胫骨内接种建立乳腺癌骨转移大鼠模型的特点

目的研究胫骨内接种MRMT-1细胞制作的乳腺癌骨转移大鼠模型在行为学、影像学、核医学、病理学和分子生物学等方面的特点。方法使用雌性SD大鼠,随机分为假手术组和模型组,使用胫骨内注射法制成乳腺癌骨转移模型。造模后第19天时进行疼痛测定;第21天取材,测定肿瘤体积,通过影像技术评估骨质缺损程度,核医学测定骨矿物质含量(BMC)和骨密度(BMD),HE染色观察形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色并计数破骨细胞,免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA)、护骨素(OPG)和核因子kB受体活化因子配体(RANKL),荧光实时定量RT-PCR测定甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)。结果模型组在造模后第19天已出现机械痛觉超敏、机械痛觉过敏和热痛觉过敏(P0.01)。第21天取材后胫骨影像评分升高(P0.01),BMD下降(P0.05);肉眼观察肿瘤生长明显(P0.01),镜下可见溶骨病变为主的混合性骨质破坏;破骨细胞数量和活性增加(P0.01),PTHrP、OPG水平与OPG/RANKL比值均下降(P0.05、P0.01),而RANKL无明显变化。结论乳腺癌骨转移大鼠模型具有疼痛和骨质破坏的表现,但未表现出PTHrP和RANKL升高,其损伤途径是通过抑制OPG破坏了OPG-RANKL-RANK系统的平衡,引起破骨细胞过度激活,造成骨吸收作用亢进。     

辛伐他汀在裸鼠模型中对乳腺癌骨转移的影响

目的 观察辛伐他汀在裸鼠模型中对乳腺癌骨转移的作用.方法采用完全随机分组方法 将60只裸鼠分为3组,每组20只,裸鼠左心腔注射乳腺癌骨转移细胞株(MDA-MB-231),7d后,分别皮下注射辛伐他汀、生理盐水及无任何处理(2次/周,19 d).应用图像分析软件评估骨转移瘤的面积.随后处死裸鼠,用放射免疫法检测骨转移癌髓腔内甲状旁腺素相关蛋白(PTHrP)浓度;应用骨密度检测软件进行组织形态学分析,计数骨转移灶每毫米癌组织与临近骨小梁之间破骨细胞的数量.计量资料比较采用方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与生理盐水组和无处理组相比,注射辛伐他汀的裸鼠骨转移癌面积明显减小(0.51±0.18 mm2 vs 2.13±1.24 mm2 vs 2.29±1.22 mm2;F=15.600,P=0.002; F=15.673,P=0.001),骨转移癌周围髓腔内PTHrP浓度明显降低(0.98±0.20 pmol/L vs 2.11±0.31 pmol/L vs 1.99±0.29 pmol/L;F=61.469,P＜0.001;F=58.274,P＜0.001),并且其转移灶破骨细胞的数量明显减少(4.00±1.73个/mm vs 11.40 ±4.93个/mm vs 10.91±3.87个/mm;F=17.820,P=0.001,F=17.184,P=0.002).结论 辛伐他汀能够降低乳腺癌细胞PTHrP的分泌,从而抑制乳腺癌细胞在骨内生长及其对骨质的破坏.     

