血浆中萘丁美酮活性代谢物的反相高效液相色谱法测定

为研究萘丁美酮的相对生物利用度,建立了用反相高效液相色谱法测定血浆中萘丁美酮的活性代谢物６－甲氧基－２－萘乙酸（ＭＮＡ）浓度的方法。实验结果表明,以萘普生作内标,甲醇∶０．０２ｍ ｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）为７４∶２６ 作流动相,用ＹＷＧ－Ｃ１８ 柱有良好的分离效果;血浆样品在ｐＨ３．０醋酸盐缓冲液存在下,用二氯甲烷萃取,回收率高,在２７０ｎｍ 波长下检测杂质峰少。该法标准曲线在０．５～６４ｍ ｇ／Ｌ范围内有良好线性,最低检测浓度为０．０２ｍ ｇ／Ｌ,萃取回收率为８８％ ～９４％ ,方法回收率为９６％ ～１０２％ ,日内相对标准差小于３．５％ ,日间相对标准差小于５％ 。具有快速简便,灵敏准确等特点,适用于萘丁美酮血药浓度测定及药代动力学和生物利用度研究用     

高效液相色谱法同时测定血浆中的肾上腺素和去甲肾上腺素

为同时测定人血浆中肾上腺素和去甲肾上腺素浓度,建立了高效液相色谱－电化学检测方法,采用ＹＷＧ－Ｃ１８分析柱,３,４－二羟在苄胺作内标,以０．０５ｍｏｌ／Ｌ醋酸盐结冲液（ｐＨ３．０）－甲醇－０．０５ｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ－Ｎａ２（７８：２０：２）为流动相,每１Ｌ流动相含ＳＤＳ２００ｍｇ,流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ。去甲肾上腺素和肾上腺素及内标的保留时间分别为７．３、８．３和１０．４分钟,线性范围均为３１     

高效液相色谱法同时测定血浆中的肾上腺素和去甲肾上腺素

为同时测定人血浆中肾上腺素和去甲肾上腺素浓度,建立了高效液相色谱－电化学检测方法,采用ＹＷＧ－Ｃ１８分析柱,３,４－二羟基苄胺作内标,以０．０５ｍ ｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）－甲醇－０．０５ｍ ｏｌ／ＬＥＤＴＡ－Ｎａ２（７８∶２０∶２）为流动相,每１Ｌ流动相含ＳＤＳ２００ｍ ｇ,流速为１．０ ｍ ｌ／ｍ ｉｎ。去甲肾上腺素和肾上腺素及内标的保留时间分别为７．３、８．３ 和１０．４ 分钟,线性范围均为３１．２５～４０００ｎｇ／Ｌ（ＮＥ：ｒ＝ ０．９９９９,Ｅ：ｒ＝ ０．９９９６）。去甲肾上腺素和肾上腺素日内ＲＳＤ分别低于１．８７％ 和２．０７％ ,日间ＲＳＤ分别小于８．９２％ 和９．６５％ ,平均萃取回收率分别为９３．５％ 和９１．３％ 。提示本方法快速简便,灵敏准确,适用于嗜铬细胞瘤的鉴别诊断和临床研究。     

HPLC法测定经皮渗透接受液中双氯灭痛的浓度

采用ＲＰ－ＨＰＬＣ以４＇－羟基－５－氯双氯灭痛为内标，测定了经皮渗透接受液中双氯灭痛的含量。考察了流动相组成、ｐＨ值等对双氯灭痛色谱行为的影响情况。方法简便准确，回收率为９８．４４％～１０２．３％，ＲＳＤ＜２．４％，双氯灭痛浓度在０．５～１６μｇ／ｍｌ范围内，线性关系良好（ｒ＝０．９９９９），最低检测限５０ｎｇ／ｍｌ。色谱条件为：Ｃ（１８）Ｈｙｐｅｒｓｉｌ（５μｍ，１００ｍｍ×４．６ｍｍ）不锈钢柱，甲醇ｐＨ７．０磷酸盐缓冲液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ）（５６：４４）作流动用，检测波长２８０ｎｍ，进样量２０μｌ。     

血清糖化脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳测定法初探

β脂蛋白的非酶糖化（即糖化β－Ｌｐ）可促使动脉粥样硬化,而血清中糖化β－脂蛋白的浓度取决于高血糖的程度及病程。因此,测定血清中ｇＬｃ－β－Ｌｐ对糖尿病的动脉粥样硬化及微血管病的诊断具有重要的价值。我们参照ＣＬＩＮＣＨＥＭ．３６／ＩＫｕｎｉｏ等的方法对部分关键步骤做了改进,实验结果比较满意。１资料与方法１．１材料（１）ｐＨ８．６的Ｔｒｉｓ－巴比妥－巴比妥钠缓冲液（μ＝０．０６）;（２）０．１ｍｏｌ／Ｌ碳酸盐缓冲液（ＰＨ１０．３）;（３）５ｍｍｏｌ／ＬＮＢＴ溶液（ｐＨ１０．３）称取ＮＢＴ２０４．４３…     

