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目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO antisense RNA 1(TMPO-AS1)与微小RNA(miRNA)-1224-5p的靶向关系及对肝癌细胞的增殖和凋亡的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定lncRNA TMPO-AS1和miR-1224-5p在肝癌组织中的表达.生物信息学预测... 相似文献
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《实用药物与临床》2019,(6)
目的探讨microRNA (miR)-145-5p在肺腺癌组织中的表达情况及其对人肺腺癌A549细胞增殖和迁移的影响及机制。方法检测人肺腺癌组织和A549细胞中miR-145-5p的基因表达。生物信息数据库预测、双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p和ABCE1的靶控关系;转染miR-145-5p的模拟物、抑制物和对照物入A549细胞,PCR法测定转染后miR-145-5p和ABCE1 mRNA的表达。MTT和划痕愈合实验检测转染前后A549细胞的增殖和迁移能力。结果在肺腺癌组织和A549细胞系中miR-145-5p表达明显下降(P<0.05)。生物信息数据库和双荧光素酶报告基因实验证实,ABCE1是miR-145-5p的靶基因。与未转染和转染miR-145-5p对照物的A549细胞相比,转染模拟物48 h后可显著增加miR-145-5p的表达,抑制ABCE1 mRNA表达,同时,细胞增殖和迁移能力受到抑制(P<0.05);而转染抑制后可显著降低miR-145-5p的表达,增加ABCE1 mRNA表达,同时,细胞增殖和迁移能力明显增强(P<0.05)。结论在癌组织中表达明显降低的miR-145-5p,能够通过负性调节ABCE1的表达,抑制人肺腺癌A549细胞增殖和迁移,为肺癌治疗提供新的靶点。 相似文献
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目的 探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)是否通过靶向调控MRG结构域结合蛋白(MRGBP)基因表达来影响晶状体上皮细胞增殖和凋亡.方法 使用紫外线照射晶状体上皮细胞SRA01/04,构建细胞凋亡模型.在细胞中转染anti-miR-145-5p或pcDNA-MRGBP,并构建细胞凋亡模型.实时荧光定量P... 相似文献
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目的 探讨miR-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制。方法 使用GEPIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F2表达后,分别采用PI染色和流式细胞术检测细胞周期的改变;Westernblot实验检测细胞周期蛋白E(CyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平;免疫荧光实验检测细胞中自噬相关蛋白LC3B的表达水平;裸鼠荷瘤实验观察黑色素瘤在体内生长的变化。经miR-101-3pmimics处理后,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MV3细胞中miR-101-3p的表达水平,同时利用qPCR和Westernblot实验检测E2F2的表达水平;通过MTT、BrdU法检测MV3细胞增殖水平。结果E2F2表达升高的患者预后更差（P<0.05）;与shGFP组相比,shE2F2组中处于G0/G1期的细胞比例显著增多（P<0.05）,CyclinE和CDK2的表达水平显著降低,自噬相关蛋白LC3B荧... 相似文献
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目的 探讨miR-28-5p靶向BECN1在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程中的作用及机制。方法 通过TUNEL荧光染色、Western blot实验明确miR-28-5p及姜黄素在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的作用,经在线预测并进一步通过双荧光素酶报告基因检测明确miR-28-5p和BECN1的靶向关系。结果 TUNEL染色和caspase-3蛋白水平检测：与对照组比较,姜黄素明显增加凋亡细胞百分比并表达裂解蛋白caspase-3(P<0.05)。相比姜黄素单独作用,细胞凋亡被miR-28-5p显著减弱抑制(P<0.05)。与对照组比较,姜黄素组beclin1和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值显著降低、P62蛋白表达明显升高(P<0.05);与姜黄素组比较,姜黄素+miR-28-5p抑制剂组beclin1表达和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高、P62蛋白表达明显降低(P<0.05)。通过在线数据库预测：miR-28-5p与BECN1存在靶向的关系;双荧光素酶报告基因实验显示：与阴性对照组比较,miR-28-5p模拟物显著降低BECN1-wt组的荧光素酶... 相似文献
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目的 探讨LINC00339对高糖作用的成骨细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 用终浓度为22 mmol/L的高糖溶液刺激hFOB1.19作为高糖组,以终浓度为5 mmol/L的糖溶液处理hFOB1.19作为对照组;将pcDNA3.1、pcDNA3.1-LINC00339、si-NC、si-LINC00339分别转染至... 相似文献
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目的 探讨LINC00691对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞恶性生物学行为的影响。方法 RT-qPCR检测30例NSCLC患者癌组织和对应癌旁组织中LINC00691和miR-512-5p的表达。双荧光素酶报告基因实验验证LINC00691和miR-512-5p的靶向关系。将A549细胞分为si-NC组、si-LINC00691组、miR-NC组、miR-512-5p组、si-LINC00691+anti-miR-NC组和si-LINC00691+anti-miR-512-5p组,MTT和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术、Transwell检测细胞凋亡、迁移和侵袭,Western blotting检测细胞中Ki67、Cleaved-caspase3、Ecadherin和N-cadherin蛋白表达。结果 LINC00691在NSCLC癌组织中表达水平上升（P<0.05）,而miR-512-5p表达水平下降（P<0.05）。LINC00691在A549细胞中负调控miR-512-5p。沉默LINC00691表达或过表达miR-512-5p可降低A549细胞的存活率、克... 相似文献
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《实用药物与临床》2019,(3)
目的探讨microRNA-140-5p (miR-140-5p)能否通过抑制组蛋白脱乙酰基酶4(Histone deacetylase 4,HDAC4)基因调控人骨肉瘤细胞MG-63增殖。方法 qRT-PCR法检测miR-140-5p在骨肉瘤细胞系MG-63及成骨细胞系hFOB1.19中的差异表达;Western blot和qRT-PCR法检测miR-140-5p对HDAC4蛋白和mRNA表达的影响;CCK8法检测miR-140-5p对人骨肉瘤细胞MG-63增殖的变化;荧光素酶报告基因实验检测miR-140-5p能否特异性结合于HDAC4基因的3′非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)。结果荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-140-5p可特异性结合于HDAC4基因的3′UTR;Western blot及qRT-PCR检测结果显示,miR-140-5p能抑制HDAC4的蛋白及mRNA表达;CCK8法结果显示,过表达miR140-5p可明显抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖。结论 miR-140-5p可抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖,且这种抑制效应与其特异性结合于HDAC4基因的3′UTR,下调HDAC4的表达有关。 相似文献
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目的 探讨微小RNA-96-5p(miR-96-5p)调控叉头样转录因子O4(FOXO4)表达影响人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及凋亡的分子机制.方法 取瘢痕疙瘩组织30例与正常皮肤组织15例,原代培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞与正常成纤维细胞.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western Blo... 相似文献
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目的 探讨miR-30a-5p对1甲基4苯基吡啶(MPP+)诱导的人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 体外培养SK-N-SH细胞,分为对照组(NC组)、MPP+组(1 mmol/L MPP+作用细胞24 h)、MPP++miR-30a-5p组(1 mmol/L MPP+作用转染miR-... 相似文献
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