丹酚酸B体外抑制淀粉样β蛋白的纤维形成及其细胞毒作用(英文)

目的:观察丹酚酸B对淀粉样β蛋白的纤维形成及其细胞毒作用的影响。方法:将不同浓度丹酚酸B与淀粉样β蛋白(1-40)在25℃共同孵育,于不同时间取样品电镜观察纤维形成。用MTT法观察此不同时间点淀粉样β蛋白(1-40)对PC12细胞的毒性作用。另将淀粉样β蛋白(25-35)预先老化7d,用MTT法观察此老化蛋白对PC12细胞的毒性及丹酚酸B的作用。结果:丹酚酸B10—100nmol/L可以完全抑制淀粉样β蛋白(1-40)25℃放置30h的纤维形成,对淀粉样β蛋白(1-40)25℃放置48及100h的纤维形成也有明显抑制作用。MTT法显示,经与丹酚酸B共同孵育的淀粉样β蛋白(1-40)明显较未与丹酚酸B孵育的淀粉样β蛋白对PC12细胞的毒性小。丹酚酸B1μmol/L可明显抑制预先老化的淀粉样β蛋白(25-35)对PC12细胞的毒性作用。结论:丹酚酸B可抑制淀粉样β蛋白的老化及纤维形成,同时可直接抑制老化淀粉样β蛋白对PC12细胞的毒性作用。 (责任编辑 吴民淑)     

银杏叶提取物对胰岛素淀粉样纤维化的抑制作用

目的探索银杏叶提取物（EGb 761）对胰岛素淀粉样纤维化及纤维细胞毒性的抑制作用。方法在pH 2．0、57℃孵育胰岛素,采用硫黄素荧光检测牛胰岛素形成淀粉样纤维的动力学曲线,透射电镜观察纤维形态;以淀粉样纤维诱导人红细胞的聚集和溶血为指标,评估EGb 761对胰岛素纤维细胞毒性的抑制作用。结果胰岛素在酸性溶液及57℃的条件下孵育可形成淀粉样纤维,EGb 761能够抑制淀粉样纤维的形成,使纤维形态改变,并能够抑制淀粉样纤维诱导的红细胞聚集和溶血。结论 EGb 761能够抑制胰岛素的淀粉样纤维化,并使胰岛素纤维的细胞毒性降低。     

丹酚酸B对β-淀粉样蛋白介导原代培养皮层神经元毒性的保护作用

目的　观察一氧化氮 (NO)在谷氨酸 (Glu) ,β 淀粉样蛋白 [β AP(1 40 ) ]引起神经细胞损伤中的作用以及丹酚酸B(SalB)对 β AP(1 40 )引起的神经细胞损伤保护作用。 方法　原代培养大鼠皮层神经元 ,建立了硝普钠(SNP) ,Glu ,β AP(1 40 )等 3种损伤模型 ,用形态学观察、MTT比色法、Griess法分别测定神经元活力 ,培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)漏出和NO释放。结果　Glu和 β AP(1 40 )可以引起神经元NO的释放增加 ,造成神经毒性。nNOS在Glu的毒性中起重要作用 ,iNOS可能在Aβ1 4 0 的毒性中起作用。SalB能显著增加细胞活力 ,降低LDH释放率 ,并剂量依赖地减少NO释放。结论　NO介导了Glu和 β AP(1 40 )的毒性 ,SalB可以通过减少NO释放 ,改善 β AP(1 40 )的毒性作用。     

丹酚酸B对β-淀粉样蛋白介导原代培养皮层神经元毒性的保护作用

目的　观察一氧化氮(NO)在谷氨酸(Glu),β-淀粉样蛋白［β-AP(1-40)］引起神经细胞损伤中的作用以及丹酚酸B(Sal B)对β-AP(1-40)引起的神经细胞损伤保护作用。方法　原代培养大鼠皮层神经元,建立了硝普钠(SNP),Glu,β-AP(1-40)等3种损伤模型,用形态学观察、MTT比色法、Griess法分别测定神经元活力,培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出和NO释放。结果　Glu和β-AP(1-40)可以引起神经元NO的释放增加,造成神经毒性。nNOS在Glu的毒性中起重要作用,iNOS可能在Aβ_1-40的毒性中起作用。Sal B能显著增加细胞活力,降低LDH释放率,并剂量依赖地减少NO释放。 结论　NO介导了Glu和β-AP(1-40)的毒性,Sal B可以通过减少NO释放,改善β-AP(1-40)的毒性作用。     

