硫氧还蛋白系统研究进展

硫氧还蛋白（Trx）系统由Trx、硫氧还蛋白还原酶（TR）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸组成。Trx是一种重要的抗氧化分子,可抵抗多种应激引起的细胞死亡,在氧化还原反应中发挥着突出作用。TR是含硒（硒代半胱氨酸）的蛋白质,主要有3种形式：TR1（主要分布在胞质）、TR2（主要分布在线粒体）和TR3（主要分布在睾丸）。...     

硫氧还蛋白-1与衰老的研究进展

过去的几十年里,虽然对衰老的氧化应激理论进行了广泛的研究,但是目前仍然存在着许多争议,特别在哺乳动物中。最近关于硫氧还蛋白-1(Trx1)在氧化应激和衰老中的研究提示：1)氧化应激及后续信号通路的改变可能在不同年龄阶段有着不同的病理生理作用;2)与氧化损伤的累积相比,氧化应激和氧化还原状态导致氧化还原敏感信号通路的改变可能在衰老的病理生理中扮演着更重要的角色。因此,本文对硫氧化蛋白-1与衰老的关系进行简述。     

硫氧还蛋白还原酶生物学活性及其与人类疾病的关系

硫氧还蛋白还原酶 (TrxR)是吡啶核苷酸和二硫化物氧化还原酶的黄素蛋白家族成员之一 ,包含保守的 Cys Val Asn Val Gly Cys 氧化还原位点 ,催化依赖硫氧还蛋白NADPH还原反应。TrxR含有存在于许多底物中的氧化还原活性位点 ,催化多种内源和外源性复合物。TrxR具有多种生物学活性 ,调节机体氧化还原反应和细胞生长与增殖 ,与人类某些疾病发病机制有关 ,可能是干预治疗的靶点     

硫氧还蛋白还原酶在大鼠阿尔茨海默病模型海马结构中的表达

目的 :探讨硫氧还蛋白还原酶 (thioredoxinreductase,TR)在阿尔茨海默病 (Alzheimer′sDisease,AD)大鼠模型发生中的作用。方法 :注射海人藻酸 (Kainicacid ,KA)毁损Meynert基底核建立AD大鼠模型 ,通过Y形迷宫判断动物模型成功与否 ,采用原位杂交方法检测AD大鼠模型中TRmRNA的表达。结果 :AD模型组大鼠短期学习记忆能力与对照组相比明显下降 (P <0 0 0 1 ) ,说明AD动物模型建立成功 ;TRmRNA原位杂交检测显示模型组大鼠海马各区TRmRNA杂交信号显著增强 ,与对照组相比有显著差异 (P <0 0 0 1 )。结论 :TR在AD发生发展中可能起神经元保护作用     

人白细胞硫氧还蛋白还原酶的分子克隆和序列分析

目的：克隆人白细胞硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase,TR)编码区的cDNA并进行序列分析。方法：采用RT－PCR方法获得TR基因cDNA，选择阳性克隆并测序。结果：通过分子克隆和序列分析，发现TR基因长1554bp,ORF为1494bp，编码498个氨基酸，结论：确定了中国人白细胞TR的cDNA序列，并据此推导出相应的氨基酸序列。     

重组人血清白蛋白-硫氧还蛋白融合蛋白对流感病毒所致急性肺损伤小鼠的保护作用

目的:探讨重组人血清白蛋白(HSA)-硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白(HSA-Trx)对流感病毒感染所致急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用。方法:利用毕赤酵母表达系统产生基因重组HAS-Trx融合蛋白,PR8(H1N1)流感病毒诱导ALI小鼠模型,设健康对照组、ALI组、ALI+Trx组和ALI+HSA-Trx组,每组10只。收集各组支气管肺泡灌洗液(BALF),计算细胞总数,测定肺泡中性粒细胞数量,考马斯亮蓝溶液法测定蛋白浓度,ELISA法测定BALF中干扰素γ(IFN-γ)含量。收集肺组织进行苏木精-伊红染色,免疫荧光法检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和3-硝基酪氨酸(NO₂-Tyr)的表达。收集血浆,使用CR2000RC分析仪测量血浆中过氧化物浓度。结果:HSA-Trx治疗显著降低ALI小鼠BALF中总细胞、中性粒细胞数量和总蛋白的含量(P<0. 05),降低肺组织中8-OHdG和NO₂-Tyr水平和血浆中过氧化物浓度(P<0. 05),但对肺组织iNOS和IFN-γ的表达无显著抑制效...     

