下调Foxp3基因表达对人调节性T细胞功能的影响

目的 利用RNA干扰技术下调Foxp3表达,观察其对人CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表型及功能的影响.方法 利用Foxp3 siRNA转染人CD4+CD25+Treg,荧光显微镜和流式细胞仪(FACS)检测转染效率,实时定量PCR和Western印迹分别鉴定Foxp3基因及Treg功能相关基因表达、Foxp3蛋白表达,细胞增殖实验检测Treg抑制功能,FACS测Treg表型标记,ELISA检测细胞因子表达.结果 Foxp3 siRNA转染人CD4+CD25+Treg效率为68%,与对照组相比,转染后的细胞Foxp3基因下调了61.4%(P<0.01),Foxp3蛋白表达较低,Treg功能相关基因和主要表型标记也较对照组有改变,差异有统计学意义.功能试验提示无论是在异种还是同种抗原刺激的淋巴细胞反应中,Foxp3 siRNA转染的Treg与对照组相比,对效应性T细胞的抑制作用较弱(异种抗原组83%比48%,P<0.05;同种抗原组65%比28%,P<0.01),且主要抑制性和效应性细胞因子的表达下降,差异有统计学意义.结论 Foxp3是人天然Treg 维持其抑制性功能的核心细胞内标志.

Abstract：

Objective To employ the technology of interfering RNA (RNAi) to identify the role of Foxp3 in the in vitro suppressive effect of human regulatory T cell (Treg) on effector T cells. MethodsExpanded human Treg were transfected with siRNA targeting Foxp3 genes. The transfection efficiency, the level of corresponding gene and its protein expression were measured by fluorescent microscopy, fluorescence-activated cell sorting (FACS), real-time PCR and Western blot respectively. The phenotypes of Treg were analyzed by FACS. The siRNA transfected Treg was then co-cultured with porcine PBMC or human PBMC-stimulated autologous CD4+CD25- T cells. Their proliferations were examined by WST-1. Treg and autologous CD4+CD25- T cell-related suppressive cytokines were assessed by ELISA. ResultsA 68% transfection efficiency in expanded Treg was achieved for Foxp3 siRNA. Real-time PCR revealed a 61.4% mRNA knockdown induced by siRNA targeting Foxp3 genes in Treg versus the control (P<0.01). Some Treg-associated surface markers were significantly altered versus the control. And the production of suppressive cytokines was lowered. These changes were correlated with the diminished Treg activity in suppressing the proliferation of effector CD4+CD25-T cells. There was 83% suppression by non-transfected Treg vs 48% suppression by Foxp3 siRNA transfected Treg in xeno-immune response (P<0.05);and 65% suppression by non-transfected Treg vs 48% suppression by Foxp3 siRNA transfected Treg in allo-immune response (P<0.01). Conclusion Foxp3 is a key intracellular marker for maintaining the phenotypes and functions of Treg.     

TGF-β_1和COX-2对CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的调控作用

作为一种抑制性T细胞功能亚群,CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5Treg)在维持机体的免疫自稳和免疫耐受方面发挥了关键作用。近年来研究表明,CD4+CD2+5Treg能通过相同的机制削弱机体的抗肿瘤效应。在乳腺癌、卵巢癌、肺癌以及肝癌等多种实体肿瘤和血液恶性肿瘤患者外周血和肿瘤局部微环境中,CD4+CD25+Treg比例增高,且数目与患者肿瘤进展程度和预后、生存率呈负相关,是免疫治疗的新的有效靶点。现就转化生长因子β1和环氧合酶2对CD4+CD2+5Treg参与肿瘤免疫逃逸的调控及作用方式予以综述。     

