血红素加氧酶1对实验性肝硬化内毒素血症大鼠肝功能的影响

目的 探讨血红素加氧酶1(HO-1)在实验性肝硬化内毒素血症大鼠中的作用.方法 80只大鼠均分为4组:对照组为正常大鼠+脂多糖(LPS);其余3组用硫代乙酰胺(TAA)诱导大鼠肝硬化模型后,TAA组腹腔内注射生理盐水,TAA+LPS组注射LPS,HM组注射氯化高铁血红素+LPS.造模后检测AST和ALT.结果 与对照组比较,其余3组血浆中ALT和AST水平均明显升高(P＜0.05),且HM组＞TAA+ LPS组＞TAA组.结论 HO-1通过其氧化损伤和促纤维化,促进大鼠肝硬化内毒素血症时肝损害.     

丹参素保护肝损伤作用及其作用机制的实验研究

目的探讨丹参素(DSS)保护肝损伤的作用及其可能机制。方法用硫代乙酰胺(TAA)构建急性重型肝损伤大鼠模型。24只雄性Wistar大鼠分为3组:正常对照组(N组),TAA组,TAA+DSS组。检测实验各组血浆内毒素、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)水平的变化判定肝功能情况;检测肝组织匀浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列环素1α(6-keto-PGF1α)的含量判定肝脏微循环变化;HE染色显示肝组织形态学改变,Weigert染色显示肝脏血管内微血栓。结果TAA+DSS组与TAA组相比,ALT、LDH、内毒素水平及TXB2含量均明显减少,6-keto-PGF1α含量明显升高(P<0.05或P<0.01);HE染色显示TAA组可见肝细胞点片状坏死、大量的炎性细胞浸润;TAA+DSS组上述改变均明显减轻;Weigert染色显示TAA组微血栓计数明显增加,TAA+DSS组较前明显减少(P<0.01)。结论丹参素通过降低肠源性内毒素水平,改善肝脏微循环障碍,从而减轻急性重型肝损伤。     

血红素加氧酶-1的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响。方法:32只健康雄性wistar大鼠,随机分为4组,正常+脂多糖(LPS)(对照组)、肝硬化+生理盐水对照组(TAA组)、肝硬化+LPS组(TAA+LPS组)、肝硬化+LPS+hemin(氯化高铁血红素)(HM组)。用硫代乙酰胺(TAA)诱导肝硬化模型时间共计10周,对照组自由饮清水。于模型造成后,向对照组、TAA+LPS组、HM组大鼠腹腔内注入LPS3 mg/kg;TAA组大鼠腹腔内注入等量的生理盐水;HM组于注射LPS 12 h前,腹腔注射HM(40 mg/kg),并在注入LPS 6 h后,各组动物经腹主动脉穿刺采全血观察血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基酸转移酶(AST)、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的表达。留肝组织用免疫组织化学法观察HO-1的表达。结果:对照组、TAA组、TAA+LPS组、HM组血浆中的ALT/AST、MDA、NO依次升高差异有显著性(P<0.05),对照组、TAA、TAA+LPS、HM组各组大鼠的灰阶值显著依次降低,且有明显差别(P<0.05)。结论:在实验性的肝硬化内毒素中尽管HO-1的表达增加,但它未起到保护作用,它与内毒素对机体的损伤有关。     

