人源化SCID小鼠模型的建立及其鉴定

目的：探讨在SCID小鼠体内移植人免疫细胞，建立人源化SCID小鼠模型及其特性鉴定。方法：SCID小鼠腹腔注射环磷酰胺（CTX）抑制骨髓造血，连续4天后，通过腹腔注射移植人外周血单个核细胞（PBMC）。4、8和12周后分别取小鼠外周血、脾脏、肝脏。荧光显微镜下观察SCID小鼠外周血中人CD3^＋、CD19^＋细胞；流式细胞仪测定全血中人CD3^＋、CD19^＋细胞百分率；免疫组织化学分析SCID小鼠肝脏和脾脏中人CD3^＋、CD19^＋细胞；ELISA检测SCID小鼠血清中人免疫球蛋白含量。结果：（I）SCID小鼠移植人外周血单个核细胞4、8和12周后在小鼠外周血中通过荧光显微镜下可观察到人CD3^＋、CD19^＋细胞，4周后流式细胞仪测得小鼠外周血单个核细胞中人CD19^＋、CD3^＋细胞百分率分别为10．6％、31．7％；（2）免疫组织化学结果显示在小鼠脾脏中存在人CD3^＋、CD19^＋细胞；（3）移植人外周血单个核细胞4、8和12周后ELISA测得小鼠血清中人免疫球蛋白的含量分别为390、1100和1040μg／ml。结论：成功地在SCID小鼠体内建立了人免疫系统。     

肿瘤病人细胞免疫功能状态及其临床意义

目的：研究肿瘤患者的外周血T淋巴细胞亚群的表达情况及其临床意义。方法：采用流式细胞仪分析172例肿瘤患者和56例正常对照者外周血T细胞亚群表达情况,同时检测肿瘤病人外周血肿瘤标志物CEA水平。结果：肿瘤病人外周血中T淋巴细胞（CD3＋细胞）比例较正常人有减少趋势,但无显著性差异;与正常人相比,CD4＋细胞比例均较正常人降低,其中肺癌组和其它组有显著性差异,并且有Th1向Th2的漂移趋势;CD8＋细胞则有升高趋势,且在肺癌组、胃癌组和其它组存在显著性差异;与正常人组比较各组CD4＋/CD8＋细胞比值明显降低,差异有显著性。肿瘤病人根据CEA水平分组,CEA升高组较CEA正常组CD4＋/CD8＋细胞比值明显降低,差异有显著性。结论：肿瘤患者CD4＋T细胞/CD8＋T细胞比例的降低可能反映了细胞免疫功能的紊乱,T细胞亚群可与肿瘤标志物协同用于了解病人的疾病和免疫状态。     

肺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞的格局变化及意义

目的：研究肺癌患者外周血（PBMC）及肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）中CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的比例改变，探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法：分离肺癌患者PBMC及TIL，FACS分析CD4^＋／CD8^＋T细胞的比值及CD4^＋ CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比例。Real-time PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果：肺癌患者PBMC及TIL中CD4^＋／CD8^＋比值降低；而CD4^＋ CD25^high T细胞在CD4^＋T细胞中所占比例升高；Foxp3基因仅在TIL中高表达，而在PBMC中低或不表达，表明肿瘤局部的CD4^＋ CD25^high T细胞主要是CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论：CD4^＋ CD25^high Foxp3^＋ Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高，可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8^＋T细胞的杀伤效应，最终发挥免疫抑制效应相关。     

软骨多糖作用下S_(180)荷瘤小鼠免疫功能的变化

研究软骨多糖作用下,S180荷瘤小鼠的免疫功能的变化。采用小鼠肉瘤S180细胞建立动物腹水瘤模型,然后随机将小鼠分为空白组、模型组和治疗组,连续腹腔注射生理盐水或软骨多糖,分别测量外周血中性粒细胞、T淋巴细胞亚型的变化,及巨噬细胞的活性变化。结果发现软骨多糖能够提高荷瘤小鼠中性粒细胞的数目,提高外周血细胞CD3+、CD4+细胞数,增加CD4+/CD8+细胞比值,显著提高巨噬细胞吞噬中性红和鸡红细胞的能力。软骨多糖能通过增强S180荷瘤小鼠的免疫功能而抑制肿瘤的生长。     