抗ATPase F1α抗体MAb3D5AB1对荷A549肺腺癌小鼠的抑制作用

目的: 以乳腺癌细胞与成骨细胞共培养模拟乳腺癌骨转移微环境,观察在此微环境中降钙素基因相关肽( calcitonin generelated peptide,CGRP)对成骨细胞护骨素 （osteoprotegerin,OPG）及细胞核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factorkappa B ligand, RANKL;又称破骨细胞分化因子）表达的影响。方法：将转移性乳腺癌细胞MDAMB231或MDAMB435与成骨细胞MG63共培养,建立模拟乳腺癌骨转移微环境。行CGRP(1×108 mol/L)干预,应用RTPCR和Western Blotting技术检测干预后OPG和RANKL在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果：MG63与MDAMB231或MDAMB435共培养环境中,RANKL mRNA及蛋白水平升高,而OPG mRNA和蛋白水平表达下降;CGRP处理后,共培养环境中RANKL mRNA及蛋白水平降低,OPG mRNA和蛋白水平升高 (均P<0.05)。结论：乳腺癌细胞能调节成骨细胞OPG/RANKL轴的表达,进而可能促进破骨细胞的活性,造成溶骨性破坏;CGRP 干预可逆转此调节作用,在乳腺癌骨转移的治疗中有潜在应用价值。     

透骨草总生物碱对乳腺癌骨转移的抑制作用及其机制

目的：探讨透骨草总生物碱（TTAT）对乳腺癌骨转移的抑制作用及其机制。方法：提取透骨草中所含生物碱,通过碘化铋钾或改良碘化铋钾与碘化汞钾试剂显色反应进行鉴定。将42只裸鼠分为正常组（常规饲养）、模型组（仅造模）、TTAT低浓度组（100 mg/kg TTAT腹腔注射）、TTAT高浓度组（500 mg/kg TTAT腹腔注射）、盐酸多柔比星（DOX）组（5 mg/kg DOX腹腔注射）、唑来膦酸注射液（ZOL）组（0.4 mg/kg ZOL颈后皮下注射）,每组7只,除正常组外其他组裸鼠右后肢胫骨内注射人乳腺癌MDA-MB-231细胞建立乳腺癌骨转移模型,除正常组和模型组外,其余组造模1周成瘤后开始给药,隔日1次,连续给药6周。给药期间,每周定期测量各组裸鼠体质量及肿瘤体积,密切观察各组裸鼠生活状态。实验结束时颈椎脱臼法处死各组裸鼠,以右侧髋关节为界切除右后肢,采用影像学技术、HE染色法和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色法评估TTAT对骨转移裸鼠的胫骨及肿瘤组织生长的影响;采用Western blot法检测肿瘤组织中核因子-κB配体（RANKL）、骨保护素（OPG）蛋白以及细胞外信号调节激酶（ERK）、p-ERK、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p-JNK蛋白的表达水平。结果：从500 g透骨草中提取得到3.28 g提取物,显色反应呈现阳性,表明提取物中含有生物碱;与模型组比较,100和500 mg/kg TTAT组瘤质量分别为（3.50±0.70）g和（2.63±0.59）g,较模型组瘤质量（5.01±1.03）g均明显下降（P < 0.01）;影像学评分均升高（P < 0.01）;HE染色结果显示100和500 mg/kg浓度组TTAT均能够显著抑制肿瘤癌巢形成,使核分裂像减少,并对乳腺癌胫骨骨转移裸鼠病变骨质具有保护作用;TRAP染色结果显示此2个TTAT组中破骨细胞数量明显减少（P < 0.05）;Western blot结果显示,TTAT显著降低肿瘤组织中RANKL/OPG比值（P < 0.05）,同时下调p-ERK、p-JNK的表达（P < 0.05）。结论：透骨草总生物碱能显著抑制乳腺癌胫骨骨转移裸鼠肿瘤生长和骨质病变,其抑制乳腺癌骨转移作用可能是通过OPG/RANK/RANKL信号通路实现的。     