复方甘草酸苷对大鼠急性肝衰竭保护机制的研究

目的探讨甘草酸苷对大鼠急性肝衰竭（AHF）的保护机制。方法将90只Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组（对照组）、模型组（AHF组）、治疗组（甘草酸苷组）,静脉注射硫代乙酰胺（TAA）600 mg/kg,2次,每次间隔24 h,复制AHF动物模型。治疗组动物除予TAA外,于实验前3 d至实验结束分别静滴甘草酸苷注射液2 mL/100 g,对照组和AHF组同时皮下注射0.9%氯化钠液1 mL/100 g。AHF组、治疗组于第2次注射TAA后24 h,随机各取8只,治疗中分时段取大鼠腹主动脉血检测肝功能、PTA、血清内毒素及多种炎性因子水平。2周后,取肝组织,用10%甲醛液固定,检测肝细胞增殖细胞核抗原阳性率（PCNA）。结果与AHF组、对照组相比,治疗中,治疗组血清ALT水平降低（P〈0.01）;治疗2周后,治疗组血清总胆红素水平（同比例）降低,而血浆凝血酶原活动度（PTA）均值较高（P〈0.01）;治疗后各时相点,治疗组TNF-α水平较低（P〈0.01）;治疗2周后,治疗组患者血浆内毒素及IL-6水平显著降低（P〈0.01）。治疗2周后,治疗组PCNA阳性细胞表达显著高于对照组（P〈0.01）。结论甘草酸苷对急性肝衰竭大鼠模型具有保护作用,其机制可能与降低血浆内毒素及细胞因子水平、促进肝组织PCNA表达有关。     

丹参素和泮托拉唑对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝再生的影响研究

目的以肝硬化大鼠为动物模型,研究药物对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝再生的影响。方法取健康的Wistar雄性大鼠64只,以60%CCl4油溶液0.3ml/100g皮下注射,同时饮用5%酒精溶液,45d后制成肝硬化动物模型。模型大鼠随机分为4组,16只/组。全麻下均行左、中叶肝切除术。术后各组按以下方案处理:对照组皮下注射生理盐水1mg·kg-1·d-1,丹参素组腹腔注射18mg·kg-1·d-1,泮托拉唑组皮下注射0.2mg·kg-1·d-1,两药合用组同时给予丹参素(tanshinol)腹腔注射18mg·kg-1·d-1,泮托拉唑(pantoprazole)皮下注射0.2mg·kg-1·d-1,连续给药2周,抽取静脉血样,取肝脏组织,检测肝功能、有丝分裂指数(MI)、增生细胞核抗原(PCNA)、细胞核DNA含量。结果丹参素组、泮托拉唑组及两药合用组MI、PCNA阳性染色细胞量、细胞核DNA含量均高于对照组(P<0.05),两药合用组MI、PCNA阳性染色细胞量、细胞核DNA含量均高于丹参素组、泮托拉唑组(P<0.05),但各组间肝功能变化无明显差异。结论丹参素、泮托拉唑及两药合用均对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝细胞再生有促进作用。     

骨髓间充质干细胞对急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症的保护作用

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对硫代乙酰胺(TAA)所致急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症(IETM)的保护作用。方法取雄性Wistar大鼠的骨髓贴壁培养获得BMSCs,取30只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、TAA模型组和BMSCs治疗组,每组10只。TAA300mg/kg灌胃建立急性肝衰竭模型,24h后重复灌胃,正常组给予磷酸盐缓冲液(PBS)2ml灌胃,第2次灌胃后将BMSCs经尾静脉注射到BMSCs治疗组中,正常组和TAA模型组给予等量PBS注射。BMSCs治疗72h后处死。腹主动脉采血,检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)以及血浆内毒素含量,取部分肝组织及回肠作常规病理切片检查。结果与正常组比较,TAA模型组大鼠血清ALT,AST活性以及血浆内毒素水平均显著上升(P<0.05),BMSCs治疗组大鼠血清ALT,AST活性以及血浆内毒素水平与模型组相比均显著降低(P<0.05)。肝脏病理切片显示BMSCs能够明显减轻TAA对肝组织的炎症性破坏。结论 BMSCs尾静脉移植对TAA引起的急性肝衰竭大鼠IETM有一定的保护作用。     

乳果糖对肝硬化大鼠血浆内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF)及血清ALT的影响

目的探讨乳果糖对肝硬化大鼠血泉内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF)及血清ALT的影响。方法将四氯化碳(CCL_4)注射于SD大鼠皮下,诱导肝硬化伴腹水动物模型.将该鼠随机分为肝硬化模型组、乳果糖治疗组,检测各组和正常鼠的血浆LPS、TNF及血清ALT水平.结果肝硬化模型组LPS.TNF,ALT水平较正常对照组明显升高;乳果糖治疗组血浆LPS,TNF、ALT水平较肝硬化模型组明显降低.结论乳果糖能通过降低血浆LPS来显著降低TNF,对肝脏又保护作用.     