人脑硫氧还蛋白还原酶基因的克隆及测序

目的：从人脑组织中克隆硫氧还蛋白还原酶基因。方法：从胎脑中提取总RNA，采用RT—PCR技术，获得该基因的cDNA，构建pHBTR重组质粒，通过蓝白斑筛选及限制性内切酶鉴定，选择阳性克隆并测序。结果：测序结果显示该基因的开放读码框为1500bp，用计算机软件处理后推导出相应的氨基酸序列为500个氨基酸的多肽链，将该基因与人胎盘TR基因比较发现两者的同源性为99％，在核苷酸序列上有5处碱基不同；且在氨基酸序列上也有4处不同。结论：首次获得中国人脑TR基因。     

硫氧还蛋白(Trx)及Trx80在免疫系统中的作用

硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)是一种广泛存在于真核生物和原核生物体内,具有多种生理学功能(如抗ROS侵害、保护大脑、调节免疫)的小分子(Mr12 000)蛋白质.它有一个活性位点Cys-Gly-Pro-Cys,通过该活性位点的二巯基/二硫键转化反应(即氧化还原反应),对生物体内的多种蛋白质进行氧化还原调节.而Trx的天然剪切产物(Trx80)没有氧化还原调节活性.本文综述了近年来有关Trx/Trx80与免疫系统的关系的研究新进展.     

c-Jun对硫氧还蛋白还原酶1启动子转录的调控作用

目的: 探讨转录因子激活剂蛋白-1(activator protein-1,AP-1)家族成员c-Jun对硫氧还蛋白还原酶1(thioredoxin reductase 1, TrxR1 )启动子转录的调控作用。方法: 利用生物信息学技术分析调控 TrxR1 启动子区域的转录因子,构建 TrxR1 启动子区域一系列截短的萤光素酶报告基因载体,将含c-Jun的真核表达载体pcDNA3.1(+)-c-Jun和含有 TrxR1 启动子的萤光素酶报告基因载体共转染人胚肾HEK293细胞和鼠心肌H9c2细胞,检测转染细胞中萤光素酶活性。应用定点突变技术针对 TrxR1 启动子区域AP-1的可能结合位点进行突变,与c-Jun的真核表达载体共转染上述2种细胞,检测各组萤光素酶活性。利用染色质免疫共沉淀(ChIP),分析c-Jun与 TrxR1 启动子区域的AP-1结合位点结合情况。结果: 酶切及测序结果表明,获得的3个不同长度的 TrxR1 启动子克隆与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,且插入方向正确;此3种质粒都有明显的启动子活性,在人胚肾HEK293和鼠心肌H9c2细胞中转染pcDNA 3. 1(+)-c-Jun可以上调 TrxR1 启动子活性。突变AP-1结合位点,导致 TrxR1 启动子活性明显降低;ChIP结果显示c-Jun结合在 TrxR1 启动子区域的AP-1结合位点上。结论: 转录因子AP-1家族成员c-Jun可能通过与 TrxR1 基因启动子区域AP-1结合位点相结合,上调 TrxR1 基因的转录。     

Expression of genes for thioredoxin 1 and thioredoxin 2 in multidrug resistance ovarian carcinoma cells SKVLB

The expression of genes for thioredoxin isoforms Trx1 and Trx2 was studied in sensitive SKOV-3 and resistant SKVLB human ovarian carcinoma cells. The development of doxorubicin resistance was accompanied by a significant increase in the expression of TRX1 gene and less pronounced increase in TRX2 gene expression. __________ Translated from Byulleten’ Eksperimental’noi Biologii i Meditsiny, Vol. 144, No. 9, pp. 274–276, September, 2007     

Expression of the thioredoxin system in interstitial lung disease

The thioredoxin system containing thioredoxin (Trx) and thioredoxin reductase (TrxR) has profound effects on cell proliferation and protection against exogenous oxidants. The significance of the Trx system in human lung and lung diseases is, however, largely unresolved. Altogether, 66 specimens of human lung were investigated by immunohistochemistry for their expression of Trx and TrxR. The diseases included interstitial pneumonias such as usual interstitial pneumonia (UIP), desquamative interstitial pneumonia (DIP), and UIP associated with collagen vascular diseases (CVD-ILD), and granulomatous diseases such as sarcoidosis and allergic alveolitis. The ultrastructural localization of Trx and TrxR was analysed by immunoelectron microscopy. In healthy lung, Trx and TrxR were expressed in bronchial epithelium and alveolar macrophages. Trx and TrxR were highly concentrated in areas of metaplastic epithelium in UIP and in alveolar macrophages in DIP, though fibrotic areas in UIP were mainly negative. The expression of both enzymes was clearly weaker in CVD-ILD than in UIP. Granulomas of sarcoidosis showed moderate to intense Trx immunoreactivity. Ultrastructurally, Trx and TrxR were expressed diffusely in the cytosolic compartment and plasma membrane of metaplastic type II pneumocytes, macrophages, and bronchial epithelial cells. This study highlights the importance of Trx and TrxR in primary defence in bronchial epithelium, alveolar epithelium, and macrophages in human lung, but also indicates that elevated expression of these proteins may serve as markers of ongoing cell regeneration and inflammation.     