马钱子碱对乳腺癌骨转移相关因子表达的影响

摘 要：［目的］ 探讨马钱子碱对乳腺癌骨转移相关因子的影响。［方法］ 建立裸鼠乳腺癌骨转移的模型,并用马钱子碱干预后用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测各组肿瘤组织中骨转移相关因子MMP-2、CXCR4、RANKL、OPG mRNA表达量。［结果］ 马钱子碱经腹腔给药的半数致死量（Medial lethal dose,LD50）为69mg/kg。根据LD50的1/10、1/20和1/40的量,设三个剂量组：高剂量组6.90mg/kg1、中剂量组3.45mg/kg和低剂量组1.73mg/kg,同时与空白对照组比较。马钱子碱各剂量组MMP-2,CXCR4,RANKL mRNA的表达量随着马钱子碱剂量的增加逐渐下降（P＜0.05）,而OPG mRNA的表达量则随着马钱子碱剂量的增加逐渐增加（P＜0.05）。［结论］ 马钱子碱可以抑制乳腺癌骨转移,主要以调节MMP-2、CXCR4、RANKL、OPG等骨转移相关因子的表达为主要手段。     

马钱子碱经皮给药对乳腺癌骨转移抑制机制的探讨

目的:探讨马钱子碱经皮给药对乳腺癌骨转移的抑制机制,为乳腺癌的治疗提供新的途径.方法:培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,取对数生长期细胞制成单细胞悬液.20只雌性Balb/c-nu/nu裸鼠麻醉后,无菌条件下,局部骨内注射乳腺癌单细胞悬液0.2 mL,复制乳腺癌骨转移模型.20只荷瘤裸鼠随机分为马钱子碱高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组4组,分别给予20％(0.2 mg/g)、10％(0.1 mg/g)和5％(0.05 mg/g)浓度的马钱子碱膏(每日总剂量≤腹腔给药的半数致死量)和凡士林经皮给药,涂抹裸鼠的整个腹部和造模的部位,1 g/次,4次/d(每次间隔3 h),连续15 d.影像学观察骨转移情况;RT-PCR检测并比较各组肿瘤组织中,骨转移相关因子VEGF、COX-2和PTHrP的表达量.结果:胫骨的X射线表现,马钱子碱高剂量组和中剂量组的骨质破坏不明显,低剂量组和模型组的骨质破坏明显,甚至出现病理性骨折.RT-PCR结果显示,钱子碱高剂量组VEGF、COX-2和PTHrP mRNA的表达分别为25.30±0.90、20.63±0.73和25.56±0.54,马钱子碱中剂量组分别为24.10±0.73、20.49±0.76和25.74±0.48,马钱子碱低剂量组分别为25.27±0.75、21.02±0.65和25.65±0.44,模型组分别为24.09±0.74、21.14±0.66和25.75±0.39.与模型组比较,马钱子碱各剂量组VEGF、COX-2和PTHrP mRNA的表达量随着马钱子碱剂量的增加逐渐下降,差异均有统计学意义,P＜0.05.结论:马钱子碱经皮给药能抑制裸鼠乳腺癌骨转移瘤的生长,减轻骨损伤,其机制可能是通过调控VEGF、COX-2和PTHrP的表达而抑制乳腺癌骨转移瘤的生长.     

抑制肿瘤细胞骨保护素表达对乳腺癌细胞致骨转移能力的影响

目的观察抑制肿瘤细胞骨保护素（0steoprotegerin,OPG）表达对乳腺癌MDA～MB-231细胞株致骨转移的影响。方法32只4～6周龄雌性裸鼠被随机分为A、B、C、D4组,每组8只,A、C组的每只裸鼠按分组分别以5×10。个MDA—MB-231细胞注射入左心室（A组）或左胫骨骨髓腔（C组）。B、D组的每只裸鼠按分组分别以5×10。个MDA—MB-231i细胞（OPG表达抑制）注射人左心室（B组）或左胫骨骨髓腔（D组）,42d后行病理检查,比较A、B组骨转移发生率和骨转移灶数量,以及C、D组的骨肿瘤体积。定量资料的比较采用t检验或秩和检验,定性资料比较采用Fisher确切概率检验。结果A组有6只发生骨转移,全组共检出不连续性骨转移灶23处;B组有3只发生骨转移,全组共检出不连续性骨转移灶8处。A组的骨转移发生率和转移灶数量虽高于B组,但两者差异并无统计学意义（P〉0．05）。C组肿瘤平均体积为（66．29±41．01）mm3,D组肿瘤平均体积为（23．70±16．14）mm3,C组骨肿瘤体积大于D组,两组间差异有统计学意义（P=0．02）。结论乳腺癌细胞致骨转移能力与其OPG表达水平密切相关,抑制OPG表达可以降低乳腺癌细胞致骨转移的能力。     

