siRNA干扰Ezrin基因对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的探讨细胞膜与细胞骨架连接蛋白埃兹（Ezrin）对人脐静脉内皮细胞生长和转移能力的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞,选择3对小干扰RNA（siRNA）序列下调Ezrin的表达,实时定量PCR和Western-blot印迹法分别检测Ezrin mRNA和蛋白表达水平的变化。BrdU ELISA法检测Ezrin siRNA干扰后细胞增殖能力的改变,伤口愈合实验检测Ezrin siRNA干扰后细胞迁移能力的变化,流式细胞术检测Ezrin siRNA干扰后细胞凋亡能力。结果实时定量PCR和Western-blot印迹结果显示,siRNA干扰后Ezrin的基因和蛋白水平均显著下调;BrdU法显示Ezrin siRNA干扰后细胞生长速率降低（P〈0.05）,划痕实验显示Ezrin siRNA干扰后细胞迁移率降低（P〈0.05）,流式细胞仪检测显示Ezrin siRNA干扰后细胞凋亡率升高。结论 Ezrin蛋白可影响脐静脉内皮细胞的增殖和迁移能力,推测其在血管功能和肿瘤研究中可能具有重要意义。     

乳腺与女性生殖系统恶性肿瘤中Ezrin的表达及意义

Ezrin是ERM(Ezrin-Radixin-Moesin)蛋白家族成员之一,是一种膜-细胞骨架连接蛋白.上世纪80年代初,Bretscher等学者首次在鸡小肠黏膜细胞刷状缘微绒毛的细胞骨架中发现了Ezrin蛋白.最初的10年间并未受到重视,只认定为细胞骨架的组成成分.2004年,Yu等和Khanna等在Nature Medicine同一期分别发表了Ezrin与小儿横纹肌肉瘤,Ezrin与小儿骨肉瘤关系的论文后才引起众多研究者的关注.近来越来越多的研究表明Ezrin在细胞形态形成、运动、黏附、细胞信号转导等多项细胞活动中发挥重要作用,而这些细胞活动与肿瘤的发生、发展及转移等密切相关.本文重点对其在乳腺与女性生殖系统恶性肿瘤中的表达及意义作一综述.     

Ezrin在炎症性疾病中的研究进展北大核心CSCD

Ezrin属于ezrin-radixin-moesin(ERM)家族成员,是连接质膜(PM)和细胞骨架的连接蛋白,在介导肿瘤的侵袭和转移过程中发挥主要作用。近年研究表明Ezrin参与调节免疫细胞功能,在T细胞中,Ezrin调节免疫突触的形成,通过控制B细胞信号传导和蛋白转运调节体液免疫。此外,Ezrin还可将囊性纤维化跨膜电导调节剂(CFTR)与TLR4信号联系起来,协调巨噬细胞的抗菌免疫反应,与L-选择素结合促使中性粒细胞功能转换和黏附。以上作用表明Ezrin在炎症性疾病中发挥作用。本文主要就Ezrin在炎症及炎症性疾病中的最新研究进展进行总结。     

Ezrin、MMP-2及TIMP-2在子宫颈癌中的表达与侵袭转移的关系

目的 通过观察埃兹蛋白(Ezrin)、金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白细胞组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白水平在子宫颈癌组织中的表达情况,探讨它们与子宫颈癌侵袭转移的关系. 方法 采用免疫组织化学方法对40例子宫颈鳞癌,20例腺癌,29例子宫颈上皮内瘤样病变和16例正常子宫颈组织进行标记及分析. 结果 Ezrin、MMP-2及TIMP-2蛋白主要表达在子宫颈鳞癌、腺癌、上皮内瘤变的异型细胞质内,各实验组中的表达量与正常组比,差异均有统计学意义(P<0.01).Ezrin和MMP-2蛋白在有淋巴结转移组中的表达量较无淋巴结转移组明显高(P<0.01), 而TIMP-2蛋白水平的表达结果却相反.同时发现Ezrin、MMP-2及TIMP-2蛋白水平在宫颈病变组织表达有正相关性. 结论 Ezrin、MMP-2及TIMP-2 蛋白在子宫颈鳞癌、腺癌的表达量较对照组高. Ezrin和MMP-2在有淋巴结转移的子宫颈癌中高表达,而TIMP-2为低表达,提示它们在子宫颈癌的侵袭转移中起重要的作用.Ezrin、MMP-2及TIMP-2蛋白水平在宫颈病变组织表达有正相关性,这三者在子宫颈癌的侵袭转移中可能起协同作用.     

