高效液相色谱法同时测定血浆中的肾上腺素和去甲肾上腺素

为同时测定人血浆中肾上腺素和去甲肾上腺素浓度,建立了高效液相色谱－电化学检测方法,采用ＹＷＧ－Ｃ１８分析柱,３,４－二羟基苄胺作内标,以０．０５ｍ ｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）－甲醇－０．０５ｍ ｏｌ／ＬＥＤＴＡ－Ｎａ２（７８∶２０∶２）为流动相,每１Ｌ流动相含ＳＤＳ２００ｍ ｇ,流速为１．０ ｍ ｌ／ｍ ｉｎ。去甲肾上腺素和肾上腺素及内标的保留时间分别为７．３、８．３ 和１０．４ 分钟,线性范围均为３１．２５～４０００ｎｇ／Ｌ（ＮＥ：ｒ＝ ０．９９９９,Ｅ：ｒ＝ ０．９９９６）。去甲肾上腺素和肾上腺素日内ＲＳＤ分别低于１．８７％ 和２．０７％ ,日间ＲＳＤ分别小于８．９２％ 和９．６５％ ,平均萃取回收率分别为９３．５％ 和９１．３％ 。提示本方法快速简便,灵敏准确,适用于嗜铬细胞瘤的鉴别诊断和临床研究。     

肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖和c－fos，c－myc原癌基因表达的影响

目的：研究肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖、ＤＮＡ合成和ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达的影响．方法：应用细胞培养、￣３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入和斑点杂交的方法．结果：１～１０μｍｏｌ／Ｌ去甲肾上腺素（ＮＥ）和０．１～１０μｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）可明显促进离体培养的ＳＤ大鼠的主动脉平滑肌细胞增殖、￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入和ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达，并呈剂量依赖效应．该效应可为相应的受体阻断剂Ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（１０μｍｏｌ／Ｌ）和Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（１０μｍｏｌ／Ｌ）所抑制（Ｐ＜０．０５）．结论：肾上腺素能受体激动剂可促进离体培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖、ＤＮＡ合成和原癌基因的表达，该效应可被其相应的阻断剂所抑制．     

HPLC法测定痛经片中阿魏酸的含量

采用高效液相色谱法，ＯＤＳ柱，以乙腈－０．０５ ８ ｍｏｌ／Ｌ ＫＨ２ＰＯ４溶液（用磷酸调ｐＨ＝２．５）（１：４）为流动相，测定痛经片中阿魏酸的含量。其方法回收率为９３．３％，ＲＳＤ为０．９％。     

α1受体激动对浦肯野纤维延迟后除极的双相效应

用乙酰毒毛旋花子甙元（ＡＳ）２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ中毒诱发绵羊心室浦肯野纤维产生延迟后除极（ＤＡＤ）作为模型，在心得安５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ作用下观察苯肾上腺素（ＰＥ）１０－７ｍｏｌ／Ｌ、３×１０－７ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ等不同浓度对ＤＡＤ幅值的影响。６０ｍｉｎ持续灌流中，前２０ｍｉｎＤＡＤ幅值分别增加８％、９％和１０％（每一浓度ｎ＝８，Ｐ＜０．０５）；随后４０ｍｉｎ内，ＤＡＤ幅值呈剂量依赖性减小，ＰＥ１０－７ｍｏｌ／Ｌ减值６．９±０．２％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０５），ＰＥ３×１０－７ｍｏｌ／Ｌ减值１３．９±０．１％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０１），ＰＥ１０－６ｍｏｌ／Ｌ减值１８．６±０．２％（ｎ＝８，Ｐ＜０．０１）。ＰＥ的作用可被哌唑嗪５×１０－７ｍｏｌ／Ｌ所阻断，提示ＰＥ作用经α１受体兴奋引起。     

L—Arg—NO途径对铝抑制大鼠海马CA3区诱发电位的影响

实验在７０只乌拉坦麻醉的ＳＤ大鼠上进行，在海马ＣＡ３区记录诱发的群体锋电位（ＰＳ）探讨了左旋精氨酸一氧化氮（Ｌ－Ａｒｇ－ＮＯ）途径对铝抑制ＰＳ波幅的作用。结果：（１）０．５ｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３注入ＣＡ３区后，ＰＳ幅度较注药前显著减小（Ｐ〈０．０５）。（２）ＣＡ３区内注入０．１和０．３ｍｏｌ／Ｌ硝基左旋精氨酸（ＮＬＡ）能分别加强０．２５和０．５ｍｏｌ／ＬＡｌＣｌ３的抑制效应，（３）ＣＡ３区注入０．３     