急性肝衰竭大鼠血浆内毒素水平的检测及其与肝细胞生长素的关系

本实验采用鲎试验基质显色法检测D-氨基半乳糖(GaLN)形成急性肝衰竭(FHF)模型大鼠血浆内毒素(LPS)水平,并探讨了肝细胞生长素(HGF)对其影响。结果表明:FHF早期血浆LPS水平较正常对照组水平(49±6.94pg/ml)明显升高,且其水平随时间延长而自然降低。动态观察第9小时为高峰期(234±83.8pg/ml),30小时为最低水平(63.1±18.4pg/ml),与正常对照组比较分别具非常显著(P<0.01)或显著性差异(P<0.05)。结合肝组织病理学检查结果提示,内毒素血症出现在形成明显的肝损害之前。以HGF早期一次性腹腔注射治疗,发现9小时治疗组血浆LPS水平(149±41.9pg/ml)明显低于盐水对照组水平(234±83.8pg/ml,P<0.005)。相反,24小时HGF组LPS水平升高(266±55.9pg/ml)而明显高于盐水对照组水平(153±71.9pg/ml,P<0.001)。改变给药方式,则24小时两组LPS水平比较无显著性差异(115±14.5pg/ml与117±12.1pg/ml,P>0.05)。本研究进一步说明HGF、内毒素血症及肝损伤三者间紧密联系,并提示HGF治疗FHF所出现的内毒素血症以间歇或持续用药为宜。     

内皮素-1在暴发性肝功能衰竭发生中的作用

目的　观察内皮素 (ET) - 1在暴发性肝功能衰竭发生中的作用。方法　以硫代乙酰胺 (TAA)灌胃染毒的方法建立大鼠暴发性肝功能衰竭模型 ,利用生化方法测定血浆内毒素及内皮素水平 ,采用 ET抗血清拮抗 ET- 1的作用。结果　 TAA组血浆内皮素、内毒素和血清丙氨酸转氨酶水平显著高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;TAA +ET- Ab组血浆内皮素、内毒素和丙氨酸转氨酶水平显著低于 TA A组 (P<0 .0 5 ) ,内皮素与内毒素水平呈显著正相关 (P<0 .0 1) ,内皮素抗血清可以拮抗 ET- 1的作用并可减轻肝坏死的程度。结论　内皮素可上调血浆内毒素水平 ,与暴发性肝功能衰竭的发生密切相关     

棓丙酯对大鼠肝纤维化防治作用的实验研究

目的观察棓丙酯对四氯化碳导致的肝纤维化大鼠的保护作用,为临床治疗肝纤维化提供实验依据。方法以四氯化碳皮下注射复制大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组、肝纤维化模型组和棓丙酯组,棓丙酯组在造模的同时给予棓丙酯注射液皮下注射。6周后取肝组织常规HE染色观察肝脏病变,天狼猩红胶原染色、肝组织羟脯氨酸(HYP)含量测定观察肝纤维化程度;赖氏法测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT);TBA法检测肝组织丙二醛(MDA)水平,产色基质偶氮法鲎试剂定量测定血浆内毒素。结果棓丙酯与肝纤维化模型组比较,①肝脏的损伤性改变较轻,肝组织HYP及肝纤维化指数(FI)明显降低。②血浆内毒素含量、ALT及肝组织MDA均有不同程度的降低。结论棓丙酯具有一定的抗肝纤维化的作用。     

Augmented hepatic injury followed by impaired regeneration in metallothionein-I/II knockout mice after treatment with thioacetamide