膜骨架连接蛋白Ezrin对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响

目的 探讨肺癌细胞中膜骨架连接蛋白Ezrin对体外培养的肺癌细胞系的增殖、凋亡、侵袭和转移能力的影响,明确Ezrin在肺癌中的异常表达与临床病理因素之间的关系.方法转染Ezrin SiRNA后,应用流式、MTT、Transwell和划痕实验等技术评价肺癌细胞体外侵袭转移和增殖能力的变化.结果转染Ezrin SiRNA ...     

非小细胞肺癌患者埃兹蛋白、血管抑制蛋白1的表达与微血管密度的相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌患者(non-small cell lung cancer,NSCLC)埃兹蛋白(Ezrin)和血管抑制蛋白1(vasohibin-1,VASH-1)的表达与肿瘤微血管密度(MVD)的相关性。方法选取2016年1月至2017年12月期间我院收治经手术切除的110例NSCLC患者临床资料进行研究,作为NSCLC组。选取同期肺良性病变组织标本80例作为对照组。比较两组间基本资料、Ezrin、VASH-1表达及MVD,并进行Spearman相关分析。结果 NSCLC组Ezrin、VASH-1阳性表达率(51. 8%、70.9%)均显著高于对照组(15.0%、16.3%)(P<0.05)。Ezrin和VASH-1阳性表达与性别、年龄、吸烟史、病理类型、分化程度、肿瘤直径均无关(P>0. 05),与TNM分期、淋巴结转移有关(P <0.05)。MVD与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。Ezrin、VASH-1及Ezrin+VASH-1阳性表达组的MVD值均明显高于Ezrin、VASH-1及Ezrin+VASH-1阴性表达组(P <0. 05),且以Ezrin+VASH-1均阳性表达组的MVD值最高(P <0.05)。经过Spearman相关性分析,Ezrin、VASH-1阳性表达与NSCLC患者MVD值呈正相关(P<0.05)。结论 Ezrin、VASH-1可能参与NSCLC患者肿瘤血管的形成机制,进而促进肺癌的生长、侵袭和转移。     

Ezrin与肿瘤发生及发展关系的研究进展

Ezrin是一种膜－细胞骨架连接蛋白,在多种肿瘤中表达上调或亚细胞定位改变,通过与细胞粘附分子相互作用、参与Rho信号传导以及受体酪氨酸激酶信号传导途径等多种机制,参与肿瘤的发生及发展。     

miR-132 靶向调控Ezrin 抑制卵巢癌细胞增殖、促进凋亡的实验研究

目的:探讨微小核糖核酸分子(miRNA)-132 在卵巢癌中生物学作用和作用靶点。方法:收集22 例卵巢癌及癌旁非肿瘤组织标本,RT-PCR 检测miR-132 表达量;RT-PCR 检测人正常卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞系中miR-132 表达量;选择miR-132 表达量最高或最低的卵巢癌细胞株,分别转染阴性对照质粒(NC)和miR-132 mimic 质粒,RT-PCR 检测转染后miR-132 表达量;CCK-8 法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot 检测Ezrin 蛋白表达。结果:卵巢癌组织中miR-132 表达量显著低于癌旁非肿瘤组织,而卵巢癌细胞系中miR-132 表达量显著低于正常卵巢上皮细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);选择卵巢癌细胞株中miR-132 表达量最低卵巢癌SKOV3 细胞株进行基因转染,与转染阴性对照质粒相比,转染miR-132 mimic 质粒后miR-132 表达量显著上升,细胞增殖显著降低,细胞凋亡显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05);Western blot 结果显示,上调miR-132 表达后,卵巢癌SKOV3 细胞株中Ezrin 蛋白表达显著上升(P<0.05)。结论:在卵巢癌中,miR-132 可能作为一种抑癌基因通过靶向调控Ezrin 抑制卵巢癌细胞增殖、促进凋亡。     