环孢霉素A对OVA免疫TCR转基因DO11.10小鼠CD4+CD25+T细胞的影响

目的：研究免疫抑制剂Csh对处于免疫应答状态的小鼠脾脏调节性CD4^＋CD25^＋T细胞影响。方法：采用流式细胞术检测卵白蛋白（OVA）免疫的DO11．10小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞及其中Foxp 3^＋T细胞的变化。结果：OVA免疫后脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞百分数及Foxp 3^＋T细胞占CD4^＋CD25^＋T细胞百分数均增加，显示CsA可明显减少正常及免疫应答状态下小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞及CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞百分数。结论：CsA在抑制免疫应答的同时也可能抑制了免疫耐受的诱导。     

促红细胞生成素对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:检测促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对荷黑色素瘤小鼠免疫功能的影响.方法:将C57BL/6小鼠随机分为3组:正常对照组、盐水处理组和EPO处理组,盐水处理组和EPO处理组小鼠皮下接种黑色素瘤细胞B16.17天后,检测各组小鼠外周血中红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)和白细胞(WBC)数量及脾脏脏器指数;应用流式细胞术检测脾细胞CD4+、CD8+T细胞亚群的分布;ELISA检测血清中IL-2和TNF-α细胞因子的水平.结果:盐水处理组荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量明显低于正常对照组小鼠(P＜0.05),应用EPO可明显提高荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量及脾脏脏器指数(P＜0.05),三组小鼠外周血中WBC数量无明显差别(P＞0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠脾脏CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+T细胞比值明显低于正常小鼠(P＜0.05).EPO处理组与盐水处理组相比,CD4+T细胞百分率无差别(P＞0.05),而CD8+T细胞百分率下降(P＜0.05),致使EPO处理组小鼠CD4 +/CD8+T细胞比值升高(P＜0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠血清中TNF-α、IL-2含量明显低于正常小鼠(P＜0.05),EPO处理组小鼠血清中IL-2水平与盐水处理组相比增高(P＜0.05),但该两组小鼠血清中TNF-α含量无明显差别(P＞0.05).结论:EPO在改善荷瘤小鼠贫血状态的同时,还可通过提高外周血CD4 +/CD8+T细胞比值和IL-2含量而增强小鼠的免疫功能.     

山仙颗粒对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及外周血中IFN-γ、TNF-β、IL-10的影响

目的:观察山仙颗粒对Lewis肺癌细胞增殖的影响及对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及免疫微环境的影响,以探究山仙颗粒抑瘤及提高机体抗肿瘤免疫力的分子机制,为其临床应用提供深层次的理论依据。方法:腋下皮肤移植Lewis肺癌细胞建立小鼠荷瘤模型,分为空白组、模型组、化疗组和山仙颗粒组;通过对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织称重并计算抑瘤率,采用免疫组织化学法检测脾脏组织中淋巴细胞CD、CD8表达情况,采用CCK-8法检测淋巴细胞对Lewis肺癌细胞增殖的影响,采用ELISA法检测外周血中IFN-γ、TNF-β与IL-10的变化。结果:(1)山仙颗粒组对Lewis肺癌的抑瘤率为45.99%,显著高于化疗组(P0.05);(2)小鼠淋巴细胞可抑制Lewis肺癌细胞的增殖,并与淋巴细胞浓度和作用时间呈正相关;且脾脏组织中CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+比值及淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的抑制率,模型组和化疗组显著低于空白组(P0.05),山仙颗粒组显著高于模型组和化疗组(P0.05),而山仙颗粒组与空白组比较无显著差异(P0.05);(3)模型组和化疗组小鼠外周血中的IFN-γ和TNF-β显著低于空白组(P0.05)、而IL-10显著高于空白组(P0.05),山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β显著高于模型组和化疗组(P0.05),而IL-10显著低于模型组与化疗组(P0.05);山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β、IL-10与空白组比较无明显差异(P0.05)。结论:山仙颗粒能明显抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的生长,并具有提高小鼠脾脏指数、增强T淋巴细胞活性、使外周血中的IFN-γ、TNF-β上调而IL-10下调,提示山仙颗粒的抗肿瘤作用可能通过调节CD4~+T淋巴细胞含量、CD4~+/CD8~+、Th1/Th2比值,恢复肿瘤患者免疫功能稳态,提高机体免疫力、加强免疫监视功能有关。     