A previous study (Oliver, J.R., Mara, T.W., Cherian, M.G. 2005. Impaired hepatic regeneration in metallothionein-I/II knockout mice after partial hepatectomy. Exp. Biol. Med. 230, 61-67) has shown an impairment of liver regeneration following partial hepatectomy (PH) in metallothionein (MT)-I and MT-II gene knockout (MT-null) mice, thus suggesting a requirement for MT in cellular growth. The present study was undertaken to investigate whether MT may play a similar role in hepatic injury and regeneration after acute treatment with thioacetamide (TAA). Hepatotoxicity of TAA is caused by the generation of oxidative stress. TAA was injected ip to both wild-type (WT) and MT-null mice. Mice were killed at 6, 12, 24, 48, 60, and 72 h after injection of TAA (125 mg/kg) or 48 h after injection of saline (vehicle control), and different parameters of hepatic injury were measured. The levels of hepatic lipid peroxidation were increased at 12 h in both types of mice; however, lipid peroxidation was significantly less in WT mice than MT-null mice at 48 h after injection of TAA. Analysis of hepatic glutathione (GSH) levels after TAA injection showed depletion of GSH at 12 h in WT mice and at 6 h in MT-null mice; however, significantly more GSH was depleted early (6-24 h) in MT-null mice than WT mice. An increase in hepatic iron (Fe) levels was observed in both types of mice after injection of TAA, but Fe levels were significantly higher in MT-null mice than WT mice at 6-60 h. The levels of hepatic copper (Cu) and zinc (Zn) were significantly higher in WT mice than MT-null mice at 6-60 h for Cu, and at 24 h and 60 h for Zn, respectively. Histopathological examination showed hemorrhagic necrosis in the liver of both types of mice at 12-72 h, with hepatic injury being more prominent in MT-null mice than WT mice. The hepatic MT levels were increased in WT mice after injection of TAA, and were highest at 24-72 h. Immunohistochemical staining for MT in WT mice indicated the presence of MT in both nucleus and cytoplasm of hepatocytes at 24-72 h after TAA injection. Cell proliferation, as assessed by immunohistochemical staining for proliferating cell nuclear antigen, was detected mainly in the livers of WT mice at 48-72 h after TAA treatment. Hepatic proliferation index in MT-null mice was very low as compared to WT mice during liver regeneration after injection of TAA. These results show that the liver cells of MT-null mice with no functional MT are unable to regenerate after TAA-induced hepatic injury, demonstrating an important role for MT in cellular regeneration.     

重组人红细胞生成素对大鼠肝切除后肝再生的影响

目的 探讨重组人红细胞生成素(rhEPO)对大鼠肝切除后肝再生的促进作用.方法 大鼠建立70%肝切除模型后分为两组:实验组术后30 min经尾静脉注射累计4000 IU/kg rhEPO(每天1333 IU/kg rhEPO,连用3 d);对照组给予相同容量的生理盐水.术后1、3、5、7、14 d随机各取5只大鼠处死,称取并计算肝再生率,采用速率法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和白蛋白(Alb),免疫组化检测肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达.结果 术后1、3、5、7、14 d实验组肝再生率较实验组明显增高(P＜0.05),实验组血清ALT水平术后5、7、14 d较对照组有降低(P＜0.05),实验组血清Alb术后7、14 d高于对照组(P＜0.05),术后1、3、5、7 d实验组PCNA标记指数均高于对照组(P＜0.05和P＜0.01).结论 rhEPO对大鼠肝切除后肝再生有促进作用.     