Ezrin蛋白过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响

目的探讨Ezrin过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响。方法用过表达载体pcb6-Ezrin稳定转染Panc-1细胞,并用流式细胞仪检测细胞周期,CCK-8法检测细胞生长曲线,扫描电镜观察细胞表面形态及表面突起的变化,用未包被及包被Matrigel胶的Transwell小室分别检测细胞的运动和侵袭能力,并用免疫印迹法检测信号相关蛋白Erk1/2的变化。结果过表达Ezrin后其蛋白的表达明显升高,Panc-1细胞表面的细胞突起、微绒毛数量明显增加,运动及侵袭能力也明显增加,但对细胞的体外增殖和细胞周期无明显的影响。Ezrin的过表达能够激活Erk1/2的表达。结论 Ezrin蛋白对胰腺癌细胞的细胞突起、表面微绒毛的形成、细胞骨架及细胞的运动和侵袭发挥着重要的作用。因此,Ezrin可能在胰腺癌的进展中发挥着重要的作用,Erk1/2信号转导途径在这一过程中发挥着重要的作用。     

Ezrin介导中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞株分泌黏蛋白增加

目的探讨膜连接蛋白Ezrin在中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导气道黏液高分泌的作用及相关调节机制。方法以中性粒细胞弹性蛋白酶刺激培养的人气道上皮HBE16细胞,ELISA法、real-time PCR法测定黏蛋白(MUC)5AC的蛋白及mRNA水平。免疫荧光法检测Ezrin蛋白含量。结果 NE刺激30 min后MUC5AC mRNA表达增强,细胞中及培养上清中黏蛋白MUC5AC的含量均显著高于对照组(P0.01);转染Ezrin永久磷酸化载体pEGFPN1-Ezrin-T567D的细胞经NE刺激后,胞质内磷酸化Ezrin表达明显增强,且胞膜分布增多。同时,细胞培养上清液中的MUC5AC蛋白含量亦显著高于单纯NE组(P0.01)。遏制Ezrin磷酸化pEGFP-N1-Ezrin-T567A载体转染组在NE刺激后,Ezrin蛋白与pEGFP-N1-Ezrin-T567D组相比有明显减少,且未出现向胞膜聚集的趋势,同时分泌至培养上清的MUC5AC蛋白也有明显减少(P0.01),同时伴随胞质内MUC5AC蛋白有所增加(P0.05)。结论 Ezrin蛋白参与了NE诱导的MUC5AC蛋白分泌,是气道上皮细胞MUC5AC分泌的重要调控分子。     

膜-细胞骨架连接分子Ezrin与肿瘤转移

Ezrin是ERM(Ezrin/Rad ixin/Moesin)家族的重要成员,是真核细胞膜蛋白-细胞骨架的桥梁分子。参与细胞形态学,细胞黏附、运动、细胞骨架的重塑及信号转导过程。Ezrin在不同肿瘤组织中的表达异常,推测它可能参与肿瘤细胞的侵袭转移,但表达的不一致提示Ezrin在不同肿瘤的进展和转移中发挥着不同的作用。     

Expression of ezrin in glial tubes in the adult subventricular zone and rostral migratory stream

Ezrin is a member of the ERM (ezrin-radixin-moesin) family of membrane-cytoskeletal linking proteins. ERM proteins are involved in a wide variety of cellular functions including cell motility, signal transduction, cell-cell interaction and cell-matrix recognition. A recent in situ hybridization study showed that the mRNA encoding ezrin is expressed in neurogenic regions of the mature brain including the subventricular zone (SVZ) and rostral migratory stream (RMS); however, the specific cell types expressing ezrin and their relationship to migrating and proliferating cells in these regions have not been characterized previously. In this study, we used immunocytochemistry to perform double labeling with a variety of cell-type specific markers to characterize the expression of ezrin in the SVZ and RMS of adult mice. Ezrin was expressed at high levels in both the SVZ and RMS where ezrin-immunopositive processes formed a trabecular network surrounding the proliferating and migrating cells. Ezrin-positive cells co-labeled with the glial makers S100beta and GFAP (glial fibrillary acidic protein), but only minimally with the early neuronal markers beta III tubulin and polysialylated form of neural cell adhesion molecule 1 (PSA-NCAM), indicating that ezrin was expressed primarily in the glial tube cells. Ezrin positive cells also expressed beta-catenin, a membrane-complex protein previously implicated in the regulation of stem-cell proliferation and neuronal migration. Glial tube cells act as both precursors of, and a physical channel for, migrating neuroblasts. Bi-directional signals between glial tube cells and migrating neuroblasts have been shown to regulate the rates of both proliferation of the precursor cells and migration of the newly generated neuroblasts. Our finding that ezrin and beta-catenin are both present at the cell membrane of the glial tube cells suggests that these proteins may be involved in those signaling processes.     