高效液相色谱法测定人血浆中翁丹西隆浓度

建立了翁丹西隆的高效液相色谱测定法。血浆样品用醋酸乙酯萃取，以ＺｏｒｂａｘＳｉｌｉｃａ为固定相，６０％０．０２５ｍｏｌ／Ｌ乙酸钠缓冲液（ｐＨ４．２）、４０％乙腈为流动相，紫外３１０ｎｍ处测定。采用外标法峰高定量。最低检出浓度达１ｎｇ／ｍｌ，线性范围１．０～４０．０ｎｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９６），平均回收率为（９５．２２±３．５８）％（ＲＳＤ３．７６％）。用本法测定人血浆中翁丹西隆浓度具有快速、简便、专一性和灵敏度高的优点。     

酶法测定血氨

采用酶法测定血氨,并对方法的可靠性作了一系列的研究。结果：在磷酸盐缓冲液中,酶促反应的最适ｐＨ 值为８－０ ,吸收峰扫描的最大吸收波长为５６０－４ ｎｍ ,批内和批间ＣＶ 分别为３－７５％ 、４－１０％ ,线性范围可达３００μｍｏｌ／Ｌ。正常参考值－ｘ＝ ５７ ．５２ μｍｏｌ／Ｌ,－ｘ ±２ｓ 为３２－６５ ～８２．９９ μｍｏｌ／Ｌ,男女间差异无显著性（Ｐ＞ ０－０５） 。     

高效液相色谱法测定鱼用麻醉剂在鱼体中的浓度

目的：建立高效液相色谱（ＨＰＬＣ）测定鱼血和鱼肝中麻醉剂间氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸盐（ＭＳ－２２２）浓度的方法。方法：样品用重蒸水匀浆,离心（１２０００ｒ／ｍｉｎ）１５ｍｉｎ,将上清液用０．４５μｍ过渡膜过滤后进ＹＷＧ－Ｃ１８柱分析,流动相为０．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液（ｐＨ３．１）：甲醇＝８５：１５,紫外检测波长２２３ｎｍ。结果：所得标准曲线的回归方程为钱血：Ｙ（ｎｇ）＝０．５２５８－０．０８９４Ｘ     

阿司匹林－聚天冬酰胺共价复合物的合成及体外释放的研究

作者选用α、β－聚（３－羟丙基）ＤＬ－天冬酰胺［α、β－ｐｏｌｙ（３－ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ）ＤＬ－ａｓｐａｒｍｉｄｅ］（ＰＨＰＡ）这一可生物降解的高分子作为载体，将阿司匹林（ＡＳＡ）通过羧酸酯键与之结合成阿司匹林－聚天冬酰胺共价复合物（ＡＳＡ－ＰＨＰＡ）。将该复合物完全水解后，用紫外分光光度法测定水解产物水杨酸的含量。由此得出该复合物中阿司匹林的接入率为４０．７％（Ｗ／Ｗ）。我们还对该复合物在ｐＨ＝７．４，离子强度μ＝０．５的磷酸缓冲液中的释放作了研究。结果显示：该复合物释放８天后即以零级动力学平稳地释放，平均释放速率以水杨酸计算为２．２２±０．２５μｇ／１０ｍｇ高聚物·天。     

生物活性蛋白钙调素与磷脂酶A2的高效毛细管电泳纯度分析

采用高效毛细管电泳对猪脑中提取的钙调素与猪胰腺中提取的磷脂酶Ａ２进行分离分析。以Ｂｉｏ－Ｒａｄ２０ｃｍ×２５μｍｃｏａｔｅｄ石英毛细管为分离柱，ＵＶ２００ｎｍ为检测波长，选择０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ３．５）为钙调素电泳分离缓冲液体系，０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ２．５，内含０．１％ＨＰＭＣ）为磷脂酶Ａ２电泳分离缓冲液体系，对多步分离纯化获得的钙调素与磷脂酶Ａ２进行纯度分析，同时为进一步研究钙调素与磷脂酶Ａ２的生物活性提供了有效的检测手段。     