丹酚酸B对β淀粉样肽诱导神经毒性的保护作用

目的：应用体内和体外实验观察丹酚酸B(SalB，中药丹参的主要活性成份)对β淀粉样肽(AB)诱导神经毒性的保护作用。方法：用MTT测定和流式细胞仪分析PC-12细胞的存活和凋亡情况。用Aβ1-40或Aβ1-40和SalB孵育PC-12细胞，观察丹酚酸B对抑制Aβ聚集和纤维形成的作用。分离大鼠线粒体，测定钙离     

丹酚酸B对神经退行性疾病的保护作用研究进展

神经退行性疾病是一类与遗传、年龄、免疫及环境等多因素相关的大脑及脊髓神经元慢性、不可逆性变性丢失的神经系统疾病,包括阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)、帕金森病( Parkinson 's disease, PD )、多发性硬化症( Multiple sclerosis, MS)、亨廷顿病(...     

银杏叶提取物EGb761对NO供体硝普钠诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的　探讨银杏叶提取物(EGb 761 )对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法　采用MTT比色分析测细胞存活率、Hoechst 332 58荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果　不同剂量EGb761预处理海马神经元6h可剂量依赖地对抗SNP引起的神经元凋亡,提高神经元的存活率;减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变。结论　EGb 761对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用     

银杏叶提取物EGb761对NO供体硝普钠诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的　探讨银杏叶提取物 (EGb 761 )对NO供体硝普钠 (SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法　采用MTT比色分析测细胞存活率、Hoechst 332 58荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果　不同剂量EGb761预处理海马神经元 6h可剂量依赖地对抗SNP引起的神经元凋亡 ,提高神经元的存活率 ;减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象 ;DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变。结论　EGb 761对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用     

人参、银杏叶提取物对β-淀粉样蛋白_(1-40)毒性损伤大鼠全脑神经递质的影响

目的探讨给予人参、银杏叶提取物(脑维康)前后,β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)1-40毒性损伤大鼠全脑乙酰胆碱、单胺类递质及其代谢产物水平的变化和可能机制。方法以双侧海马CA1区注射Aβ1-40(每侧4 g.L-1)大鼠为模型,给药组大鼠每天灌胃给予脑维康(15.5、31、62mg.kg-1)4 wk。以改进的柱前、柱后双酶柱结合高效液相电化学方法检测大鼠全脑乙酰胆碱含量,以高效液相电化学方法检测大鼠全脑单胺类神经递质及其代谢产物的含量。结果双侧海马注射Aβ1-404 wk后,大鼠全脑乙酰胆碱、5-羟色胺含量明显降低(P<0.05~0.01),多巴胺、去甲肾上腺素表现下降趋势。给药4 wk后,脑维康各给药组大鼠全脑乙酰胆碱含量较模型组大鼠升高(P<0.05~0.01),多巴胺、5-羟色胺水平无变化,高香草酸、5-羟吲哚乙酸水平呈下降趋势,其中脑维康15.5 mg.kg-1组高香草酸含量下降(P<0.05)。结论脑维康可升高Aβ1-40毒性损伤大鼠脑内的乙酰胆碱水平,对单胺类递质代谢有一定的调节作用。该药改善大鼠学习记忆损伤的机制可能与其保护脑内胆碱能和单胺能系统或干预神经递质的合成、摄取和降解等作用有关。     

Daidizein对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究Daid ize in对β淀粉样蛋白(Aβ_1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用Aβ_1-42处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用不同浓度的Daid ize in进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况。结果保护组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,保护组上清液LDH活性显著低于损伤组(P<0.01),MTT值显著高于损伤组(P<0.01)。结论Daid ize in对Aβ_1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