二甲双胍抑制酸性环境下的调节性T细胞增殖及功能

目的 探讨二甲双胍对酸性环境下的调节性T细胞（Treg）的调控及二甲双胍的抗肿瘤作用。 方法 经磁珠分选得到CD4+CD25+ Treg细胞。在pH 7.4或pH 6.7环境加入二甲双胍干预的条件下,培养Treg或T细胞（Tcon）24~72 h后,采用流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及Foxp3表达情况,采用Real-time PCR检测糖代谢相关基因水平。动物实验中,将32只C57BL/6雄性小鼠单次皮下注射RM-1细胞建立小鼠前列腺癌模型,随机分为PBS对照组、二甲双胍治疗组、疫苗治疗组及联合治疗组（各组n=8）。于接种后第4天开始,按100 mg· kg-1· d-1给予二甲双胍治疗组及联合治疗组小鼠腹腔注射二甲双胍,给予疫苗治疗组及联合治疗组小鼠每4 d一次肌注疫苗。PBS注射作为对照。连续监测肿瘤大小,在植瘤后第25天处死小鼠获取肿瘤及血液样本。采用流式细胞术检测瘤内及外周血内CD4+、CD8+、CD4+Foxp3+细胞亚群的变化。 结果 较中性缓冲条件,酸性环境下Treg细胞活性增强（P<0.05）,而Tcon细胞增殖受到抑制（P<0.001）。QPCR结果显示,酸性环境较正常酸碱环境下,Treg细胞OXPHOS相关基因pgc1a（P<0.001）及cox5b（P<0.01）水平增高,而Tcon细胞内相关基因水平变化不显著。酸性环境下Treg细胞凋亡显著减少（P<0.01）、Foxp3+细胞比例增加（P<0.001）、胞内pH值偏碱性（P<0.001）,加入二甲双胍,逆转了Treg细胞的酸性耐受。但是,二甲双胍对Tcon细胞影响不显著。动物实验中,二甲双胍（P<0.05）或疫苗（P<0.01）单独治疗均可减小肿瘤体积,而联合治疗组肿瘤体积减小最多（P<0.001）。二甲双胍单独治疗对肿瘤内CD4+细胞、CD8+细胞影响不明显,但可显著降低CD4+Foxp3+细胞比例（P<0.05）,而疫苗单独治疗显著提高肿瘤内CD4+细胞、CD8+细胞（P<0.001）,但CD4+Foxp3+细胞也升高（P<0.05）。联合治疗组肿瘤内CD4+细胞、CD8+细胞增高最多（P<0.01）,CD4+Foxp3+细胞比例较疫苗单独治疗组下降（P<0.01）。结论 二甲双胍抑制酸性环境下的调节性T细胞增殖及功能,并且在体内通过减少Treg细胞比例提高肿瘤疫苗效果,发挥抗肿瘤功能。     

CD+4CD+25调节性T细胞在肿瘤免疫治疗中的价值及应用前景

恶性肿瘤的临床治疗主要是手术治疗、化学治疗和放射治疗.近年来,随着分子生物技术的不断发展,肿瘤的生物治疗在临床应用中的地位日渐突出.但是免疫细胞过继治疗作用的一过性和功能抑制成为影响其临床应用的瓶颈,其中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋ regulatory T cell ,Treg）在抑制肿瘤免疫方面起着重要作用.本文就其近年来的肿瘤临床研究进展做一综述.     