反相HPLC法测定血浆中的氢化可的松和甲基强的松龙

A sensitive and rapid method for the simultaneous measurement of both hydrocortisone (HC) and methylprednisolone (MP) using dexamethasone (DX) as the internal standard was presented. High-performance liquid chromatograph Model 344 (Beckman, USA) with a 254 nm wavelength UV detector and reversed-phase Ultrasphere ODS (5 microns) column was used. Sample was extracted with ethyl acetate and the organic layer was evaporated to dryness under an air stream in a 37 degrees C water bath. The residue was dissolved in 30 microliters mobile phase and 20 microliters injected. The mobile phase of methanol and 0.01 mol/L acetate buffer (pH 3.0) (64:36) was pumped at 1.0 ml/min through the column. The detector was operated at 0.005 aufs. The retention time for HC, MP and DX was 5.43 min, 7.7 min and 11.5 min, respectively. Standard curve was linear in the concentration range of 0.02 to 1.28 mg/L for HC and 0.05 to 12.8 mg/L for MP. Sensitivity was 1 ng for HC and 1.5 ng for MP; extraction recovery 76-83%; within day CV less than 4%, and inter-day CV less than 6% for both steroids.     

柱切换-反相高效液相色谱法测定血浆中沙丁胺醇浓度

目的　采用柱切换对反相高效液相色谱法测定血浆中沙丁胺醇浓度的方法进行改进。方法　采用Ultrasphere CN色谱柱 ( 2 5 0× 4.6m m,5μm )和 Krom asil C1 8( 2 0× 4m m,5μm )预处理柱 ,分析和预处理柱均以p H 2 .8、0 .0 2 5 mol/L磷酸盐缓冲液∶乙腈∶甲醇 ( 95∶ 4∶ 1)为流动相 ,吗啡作内标。血浆样品加入含二苯基硼酸 - 2 -氨基乙脂的缓冲液 ( p H 9.0 )后 ,用含四辛基溴化铵的氯仿萃取 ,再用 0 .0 8m ol/L醋酸 3 0 0μl反萃 ,取酸液10 0μl进样 ,预处理柱 0 .7～ 1.5 m in流出组份进入分析柱分析 ,2 2 4nm波长下检测 ,按内标法定量。结果　标准曲线线性范围为 0 .5～ 3 2μg/L ,最低定量限为 0 .5μg/L ,沙丁胺醇和内标的保留时间分别为 6.7min和 7.6m in,日内 RSD小于 5 % ,日间 RSD小于 8% ,萃取回收率大于 80 % ,方法回收率在 96%～ 10 7%。结论　本法具有快速简便 ,灵敏准确等特点 ,适用于沙丁胺醇血药浓度测定及药代动力学、生物利用度研究用     

血清中罗红霉素浓度反相高效液相色谱测定法的改进

OBJECTIVE: To make better the RP-HPLC method for the determination of roxithromycin(RM) in human serum. METHODS: RM and clarithromycin (internal standard) were extracted from alkalinized serum sample (500 microliters) with methylene chloride. After evaporation of the organic layer, the residue was dissolved in 100 microliters of acetonitrile-ammonium phosphate (1:1, pH 6.0) and washed with n-hexane, then 20 microliters was injected onto a column (5 microns, 15 cm x 4.6 mm) of Penomenex luna C18. The mobile phase was acetonitrile-0.05 mol/L phosphoric acid (39:19:42, adjusted to pH 7.2 with ammonia water) pumped at 1.2 ml/min through the column. The variable wavelength UV detector operated at 0.01 aufs and the wavelength was set at 210 nm. RESULTS: The retention times for RM and clarithromycin were 4.4 min and 5.0 min, respectively. Standard curve was linear in the concentration range of 0.25 to 32 mg/L. The detection limit in serum was 0.06 mg/L; the average method recovery 97.4%; the inter-day RSD less than 3.0%. CONCLUSION: This method was found to be simple, rapid, sensitive and accurate for determination of RM in human serum.     

高效液相色谱法测定大鼠肺组织中百草枯质量浓度

目的：建立组织中百草枯质量分数高效液相色谱检测方法,观察百草枯染毒大鼠模型肺组织中百草枯含量的动态变化趋势。方法样品处理采用35％高氯酸处理。流动相为0.1 mol／L磷酸缓冲液－乙腈;流速1.0 ml／min ;柱温28℃;检测波长258 nm。结果所采用方法在2～200μg／ml范围内线性关系良好。平均绝对回收率为91.4％,RSD均小于3％;平均相对回收率为100.67％,RSD均＜6％。日内和日间RSD均＜6％,冻融及冻存后百草枯样品质量分数测定结果无显著性差异。结论高效液相色谱法快速、准确,无组织中杂质干扰,适用于百草枯染毒大鼠模型肺组织中百草枯质量浓度的分析测定。     