Daidizein对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究Daid ize in对β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用Aβ1-42处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用不同浓度的Daid ize in进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况。结果保护组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,保护组上清液LDH活性显著低于损伤组(P<0.01),MTT值显著高于损伤组(P<0.01)。结论Daid ize in对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

银杏叶提取物对Aβ25-35诱导的神经细胞毒性的防治作用

目的探讨银杏叶提取物对Aβ25-35诱导体外培养神经细胞毒性的防治作用。方法 培养大鼠大脑皮质神经元细胞,构建AD细胞模型,制模前后加用银杏叶提取物(EGb)干预,四甲基噻唑蓝比色法(MTT)测定神经细胞活力,West-ern印迹分析法测Caspase3、Bcl-2、Bax表达。结果 EGb显著提高预防组细胞活力(P<0.01),增强预防组及治疗组Bcl-2表达(P<0.01),明显抑制预防组及治疗组Caspase3、Bax表达(P<0.01)。结论 EGb可有效的对抗Aβ25-35的神经毒性作用,抑制细胞凋亡。     

肉苁蓉总苷对β淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的研究肉苁蓉总苷(GCs)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡的保护作用。方法体外培养的大鼠PC12细胞分6组:正常对照组、模型组、银杏叶片组(40mg·L-1)、GCs低剂量组(25mg·L-1)、GCs中剂量组(50mg·L-1)和GCs高剂量组(100mg·L-1)。细胞培养至对数生长期时分别加入上述各组药物,每日1次。培养h96时,模型组、银杏叶片组和GCs各剂量组分别加入终浓度20μmol·L-1的Aβ25-35,正常对照组以等体积培养基替代。继续培养24h和48h时,光镜观察各组细胞的形态及生长情况,MTT比色法检测各组细胞的存活率,分光光度法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡率。结果与正常对照组比较,模型组细胞数目显著减少,部分细胞皱缩,变圆、脱落的细胞数目较多,其存活率显著降低、LDH活性明显提高、凋亡率显著增加(P<0.01)。与模型组相比,GCs各剂量组细胞数目显著增多,细胞形态学变化明显改善,细胞的存活率增高、LDH活性下降、凋亡率降低,有非常显著差异(P<0.01)。其中,GCs高剂量作用48h效果最显著。结论GCs对Aβ25-35引起的PC12凋亡细胞损伤具有明显的保护作用。     

白藜芦醇调控RAGE/LRP1通路改善β-淀粉样蛋白对PC12细胞神经毒性作用研究

目的:探究中药活性单体白藜芦醇对β-淀粉样蛋白(amyloid-beta,Aβ)诱导PC12细胞损伤的保护作用及对相关蛋白表达调控的影响。方法:用不同浓度(1,5和10μmol·L^-1)白藜芦醇处理Aβ_1-42诱导的PC12细胞,应用MTT法检测PC12细胞增殖情况,ELISA法检测PC12细胞内Aβ_1-42含量变化,qPCR法检测晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白1 (low-density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)在基因水平的变化,应用Western Blot法检测RAGE和LRP1在蛋白水平的变化。结果:白藜芦醇对PC12细胞增殖的IC₁₀值是11.2μmol·L^-1。白藜芦醇能够改善Aβ_1-42诱导的细胞增殖活力下降,同时白藜芦醇能够降低Aβ_1-42在...     

黄芩素对β-淀粉样蛋白纤维化及其细胞毒性的影响

目的探讨黄芩素对致病性β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)纤维形成及细胞毒性作用的影响。方法采用硫黄素-T(Th-T)荧光分析法观察黄芩素对抗Aβ1-42纤维化效应;应用噻唑蓝(MTT)法,观察黄芩素对抗Aβ1-42对PC12细胞毒性的影响。结果 Th-T荧光分析显示:黄芩素对Aβ1-42纤维形成和聚集有浓度依赖性抑制作用,对预聚集的Aβ1-42纤维也有明显解聚作用(P<0.01);MTT法显示:黄芩素能显著降低Aβ1-42对PC12细胞的毒性作用(P<0.01)。结论黄芩素在体外能有效抑制Aβ1-42纤维形成和聚集,并显著降低Aβ1-42对PC12细胞的毒性作用,提示黄芩素有可能成为防治阿尔茨海默病的药物之一。     

阿尔茨海默病中β-淀粉样蛋白毒性作用的研究现状

阿尔茨海默病(alzheimer's disease,AD)是老年期痴呆症中最常见的一种进行性神经变性疾病,在65岁以上老年人中的发病率为7%-10%,80岁以上老年人中发病率大约为40%[1].     