NOD小鼠人源化后CD4~+ Tregs和CD8~+ Tregs频率和功能变化及意义

目的观察NOD小鼠人源化后,CD4~+和CD8~+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)频率和功能的变化,揭示Tregs在人源化NOD小鼠1型糖尿病中的作用及免疫学机制可能的变化。方法流式细胞术分别分析12周龄未发病的人源化NOD小鼠和NOD小鼠脾淋巴细胞和胰腺淋巴结细胞中CD8~+CD122~+T、CD8~+CD28-T、CD8~+CD25~+Foxp3~+T和CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞的频率,并采用3H-Td R掺入法检测脾CD4~+CD25~+T和CD8~+CD25~+T细胞的免疫抑制功能。结果人源化NOD小鼠和NOD小鼠的脾淋巴细胞和胰腺淋巴结细胞中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞频率无显著性差异(P0.05),而人源化NOD小鼠脾淋巴细胞和胰腺淋巴结细胞中CD8~+CD122~+T、CD8~+CD28-T、CD8~+CD25~+Foxp3~+T细胞等CD8~+Tregs亚群的频率较NOD小鼠都显著降低,但NOD小鼠人源化后,CD4~+CD25~+T和CD8~+CD25~+T细胞的免疫抑制功能并没有显著性差异;同时与人源化NOD小鼠相比,NOD小鼠的胰腺淋巴结细胞中CD8~+T细胞频率更低。结论人源化NOD小鼠脾脏和胰腺淋巴结中CD8~+Tregs亚群频率的降低,引起其胰腺淋巴结中CD8~+T细胞频率的升高,导致胰岛β细胞破坏更严重,可能是引起人源化NOD小鼠自发1型糖尿病较NOD小鼠明显提前且加重的因素之一。     

宫颈癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测及其临床意义

为探讨宫颈癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性检测的临床意义,采用流式细胞仪测定宫颈癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性,以正常人作对照分析。结果表明,宫颈癌患者外周血CD3＋、CD3＋CD4＋、NK细胞数量及CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值较正常对照组均明显下降（P〈0.05）,而CD3＋CD8＋细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与宫颈癌临床病理分期有关,分期越晚,CD3＋细胞、CD3＋CD4＋细胞、CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋细胞比值及NK细胞数量越低,CD3＋CD8＋细胞水平越高;Ⅰ、Ⅱ期宫颈癌患者与Ⅲ、Ⅳ期患者之间有显著差异（P〈0.05）。实验结果提示,宫颈癌患者细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低,检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于宫颈癌患者的免疫监测。     

FBL3细胞在小鼠体内外诱导CD4+CD25+调节性T细胞增殖的实验研究

目的：通过小鼠体内外实验观察肿瘤细胞是否可以诱导CD4^＋CD25^＋Treg的分化增殖。方法：将小鼠的红白血病瘤细胞系FBL3接种于C57BL/6小鼠腹壁皮下,流式细胞仪检测小鼠外周血、脾脏及瘤组织CD4^＋CD25^＋Treg细胞含量,RT-PCR检测小鼠脾脏及瘤组织Foxp3 mRNA的表达;体外实验检测FBL3细胞培养上清液对小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg细胞的作用。结果：荷瘤鼠外周血CD4^＋CD25^＋Treg比例与正常鼠比较无统计学差异（P〉0.05）,但荷瘤鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg比例显著高于正常对照（P〈0.01）,荷瘤小鼠脾脏组织Foxp3 mRNA的表达量明显增加;体外实验表明FBL3培养上清液促使CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例增高,并诱导Foxp3 mRNA表达增加。结论：FBL3细胞及其分泌的可溶性物质能诱导CD4^＋CD25^＋Treg细胞的增殖,说明是肿瘤的发生促进了CD4^＋CD25^＋Treg增高。     