Signal transduction by the T cell antigen receptor.

The T cell antigen receptor (TCR) must recognize antigen, and translate this recognition event into intracellular signal transduction events. Two signal transduction events are regulated by the TCR: the activation of a protein tyrosine kinase (PTK) and phospholipase C (PLC). Recent studies suggest that the TCR-activated PTK regulates PLC activation by the phosphorylation of tyrosine residues of PLC gamma 1. The complex structure of the TCR is now being related to its signal transduction function. Studies with chimeric receptors reveal that the antigen binding Ti heterodimer communicates with the subunits involved with signal transduction, the CD3 chains and zeta dimers, through the carboxy-terminal regions of the Ti chains that surround and include the transmembrane domains. Other chimeras have helped demonstrate that the zeta chain family of dimers function to couple the TCR to intracellular signal transduction mechanisms. The signal transduction function of the TCR can be regulated in a number of ways and by other T cell surface molecules. The plasma membrane tyrosine phosphatase CD45, plays a critical role to specifically regulate TCR-mediated activation of PTK's and PLC. Thus, an understanding of the complex structure of the TCR and the intricacies of its signal transduction function is rapidly emerging.     

埃兹蛋白(Ezrin)在肺癌发生发展中的作用

Ezrin是埃兹蛋白、 根蛋白和膜突蛋白(Ezrin-Radixin-Moesin,ERM)家族中的一员,参与细胞增殖、 迁移、 黏附、 侵袭,并影响细胞周期和细胞凋亡,在肺癌中高表达,与肺癌发生发展有重要相关性.Ezrin可以作为肺癌诊断和治疗的生物标志物.以Ezrin作为特异性靶点,可以作为肺癌治疗的新方案.     

Merlin/ERM proteins establish cortical asymmetry and centrosome position

The ability to generate asymmetry at the cell cortex underlies cell polarization and asymmetric cell division. Here we demonstrate a novel role for the tumor suppressor Merlin and closely related ERM proteins (Ezrin, Radixin, and Moesin) in generating cortical asymmetry in the absence of external cues. Our data reveal that Merlin functions to restrict the cortical distribution of the actin regulator Ezrin, which in turn positions the interphase centrosome in single epithelial cells and three-dimensional organotypic cultures. In the absence of Merlin, ectopic cortical Ezrin yields mispositioned centrosomes, misoriented spindles, and aberrant epithelial architecture. Furthermore, in tumor cells with centrosome amplification, the failure to restrict cortical Ezrin abolishes centrosome clustering, yielding multipolar mitoses. These data uncover fundamental roles for Merlin/ERM proteins in spatiotemporally organizing the cell cortex and suggest that Merlin''s role in restricting cortical Ezrin may contribute to tumorigenesis by disrupting cell polarity, spindle orientation, and, potentially, genome stability.     

