复合骨修复材料HAPw/nmZnO-nmCaO的抗菌性能研究

目的：研究HAPw/nmZnO-nmCaO对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的体外抗菌性能。方法：配制OD595=0.1的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌悬液。用灭菌纯水配制浓度为1mg/ml的HAPw、Bio-oss、HAPw/nmZnO-nmCaO材料悬浊液。A组：5ml培养基+1ml HAPw/nmZnO-nmCaO+200ul菌悬液;B组：5ml培养基+1ml HAPw+200ul菌悬液;C组：5ml培养基+1ml Bio-oss+200ul菌悬液;D空白组：5ml培养基+1ml灭菌纯水+200ul菌悬液。各组37℃恒温培养20h,取样进行浓度梯度稀释。稀释后的菌液取100ul涂布于琼脂平板,37℃恒温培养20h行平板菌落计数。结果：金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌HAPw/nmZnO-nmCaO组的菌落数量少于HAPw、Bio-oss、空白对照组（P＜0.001）,HAPw、Bio-oss、空白对照组三组之间无差异（P＞0.05）。结论：HAPw/nmZnO-nmCaO对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的生长均有抑制作用,对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于铜绿假单胞菌。     

关于从核梭形菌培养上清液中提取抗肿瘤物质的研究

关于微生物的抗癌作用之研究,已有很多,但尚无厌气性无芽胞杆菌(核梭形菌)的报告。作者发现口腔常住菌中核梭形菌的培养上清液具有抗肿瘤活性,从中提取出抗肿瘤物质,并用于被Ehrlich癌细胞或肉瘤180细胞致癌的小鼠,研究其抗肿瘤活性。方法:实验菌落是从白斑患者口腔内分离、鉴定,在金沢大学医学部齿科口腔外科学教研室保存的核梭形菌KO-31株。用TF培养基培养48小时,取其上清液,加乙醇,然后加PBS(磷酸缓冲液)(pH7.0),采用     

黄芪浸出液对致龋菌的体外抑菌实验

选择甘肃产黄芪为原料,制成水浸出液,研究其对口腔常见致龋菌的抑制效果,并与国外致龋菌抑菌产品(MI)进行比较.以变形链球菌、乳酸杆菌为实验菌株,用选择性培养基进行液体培养,在培养基中添加不等量的药物,测培养24 h后菌液的A值、pH值;用SPSS 13.0对数据进行统计分析.黄芪浸出液对变形链球菌、乳酸杆菌的生长、产酸均有抑制效果,抗菌效果与MI相当.     

颌面部蜂窝织炎细菌丛的种类和数量指标

近来临床细菌学家特别注意评定化脓伤口细菌培养的数量指标,因为只检查细菌的种类,不是确定伤口感染的可靠标准.有些作者提出,从伤口深处取材,1g 组织内细菌总数必须超过临界水平——10~4～10~5(培养菌落形成数),才能发展成感染性炎症。作者检查颌面部牙源性蜂窝织炎57例,用有严密活塞的注射器穿刺吸取或切开后立即从伤口深处吸取脓性渗出物,排出注射器内的空气,针头套上无菌橡皮塞,同时立即从伤口深处切取小块组织,很快接种在富有血晶和维生素K 的液体培养基和血琼脂培养基。为测定细菌培养率,取脓性渗出物0.5ml,或取深处病变组织准确称量以后匀化在4.5ml 无菌生理盐水中,然后连续稀释,从10~(-1)到10~(-6)～10~(-8)。在厌氧条件下(含氮气80%,氢气10%,二氧化碳10%)37℃培养48～72小时,鉴定厌氧菌种类。在需氧条件下37℃培养24小时,鉴定需氧菌和兼性菌种类。分别计算培养菌落形成数。结果所有病例都分离出2～6种细菌联合生长,在专性厌氧菌中,常见口腔类杆菌、产黑色素杆菌、颊     

干槽拔牙创微生物研究初报 第Ⅲ报:不同的口腔细菌对人血纤维蛋白的溶解作用

在拔牙后干槽症的病因学说中,近年来纤维蛋白溶解学说甚为盛行,甚至称干槽症为纤维蛋白溶解性牙槽炎。本研究的目的是用从干槽症牙窝组织块中分离培养出的不同菌株,或我院分离培养的口腔菌株,增菌培养制成菌悬液,与健康志愿者新鲜静脉血一起孵育12—24小时,测定纤维蛋白降解产物(FDP)含量,以了解这些菌悬液是否具有溶解纤维蛋白的能力并相互进行比较。现将结果报告于后。材料与方法一、菌悬液的制备从超低温(—70℃)冰箱中取出保种的细菌7株(见表1),用BHI固体培养基复苏增菌。刮取菌落于pH7.2、0.2M磷酸     