Walker256乳腺癌细胞构建大鼠胫骨骨癌痛模型

目的：探讨以Walker256大鼠乳腺癌腹水瘤细胞制备大鼠胫骨骨癌痛模型，为骨癌痛机制和治疗研究提供有用的工具。方法：以Walker256乳腺癌细胞接种幼年雌性SD鼠腹腔制备腹水瘤细胞，将15μl腹水瘤细胞注入雌性成年SD鼠左侧胫骨骨髓腔制备骨癌痛模型；以注射加热灭活瘤细胞的SD鼠为假手术对照鼠，以正常鼠为正常对照鼠。造模后1-4周观察模型鼠自由行走痛评分、辐射热痛觉阈值[缩爪反应潜伏期（paw withdrawal latency，PWL）]和机械刺激诱发痛觉阈值[缩爪反应阈值（paw withdrawal threshold，PWT）]改变，并对痛觉行为改变明显的模型鼠进行影像学检测。结果：本方法制备模型的成瘤率为67．3％。模型鼠在造模后15d自由行走痛评分显著高于正常鼠和假手术鼠（P〈0．01）；模型鼠的模型后肢对热刺激痛觉阈值和对机械刺激诱发痛觉阈值分别在造模后21d和18d明显低于正常鼠和假手术鼠（P〈0．01），同时也明显低于模型肢对侧后肢（P〈0．05）。影像学结果显示，痛行为改变明显的模型鼠模型后肢胫骨骨质结构遭到明显破坏。结论：采用Walker256乳腺癌腹水瘤细胞可成功制备与人类骨癌痛体症相似的大鼠胫骨骨癌痛模型。     

芳香化酶抑制剂对胶原性关节炎大鼠血清中IL-17和RANKL／RANK／OPG的影响

目的探讨第三代芳香化酶抑制剂阿那曲唑对胶原诱导的关节炎（ClA）大鼠血清中自介素17（IL—17）、核因子-KB受体活化因子（RANK）及其配体（RANKL）和骨保护素（OPG）的作用,了解其加重骨关节病变作用及其机制。方法建立C1A大鼠模型,分为阿那曲唑组、卵巢切除组和假手术组,用排水法大鼠关节炎足体积变化,放射线分析大鼠关节病变情况,并用ELISA法分析C1A大鼠血清中IL-17、RANKL及RANK和OPG的表达情况。结果与卵巢切除组比较,阿那曲唑组大鼠关节病变加重（P〈0．05）,血清中IL－17、RANKL表达增加,OPG的表达显著降低,RANKL／OPG比值明显增加,差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论在CIA大鼠模型中,阿那曲唑可增加大鼠衄清中IL－17、RANKL的表达,而抑制OPG的表达,导致大鼠关节病变加重。     

BSP和PTHrP的联合检测对乳腺癌骨转移临床意义的研究

目的:探讨骨唾液蛋白(BSP)和甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)的联合检测对乳腺癌骨转移的临床意义.方法:乳腺癌87例患者,分为骨转移组40例和无骨转移组47例.应用免疫组织化学法检测石蜡包埋标本BSP和PTHrP的表达.结果:BSP和PTHrP在骨转移组的阳性表达均明显高于无骨转移组(x2值分别为8.47和10.49,P均<0.01),且强阳性表达也均高于后者(x2值分别为9.18和11.05,P均<0.05);同时两者在骨转移组的阳性表达与无转移组和骨外转移组之间比较,差异有统计学意义(P<0.01),而后两组间阳性表达差异无统计学意义(P>0.05).Cox比例风险回归模型分析结果发现,乳腺癌组织中BSP和PTHrP的高表达是预测骨转移的主要危险因素(P<0.01),其相对危险度分别为1.293和1.348.Log-rank生存曲线分析结果显示,在乳腺癌患者中BSP和PTHrP高表达者的累积生存概率均明显低于BSP和PTHrP阴性表达组,P<0.05.结论:BSP和PTHrP的过表达是早期预测乳腺癌骨转移的良好标志,并可作为评估乳腺患者的一项重要的预后因子.     