HPLC 法测定兔血浆中阿西美辛和吲哚美辛的浓度

目的：建立家兔血浆中阿西美辛和吲哚美辛浓度的测定方法。方法：采用高效液相色谱法,以酮洛芬为内标,色谱柱：Hypersil BDS C18（4．6 mm＆#215;250mm,5μm）,流动相为pH 4．5醋酸盐缓冲液-乙腈-甲醇（50∶40∶10）,流速为0．6 mL/min,柱温为25℃,检测波长为250nm,进样量为20μL。结果：阿西美辛在0．04-2．56μg/mL浓度范围内线性关系良好,平均回收率为89．4％,RSD＝5．2％（ n＝5）;吲哚美辛在0．03-1．92μg/mL浓度范围内线性关系良好,平均回收率为89．7％,RSD＝5．7％（ n＝5）。结论：本法简单、灵敏、结果准确,可用于测定兔血浆中阿西美辛和吲哚美辛的浓度。     

HPLC法测定雪上一枝蒿速效止痛搽剂中雪上一枝蒿甲素

目的:建立HPLC法测定雪上一枝蒿速效止痛搽剂中雪上一枝蒿甲素的方法。方法:采用Watres SunfireC18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-磷酸盐缓冲溶液(pH 7.3)(65∶35)为流动相;检测波长:210 nm;体积流量:1.0 mL/min。结果:雪上一枝蒿甲素在33.6 mg/L~268.8 mg/L线性关系良好,相关系数r=0.99998,平均回收率为96.80%,RSD为1.89%(n=6)。结论:本方法简便快速、准确,可为评价雪上一枝蒿速效止痛搽剂质量提供依据。     

高效液相色谱法测定人血浆中百草枯浓度

目的：建立人血浆中百草枯浓度高效液相色谱检测方法,为百草枯中毒患者预后评估、治疗方案选择提供方法学支持。方法样品处理采用35％高氯酸处理。流动相为0.1mol · L －1磷酸缓冲液（含75 mmol · L －1庚烷磺酸钠）‐乙腈（88∶12,三乙胺调pH＝3.0）;流速为1.0 mL · min－1;柱温为28℃;检测波长为258 nm。结果所采用方法在0.2～500μg · mL －1范围内线性关系良好。平均绝对回收率为100.6％,RSD均小于3％;平均相对回收率为101.31％,RSD均小于6％。日内和日间RSD均小于6％,冻融及冻存后百草枯样品浓度测定结果差异无统计学意义。结论高效液相色谱检测方法快速,准确、血液中杂质无干扰,适用于百草枯中毒患者血药浓度的分析测定。     

HPLC-MS/MS法测定血浆中华法林对映异构体浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中华法林对映异构体的浓度。方法 以乙酸乙酯为萃取剂,采用MS Chiral? MS-OD(50×2.1 mm, 3 μm)为手性柱,流动相为甲醇∶水∶甲酸=85∶15∶0.05,流速为0.18 mL/min。采用负离子模式,电喷雾离子源（ESI）,以萘普生为内标定量,华法林和内标的检测离子对质荷比分别为（m/z）307.2→160.9和（m/z）228.9→185.1。结果 R-华法林批内精密度,其相对标准偏差(RSD)为3.2%~5.8%,批间RSD为2.5%~5.1%;方法回收率(96.1±5.6)%~(105.4±4.7)%,提取回收率80.7%~84.4%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%;S-华法林批内精密度RSD为3.7%~5.2%,批间RSD为3.2%~4.8%;方法回收率(98.3±5.1)%~(103.7±3.8)%,提取回收率81.3%~84.6%,内标基质效应校准后的基质效应RSD<10%。最低定量限均为0.1 μg/mL。结论 本文建立的方法准确、灵敏、可靠,可用于人血浆中华法林对映体的拆分和血药浓度的测定。     

反相离子对高效液相色谱法测定人血清中异烟肼浓度

目的：建立一种快速简便的的反相离子对高效液相色谱法测定血清中异烟肼（ＩＮＨ）浓度。方法：用ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＳｉＯ２（５μ，２５０ｍｍ×４６ｍｍ）色谱柱，以甲醇：２０ｍｍｏｌ／ＬＩＰＲ－Ｂ８＝１５∶８５（Ｖ∶Ｖ）为流动相，紫外检测器检测，波长２５４ｎｍ，烟酰胺（ＮＡ）为内标物。结果：在此色谱条件下，ＩＮＨ与ＮＡ的保留时间分别为７８１７ｍｉｎ和６８７２ｍｉｎ。在０５～２００μｇ／ｍｌ的浓度范围内，线性关系良好（ｒ＝０９９９５）。方法日内差异２１９％，日间差异４５１％，回收率９３３％，最低检测浓度５０ｎｇ／ｍｌ。结论：该法灵敏度高，特异性好，不需提取过程，大大减低了测定的工作量，对日常血药浓度监测和药代动力学工作的开展，具有极大的优越性。