抗菌剂作用后变形链球菌生物膜细胞活力观察

目的:观察抗菌剂作用后变形链球菌生物膜细胞活力。方法:将已形成24h变形链球菌生物膜分别用1000μg/ml、500μg/ml、100μg/ml、50μg/ml、0μg/ml红霉素药液作用3h后取出,对这些生物膜分别进行两种不同的处理。A组将生物膜继续培养后,用死菌活菌荧光染色方法结合激光共聚焦扫描显微镜进行观察;B组将生物膜细胞刮下接种到培养基上,革兰染色观察。结果:A组每个标本均重新形成较完整的生物膜;B组每个标本均发现有变形链球菌生长。结论:变形链球菌生物膜被高浓度抗菌剂作用后,膜中存活的细菌仍能分裂繁殖,并可修复已损伤的生物膜。     

儿童口腔中变形链球菌传播方式的研究

目的通过对婴儿院儿童及其母亲之间、全托儿童之间口腔中变形链球菌（简称变链菌）传播方式的研究,为儿童龋病预防提供新的思路.方法选取四川省实验婴儿院3～4岁的20名非全托儿童及其母亲和24名全托儿童作为研究对象,无菌牙签收集其菌斑样本,MSB培养基中培养48 h,每种表型菌落挑取一个代表株在TPY平板上次代纯培养,经形态学和微量生化鉴定后对分离的变链菌株行AP-PCR扩增,对不同个体出现相似基因型的变链菌株进行分析.结果44名儿童中,65.9%的儿童口腔内检出变链菌,20对母子中有10对均检出变链菌,44名儿童及20名母亲口腔中共分离出98株变链菌;均有变链菌检出的10对母子口腔中分辨出32个不同的基因型,其中7对母子有相似基因型出现;24名全托儿童口腔中共分辨出29个不同的基因型,有2种基因型在13名全托儿童口腔中有重复检出.结论变链菌在婴儿院儿童中存在水平传播及垂直传播两种传播方式.     

白屈菜红碱对变链菌产酸抑制作用的实验研究

目的:观察白屈菜红碱对变链菌产酸的影响,为龋病预防提供实验基础.方法:采用二倍稀释法用BHI液体培养基将白屈菜红碱稀释为从390.6 μg/ml到24.4 μg/ml 5个不同浓度的溶液,以不含白屈菜红碱溶液的BHI液体培养基作为对照组,将pH值均调定为7.4,按菌液与白屈菜红碱溶液1:10的体积比接种变链菌,测定在不同培养时间段各浓度白屈菜红碱溶液实验前后pH值的变化值( pH).实验结果采用SPSS 11.0统计软件进行数据处理,总体均数之间的比较采用单因素方差分析.结果:随着白屈菜红碱浓度的升高,各浓度组 pH呈逐渐减少的趋势.除24.4 μg/ml浓度组外,各个浓度组与对照组的 pH均有显著性差异(P＜0.05),除3 h的各组及24 h和48 h的24.4 μg/ml和48.8 μg/ml组以外,各浓度组在各个时间段与对照组之间均有显著性差异(P＜0.05),随着细菌培养时间的延长,实验前后各溶液 pH呈逐渐增高的趋势.与对照组相比,不同浓度的白屈菜红碱溶液产生最大 pH差值的时间不同,浓度越高则达到最大 pH差值的时间越长.结论:白屈菜红碱对变链菌代谢产酸具有显著抑制作用.     

科玛嘉念珠菌培养基在儿童牙菌斑中白色念珠菌分离培养的应用

目的:探讨科玛嘉念珠菌培养基(CAC)对儿童牙菌斑中白色念珠菌分离培养的有效性。方法:分别采用CAC和沙保培养基(SDA)分离培养儿童龋损牙体组织及无龋牙体龈上菌斑中的白色念珠菌,通过生化鉴定及PCR技术等方法对分离菌株进行鉴别,运用卡方检验比较两种培养基对白色念珠菌的检出情况。结果:CAC和SDA对牙菌斑中白色念珠菌的检出率分别为35.3%、31.7%(P<0.05)。培养24~48 h后,CAC平板通过颜色判读白色念珠菌的结果与生化鉴定和PCR基因分型的结果一致。结论:CAC是一种快速、有效、特异性较强的念珠菌培养基,适合用于分离培养儿童牙菌斑中的白色念珠菌。     

可吸收性甲硝哒唑药膜的研究

利用可溶性羟丙基甲基纤维素(HPMC)研制出一种可吸收性甲硝哒唑(MTZ)药膜,观察其抑菌作用及临床疗效。结果表明:离体条件下24小时内HPMC缓慢溶解,MTZ几乎完全释放,活体牙周龈沟液中24小时后MTZ的量仍维持40μg/ml的水平(远高于牙周病相关菌的最低抑菌浓度),HPMC逐渐溶解消失。     