血清中CaN和PTHrP测定在肺癌骨转移诊断和疗效判定中的意义

目的：探讨血清中钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）和甲状旁腺激素相关蛋白（parathyroid hormone-related protein,PTHrP）的测定对肺癌骨转移患者的诊断及临床疗效评价的意义。方法：应用ELISA法检测患者血清CaN和PTHrP浓度,并比较其浓度在肺癌骨转移未治疗患者,非骨转移患者及骨转移治疗患者中的差异。结果：骨转移未治疗组患者血清CaN和PTHrP水平均明显高于非骨转移组（P〈0.01）,并高于骨转移治疗组（P〈0.01）。结论：血清CaN和PTHrP的测定对肺癌患者骨转移的诊断及疗效评价可能具有重要意义。     

乳腺癌骨转移患者血液OSC、OPG、NTX及与尿液NTX水平相关性探讨

目的:探讨乳腺癌骨转移患者血液骨钙素（OSC）、骨保护素（OPG）、I型胶原吡啶交联氨基末端肽（NTX）及与尿液NTX水平的相关性。方法:通过对比40例乳腺癌骨转移患者（实验组）和40例健康女性（对照组）血液OSC、OPG、NTX 和尿液 NTX水平，比较实验组治疗前和对照组的血液OSC、OPG、NTX和尿液NTX水平的差异。评估血液OSC与血液NTX水平相关性，血液OPG与血液NTX水平相关性，血液和尿液NTX水平相关性。结果:实验组中血液OSC、OPG和NTX水平比对照组要高，两组的OSC差异具有统计学意义（P＜0.001），两组的OPG差异具有统计学意义（P＜0.003），两组的NTX差异具有统计学意义（P＜0.001）。相关性统计结果显示血液中的NTX的升高和血液中的OSC及OPG水平具有关性，血液NTX和OSC之间的r=0.768(P＜0.001)，血液NTX和OPG之间的r=0.685(P＜0.001)，差异均具有统计学意义；血液NTX和尿液NTX之间也具有相关性r=0.638(P＜0.005)，差异具有统计学意义。结论:乳腺癌骨转移的患者血液OSC、OPG、NTX及与尿液NTX水平之间具有一定关系，且有一定的临床意义。     

地诺单抗用于骨转移癌治疗的研究

癌症转移是致死的主要原因,骨是排第三的好发转移部位。OPG／RANKL—RANK骨调节轴是影响破骨细胞发育及功能的唯一途径。地诺单抗（denosumab）是全人源化结合RANKL的中和抗体,由FDA于2010年11月批准用于实体瘤骨转移的治疗。本文就地诺单抗用于骨转移癌治疗的机制及临床实验研究作一综述,为临床医生更合理的选择骨改构药物用于骨转移癌的治疗做指导。     

乳腺癌溶骨性骨转移相关因子

乳腺癌溶骨性骨转移主要是通过激活破骨细胞引起的.在这一过程中,乳腺癌细胞、成骨细胞和骨基质细胞通过分泌一系列相关因子促进骨转移发生.这些因子大多通过转录核因子-кB (NF-кB)相关的机制激活破骨细胞.最近研究发现白细胞介素-8(IL-8)通过NF-кB无关的机制激活破骨细胞.这些因子有可能成为乳腺癌防治的新靶点.     