人天然CD4+CD25+调节性T细胞的体外扩增培养及鉴定

目的：建立有效的体外培养扩增人天然CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的体系,并检测扩 增细胞的表型及体外免疫抑制功能,为Treg应用于临床免疫治疗提供实验基础。方法：免疫磁珠分离(MACS)方法从 人外周血单个核细胞中分离CD4+CD25+Treg,加入抗CD3/CD28包被磁珠刺激扩增;用台盼蓝染色法测定新鲜分选 的和扩增的Treg的数量和活性,用流式细胞法检测新鲜的和扩增的Treg主要表型标志和纯度,用混合淋巴细胞反应 (mixed lymphocyte reaction,MLR)法检测扩增的Treg对羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酶(CFSE)标记的自体和异体的 CD4+CD25–T细胞增殖的抑制作用。结果：扩增3周后Treg数目约为新鲜分选细胞数的2 000倍(由5.23×105±1.52×105扩增 至1.02×109±0.20×109),活性>97%。扩增3周后的Treg与新鲜分选细胞保持了相似的表型特征：CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺三阳细 胞约占(94.22±2.12)%,与新鲜分选细胞相似。扩增3周后的Treg对自体和异体的CD4+CD25–T细胞的增殖均有明显的抑 制作用,抑制率随着效靶比浓度的增高而增高(P<0.01),而且其各浓度梯度对自体和异体CD4⁺CD25^–T细胞的抑制率 无明显差异(P>0.05)。结论：创建的分离和体外扩增人CD4⁺CD25⁺Treg的方法,可以大量扩增出高纯度且保留其免疫 抑制功能的Treg,解决了Treg数目少的问题,有利于进一步的免疫研究和治疗。     

从Th17和CD4+CD25+Foxp3+T细胞功能变化探讨肺结核的耐药机制

目的 分析耐药肺结核患者外周血Th17细胞与CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例及细胞因子的变化,从免疫学角度探讨其耐药机制。 方法 分别选取33例耐药肺结核(耐药组)、49例普通肺结核(普通组)及51例健康志愿者(对照组)展开对比研究。检测Th17细胞与CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例;采用RT-PCR检测其特异性转录因子RORγt与Foxp3的mRNA表达水平;采用ELISA实验检测IL-17A、IL-17F、TGF-β1及IL-10的血清水平。 结果 普通组Th17细胞比例和RORγt mRNA表达水平低于对照组,耐药组低于普通组;普通组CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例和Foxp3 mRNA表达水平高于对照组,耐药组高于普通组;普通组Th17/CD4+CD25+Foxp3+T和RORγt/Foxp3低于对照组,耐药组低于普通组(P＜0.05)。普通组IL-17A、IL-17F水平低于对照组,耐药组低于普通组;普通组TGF-β1、IL-10水平高于对照组,耐药组高于普通组;其组间差异均有统计学意义(P＜0.05)。 结论 Th17/CD4+CD25+Foxp3+T平衡向CD4+CD25+Foxp3+T偏移、免疫系统功能抑制,可能是结核病慢性化和产生耐药的重要机制之一。      

NOD小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞功能变化研究

目的：观察NOD小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的功能变化。方法：流式细胞仪分析NOD小鼠胰腺引流淋巴结（PLN）CD4^＋CD25^＋T细胞频率,CD4^＋CD25^＋T细胞中FoxP3^＋细胞的比例,CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋T细胞的FoxP3平均荧光强度（MFI）;检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的抑制功能。结果：在不同的年龄阶段,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量未发生明显变化,而随时间的推移,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞中FoxP3表达水平降低,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的功能也下降。结论：CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的抑制功能降低可能是NOD小鼠糖尿病发作的根本原因。     

转录因子FOXP3在肿瘤免疫中的作用

叉头样转录因子(FOXP3)是脊椎动物叉头样转录因子家族中的一员,通过调控Treg细胞的发育、分化和成熟,发挥其免疫抑制作用。在肿瘤学的研究领域中,FOXP3＋Treg细胞在肿瘤免疫逃逸机制中发挥了相当重要的作用。本文就FOXP3在各类肿瘤中的表达、肿瘤免疫中的作用机制以及免疫治疗中的作用作一综述。     

胃癌肿瘤引流淋巴结内Foxp3+调节性T细胞的分布

采用免疫组织化学方法检测胃癌肿瘤引流淋巴结和第二站淋巴结内调节性T细胞(Treg细胞)的分布和细胞数量.结果显示Foxp3+ Treg细胞弥散地分布于胃癌引流淋巴结的副皮质区和髓质区.胃癌肿瘤引流淋巴结内Treg细胞数明显多于第二站淋巴结(P＜0.01),进展期胃癌肿瘤引流淋巴结内Treg细胞数多于早期胃癌(P＜0.01).Treg细胞聚集胃癌肿瘤引流淋巴结内可能通过形成免疫耐受环境而促进肿瘤淋巴转移的发生.     

CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg调节性T细胞与移植肾长期存活的关系

[摘要] 目的 探讨肾移植术患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T 细胞( regulatory T cell , Treg) 百分含量,血清细胞因子IL-10的水平变化对移植肾远期存活的影响及其作用机制。 方法 肾移植术受者30例按肾移植术后恢复情况分为移植肾长期存活组16例,急性排斥组14例。健康志愿者20 例。分别检测外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 百分含量、血清IL-10 水平、血清肌酐水平,所得结果进行相关分析。 结果　移植肾长期存活组CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量较正常组及急性排斥组均显著升高。CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量和血清IL-10 水平呈正相关(r=0.604,p<0.05),移植肾长期存活组的血清肌酐水平明显低于急性排斥组,CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量和血清肌酐水平呈负相关（r=-0.534,p<0.05）。结论 CD4+CD25+Foxp3+ Treg 有可能参与移植术后受者对同种异体移植肾免疫耐受,与受者长期存活密切相关;外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量可作为临床反映移植受者免疫功能状态的指标之一。     

低剂量环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞功能的影响

目的：研究低剂量环磷酰胺（CTX）单次注射对Lewis肺癌小鼠CD4⁺CD25⁺Treg细胞功能的影响,探讨CD4⁺CD25⁺Treg 细胞与肿瘤发生、发展的关系。方法：将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型,随机分成3组：CTX组、肿瘤组、单纯对照组。采用CTX单次注射,观测各组肿瘤体积动态变化;采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测各组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能;采用LDH释放法检测脾脏特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)细胞的杀伤活性。结果：与未治疗肿瘤组相比,CTX治疗可延缓荷19 d Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长;CTX组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平明显低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞功能明显高于肿瘤组（P<0. 05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞杀伤活性比肿瘤组略高,但变化不显著（P>0.05）。结论：CTX单次注射可降低Lewis肺癌小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞的数量及Foxp3 mRNA表达,使T淋巴细胞增殖功能及脾细胞中CTLs杀伤功能增强。     

妊娠期高血压疾病妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达分析

目的 分析妊娠期高血压疾病(PIH)妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达变化。方法 连续选择近期住院确诊的PIH 妇女27例(PIH组),入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD+4CD+25 Treg 和CD+4CD+25 Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测,并与同期住院正常怀孕产妇 (对照组,20例)相同测试结果进行比较。结果 调节性T细胞数据中,PIH组血清CD+4CD+25 Treg和CD+4CD+25 Foxp3+ Treg水平明显低于对照组(P均<0.05～0.01)。辅助性T细胞中,PIH组血清CD+4/CD+8表达水平明显高于对照组,而CD+8表达水平则显著低于对照组(P均<0.05～0.01)。结论 PIH患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

白癜风患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的检测及意义

目的检测白癜风患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平变化及免疫调节剂对其表达的影响,进一步明确其在白癜风免疫治疗中的意义。方法白癜风患者36例,进展期24例,稳定期12例。采用流式细胞术检测不同病期白癜风患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平,并与20例正常人进行对照。对进展期白癜风患者给予免疫调节剂等进行综合治疗。结果进展期患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量低于正常对照组(P<0.05);稳定期患者与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);经卡介菌多糖核酸治疗后,进展期患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量高于治疗前(P<0.05),略低于正常对照组(P>0.05),稳定期患者与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白癜风患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的数量存在异常,使体内免疫功能处于失衡状态,卡介菌多糖核酸可能通过调节CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达水平,调节白癜风患者的细胞免疫功能,从而发挥治疗作用。     