T淋巴细胞亚群检测在呼吸系统性疾病的诊断价值

目的：探讨T淋巴细胞亚群检测在呼吸系统性疾病的诊断价值。方法：采用流式细胞术对呼吸系统性疾病和正常健康人体内淋巴细胞亚群检测,并通过检测数据分析其淋巴细胞亚群功能变化。结果：①肺结核组、肺炎组和肺癌组的CD3^＋、CD3^＋CD4^＋及T4／T8比值水平均明显低于正常对照组,差异均有极显著变化（P〈0．01）,而CD3^＋CD8^＋水平明显高于正常对照组,差异有极显著变化（P〈0．01）;②肺结核组、肺炎组与肺癌组T淋巴细胞亚群比较：CD3^＋、CD3^＋CD4^＋及T4／T8比值水平均明显高于肺癌组,差异均有极显著变化（P〈0．01）,而CD3^＋CD8^＋水平明显低于肺癌组,差异有极显著变化（P〈0．01）;③肺结核组与肺炎组比较：CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋及T4／T8比值水平无显著性差异（P〉0．05）。结论：T淋巴细胞亚群参与了呼吸系统性疾病（肺结核、肺炎和肺癌）的病理过程,在其呼吸系统性疾病的发生、发展中起着十分重要的作用。因此,监测呼吸系统性疾病患者外周血T淋巴细胞亚群,可对肺结核和肺炎患者的疗效作出评估和免疫增强提供理论依据,对肺癌患者的辅助免疫治疗支持参照。     

A multiple transgenic mouse model with a partially humanized activation pathway for helper T cell responses

Mice expressing human CD4 and human MHC II molecules provide a valuable model both for the investigation of the immunopathogenetic role of human autoantigens and for the development of therapeutic strategies based on modulating helper T cell activation in vivo. Here we present a novel mouse model expressing HLA-DR17 (a split antigen of HLA-DR3) together with human CD4 in the absence of murine cd4 (CD4/DR3 mice). Human CD4 accurately replaces murine cd4 within T cells. In particular, the preservation of cd8(+) and CD4(+) T cell subsets distinguishes CD4/DR3 mice from other multiple transgenic models in which the alternative T cell subsets are fundamentally disturbed. Moreover, human CD4 is also faithfully expressed on antigen presenting cells such as dendritic cells and monocyte/macrophages, so that the overall transgenic CD4 expression pattern resembles very closely that of humans. HLA-DR3 expression in the thymus correlates very closely to that of mouse MHC II. In contrast, only 70% of mouse MHC II positive cells in spleen, lymph node, and peripheral blood coexpress HLA-DR3. No significant bias was found with regard to particular leucocytes in this respect. The stimulation of helper T cells clearly depends on the interaction between the human transgene products, since mAbs to HLA-DR and/or CD4 completely blocked in vitro recall responses to tetanus toxoid. CD4/DR3 mice represent a partially humanized animal model which will facilitate studies of DR3-associated autoimmune responses and the in vivo determination of the therapeutic potential of mAbs to human CD4.     

Humanized NOG mice as a model for tuberculosis vaccine‐induced immunity: a comparative analysis with the mouse and guinea pig models of tuberculosis

The humanized mouse model has been developed as a model to identify and characterize human immune responses to human pathogens and has been used to better identify vaccine candidates. In the current studies, the humanized mouse was used to determine the ability of a vaccine to affect the immune response to infection with Mycobacterium tuberculosis. Both human CD4⁺ and CD8⁺ T cells responded to infection in humanized mice as a result of infection. In humanized mice vaccinated with either BCG or with CpG‐C, a liposome‐based formulation containing the M. tuberculosis antigen ESAT‐6, both CD4 and CD8 T cells secreted cytokines that are known to be required for induction of protective immunity. In comparison to the C57BL/6 mouse model and Hartley guinea pig model of tuberculosis, data obtained from humanized mice complemented the data observed in the former models and provided further evidence that a vaccine can induce a human T‐cell response. Humanized mice provide a crucial pre‐clinical platform for evaluating human T‐cell immune responses in vaccine development against M. tuberculosis.     