小型猪双侧腮腺萎缩后唾液流率及口腔细菌变化的观察

目的 观察小型猪腮腺萎缩后混合唾液流率的变化以及对口腔主要致病菌的影响.方法 10只小型猪分成两组,每组5只,其中一组双侧腮腺注入甲紫致腺体萎缩,另5只作为健康对照组.分别在萎缩后第12、24个月收集混合唾液并观察唾液流率的变化;同时检测小型猪龈下菌斑和混合唾液中口腔主要致病菌数量并与健康对照组比较.结果 腮腺萎缩后第12个月混合唾液流率自(1.36±0.74)ml/min下降到(1.32±0.65)ml/min,第24个月唾液流率自(0.72±0.34)ml/min上升到(0.86±0.57)ml/min;龈下菌斑中的核梭杆菌、后牙龈下菌斑中厌氧菌总数、产黑菌数量均明显高于健康对照组;第12个月前牙和第24个月后牙的龈下菌斑中变形链球菌有短暂升高,而需氧菌总数、乳酸菌和放线菌数量无明显变化.唾液中除变形链球菌和产黑菌在腮腺萎缩早期有轻度上升外,其余细菌数量均无明显变化.结论 双侧腮腺萎缩后明显降低口腔中唾液总量,导致牙菌斑中的致龋菌和牙周致病菌数量上升.     

牙周炎牙槽骨吸收机理的基础研究——白细胞介素2对破骨细胞性骨吸收的作用

本文利用新生兔的四肢长管骨分离破骨细胞,将其与牛骨片共同培养。24小时后,培养液中加入白细胞介素2(IL-2),使终浓度分别为50μ/ml和100μ/ml,并做空白对照。培养40小时、64小时及1周,采用相差显微镜计数每个骨片上形成的吸收陷窝数,同时拍照,再利用图象分析系统计算每张照片上吸收陷窝的表面积。初步的研究结果表明:IL-2可以刺激破骨细胞性骨吸收。     

两种糖对变异链球菌产酸能力影响的比较研究

目的:通过测量变异链菌代谢高果糖玉米糖浆(high-fructose corn syrup,HFCS)和蔗糖后△pH值的变化,比较两种糖对变异链球菌产酸能力的影响。方法:配制质量浓度为0.25%、0.5%、1%、3%和5%的高果糖玉米糖浆和蔗糖培养基,将变异链球菌UA159于上述各培养基37℃微需氧培养,分别于培养1、4、8、24、48 h各个时间点,用酸度计测量培养前后的pH值,计算ΔpH值,代表变异链球菌的产酸能力。结果:在本研究设定的糖浓度范围和培养时间段内,高果糖玉米糖浆(HFCS)和蔗糖培养基中的ΔpH值均随时间的延长而增大,在培养4～8 h内,HFCS培养基内pH值下降速度快于蔗糖培养基。在培养4、8、24 h时,5种浓度的HFCS培养基中ΔpH值均明显大于蔗糖培养基,差异均有统计学意义(P<0.05),而在培养1 h和48 h时,两种糖培养基中ΔpH值的变化无统计学意义(P>0.05)。结论:在培养4～8 h内,HFCS利于变异链球菌代谢产酸,而在24～48 h内,蔗糖则显示出较强的持续产酸能力。     

碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖与ALP活性表达的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）以人牙周膜细胞的增殖与碱性磷酸酶（ALP）活性表达的影响,为bFGF应用于牙周组织的再生与修复提供实验依据。方法：采用MTT和ALP活性检测法,观察不同浓度（0．1－10ng/ml)的bFGF第24、48和72小时对5％和10％胎牛血清（FBS）体外培养的第3代人牙周膜细胞（PDLCs）的作用。结果：与对照组比较,①10％FBS,5ng／ml和10ng／ml的bFGF在第24、48、72小时,可显著促进PDLCs的增殖（P＜0．01－0．05）,5％,10ng／ml的bFGF在24、48小时,5ng／ml的bFGF在24小时对PDLCs有显著促增殖作用（P＜0．01）。②10％FBS,1ng／ml的bFGF在48、72小时,5ng／ml的bFGF在24、48、72小时,10ng／mlbFGF在48小时对PDLCs有显著增强ALP活性的作用P＜0．01－0．05）;5％FBS,10ng／ml的bFGF在24、72小时对PDLCs有显著增强ALP活性的作用（P＜0．05）。结论：以上结果提示：在一定的作用时间内一定条件下,5ng／ml和10ng／ml的bFGF可促进人PDLCs的生长和分化。     