人参皂苷Rg3对乳腺癌骨转移大鼠疼痛的缓解作用及机制研究

目的:研究人参皂苷Rg3缓解乳腺癌骨转移大鼠痛觉行为的作用及机制。方法:采用大鼠乳腺癌细胞注入胫骨骨髓腔内构建乳腺癌骨转移疼痛模型;随机分成假性手术组、模型组以及人参皂苷Rg3给药组;连续3天静脉注射人参皂苷Rg3;记录大鼠痛觉行为学变化;分子对接分析人参皂苷Rg3与蛋白质的结合;免疫荧光和免疫印迹法检测各组动物脊髓组织炎症相关蛋白表达变化。结果:乳腺癌骨转移可导致骨组织损伤,诱发大鼠机械痛敏、热痛敏及自发痛。同时脊髓胶质细胞和NLRP3炎症小体激活,促炎因子IL-1β表达上调,抗氧化因子Nrf2和GPX4表达下降,线粒体氧化损伤相关蛋白DHODH和细胞色素C表达增加。人参皂苷Rg3给药后,大鼠机械痛、热痛和自发痛缓解,脊髓炎症信号下降,抗氧化Nrf2/GPX4信号增加,线粒体过氧化物信号下降。分子对接显示人参皂苷Rg3可结合Nrf2。结论:人参皂苷Rg3激活Nrf2介导的抗氧化反应,降低脊髓炎症,从而缓解癌痛。     

骨疏康对1型糖尿病大鼠体外培养的破骨细胞影响的初步探讨

目的 探讨骨疏康对1型糖尿病大鼠体外培养的破骨细胞影响。方法 用RANKL和M-CSF诱导1型糖尿病大鼠的股骨骨髓进行体外培养生成类破骨细胞样细胞(OLC)。实验分为正常对照组,1型糖尿病组,正常对照+骨疏康组,1型糖尿病+骨疏康组。骨疏康的浓度为20μg/ml。细胞培养7天后,贴壁细胞固定,抗酒石酸盐酸性磷酸酶染色,破骨细胞计数。结果 1型糖尿病大鼠与正常大鼠组的破骨细胞数比较无明显差别(P>0.05);经骨疏康干预后,1型糖尿病大鼠与正常大鼠的破骨细胞数都明显减少(P<0.01)。结论 1型糖尿病早期破骨细胞形成与正常对照组无明显差异。中药骨疏康明显抑制正常大鼠和1型糖尿病大鼠的破骨细胞形成。     

核素骨显像联合血管内皮生长因子、瘦素检测对乳腺癌骨转移的诊断价值

目的 探讨乳腺癌患者核素骨显像联合血管内皮生长因子（VEGF）、瘦素（Leptin）检测对乳腺癌骨转移诊断价值.方法 应用酶联免疫吸附法和放射免疫分析法对40例乳腺癌患者进行手术前后血清VEGF和Leptin水平检测,并与50例乳腺良性疾病患者、60名健康对照比较.对乳腺癌患者手术治疗3个月后行核素骨显像.结果 乳腺癌患者术前VEGF和Leptin水平[（338±69）pg/ml、（1.71±0.30）ng/ml]显著高于乳腺良性病患者[（113±42）pg/ml、（1.16±0.27）ng/ml]和健康对照[（87±36）pg/ml、（1.01±0.16）ng/ml],差异有统计学意义（P＜0.05）.术后3个月无转移者与乳腺良性疾病者和健康对照比较差异无统计学意义（P＞0.05）,而伴骨转移者血清VEGF和Leptin水平明显升高,与乳腺癌无骨转移组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 核素骨显像对乳腺癌骨转移诊断有重要意义.检测血清VEGF和Leptin可用于乳腺癌患者疗效监测及预后评估;与核素骨显像联合应用,可用于监测乳腺癌骨转移.     