阿尔茨海默病中β-淀粉样蛋白毒性作用的研究现状

阿尔茨海默病(alzheimer's disease,AD)是老年期痴呆症中最常见的一种进行性神经变性疾病,在65岁以上老年人中的发病率为7%-10%,80岁以上老年人中发病率大约为40%[1].     

远志皂苷对β淀粉样蛋白片段1-40诱导PC12细胞凋亡的抑制作用

目的探讨远志皂苷抑制β淀粉样蛋白片段1-40(Aβ1-40)诱导的PC12细胞凋亡的作用机制。方法采用聚集状的Aβ1-40 25μmol·L-1诱导PC12细胞凋亡,然后将处理后的PC12细胞分为Aβ1-40模型组和远志皂苷50,100和200μmol·L-1组,同时设正常细胞对照组。采用MTT比色法检测细胞存活率;膜联蛋白-Ⅴ和PI双染法检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞凋亡基因Bcl-2和Bax及细胞色素c(Cyt c)表达阳性的细胞百分率;Western印迹法检测PC12细胞中Cyt c的表达水平。结果与正常对照组比较,Aβ1-40模型组PC12细胞的存活率明显降低(P<0.01),为(31±7)%;Bcl-2阳性表达细胞率降低(P<0.01),为(23.9±1.9)%;Bax和Cyt c阳性表达细胞率升高(P<0.01),分别为(79.0±3.7)%和(49.2±3.6)%,Bcl-2/Bax阳性表达细胞比值为0.30。与模型对照组比较,远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24 h后,细胞存活率分别升高至(51±13)%,(64±7)%和(84±10)%(P<0.01);Bcl-2阳性率升高至(38.7±0.9)%,(53.7±1.6)%和(60.3±0.8)%(P<0.01),Bax阳性率分别降低为(60.8±1.9)%,(41.5±2.2)%和(32.7±1.4)%(P<0.01),Bcl-2/Bax比值亦分别上升为0.64,1.29和1.84;Cyt c阳性率分别降低至(45.4±3.4)%,(30.2±2.2)%和(27.5±1.0)%(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率和Cyt c蛋白表达水平亦明显升高(P<0.01);远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24h,PC12细胞凋亡率和Cyt c表达水平较模型组均降低(P<0.01)。结论远志皂苷对Aβ1-40诱导的PC12细胞凋亡具有明显的抑制作用,其作用机制可能是抑制Bax和Cyt c表达,增加Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,从而阻断内源性细胞凋亡通路。     

雷洛昔芬可减弱β-淀粉样蛋白对原代海马神经元的毒性作用

目的研究雌激素受体调节剂雷洛昔芬对原代海马神经元的保护作用。方法将原代培养的海马神经元分为五组:对照(A)组;β-淀粉样蛋白(Aβ)(B)组;Aβ+17β雌二醇(C)组;Aβ+苯甲酸雌二醇(D)组;Aβ+雷洛昔芬(E)组。用MTT方法观测各组海马神经元活力;通过AnnexinV-FITC双染流式细胞术检测各组海马神经元的凋亡。结果 B组海马神经元活力(72.5±10.7)%,显著低于A组的100%(P<0.01);B组凋亡率(31.5±1.9)%,明显高于与A组的(9.0±0.6)%(P<0.01)。C、D、E组海马神经元活力均高于与B组(P<0.05或P<0.01),而凋亡率均降低(P<0.05),但C、D、E三组之间差异无统计学意义。结论雷洛昔芬可减弱Aβ对原代海马神经元的毒性作用;雷洛昔芬对原代海马神经元的保护作用与雌激素相似。