Caspase与肝脏疾病

近年来,细胞凋亡发生机制的研究日益受到人们的关注。研究表明,许多肝脏疾病与caspase家族有着密切联系,如肝缺血再灌注损伤、炎症、肿瘤等。现将细胞凋亡中caspase家族在肝脏疾病中的最新研究结果及其地位做了简单综述,希望由此了解肝细胞凋亡的内在机制并达到治疗目的。     

TR基因重组腺病毒载体的构建和鉴定

目的 :构建含人硫氧还蛋白还原酶 (TR)基因的重组腺病毒载体 ,探讨TR的抗氧化功能与神经退行性疾病的相关性。方法 :从重组质粒pGEM TR上用内切酶切下编码 5 0 0个氨基酸的全长TRcDNA片段 ,并连接穿梭质粒pShuttle,再双酶切pShuttle TR。将带有CMV启动子的目的片段 ,插入E1、E3缺失的Adeno X病毒DNA中 ,以Adeno TRDNA通过脂质体转染HEK2 93细胞 ,获得重组腺病毒Adeno TR进行PCR鉴定及病毒滴度测定。用重组腺病毒感染CV1细胞 ,通过免疫荧光染色与Westernblot分别检测重组腺病毒感染的细胞上和裂解液中TR蛋白的表达。结果 :重组腺病毒Adeno TR的病毒滴度为 4 .4× 10 11pfu/L。PCR、荧光显微镜证实 ,以及Westernbolt分析 ,在相对分子质量 (Mr)约 5 5 0 0 0处均出现特异性条带。结论 :成功地构建了重组腺病毒载体 ,并能介导外源基因TR表达 ,为进一步研究TR的功能及其与疾病的相关性奠定了基础。     

脂氧素在疾病中的作用

脂氧素( lipoxins,LXs)为花生四烯酸代谢产物,是体内最重要的内源性脂质抗炎介质之一,它参与多种疾病的病理生理过程,在炎症消退及免疫调节过程中发挥至关重要的作用.深入研究LXs的生物学活性及相关机制,可为人类难治性疾病防治提供新的策略和途径.     

高尿酸血症对肾脏损害的研究进展

近年来,大量的流行病学研究表明高尿酸血症可以导致肾脏损伤。其发生的病理生理学机制可能与血管内皮功能障碍、激活肾素-血管紧张素系统、炎性因子释放以及氧化应激的增加等有关。因此,深入认识无症状高尿酸血症的危险性及早干预对改善肾功能有非常重要的临床意义。本文就高尿酸血症的形成病因以及肾脏受损的发生机制的研究作一简综述。     

小檗碱在自身免疫性疾病治疗中的研究进展

小檗碱在临床上主要用于治疗肠道感染,是我国传统药物.近年来研究发现小檗碱可通过抑制Th1、Th17细胞分化,调节Th1/Th2平衡,抑制T细胞增殖,诱导树突状细胞、巨噬细胞凋亡,抑制促炎性因子和抗体生成,保护上皮屏障功能等机制发挥免疫调节作用.通过以上机制,小檗碱在多发性硬化、类风湿性关节炎、1型糖尿病、肾小管间质性肾炎、结肠炎等自身免疫性疾病中发挥治疗作用.     

MHC-Ⅰ链相关基因A在免疫性疾病中的研究进展

MHC-Ⅰ链相关基因A（MICA）位于人第6号染色体的MHC—Ⅰ类区域中,该基因包含6个外显子,编码的蛋白分子结构域与经典的Ⅰ类分子α链相似,包括胞外结构域（α1、α2与α3）、跨膜区和胞质区,但不含β2微球蛋白。MICA表达于内皮细胞、上皮细胞、单核细胞、成纤维细胞以及大多数上皮性肿瘤细胞表面,但在CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞和CD19^＋细胞不表达。MICA在肾脏等器官移植排斥反应和移植物存活率有重要的相关性,其抗体阳性者预后较差。MICA在肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病的发生、发展过程中起着独特的作用。