癫痫持续状态下幼年癫痫大鼠海马区星形胶质细胞：大麻素2型受体调控MAPK通路的作用

文题释义：癫痫持续状态：指连续癫痫发作、持续时间超过10-30 min以上或每次癫痫发作间隔时间短、没有意识清醒期，或者是出现了短暂的意识清醒马上又出现二次发作。分型如下：①局灶性癫痫持续状态：意识清醒，仅局部某个部位抽动或者感觉异常，对人体的影响相对较小；②全面性癫痫持续状态：在发作期间意识完全丧失或稍有缓解马上又出现意识丧失，对人体损害较大，易引起脑组织大量的缺氧，严重时可以造成患者的死亡，应及早干预。丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)：是众多信号蛋白的一种，其激活调控一系列细胞活动。活化的MAPK通过磷酸化核转录因子、细胞骨架蛋白及酶类等参与细胞增殖、分化、转化及凋亡的调节。背景：星形胶质细胞增生是癫痫的重要形态学改变，增生的胶质细胞可产生细胞因子，继而激活JAK/STAT信号转导进一步促进胶质细胞的增生，从而影响癫痫的发生及复发，星形胶质细胞和信号转导途径相互影响，在癫痫的发病中发挥重要作用。 目的：探讨大麻素2型受体对癫痫持续状态幼年大鼠星形胶质细胞和MAPK通路ERK、p38、JNK蛋白激活的影响。方法：健康雄性SD大鼠40只(18-21 d龄)，随机分为4组：正常对照组、癫痫模型组、大麻素2型受体激动剂JWH133组、大麻素2型受体拮抗剂AM630组，正常对照组仅给予生理盐水，其他各组大鼠腹腔注射氯化锂和匹鲁卡品建立癫痫模型，并分别进行不同干预。发生癫痫持续状态后24 h取脑组织，采用免疫荧光检测海马组织GFAP与p-ERK、p-p38、p-JNK的共表达，Real-time PCR检测海马组织GFAP mRNA的表达。结果与结论：①癫痫模型组GFAP/p-ERK、GFAP/p-p38共表达较正常对照组增多(P < 0.05)，JWH133组较癫痫模型组减少(P < 0.05)，AM630组较JWH133组增多(P < 0.05)；②癫痫模型组GFAP/p-JNK共表达较正常对照组减少(P < 0.05)，JWH133组较癫痫模型组增多(P < 0.05)，AM630组较JWH133组减少(P < 0.05)；③癫痫模型组GFAP的mRNA表达较正常对照组减少(P < 0.05)，JWH133组较癫痫模型组有明显增多(P < 0.05)，而AM630组GFAP的表达降低(P < 0.05)；④结果表明，大麻素2型受体可以通过调控MAPK通路ERK、p38、JNK蛋白，从而影响癫痫持续状态下幼年癫痫大鼠海马区星形胶质细胞。 ORCID: 0000-0001-5767-8662(曹庆隽) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程     

LAT在T细胞成熟分化中的作用

T细胞活化衔接因子(Linker for activation of T cells,IJAT)是一种Ⅲ型的跨膜蛋白,它不具有酶的活性,却能通过连接信号转导途径中的其他衔接蛋白或主要的酶而发挥重要作用.LAT参与多种细胞的信号转导,尤其在T细胞的成熟活化过程中起着重要的跨膜信号传递作用,当T细胞借助TCR识别由MHC分子递交的抗原肽后,LAT胞内段的酪氨酸发生磷酸化,继而募集到在T细胞激活中起重要作用的多种信号分子,对TCR信号转导和T细胞内环境稳定进行调节,在这一过程中,132、171、191和226四个位点的酪氨酸磷酸化起了关键性的作用.     

两条IL-6信号转导途径在人骨髓瘤细胞系U266中的相互拮抗作用

目的 研究人骨髓瘤细胞系U266中白细胞介素6（IL－6）信号转导途径及彼此之间的相互调控方式。方法 首先采用凝胶阻滞电泳（electrophoretic mobility shift assay,EMSA)方法观察分别参与两条IL－6信号转导途径的转录因子STAT3和NF－IL－6在U266细胞中的诱导激活状态并确定该细胞中的IL－6信号转导通路;继而采用转基因或化学试剂处理方法,特异性上调或下调其中一条IL－6信号途径的化,并同时观察另外一信号途径的激活状态。结果 1、以上两种转录因子分别参与的IL－6信号转导途径－－JAK／STAT和Ras/NF-IL-6,它们都能够在U266细胞中诱导激活;2、在高剂量IL－6（1－100ng/ml）刺激范围之内,一条IL－6信号途径活化水平的升高可同时导致另一条信号途径活化水平的下降。结论 在一定IL－6刺激剂量范围内,U266细胞中两条IL－6信号途径的诱导激活存在着相互拮抗作用。