基因修饰树突状细胞诱导前列腺癌患者外周血T细胞亚群重排的研究

目的探讨以腺相关病毒（AAV）为载体,前列腺特异性抗原（PSA）基因转染树突状细胞（DC）诱导前列腺癌患者外周血T细胞亚群变化特点及临床意义。方法抽取30例前列腺癌患者外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,以rAAV/PSA感染DC前体细胞,采用系列细胞因子诱导DC前体细胞成熟。第6天收集成熟DC并与T细胞按比例混合培养,诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。分别于DC与T细胞混合培养前后应用流式细胞术分析外周血T细胞亚群及调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg）的表达水平。结果 PSA基因转染DC刺激T淋巴细胞爆发增殖,与培养前比较,混合培养6d后CD8^＋、CD8^＋CD69^＋、CD8^＋CD28^＋T细胞的比例和CD8^＋/CD4^＋比值均明显增高,差异有统计学意义（P〈0.01）;而CD8＋CD28-T细胞和Treg细胞的比例均显著降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。CD4^＋T细胞比例较前略有升高,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 PSA基因转染DC能够有效地激活CD8＋抗原特异性CTL,下调免疫抑制性T细胞,提高患者的细胞免疫功能,为前列腺癌的免疫治疗提供新的有效策略。     

HBV转基因小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞免疫抑制功能的研究

目的通过对HBV转基因小鼠CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞数量和免疫抑制功能的研究,探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在乙肝免疫耐受中的作用。方法用流式细胞术对12只HBV转基因小鼠和12只正常小鼠外周血CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞的频率进行检测;磁珠分选小鼠脾CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋T细胞,分为HBsAg刺激组和ConA刺激组体外单独和共培养,ELISA方法检测诱生的细胞因子IL-2。结果与正常小鼠比较,HBV转基因小鼠外周血CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞数量差异无统计学意义（P〉0.05）。HBsAg刺激组,CD4＋CD25-T细胞单独或共培养,HBV转基因小鼠CD4＋CD25-T细胞诱生IL-2水平显著低于正常小鼠（P〈0.01）;ConA刺激组,HBV转基因小鼠CD4＋CD25-T细胞诱生IL-2水平与正常小鼠相比则差异无统计学意义（P〉0.05）;两组小鼠CD4＋CD25-T细胞单独培养时诱生IL-2水平均显著高于共培养（P〈0.01）。结论与正常小鼠比较,HBV转基因小鼠CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞数量和免疫抑制功能差异无统计学意义,但T细胞水平对乙肝病毒存在特异性免疫耐受。CD4＋CD25＋调节性T细胞可抑制CD4＋、CD8＋T细胞。     

转录因子IRF8抑制Th17细胞分化并减轻T细胞免疫介导的小鼠结肠炎

 目的：转录因子干扰素调节因子（interferon regulatory factor, IRF）家族与Th17的发育密切相关,近年来发现Th17细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Th17发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响。方法：(1)采用流式细胞术分选野生型（WT）或IRF8全基因敲除(IRF8 -/-)小鼠脾脏和淋巴结的naive CD4 +T细胞(CD4 + CD62L +CD44 low),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17的比例。(2)建立实验性肠炎模型：采用免疫磁珠法分选WT或IRF8 -/-小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4 +CD25 +Treg,WT小鼠的CD4 + CD45RB hi T细胞单独或者分别联合WT或IRF8 -/-小鼠的CD4 +CD25 +Treg腹腔注射给RAG1 -/-小鼠;WT或IRF8 -/-小鼠的naive CD4 + CD45RB hi T细胞腹腔注射给RAG1 -/-小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测。结果：(1)IRF8 -/-较WT的naive CD4 +T细胞在极化条件下向Th17细胞分化更明显(P<001),而对Th1和Th2细胞的分化无影响(P>0.05)。(2)CD4 + CD45RB hi T细胞转染给RAG1 -/-小鼠,IRF8 -/-较WT供体鼠引起的RAG1 -/-小鼠体重显著降低(P<0.05),结肠炎评分显著增高（P<0.05）,且肠系膜淋巴结中IL-17 +CD4 +细胞比例明显增高(P<0.01),而 IFN-γ +CD4 + 和 Foxp3 +CD4 +细胞比例无影响(P>0.05);IRF8 -/-小鼠的CD4 +CD25 +Treg对WT小鼠CD4 + CD45RB hi T细胞转染给RAG1 -/-小鼠诱发的免疫介导的结肠炎显示出正常的免疫抑制作用。结论：转录因子IRF8基因敲除促进CD4 +T细胞向Th17细胞分化,促进转染naive CD4 +T细胞诱导的实验性结肠炎的发生,IRF8基因敲除小鼠Treg细胞免疫抑制功能正常。     