人胎儿肝干细胞异种移植治疗小鼠暴发性肝功能衰竭

目的：探讨人胎儿肝干细胞异种移植治疗暴发性肝功能衰竭伴严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠的可能性与有效性。方法：改进Seglen胶原酶（Ⅳ型）原位灌注结合Percol密度梯度离心法分离纯化中期妊娠流产的男性胎儿肝干细胞。经肝脏注射移植（106细胞）治疗D-氨基半乳糖（1600mg／ks）诱发的暴发性肝功能衰竭雌性SCID小鼠（治疗组），于移植前及移植后24，48，72h及1周取血测定血氨、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBiL），于移植后1，2，4周取受体肝脏组织，PCR方法检测性别决定因子，并与未移植肝干细胞小鼠（对照组）比较。结果：治疗组小鼠中位生存时间较对照组延长（123．4hvs70．4h）（P〈0．05）；移植后治疗组血清ALT、TBiL及血氨水平降低，各时间点均低于对照组（P〈0．05）；治疗组肝脏病理损伤逐渐减轻，存活2周小鼠肝脏组织中性别决定因子呈阳性表达，随时间延长表达增强。结论：人胎儿肝于细胞移植能延长暴发性肝功能衰竭SCID小鼠的存活时间，改善其肝功能及肝脏病理指标。     

促肝细胞生长素肠溶胶囊与其注射剂对大鼠肝切除后肝再生影响的对照实验研究

目的通过应用不同剂量的促肝细胞生长素(HGF)肠溶胶囊剂与注射剂,来判断两种给药方式和不同剂量对肝再生的影响。方法本试验采用雄性SD大鼠144只,随机分为4组,分别于肝部分切除术后12,24,48,72,120,168 h麻醉后,腹主动脉取血提取血清测量ALT、AST、ALB和TB IL,完整取出大鼠肝脏并称量残肝重量,并计算肝再生率(HRR),切取新鲜肝组织应用流式细胞分析技术测量细胞周期,其余组织以10%中性福尔马林固定后行HE染色观察标本大体形态,并行免疫组化观察增殖细胞核抗原(PCNA)。结果当静脉组和口服组应用相同剂量的HGF时,口服组与静脉组的促进肝再生效果相似。当口服应用HGF剂量是静脉剂量的3倍时,口服应用HGF促进肝再生效果优于静脉应用,尤其以术后24 h更明显。用药途径同为口服时,3倍剂量组的促进肝再生效果优于1倍剂量组,其中以术后24 h和48 h最明显。结论HGF肠溶胶囊避免了胃酸对本品的破坏,综合疗效优于静脉注射HGF。     

沙苑子黄酮抗裸鼠人肝癌移植瘤的实验研究

目的观察沙苑子黄酮(ACF)对人肝癌细胞SMMC7721裸鼠移植瘤生长的影响。方法30只裸小鼠建立人肝癌SMMC7721细胞皮下移植瘤模型后随机分为模型组、环磷酰胺(CTX,25mg·kg-1)组、ACF-1(400mg·kg-1)、ACF-2(200mg·kg-1)和ACF-3(100mg·kg-1)5组,给予相应药物,观察肿瘤生长曲线和移植瘤重量,计算肿瘤抑制率;免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(proliferationcellnuclearantigen,PCNA)在肿瘤组织中的表达;光镜和电镜观察肿瘤组织病理变化。结果ACF-1组和ACF-2组裸鼠肿瘤体积和重量明显降低,ACF各给药组平均抑瘤率分别为68.20%、41.19%、26.79%;ACF-1组和ACF-2组肿瘤组织PCNA表达率明显减少(P<0.01,P<0.05);病理学观察结果,ACF可引起SMMC7721细胞坏死,诱导SMMC7721细胞凋亡。结论ACF可抑制SMMC7721裸鼠移植瘤的生长,其作用可能与下调肿瘤组织PCNA表达和诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

Effect of liver hydrolysate on hepatic proliferation in regenerating rat liver

The effect of liver hydrolysate (LH) derived from bovine liver on rat liver regeneration after partial hepatectomy (PH) were investigated. Oral administration of LH increased rat liver weight dose-dependently at 24 h after PH. Hepatic ornithine decarboxylase (ODC) activity and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) labeling index were measured in regenerating rat liver as markers of cell proliferation. ODC activities at 4 and 24 h after PH were significantly increased by LH administration. PCNA labeling index at 24 h after PH were also increased by LH administration. These results suggest that LH stimulates liver regeneration in partially hepatectomized rats.