高效毛细管电泳法测定肾上腺素和去甲肾上腺素

探讨了用高效毛细管电泳法（ＨＰＣＥ）测定肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）的最佳分离条件，即以ｐＨ６．０的硼酸溶液加入０．１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ和２０％丙二醇为载体缓冲液，ＮＥ与Ｅ的浓度在０．０１～０．０５μｇ／ｍｌ内与峰面积之间有良好的线性关系（ｒＮＥ＝０．９９９０，ｒＥ＝０．９９８７），重现性结果为日内ＲＳＤＮＥ＝３．５２％，ＲＳＤＥ＝４．８１％；日间ＲＳＤＮＥ＝６．４２％；ＲＳＤＥ＝７．２７％。     

HPLC法测定牛黄清心丸中甘草酸含量

用ＨＰＬＣ法测定牛黄清心丸中甘草酸的含量。采用ＯＤＳ－５柱,４．６ｍｍ＊１５０ｍｍ,流动相为０．０５ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ＝２．５）－ＭｅＣＮ（２１：１０）,流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ,检测波长２５４ｎｍ。检测量在０．５６４－２．０６８μ之间关系良好。     

反相高效液相色谱法测定血浆中普萘洛尔的浓度

以硫酸奎宁为内标，反相ＨＰＬＣ－ＵＶ法定量测定血浆中普萘洛尔的含量。固定相为Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ５ＯＤＳ（２），流动相为甲醇－水－０．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾（１００：１５：１）。紫外检测波长为２３２ｎｍ。检测浓度可低达１０ｎｇ／ｍｌ。线性范围为１０～２００ｎｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９７）。本法灵敏，准确，简便，可用于血浆普萘洛尔测定及其药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定舒他西林片中氨苄青霉素的血药浓度及 …

采用ＨＰＬＣ－荧光检测法测定舒他西林片中氨苄青霉素的血药浓度，采用Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ ＯＤＳ柱，流动相为磷酸盐缓冲液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ＝４．０）－乙膊（７８：２２，Ｖ／Ｖ），标准曲线范围０．２２￣１３．８９μｇ／ｍｌ，ｒ＝０．９９９７，保留时间为７．３ｍｉｎ，回收率大于９５％。日内和日间差小于７％，最低检测浓度为０．２２μｇ／ｍｌ，无内涛性杂质干扰。９名受试者的主要药动学参数：Ｔ１／２＝     

HPLC法测定经皮渗透接受液中双氯灭痛的浓度

采用ＲＰ－ＨＰＬＣ以４＇－羟基－５－氯双氯灭痛为内标，测定了经皮渗透接受液中双氯灭痛的含量。考察了流动相组成、ｐＨ值等对双氯灭痛色谱行为的影响情况。方法简便准确，回收率为９８．４４％～１０２．３％，ＲＳＤ＜２．４％，双氯灭痛浓度在０．５～１６μｇ／ｍｌ范围内，线性关系良好（ｒ＝０．９９９９），最低检测限５０ｎｇ／ｍｌ。色谱条件为：Ｃ（１８）Ｈｙｐｅｒｓｉｌ（５μｍ，１００ｍｍ×４．６ｍｍ）不锈钢柱，甲醇ｐＨ７．０磷酸盐缓冲液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ）（５６：４４）作流动用，检测波长２８０ｎｍ，进样量２０μｌ。     

柱切换-反相高效液相色谱法测定血浆中沙丁胺醇浓度

目的　采用柱切换对反相高效液相色谱法测定血浆中沙丁胺醇浓度的方法进行改进。方法　采用Ultrasphere CN色谱柱 ( 2 5 0× 4.6m m,5μm )和 Krom asil C1 8( 2 0× 4m m,5μm )预处理柱 ,分析和预处理柱均以p H 2 .8、0 .0 2 5 mol/L磷酸盐缓冲液∶乙腈∶甲醇 ( 95∶ 4∶ 1)为流动相 ,吗啡作内标。血浆样品加入含二苯基硼酸 - 2 -氨基乙脂的缓冲液 ( p H 9.0 )后 ,用含四辛基溴化铵的氯仿萃取 ,再用 0 .0 8m ol/L醋酸 3 0 0μl反萃 ,取酸液10 0μl进样 ,预处理柱 0 .7～ 1.5 m in流出组份进入分析柱分析 ,2 2 4nm波长下检测 ,按内标法定量。结果　标准曲线线性范围为 0 .5～ 3 2μg/L ,最低定量限为 0 .5μg/L ,沙丁胺醇和内标的保留时间分别为 6.7min和 7.6m in,日内 RSD小于 5 % ,日间 RSD小于 8% ,萃取回收率大于 80 % ,方法回收率在 96%～ 10 7%。结论　本法具有快速简便 ,灵敏准确等特点 ,适用于沙丁胺醇血药浓度测定及药代动力学、生物利用度研究用     