不同浓度脂多糖刺激下成骨细胞的增殖分化凋亡及IL-23表达

目的 研究小鼠成骨细胞在不同浓度脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激下的增殖分化凋亡及白介素-23(interleukin-23,IL-23)的表达.方法 第一实验组至第五实验组分别用含0.01ug/ml、0.1ug/ml、1ug/ml、10ug/ml、100ug/ml LPS的培养基对小鼠成骨细胞MC3T3-E1进行刺激,并以不加LPS刺激的作为对照组,培养24小时后,应用MTT法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)法检测六组细胞增殖、分化情况,流式细胞术(flowcytometry,FCM)和Western Blot检测细胞凋亡情况,并采用酶联免疫吸附剂(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测六组IL-23的蛋白表达.结果 LPS刺激下各实验组MTT和ALP检测值均低于对照组,差异有显著性(P＜0.05),且随LPS浓度增加有逐渐降低趋势;LPS促进了MC3T3-E1的凋亡.实验组IL-23蛋白的表达均高于对照组,差异有显著性(P＜0.05),且随LPS浓度增加有逐渐升高趋势.结论 LPS抑制成骨细胞增殖分化,刺激成骨细胞表达IL-23,且呈剂量依赖性.     

柠檬酸及次氯酸钠对厌氧菌的杀灭作用

由于分离和培养厌氧菌技术的发展,发现在牙髓及尖周病变中的厌氧菌远较过去所想像的多见。Sundgist表明产黑色素类杆菌与死髓牙、急性根尖周感染有关。一般错误认为氧可杀灭厌氧菌,而事实上厌氧微生物具有不同程度对氧的耐受力。本文为测定三种冲洗剂对根管中四种不同的专性厌氧菌的杀菌效力。用50％柠檬酸、5.25％次氯酸钠及消毒盐液作为试验液对产黑色素类杆菌、脆弱拟杆菌、梭状芽胞杆菌及厌氧消化球菌进行研究。使用在50ml胰蛋白酶大豆肉汤中培养24～48小时混浊生长的产黑色素类杆菌10~6/ml细菌。24支无菌纸尖20支浸入此     

甲壳胺影响细菌硫化氢代谢产物的研究

目的:观察甲壳胺对口腔细菌硫化氢产物的影响,评价甲壳胺的抗口臭作用.方法:选择3种口腔主要产臭菌:牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、具核梭杆菌,分别接种于不含药物的液体培养基、含1%甲壳胺的液体培养基和含0.2%洗必泰溶液的液体培养基中,厌氧培养后,用硫化物测量仪分析3个菌种硫化氢代谢产物的变化.结果:3种细菌在不含药物的试管中有大量硫化氢生成,含1%甲壳胺的实验组和含0.2%洗必泰溶液的对照组试管中检测出硫化氢的量明显降低(P＜0.05).结论:甲壳胺能有效抑制产臭菌异味产物--硫化氢,实验为甲壳胺抗口臭的临床应用提供了可靠的实验依据.     

变形链球菌表面蛋白PAc不同表达株的蔗糖粘附实验

研究变形链球菌表面蛋白ＰＡｃ没表达株在含蔗糖培养基中，及加氟至１ｐｐｍ或洗必地０．００５％的含蔗培养基中对玻壁表面粘附能力的差异。方法 在厌氧培养条件下培养各株变形链球菌，用ＯＤ值测量法计算粘附量。结果 在普通 入氟至１ｐｐｍ的含蔗糖培养基中，变链菌表面蛋白ＰＡｃ没表达株对玻壁的粘附无差异。     

山梨醇对变形链球菌致龋性影响的体外实验研究

作者分别在３％蔗糖培养基，５％山梨醇培养基和含５％山梨醇的蔗糖培养基中培养变形链球菌，比较三种培养基中变链菌在多个环节上的致龋能力。发现变链菌经三种培养后，吸附能力无差别，但在山梨醇中培养时，变链菌生长缓慢，产酸少，特别是乳酸量远低于另两组，培养基ｐＨ值下降轻微。在蔗糖培养基中加入山梨醇后，细菌的生长和产酸都有所减弱。表明山梨酵致龋性低，代替蔗糖可减少龋齿。     

山梨醇对变形链球菌致龋性影响的体外实验研究

作者分别在３％蔗糖培养基，５％山梨醇培养基和含５％山梨醇的蔗糖培养其中培养变形链球菌，比较三种培养其中变链菌在多个环节上的臻龋能力。发现变链菌经三种培养后，吸附能力无差别，但在山梨醇中培养时，变链菌生长缓慢，产酸少，特别是乳酸量远低另两组，培养基ＰＨ值下降轻微。