老年2型糖尿病周围神经病变患者外周血调节性T细胞的检测及其临床意义

目的：探讨2型糖尿病周围神经病变（DPN）患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（Treg）的变化及其检测的临床应用。方法：采用流式细胞技术多色荧光分析法,对20例初诊老年DPN患者、20例初诊老年2型糖尿病（T2DM）不伴并发症患者及20例性别年龄匹配的健康对照（CON）者外周血中Treg细胞测定,对两组结果进行统计学分析。结果：与正常对照组比较,DPN组和DM组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞数量均显著减少（P<0.05）,且DPN组患者较DM组患者亦显著减少（P<0.05）;DPN组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞比例与MNSI评分呈负相关,但无统计学意义,而与MDNS评分则呈显著负相关（r=-0.339,P<0.05）。结论：老年DPN患者中CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞数量减少,可能在DPN的发生发展中起到一定作用。     

胸腺基质淋巴细胞生成素表达与外周血调节性T细胞的相关性

目的:探讨人胸腺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达水平与外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的相关性。方法:取23例先天性心脏病患者,分离外周血单个核细胞后表面染色及破膜胞内染色后,流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+Treg,同时取对应患者切除的胸腺组织,免疫组织化学法检测其TSLP的表达水平,统计分析其差异性,Logistic回归分析二者相关性。结果:23例先心病患者CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞比率为(5.73±0.56)%,胸腺Hassall小体TSLP表达水平为(18.87±3.06)个,Logistic回归分析表明二者呈正线性相关性。结论:人外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的水平与胸腺组织TSLP的表达密切相关,外周血Treg细胞数量的增加可能依赖于更高水平TSLP的表达。     

成人微小病变肾病患者外周血CD4~＋Foxp3~＋调节性T细胞的研究

目的研究CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋Foxp3＋Treg）及亚群在成人微小病变肾病（MCD）患者外周血CD4＋T细胞中的分布,探讨CD4＋Foxp3＋Treg参与MCD发病的可能机制。方法以27例经肾穿刺活检确诊为MCD的初发成人患者作为研究对象,采用Foxp3-FITC/CD45RA-PE/CD3-ECD/CD4-PC7抗体组合经流式细胞仪检测外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4＋Foxp3＋Treg及亚群占CD4＋T细胞的百分比。Real-Time PCR检测PBMCs中Foxp3、Th17转录因子RORc以及细胞因子TGF-β1、IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达。设立正常对照。结果流式细胞检测显示CD4＋Foxp3＋Treg分成3个细胞群体,分别为CD45RA＋Foxp3low（Ⅰ区,静息期Treg）、CD45RA-Foxp3high（Ⅱ区,活化Treg）和CD45RA-Foxp3low（Ⅲ区）。MCD组Ⅰ区＋Ⅱ区细胞和Ⅱ区细胞占CD4＋T细胞的百分比显著低于对照组（P〈0.01）。MCD组PBMCs中Foxp3mRNA表达较对照组下调（P〈0.05）,RORcmRNA表达较对照组上调（P〈0.05）,IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达均显著高于对照组（P〈0.05和P〈0.01）。相关性分析显示,MCD组IL-17A mRNA表达与Ⅱ区细胞占CD4＋T细胞的百分比呈显著负相关（r=-0.81,P〈0.05）。结论成人MCD患者外周血Treg及其活化功能亚群减少,同时伴有Th17转录基因及其相关细胞因子表达的异常升高。提示Treg Foxp3 mRNA表达下调及Treg/Th17细胞比例失衡可能与MCD的发病有关。     