血浆中萘丁美酮活性代谢物的反相高效液相色谱法测定

为研究萘丁美酮的相对生物利用度,建立了用反相高效液相色谱法测定血浆中萘丁美酮的活性代谢物６－甲氧基－２萘乙酸（ＭＮＡ）溶液的方法。实验结果表明,以萘普生作内标,甲醇：０．０２ｍｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）为７４．２６作流动相,用ＹＷＧ－Ｃ１８柱有良好的分离效果;血浆样品在ｐＨ３．０醋酸盐缓冲液存在下,用二氯甲烷萃取,回收率高,在２７０ｎｍ波长下检测杂质峰少。该法标准曲线在０．５～６４ｍｇ／Ｌ     

高效液相色谱法测定血清叶黄素和玉米黄素

目的:建立C30-高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)内标法测定血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素。方法:应用Develosil C30-UG色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为乙腈∶甲醇(体积比60∶40),流动相B为甲基叔丁基醚,梯度洗脱。流速1 mL/min,检测波长450 nm,进样量20μL,柱温25℃。内标物为全反式-β-阿扑-8'-胡萝卜醛。结果:血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的分离效果良好,保留时间分别为9.9min、10.3 min和21.2 min,日内相对标准差分别为3.22%、3.81%和1.60%。血清叶黄素、β-胡萝卜素在0.012 5～12.5 mg/L(r=0.999 5、r=0.999 7),玉米黄素在0.005～5.0 mg/L(r=1)范围内呈良好线性关系。58名正常老年人(年龄50岁)血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的平均浓度分别为0.410μmol/L、0.054μmol/L和0.128μmol/L。结论:该C30-HPLC内标法是定量分析血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的可靠方法之一。     

血清中罗红霉素浓度反相高效液相色谱测定法的改进

OBJECTIVE: To make better the RP-HPLC method for the determination of roxithromycin(RM) in human serum. METHODS: RM and clarithromycin (internal standard) were extracted from alkalinized serum sample (500 microliters) with methylene chloride. After evaporation of the organic layer, the residue was dissolved in 100 microliters of acetonitrile-ammonium phosphate (1:1, pH 6.0) and washed with n-hexane, then 20 microliters was injected onto a column (5 microns, 15 cm x 4.6 mm) of Penomenex luna C18. The mobile phase was acetonitrile-0.05 mol/L phosphoric acid (39:19:42, adjusted to pH 7.2 with ammonia water) pumped at 1.2 ml/min through the column. The variable wavelength UV detector operated at 0.01 aufs and the wavelength was set at 210 nm. RESULTS: The retention times for RM and clarithromycin were 4.4 min and 5.0 min, respectively. Standard curve was linear in the concentration range of 0.25 to 32 mg/L. The detection limit in serum was 0.06 mg/L; the average method recovery 97.4%; the inter-day RSD less than 3.0%. CONCLUSION: This method was found to be simple, rapid, sensitive and accurate for determination of RM in human serum.     

哌嗪雌酚酮的含量测定方法研究

目的 采用非水滴定法和HPLC-UV法测定哌嗪雌酚酮原料药含量,建立柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法测定狗血浆中哌嗪雌酚酮含量。方法 分别采用无水冰醋酸为溶剂,0．1mol／L高氯酸为滴定液,结晶紫指示液指示终点的非水滴定法和HPLC-UV法测定哌嗪雌酚酮原料药含量;以FMOC-CL为衍生化试剂,采用柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法测定狗血浆中哌嗪雌酚酮含量。结果非水滴定法日内精密度(RSD)及日间精密度(RSD)分别为0．28％、0．21％;HPLC-UV法中哌嗪雌酚酮在1．001～5．005μg范围内呈良好的线性关系和重现性,方法的检测限为4ng(S／N=3);柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法中线性范围为8．4～420ng／mL,净化回收率为77．24％～83．10％,方法回收率为98．33％～103．3％,日内精密度(RSD)及日间精密度(RSD)分别小于7．7％和7．3％,方法的检测限为1ng(S／N=3)。结论 以上三种方法简便、准确、重现性好,分别为哌嗪雌酚酮原料药及狗血浆中的哌嗪雌酚酮的含量测定提供了方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定6-巯基嘌呤血浆药物浓度方法的建立与评价