Pluripotent allospecific CD8+ effector T cells traffic to lung in murine obliterative airway disease

Long-term success in lung transplantation is limited by obliterative bronchiolitis, whereas T cell effector mechanisms in this process remain incompletely understood. Using the mouse heterotopic allogeneic airway transplant model, we studied T cell effector responses during obliterative airways disease (OAD). Allospecific CD8+ IFN-gamma+ T cells were detected in airway allografts, with significant coexpression of TNF-alpha and granzyme B. Therefore, using IFN-gamma as a surrogate marker, we assessed the distribution and kinetics of extragraft allo-specific T cells during OAD. Robust allospecific IFN-gamma was produced by draining the lymph nodes, spleen, and lung mononuclear cells from allograft, but not isograft recipients by Day 14, and significantly decreased by Day 28. Although the majority of allospecific T cells were CD8+, allospecific CD4+ T cells were also detected in these compartments, with each employing distinct allorecognition pathways. An influx of pluripotent CD8+ effector cells with a memory phenotype were detected in the lung during OAD similar to those seen in the allografts and secondary lymphoid tissue. Antibody depletion of CD8+ T cells markedly reduced airway lumen obliteration and fibrosis at Day 28. Together, these data demonstrate that allospecific CD8+ effector T cells play an important role in OAD and traffic to the lung after heterotopic airway transplant, suggesting that the lung is an important immunologic site, and perhaps a reservoir, for effector cells during the rejection process.     

微波消融肝癌对小鼠细胞免疫的影响

目的：探讨不同温度微波消融肝癌对小鼠细 胞免疫的影响。方法：建立C57BL/6J小鼠Hepa 1-6肝癌皮下移植模型,分别采用45 ℃、50 ℃、55 ℃和60 ℃×180 s 的消融条件对肝癌进行微波消融。用流式细 胞仪分析外周血CD4＋、CD8＋ T细胞和NK细胞的比例，用LDH法测脾NK细胞和灭活的Hep a 1-6细胞活化的脾细胞毒T 淋巴细胞（CTL）的细胞毒活性。结果:50 ℃和55 ℃组消融后 21 d 外周血CD4＋、CD8＋ T细胞和NK细胞比例明显升高，60 ℃组 消融后 21 d 外周血NK比例明显升高，但消融后42 d与对照组相比均无明显差异。50 ℃和55 ℃组消融后 21 d 和42 d脾CTL和NK细胞毒活性均明显增强，且均明显强于同期45 ℃ 组。50 ℃和55 ℃组消融后 21 d 脾CTL细胞毒活性明显强于同期60 ℃组。结论:在一定消融温度条件下，肝癌微波消融能促进机体产生细胞免疫反应。     

T细胞诱导的结肠炎中多形螺旋线虫感染对CD4^＋T细胞增殖的影响

目的 研究肠道多形螺旋线虫对T细胞诱导的小鼠结肠炎CD4^±T细胞增殖情况的影响。方法 用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）染色的卵清蛋白（OVA）特异性CD4＾±辅助性T细胞转入重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠中，制作小鼠实验性肠炎模型。将实验模型小鼠分为多形螺旋线虫感染组和无感染组（每组n=5），观察多形螺旋线虫感染7d后小鼠结肠炎性反应的组织学变化；以流式细胞仪检测感染3、5、7d小鼠肠系膜淋巴结中CD4＾＋T细胞CFSE的阴性率，判定肠系膜淋巴结中CD4＾＋T细胞的增殖情况。结果 与无感染组比较，感染组小鼠第7天时有螺旋线虫感染结肠炎性反应明显加重，黏膜固有层细胞浸润增多，结肠上皮破损增加，病理评分明显升高（5．20±0．84比2．00±0．71，P〈0．05）。感染3、5、7d后，感染组小鼠肠系膜淋巴结中CD4±T细胞增殖均比无感染组明显增强，CFSE的阴性率升高[3d：（7．03±1．61）％比（2．32±0．62）％，5d：（55．05±13．41）％比（29．10±2．23）％，7d：（76．97±1．89）％比（43．87±5．56）％，均P〈0．05]。结论 多形螺旋线虫感染在CD4＾＋T细胞诱导的小鼠实验性结肠炎的早期阶段促进了炎性反应的加重，可能与促进CD4＾＋T细胞的增殖有关。