非小细胞肺癌肿瘤间质T淋巴细胞亚群活性及临床意义

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者肿瘤间质T淋巴细胞亚群分布,探讨NSCLC临床分期与淋巴细胞各亚群比例及免疫功能的关系。方法收集60例NSCLC患者新鲜肿瘤标本,运用免疫组化染色方法检测T淋巴细胞亚群CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋（Treg）的分布。结果与I/II期患者比较,Ⅲ/Ⅳ期患者肿瘤组织中CD4^＋和CD4^＋/CD8^＋比值下降（P〈0.05）,CD8^＋和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋比值升高（P〈0.05）。较之癌旁组织,Treg细胞在肿瘤组织中明显富集。结论NSCLC患者T淋巴细胞免疫功能受抑制,作为主要免疫抑制细胞的Treg细胞比例与肿瘤分期呈正相关。     

宫颈癌人乳头瘤病毒感染与CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞的相关性研究

目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒（HPV）感染与T细胞亚群、CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg）的相关性。方法采用HPV核酸扩增分型检测试剂盒及流式细胞术检测宫颈癌组（40例）、正常对照组（20例）的HPV分型和外周血中T细胞亚群及CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率。结果HPV阳性的患者外周血T细胞亚群与HPV阴性的患者比较,差异无统计学意义（P〉O．05）,但调节性T细胞（Treg）在HPV阳性与阴性组之间比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。宫颈癌组外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。HPV与CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞呈显著正相关（r=0．613,P〈O．05）。结论宫颈癌患者免疫功能与正常人无明显差异,Treg细胞与宫颈癌患者HPV持续感染、肿瘤免疫逃避密切相关。     

FOLFOX方案化疗对胃癌术后患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞细胞增殖及功能的影响

目的探讨FOLFOX方案化疗对胃癌术后患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)比例及功能的影响。方法选择43例胃癌术后化疗患者,于化疗前1天、化疗结束后第5天采集外周血。采用流式细胞法检测外周血Treg细胞的比例;RT-PCR法检测外周血Treg细胞FoxP-3 mRNA表达水平;将分选的Treg细胞和CD4+CD25-T细胞按单纯Treg细胞组、1∶1混合细胞组,单纯CD4+CD25-T细胞组培养,3H-TdR掺入法检测Treg细胞体外抑制CD4+CD25-T细胞增殖的能力。结果 43例胃癌患者化疗前1天外周血Treg细胞占CD4+T细胞的比例为17.63%±6.31%,化疗后降至13.79%±4.82%(P<0.01);化疗后FoxP-3表达水平较化疗前显著下降(P<0.01);化疗后Treg细胞对CD4+CD25-T细胞的增殖抑制率由化疗前的54.64%±5.15%下降至24.63%±2.34%(P<0.01)。结论 FOLFOX化疗方案可减少胃癌患者外周血Treg细胞数量,下调其表面标志物FoxP3基因的表达水平,减弱Treg细胞的免疫抑制功能,有利于诱生抗肿瘤免疫效应。     

卵巢癌患者CD8+ T细胞中调节性T细胞相关分子标志物的表达率及临床意义

目的 :检测卵巢癌患者组织及外周血CD8~+T细胞中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)相关分子标志物的表达率,探讨其在卵巢癌发生发展中的临床意义。方法:用流式细胞术检测31例卵巢癌患者、31例卵巢良性肿瘤患者和31例健康对照者的外周血,以及14例卵巢癌组织和12例卵巢良性肿瘤组织CD8~+T细胞中Foxp3、CD25、CD28、CTLA-4及GITR的表达率。结果:Foxp3和CTLA-4在卵巢癌组织CD8~+T细胞中的表达率显著高于卵巢良性肿瘤组织(P<0.05);CD28在卵巢癌组织CD8~+T细胞中的表达率显著低于卵巢良性肿瘤组织(P<0.05)。卵巢癌患者外周血CD8+T细胞中Foxp3、CD25、CTLA-4的表达率显著高于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.05),CD28的表达率显著低于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.05)。结论:卵巢癌组织及外周血CD8~+Treg所占的比例显著高于卵巢良性肿瘤组及健康对照组,且CD8~+T细胞中Foxp3的表达率可能对了解卵巢癌进展状况有一定帮助。