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测人血浆中6-巯基嘌呤(6-MP)的浓度,为临床制定个体化给药方案提供基础.方法 使用 Waters公司超高效液相色谱(I-Class)-质谱(TQ-S)联用仪,以Waters ACQUITY BEH HILIC (2.1 mm×50 mm,1.7 μm)为色谱柱,pH 3.0,0.02 mol/L 醋酸铵缓冲液(含0.3%HCOOH)-乙腈(20:80)为流动相,流速0.4 mL/min,以6-硫鸟嘌呤(6-TG)为内标,乙腈沉淀蛋白,取4 μL上清液进样分析.采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为 m/z 153.03→119.1(6-MP)和m/z 168.06→134.13(6-TG).结果 6-MP 血浆浓度在0.5~2000 ng/mL 内线性关系良好(r=0.9989),定量下限为0.125 ng/mL.日内、日间 RSD<6%,方法回收率89%~104%(RSD<6%),提取回收率>95 %(RSD<8%).血浆中6-MP 在室温避光保存6 h,冻融3次和-20 ℃保存15 d 的 RSD 分别为<4.66%、4.74%和5.11%.结论 该方法操作简单、快速、灵敏度高、稳定性强,适用于血浆中6-MP 药物浓度监测.     

反相高效液相色谱法同时测定血清中多索茶碱和茶碱的浓度

目的：建立同时测定人血清中茶碱和多索茶碱浓度的反相高效液相色谱方法。方法：采用内标法,咖啡因为内标,分析柱为WondaSilCl8,流动相为甲醇-水-三乙胺-冰醋酸（35：65：0.01：0.01）,流速为1.0mL/min,柱温：30℃,检测波长为273nm;血清样品经12%高氯酸直接沉淀蛋白离心后取样进行色谱分析。结果：样品与内标的峰面积比（R）同样品浓度（C）间线性均良好,线性范围均在2.5-40mg/L,回归方程分别为：茶碱C=3.746R＋0.4436,r=0.9997,多索茶碱C=10.24R-4.506,r=0.9999;平均回收率为：茶碱99.89%（RSD=1.07%,n=5）,多索茶碱99.60%（RSD=0.81%,n=5）。结论：该方法简单方便,快速,准确     

人血清中吲达胺的高效液相色谱法测定

应用乙腈:0.05mol/L,pH3.72的乙酸盐缓冲液(45:55V/V)为流动相,在C_(18)色谱柱上以Sulfisoxazol为内标,建立了适合临床药理应用的吲达胺高效液相色谱测定法。本法简便、快速、灵敏、重现性好,流动相可循环使用,样品用乙酸乙酯提取,吲达胺和内标的平均回收率>98.5％。测定结果的变异系数,日内<4.6％,日间<4.3％。     

HPLC法测定复方苯海拉明麻黄碱糖浆中麻黄碱、苯海拉明的含量

目的:研究并建立同时测定复方苯海拉明麻黄碱糖浆中盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明含量的HPLC法.方法:采用Sino Chmm ODS-BP C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.02 mo儿十二烷基硫酸钠溶液-乙腈-三乙胺(48:52:0.1),用磷酸调节pH至(3.50±0.05),流速为0.8 ml/min,检测波长为257 nm,柱温为35℃.结果:盐酸麻黄碱、盐酸苯海拉明的线性范围分别为0.585 6～5.856 0μg(r=0.999 9)和0.508 4-5.084 0 μg(r=0.999 9),平均回收率分别为98.3%(RSD=1.01%)和98.5%(RSD=1.12%).结论:该法快速、简便、准确,可用于复方苯海拉明麻黄碱糖浆的质量控制.     

反相高效液相色谱法测定血浆中利福喷丁的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中利福喷丁的浓度。方法以Kromasil 1850mm×4．6mm,5μm）为分析柱,甲醇：0．02mol／L,KH2P02（磷酸调pH5．2,65：35v／v）为流动相,流速为1．0ml／min,检测波长为335nm,利福平为内标,测定血浆中利福喷丁的浓度。结果在0．316～20．2μg/ml浓度范围内,利福喷丁和内标峰的面积比值与浓度呈良好的线性关系（r=0．9991）。利福喷丁高、中、低3个浓度的平均回收率分别为：103．80％,98．53％,102．65％;日内、日间RSD均小于10％。结论该方法简便、快速准确、重现性好,可用于药代动力学以及生物等效性研究。