutin exerts anti-inflammatory activity by inhibiting NLRP3 inflammasome activation in macrophages

Citrus peel has long been used in traditional medicine in Asia to treat common cold, dyspepsia, cough, and phlegm. Narirutin–a flavanone-7-O-glycoside–is the major flavonoid in citrus peel, and has anti-oxidative, anti-allergic, and anti-inflammatory activities. However, the anti-inflammatory mechanism of narirutin has not been fully elucidated. This study is aimed to investigate the effects of narirutin on the Nod-like receptor protein 3 (NLRP3)-mediated inflammatory response in vitro and in vivo, and determine the underlying mechanism. THP-1 differentiated macrophages and bone marrow-derived macrophages (BMDMs) were used for in vitro experiments, while dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis and alum-induced peritonitis mouse models were constructed to test inflammation in vivo. Narirutin suppressed secretion of interleukin (IL)-1β and pyroptosis in lipopolysaccharide (LPS)/ATP-stimulated macrophages. Narirutin decreased the expression of NLRP3 and IL-1β in the LPS-priming step through inhibition of NF-κB, MAPK and PI3K /AKT signaling pathways. Narirutin inhibited NLRP3–ASC interaction to suppress NLRP3 inflammasome assembly. Furthermore, oral administration of narirutin (300 mg/kg) alleviated inflammation symptoms in mice with peritonitis and colitis. These results suggest that narirutin exerts its anti-inflammatory activity by suppressing NLRP3 inflammasome activation via inhibition of the NLRP3 inflammasome priming processes and NLRP3–ASC interaction in macrophages.     

HPLC-ELSD法测定疲王颗粒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1

目的建立疲王颗粒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的定量测定方法。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱:0~20 min,20%乙腈;20~35 min,20%~30%乙腈;35~55 min,30%乙腈;55~56 min,30%~45%乙腈;体积流量0.8 mL/min;柱温25℃;ELSD漂移管温度100℃,气体流量3 L/min。结果人参皂苷Rg1、Re、Rb1的线性范围分别为125.44~470.40μg/mL(r=0.999 6)、88.96~333.60μg/mL(r=0.999 2)、157.12~589.20μg/mL(r=0.999 5),其平均加样回收率分别为100.27%(RSD为1.713%,n=9)、101.29%(RSD为1.220%,n=9)、101.00%(RSD为1.668%,n=9)。结论该方法测定简便、快速、重复性好,可作为疲王颗粒的质量控制方法。     

人参皂苷Rg1诱导人肝HL-7702细胞糖皮质激素受体报告基因表达的作用

目的探讨人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,G-Rg1)对人肝HL-7702细胞糖皮质激素受体(GR)的调节作用。方法将含有糖皮质激素受体反应元件(GRE)的荧光素酶报告基因的表达质粒载体pGRE-tk-LUC与内参照基因载体质粒pRL-SV40,通过脂质体介导瞬时转染至人肝HL-7702细胞中,利用双荧光素酶报告基因检测系统,观察报告基因的表达变化;利用Western blotting方法检测药物对细胞GR蛋白表达的影响。结果G-Rg1与地塞米松均可诱导pGRF-tk-LUC报告基因表达,且呈剂量依赖性,而且这种诱导作用可以被糖皮质激素受体阻断剂RU486(Mifepristone)所阻断,G-Rg1对细胞GR蛋白表达有显著的抑制作用。结论G-Rg1在体外能够表现出一些类似糖皮质激素样的生物活性,可能是GR的配体。