PI3K/Akt信号通路在RANKL诱导的MCF-7乳腺癌细胞迁移中的作用

目的：核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）能促进表达RANK的上皮癌细胞迁移至骨,与乳腺癌骨转移密切相关。本文探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶（phosphoinositide3-kinase/serine/threonine protein kinase PI3K/Akt）信号通路在RANKL诱导的乳腺癌MCF-7细胞迁移中的作用。方法：流式细胞仪检测MCF-7细胞表面RANK蛋白的表达;Transwell法测定RANKL刺激后MCF-7细胞迁移能力的改变;Western-blot检测MCF-7细胞RANKL刺激后p-Akt及Akt的表达。SPSS 16.0软件分析实验数据。结果：MCF-7细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MCF-7细胞迁移能力显著增强,RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移。RANKL刺激后MCF-7细胞p-Akt表达在1、5分钟时一过性升高,PI3K抑制剂LY294002显著抑制RANKL诱导的细胞迁移。结论：PI3K/Akt信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞系MCF-7迁移。     

大鼠骨癌痛模型的建立及组织学研究

目的建立一个有用的癌痛动物模型.方法将MRMT-1大鼠乳腺癌细胞接种到SD大鼠胫骨上段骨髓腔内,造成骨癌痛动物模型.用von Frey细丝刺激足底和后肢负重测量仪分别测量机械性痛觉超敏和痛觉过敏,放射学方法评估骨破坏,同时,组织切片镜下观察肿瘤和骨结构的破坏情况.结果造模动物在14天左右开始出现机械性痛觉超敏和痛觉过敏,胫骨X线摄片显示明显的骨破坏,组织学研究显示骨髓腔内肿瘤生长,向外侵蚀破坏骨皮质,同时伴有新生的编织骨形成.结论从疼痛行为学、放射学、组织学多方面研究的结果,表明大鼠骨癌痛模型已复制成功.该癌痛模型的建立,将为我国癌痛新药的评价,尤其是研究治疗癌痛中药的疗效及作用机制提供一个有用的工具.     

华蟾素对骨癌痛大鼠的镇痛效应及对脊髓胶质细胞活化的影响

目的：探讨华蟾素对骨癌痛大鼠的镇痛效应及对脊髓胶质细胞活化的影响。方法：选用雌性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、假手术组（胫骨内注射20 μL PBS）、模型组和华蟾素干预组,每组12只。模型组与华蟾素干预组大鼠胫骨内注射20 μL Walker 256乳腺癌细胞构建骨癌痛模型。华蟾素干预组于造模第7天开始腹腔注射华蟾素注射液,其余各组每天予以等量生理盐水,各组于造模前以及造模后第2、5、7、9、13、15天分别测定热缩足阈值和机械缩足阈值,造模第7天行胫骨X线摄片观察骨质破坏程度,末次行为学检测后处死大鼠,取外周血、L4～L6节段脊髓,利用免疫组化检测星形胶质细胞标记物（GFAP）和小胶质细胞标记物（Iba-1）的表达情况,ELISA检测外周血及脊髓中相关炎性因子（TNF-α和IL-1β）的表达。结果：X线显示模型组大鼠胫骨骨皮质破坏明显、骨质连续性缺乏、骨组织肿胀明显,正常对照组、假手术组未见明显骨组织肿胀、骨连续性较好,提示造模成功。行为学检测结果表明与模型组比较,华蟾素干预可明显缓解骨癌所诱发的机械痛敏、热痛敏（P < 0.01）。免疫组化结果提示与假手术组相比,模型组大鼠脊髓胶质细胞活化明显增强（P < 0.05）;与模型组相比,华蟾素能显著抑制脊髓胶质细胞活化（P < 0.05）。ELISA检测结果显示与假手术组相比,模型组大鼠脊髓及血清中TNF-α和IL-1β表达增强（P < 0.05）;与模型组相比,华蟾素能降低TNF-α和IL-1β表达（P < 0.05）。结论：华蟾素对骨癌痛大鼠有较好的镇痛效应,其镇痛作用可能是通过抑制脊髓星形胶质细胞及小胶质细胞活化发挥作用的。